微生物实验思考题
微生物思考题(一)
微生思考题（一）一、微生物在生物六界中的地位？病毒界 原核生物界 真核生物界 真菌界 动物界 植物界二．微生物的主要特点？1．形态微小，结构简单 2．代谢旺盛，繁殖快速 3．适应性强，易变异 4．种类繁多，分布广泛三．细菌的基本形态，细菌的染色观察细菌的基本形态：球状 ：(a)单球菌 (b)双球菌 (c)四联球菌 (d)八叠球菌(e)葡萄球菌 (f)链球菌杆状： (a)球杆菌 (b)单杆菌 (c)双杆菌 (d)链杆菌 螺旋状：(a) 螺菌 (b)螺旋体 (c)弧菌四．细菌细胞壁结构与功能？革兰氏染色机理如何区别革兰氏阳性和阴性细菌？细菌细胞壁结构革兰氏阳性菌特点：细胞壁厚度大，20~80 nm；化学组分简单，一般含90%肽聚糖和10%磷壁酸。
革兰氏阴性菌特点：肽聚糖层很薄（仅2~3nm），在肽聚糖层外还有一个外膜，成分较复杂，个壁厚度较G+菌薄，机械强度较G+菌弱。
细胞壁功能：①固定细胞外形和提高机械强度，保护细胞免受外力的损伤；②为细胞生长、分裂和鞭毛运动所必需；③阻拦酶蛋白或抗生素等有害物质进入细胞；④赋予细菌特有的抗原性和致病性(如内毒素)，并与细菌对抗生素和噬菌体的敏感性密切相关。
革兰氏染色机制G-：细胞壁薄,肽聚糖含量少,交连程度低,网孔大.又由于有机物质含量高,乙醇溶解了脂类后,网孔更大.所以:结晶紫和碘易被从细胞中抽提出来,速度快,而呈复染沙黄的颜色-红色.G+：细胞壁厚,肽聚糖含量高,网孔小,经乙醇脱水后,使网孔更小,结晶紫,碘不能被抽提出来,速度慢,而呈紫色.五．细胞内膜系统，细胞质及其内含物1．细胞内膜系统间体——细胞膜向内延伸或折叠形成的一种管状、层状或囊状结构.载色体——光合细菌的膜囊结构羧酶体——某些硫杆菌细胞内散布着由单层膜围成的多角体，其内含1，5-二磷酸核酮糖羧化酶.2.细胞质及其内含物细胞质（cytoplasm）:是细胞质膜包围的除核区外的一切半透明、胶体状、颗粒状物质的总称，是进行物质代谢及合成核酸蛋白质的场所。
食品微生物学检测技术思考题
⾷品微⽣物学检测技术思考题⾷品微⽣物学检测技术思考题1、试述微⽣物与⾷品安全的关系。
微⽣物引起⾷品腐败变质；微⽣物引起⾷物中毒；微⽣物制造⾷品、促进粮⾷⽣产。
2、对⾷品进⾏微⽣物检验有何意义？检验结果是衡量⾷品卫⽣质量的重要指标,也是判定被检⾷品能否⾷⽤的科学依据；可以有效地防⽌或减少⾷物中毒和⼈畜共患病的发⽣；保证产品的质量,避免不必要的损失。
3、⾷品微⽣物检验的范围包括哪些？⽣产环境的检验；原辅料的检验；⾷品加⼯、储藏、销售诸环节的检验；⾷品的检验。
4、⾷品卫⽣标准中的微⽣物指标有哪些？根据⾷品卫⽣要求,⾷品中需要检测的微⽣物种类、数量及其代谢产物的种类和数量称为⾷品卫⽣微⽣物学指标，是评判⾷品卫⽣质量的重要依据。
微⽣物学指标种类：菌落总数；⼤肠菌群数；致病菌；霉菌及其毒素；其他指标。
我国卫⽣部颁布的⾷品微⽣物指标最重要的是菌落总数、⼤肠菌群数和致病菌三项。
5、描述⾷品微⽣物检验的⼀般程序。
6、列表⽐较低倍镜、⾼倍镜及油镜在数值孔径、⼯作距离及镜头⼤⼩等⽅⾯的差别。
数值孔径（NA）⼯作距离镜头⼤⼩0.25 7-8mm 较⼤低倍镜0.65 0.4-0.5mm 中等⾼倍镜1.25 0.18-0.2mm 较⼩油镜7、要使视野明亮，除光源外，还可采取哪些措施？加⼤虹彩光圈,提升聚光程度.调节光圈⼤⼩,提升聚光器8、与普通光学显微镜⽐较暗视野显微镜和相差显微镜在结构和功能上有何特点？结构：暗视野显微镜聚光器下增加了环状光栅，观察⽬标是亮的，背影为暗的，提⾼观察物体的对⽐度；相差显微镜聚光器下增加了环状光阑和相位板，把透过标本的可见光的相位差（光程差）变成振幅差。
功能：暗视野显微镜可以观察活细胞的形态和运动性；相差显微镜可以观察活细胞的形态和运动性，以及活细胞内部结构相差显微镜：通过环形光阑和相位板把透过标本的可见光的相位差（光程差）变成振幅差，从⽽提⾼了各种结构间的对⽐度，使各种结构变得清晰可见。
9、简述监测⾼压蒸汽灭菌效果的⽅法及其特点。
微生物工程思考题参考答案
微生物工程思考题参考答案Ricky & Bullet 2017.11、举出几例微生物大规模表达的产品, 及其产生菌的特点？A.蛋白酶表达产物一般分泌至胞外，能利用廉价的氮源，生长温度较高，生长速度快,纯化、分离及分析快速；安全性高，得到FDA的批准的菌种。
B.单细胞蛋白生长迅速，营养要求不高，易培养，能利用廉价的培养基或生产废物。
适合大规模工业化生产，产量高，质量好。
安全性高，得到FDA的批准的菌种。
C. 不饱和脂肪酸生长温度较低，安全性高，能利用廉价的碳源，不饱和脂肪酸含量高，D.抗生素生产性能稳定，产量高，不产色素，，能利用廉价原料F. 氨基酸代谢途径比较清楚，代谢途径比较简单2、自然界分离微生物的一般操作步骤？样品的采取→预处理→培养→菌落的选择→初筛→复筛→性能的鉴定→菌种保藏3、从环境中分离目的微生物时，为何一定要进行富集培养？自然界中目的微生物含量很少，非目的微生物种类繁多，进行富集培养，使目的微生物在最适的环境下迅速地生长繁殖，数量增加，由原来自然条件下的劣势种变成人工环境下的优势种，使筛选变得可能。
4、菌种选育分子改造的目的？防止菌种退化; 解决生产实际问题;提高生产能力; 提高产品质量; 开发新产品5、什么叫自然选育？自然选育在工艺生产中的意义？自然选育就是不经人工处理，利用微生物的自然突变进行菌种选育的过程。
自然选育在工业生产上的意义：自然选育可以有效地用于高性能突变株的分离。
然选育虽然突变率很低，但却是工厂保证稳产高产的重要措施。
6、什么是诱变育种？常用的诱变剂有哪些？诱变育种是指用物理、化学因素诱导植物的遗传特性发生变异，再从变异群体中选择符合人们某种要求的单株，进而培育成新的品种或种质的育种方法。
诱变剂有两大类：物理诱变剂和化学诱变剂。
常用的物理诱变剂有紫外线、x射线、γ射线(如Co60等)、等离子、快中子、α射线、β射线、超声波等。
常用的化学诱变剂有碱基类似物、烷化剂、羟胺、吖定类化合物等。
微生物总复习思考题第1-6章答案
微生物总复习思考题0章-绪论1.什么是微生物?它包括哪些类群?答：微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称,包括属于原核类的细菌、放线菌、蓝细菌、支原体、立克次氏体和衣原体。
属于真核类的真菌、原生动物和显微藻类。
以及属于非细胞类的病毒和亚病毒。
2.试述列文虎克、巴斯德和柯赫对微生物学的贡献。
列文虎克：自制间式显微镜，观察到细菌等微生物的个体巴斯德的贡献（微生物学奠基人）:微生物作为一门科学的诞生—-彻底驳斥了自然发生说.发现了厌氧生命（生活）的存在—发酵。
疫苗.巴斯德灭菌。
科赫（细菌学奠基人）的贡献:1、微生物的纯培养技术，及培养基的改进。
2、分离出了多种病原菌，包括炭疽芽孢子杆菌、结核分支杆菌、链球菌等。
3、创立了细菌鞭毛染色、悬滴培养法和显微摄影等多种显微镜技术。
4、提出了证明特定病害的病原菌的科赫法则3.微生物学发展的各个时期有哪些主要成就?4.简述微生物与人类的关系。
5.在生物科学中微生物学占有什么样的地位?6.微生物学的主要任务是什么?7.微生物先辈们成功的原因何在?8.微生物学与现代生物产业的关系如何?1章-原核生物的形态、结构和功能细胞的一般结构与特殊结构、鞭毛、芽孢、糖被、放线菌、质粒、肽键桥一般结构：1、细胞壁：位于细胞最外的一层厚实、坚韧的外被，主要成分为肽聚糖。
2、细胞膜：是一层紧贴在细胞壁内侧，包围着细胞质的柔软、脆弱、富有弹性的半透性薄膜，如磷脂双分子层和蛋白质、多糖构成。
3、细胞质：是指被细胞膜包围的核区以外的一切半透明、胶体状、颗粒状物质的总称。
4、核区：指原核生物所特有的无核膜包裹、无固定形态的原始细胞核。
特殊结构：1、鞭毛：生长在某些细菌表面的长丝状、波曲的蛋白质附属物2菌毛：是一种长在细菌体表的纤细、中空、短直且数量较多的蛋白质类附属物，具有使菌体附着于物体表面上的功能。
3性毛：构造与成分与菌毛相同，但比菌毛长。
一般见于G-细菌的雄性菌株中，具有向雌性菌株传递遗传物质的作用。
2013_食品微生物学复习思考题(附答案)
1、（V ）原核生物细胞中的DNA发现在染色体和质粒中。
2、（X ）病毒被认为是原核生物因为它们具备全部原核生物的特征。
3、（X ）所有细菌都有细胞壁。
4、（X ）微生物中的原生动物、真菌和细菌被认为是真核生物。
5、（X ）在微生物生长的稳定期，细胞快速分裂。
6、（X ）微生物单菌落的成员全都来自一个单个细胞的祖先。
7、（X ）为了抵御干旱环境，某些原生动物产生芽孢。
8、（X ）在实验室中细菌很难形成菌落。
9、（V ）用来固化细菌培养基的多糖是琼脂。
10、（V ）为了进行新陈代谢微生物体内必须有一定量的水。
11、（X ）精确定量某些成分而配制的培养基称为天然培养基，又名半合成培养基。
13、（X ）真菌、原生动物和单细胞藻类中主要的繁殖方法是二分裂。
14、（X ）出芽生殖过程在病毒中是可以普遍见到的。
15、（X ）称为嗜碱菌的那些细菌是能够在pH7.0以上生长的。
16、（X ）真菌最适的生长条件是有点碱性的。
17、（V ）特殊抗微生物剂的选择取决于待处理物品中种类控制的微生物种类、抗微生物使用时的环境条件。
18、（X ）有机物可促进抗微生物剂成功的使用。
19、（X ）消毒剂指的是消除所有微生物包括微生物的孢子。
20、（X ）抗生素的抗微生物效果一般低于消毒剂和防腐剂。
21、（X ）放在煮沸的水中灭菌需要30分钟。
22、（X ）干热较湿热灭菌效果好，因为干热适用于灭菌的物质如粉料物质、玻璃制品、设备和油料物质。
23、（V ）巴斯德消毒法是一种防腐的方法，如牛奶、啤酒和果汁，但没有灭菌效果。
24、（X ）微波对微生物有很严重的副作用，因它们与生物的核酸反应，改变它们的结构。
25、（X ）酸类中用于食品防腐和控制微生物生长的是乙酸、丙醇和苯甲酸。
26、（X ）只发现有一种抗生素可用于治疗一种严重的肺病——结核病。
27、（V ）对已知细菌种分类列表的权威手册是《伯杰氏系统细菌学手册》。
28、（V ）所有藻类都是真核生物。
食品微生物学检测技术思考题
食品微生物学检测技术思考题食品微生物学检测技术思考题1、试述微生物与食品安全的关系。
微生物引起的食品腐败；微生物引起的食物中毒；微生物生产食物并促进食物生产。
2、对食品进行微生物检验有何意义？检验结果是衡量食品卫生质量的重要指标，也是判断被检验食品能否食用的科学依据；能有效预防或减少食物中毒和人畜共患病的发生；确保产品质量，避免不必要的损失。
3、食品微生物检验的范围包括哪些？生产环境检查；原辅材料检验；食品加工、储存和销售的检查；食品检验。
4、食品卫生标准中的微生物指标有哪些？根据食品卫生要求，食品中微生物及其代谢产物的种类和数量称为食品卫生微生物指标，是判断食品卫生质量的重要依据。
微生物学指标种类：菌落总数；大肠菌群数；致病菌；霉菌及其毒素；其他指标。
我国卫生部颁布的食品微生物指标最重要的是菌落总数、大肠菌群数和致病菌三项。
5.描述食品微生物检验的一般程序。
6、列表比较低倍镜、高倍镜及油镜在数值孔径、工作距离及镜头大小等方面的差别数值孔径（na）工作距离镜头大小0.257-8mm较大低倍镜0.650.4-0.5mm中等高倍镜1.250.18-0.2mm较小油镜7.除了光源外，可以采取哪些措施使视野明亮？增加虹膜光圈以提高聚焦度调整光圈大小并改进集中器8、与普通光学显微镜比较暗视野显微镜和相差显微镜在结构和功能上有何特点？结构：在暗场显微镜的聚光镜下增加一个圆形光栅，观察目标亮，背面暗，以提高观察对象的对比度；样品光路与显微镜下集中器光路之间的相位差增大。
功能：暗视野显微镜可以观察活细胞的形态和运动性；相差显微镜可以观察活细胞的形态和运动性，以及活细胞内部结构相差显微镜：通过环形光阑和相位板将通过试样的可见光的相位差（光程差）转化为振幅差，以提高各种结构之间的对比度，使各种结构清晰可见。
9.本文简要介绍了监测高压蒸汽灭菌效果的方法和特点。
工艺监测（根据安装在灭菌器上的量器（压力表、温度表、计时表）、图表、指示针、报警器等，指示灭菌设备工作正常与否）；化学指示剂监测（利用化学指示剂在一定温度和作用时间下变色或变形的特性，判断其是否符合灭菌要求的参数）；生物指示剂监测（利用嗜热脂肪杆菌作指示菌，测定热力灭菌的效果。
微生物学复习思考题
微⽣物学复习思考题《微⽣物学》复习思考题第1章绪论1.名词解释：微⽣物，微⽣物学2.⽤具体事例说明⼈类与微⽣物的关系。
3.微⽣物包括哪些类群？它有哪些特点?4.为什么说巴斯德和柯赫是微⽣物学的奠基⼈?5.试根据微⽣物的特点，谈谈为什么说微⽣物既是⼈类的敌⼈，更是⼈类的朋友？6.简述21世纪微⽣物学发展的主要趋势。
第2章原核微⽣物1.名词解释：肽聚糖、溶菌酶、核区、异形胞2.根据⾰兰⽒阳性细菌与⾰兰⽒阴性细菌细胞壁通透性来说明⾰兰⽒染⾊的机制。
3.什么是芽孢？它在什么时候形成？试从其特殊的结构与成分说明芽孢的抗逆性。
渗透调节⽪层膨胀学说是如何解释芽孢耐热机制的？4.⽴克次⽒体有哪些与专性活细胞内寄⽣有关的特性？它们有什么特殊的⽣活⽅式？⾐原体与⽴克次⽒体都为专性活细胞内寄⽣，两者有何差别？5.螺旋体和螺旋菌有何不同？6.什么是缺壁细菌？试简述四类缺壁细菌的形成、特点和实践意义。
7.举例说明细菌的属名和种名。
8.试述古⽣菌和细菌的主要区别。
9.试根据细菌和古⽣菌细胞结构的特点，分析并举例说明为什么它们能在⾃然界中分布泛。
10.细菌（狭义）、放线菌、霉菌、酵母在繁殖⽅式上各有什么特点？第三章真核微⽣物1.名词解释：真菌、霉菌、酵母菌、真酵母、假酵母。
2.举例说明霉菌与酵母菌与⼈类的关系。
3.试列表说明真核微⽣物与原核微⽣物的主要区别。
4.试图⽰真核⽣物“9+2型”鞭⽑的横切⾯构造，并简述其运动机理。
5.细菌(狭义)、放线菌、酵母菌和霉菌的菌落有何不同？6.试⽐较细菌(狭义)、放线菌、酵母菌和霉菌细胞壁成分的异同，并讨论它们的原⽣质体的制备⽅法。
7.丝状真菌的营养菌丝和⽓⽣菌丝各有何特点？它们可以分化出哪些特殊结构？8.试述真菌的孢⼦类型和特点。
第4章病毒1. 名词解释：病毒粒⼦、烈性噬菌体、温和噬菌体、溶源性转变、前噬菌体、溶源性细菌、裂解量、类病毒、朊病毒。
2. 病毒区别于其他⽣物的特点是什么? 根据你的理解，病毒应如何定义?3. 试述病毒的主要化学组成及其功能。
微生物思考题大全
●从细菌生长繁殖的条件入手，如何进行细菌的人工培养？充足的营养成分、适合的酸碱度、合适的酸碱度、适宜的温度、一定的气体环境、渗透压等、及时高压灭菌、适宜的培养基●什么是生长曲线？简述其分期及各期意义。
迟缓期：细菌被接种培养基的最初一段时间，主要是适应新环境，同时为分裂繁殖作物质准备，此时细菌体积比较大，含有丰富的酶和中间代谢产物。
对数期：细菌分裂繁殖最快的时期，菌数以几何级数增长，研究细菌的最佳时期。
稳定期：由于营养物质的消耗，代谢产物的堆积，繁殖数与死亡数几乎相等。
活菌数保持稳定。
一些细菌的芽胞、外毒素和抗生素等代谢产物大多在稳定期产生。
衰退期：繁殖变慢，死菌数超过活菌数。
细菌形态发生改变，生理活动趋于停滞。
●如何利用细菌分解代谢产物鉴别细菌？糖发酵试验：葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖IMViC 试验常用于肠道杆菌的鉴定：吲哚（I）、甲基红（M）、VP（Vi）、枸橼酸盐利用（C）实验。
结果：大肠埃希菌：++-- 产气杆菌--++●简述细菌合成代谢产物在医药学上的意义。
1、热原质（致热源）：是细菌合成的一种注入人体或动物体内能引起发热反应的物质。
产生热致源的细菌大都为格兰阴性菌，热致源即其细胞壁的脂多糖。
2、毒素及侵袭性酶：①外毒素：多数G+菌和少数G-菌在生长繁殖过程中释放菌体外的蛋白质；②内毒素：G-菌细胞壁的脂多糖；外毒素毒性强于内毒素。
③侵袭性酶：某些细菌产生的，能损伤机体组织，促使菌体的侵袭和扩散，是细菌重要的致病物质。
3、色素：①水溶性；②脂溶性。
4、抗生素：某些微生物代谢过程中产生的一类能抑制或杀死某些其他微生物或肿瘤细胞的物质。
抗生素大多由放线菌和真菌产生。
5、细菌素：某些菌株产生的一类具有抗菌作用的蛋白质。
细菌素仅对与产生菌有亲缘关系的细菌有杀伤作用。
6、维生素●简述微生物的分类及各类微生物的特点 P4●比较G+菌与G-菌细胞壁结构的异同，并简述细胞壁的功能细胞壁结构革兰阳性菌G+革兰阴性菌G-肽聚糖组成由聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥构成坚韧三维立体结构由聚糖骨架、四肽侧链构成疏松二维平面网络结构肽聚糖厚度20～80nm 10～15nm肽聚糖层数可达50层仅1～2层肽聚糖含量占胞壁干重50～80% 仅占胞壁干重5～20%磷壁酸有无外膜无有细胞壁的功能：维持菌体固有的形态，并保护细菌抵抗低渗环境。
细菌革兰氏染色实验思考题
细菌革兰氏染色实验思考题细菌革兰氏染色实验是一种常用的细菌分类和鉴定方法。
通过对细菌进行革兰氏染色，可以将其分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两类。
本文将从实验原理、步骤、结果解读以及实验应用等方面进行详细的回答。
一、实验原理细菌革兰氏染色实验是利用了细菌胞壁的化学成分差异来进行分类。
在这个实验中，首先对细菌进行固定，然后使用紫晶染液染色，接着用碘液处理，再用乙醇酸洗去多余的染料，最后使用红粉染液进行对比染色。
根据不同的颜色反应，可以将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。
二、实验步骤1. 准备培养基：首先需要准备好适合培养目标细菌的培养基，并在无菌条件下制备好培养物。
2. 涂布法接种：取一根无菌铁棒，在培养物上蘸取适量的细菌，然后均匀涂布在玻璃片上。
3. 固定：将涂布好的细菌玻璃片用火焰或紫外灯进行固定，使细菌附着在玻璃片上。
4. 染色：将固定的细菌玻璃片放入紫晶染液中浸泡1分钟，然后用蒸馏水冲洗干净。
5. 碘处理：用碘液处理细菌玻璃片2分钟，然后用蒸馏水冲洗干净。
6. 脱色：将乙醇酸倾倒在细菌玻璃片上，直至不再有紫晶染料从上面流出为止。
然后用蒸馏水冲洗干净。
7. 对比染色：将固定的细菌玻璃片放入红粉染液中浸泡30秒钟，然后用蒸馏水冲洗干净。
8. 干燥：将处理好的细菌玻璃片自然晾干或用吹风机吹干。
9. 观察和记录结果：使用显微镜观察细菌的颜色反应，并记录下来。
三、结果解读根据细菌革兰氏染色实验的结果，可以将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。
革兰氏阳性菌呈紫色或紫蓝色，而革兰氏阴性菌呈红色或粉红色。
革兰氏阳性菌的颜色反应是由于其细胞壁含有较多的胞内结构物，这些结构物能够吸附和保持紫晶染料。
而革兰氏阴性菌的颜色反应是由于其细胞壁较薄，并且含有较多的脂质成分，使得乙醇酸能够将紫晶染料洗去。
四、实验应用细菌革兰氏染色实验在微生物学研究中具有广泛的应用价值。
以下是一些常见的实验应用：1. 细菌分类和鉴定：通过对细菌进行革兰氏染色，可以将其分为不同类型，从而对细菌进行初步分类。
微生物复习思考题
（
）是存在于某些缺乏完整 EMP 途径的微生物种的一种替代途径，为微生物所特
有；（
）是产生 4 碳、5 碳等中间产物，为生物合成提供多种前体物质的途径。
2.产能代谢中，微生物通过（
）磷酸化和（
）磷酸化将某种物质氧
化而释放的能量储存在 ATP 等高能分子中，光合微生物则通过（
）磷酸化将光能
转变成化学能储存在 ATP 中。（
A、肽聚糖和甘露聚糖 B、葡聚糖和脂多糖 C、几丁质和纤维素 D、葡聚糖和甘露聚糖
2.在酵母菌细胞壁的四种成分中，赋予其机械强度的主要成分是（
）。
A、几丁质 B、蛋白质 C、葡聚糖 D、甘露聚糖
3.酵母菌无性繁殖最主要方式是（
）。
A、芽殖 B、裂殖 C、产生子囊孢子 D、产生掷孢子
4.构成丝状真菌营养体的基本单位是（
3.病毒的基本结构是（
）。
B、衣壳 B、衣壳粒 C、核衣壳 D、囊膜
4.溶源性细菌是指（
）。
A.带有前噬菌体的细菌 B.带有烈性噬菌体的细菌 C.带有 R 因子的细菌
D.带有 F 因子的细菌
5.温和噬菌体的基因组在溶源性细菌内可以下列状态存在（ ）。
A、复制、表达产生子代病毒 B、整合于宿主染色体或质粒形式 C、自发或经诱导进入裂
）。
A.紫硫细菌和绿硫细菌 B.肠道细菌和大肠杆菌 C.土壤细菌如放线菌 D.立克次氏
3.
试图示 G+和 G -细菌细胞壁的主要构造，并简要说明其异同。
4.
试用简图表示 G+和 G -细菌肽聚糖单体构造的差别，并作简要说明。
5.
试列表比较 G+和 G -细菌间的 10 种主要差别。
6.
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微生物实验思考题Last revision on 21 December 2020
微生物实验思考题1、用油镜观察时应该注意哪些问题在载破片和镜头之间加滴什么油起什么作
用
答：应该先用擦镜纸将镜头擦干净,以防上次实验的污染.操作时,先低倍再高倍.用完要擦掉油.
加滴香柏油。
作用：增加,也就是增加了显微镜的分辨率.
2、根据实验体会，谈谈应如何根据所观察微生物的大小，选择不同的物镜进
行有效的观察。
答：细菌用油镜,真菌用高倍镜.都是先用低倍镜找到目标后,再用高倍镜调到合适的视野和合适的清晰度. 放线菌、酵母菌、多细胞真菌相对较大，用放大 40 倍的物镜就可以看了，细菌小，要用放大 1000 倍的物镜看，感觉还很小。
病毒那就要用电子显微镜看了。
3、哪些环节会影响革兰氏染色结果的正确性其中最关键的环节是什么
答：涂片环节、加热固定环节、脱色环节；其中最关键的环节是脱色环节。
4、进行革兰氏染色时，为什么特别强调菌龄不能太老，用老龄细菌染色会出
现什么问题
答：着色不均，染色效果不好。
阴性阳性不明显分不太清楚,问题是：不便于显微镜下观察是阳性菌还是阴性菌。
5、革兰氏染色时，初染前能加碘液吗乙醇脱色后复染之前，革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌应分别是什么颜色
答：不可以。
因为碘与染料会结合成大分子，使得染料分子不能穿过细胞的细胞壁，对实验结果造成影响。
脱色后复染前，革兰氏阳性菌呈紫色，阴性菌无色。
6、不经过复染这一步，能否区别革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌
答：不行。
在复染之前，革兰氏阴性菌是无色透明的，在显微镜下很难观察到；或者脱色过度，也会造成阳性菌脱色，不经过复染，无法进一步区别。
7、你认为制备细菌染色标本时,应该注意哪些环节
答:1制备适宜的培养基
2在超净工作台上进行,保持无菌环境
3对培养基,接种环等物品的高温高压灭菌.
4倒置培养基,防止冷凝水内流
8. 为什么要求制片完全干燥后才能用油镜观察
答:1、若未完全干燥,载玻片上的液体会污染油镜镜头。
镜头非常精密,被污染后不利于下次观察；2、若未完全干燥，水滴会影响油与玻璃之间折光率，造成视野不够清晰。
9. 如果涂片未以热固定,将会出现什么问题加热温度过高、时间太长，又会怎么样呢答:如果没有加热固定的话，水分蒸发太慢或者在染色时菌体会被冲洗掉；如果加热时间过久，菌体变形或形态破坏，无法染色。
10. 制备培养基的一般程序是什么
答：称量——溶解—调 PH 值—融化琼脂—过滤分装—包扎标记——灭菌——倒平板11. 做过本次实验后，你认为在制备培养基时要注意些什么问题
答：溶解配料的水要适量；PH 要调到左右；要小心手提式高压锅的使用；倒平板时要防止培养基被污染
12. 灭菌在微生物学实验操作中有何重要意义
答：防止培养基被污染；防止杂菌影响实验结果
13. 试述高压蒸汽灭菌的操作方法和原理。
答：高压灭菌的原理是：在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加。
在的压力下，锅内温度达 121℃。
在此蒸汽温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。
操作方法：加水——装料、加盖——排气——升压、保压、和降压——取料
14. 高压蒸汽灭菌时应注意哪些事项
答：第一，无菌包不宜过大，不宜过紧，各包裹间要有间隙，使蒸汽能对流易渗透到包裹中央。
第二，布类物品应放在金属类物品上，否则蒸汽遇冷凝聚成水珠，使包布受潮。
阻碍蒸汽进入包裹中央，严重影响灭菌效果。
第三，定期检查灭菌效果。
15. 试述如何在接种中，贯彻无菌操作的原则
答：保持操作台的无菌状态与在无菌室操作；操作前，要进行手的消毒；接种环要加热灭菌；接种物品要标记。
16. 以斜面上的菌种接种到新的斜面培养基为例说明操作方法和注意事项。
答：在接种箱或者超净工作台上.将母种经过消毒处理以后,在酒精灯火焰区上方打开棉塞.用接种针挑取一小块菌丝体,接入新的试管培养基上即可.
17.试设计一个实验，从土壤中分离酵母菌并进行计数。
答：无标准答案。
18.在酵母菌死活细胞的观察中，使用美蓝液有什么作用
答：区别死活细胞。
19.为何要用乳酸-石碳酸溶液作霉菌水浸片
答：用乳酸-石炭酸的优点是可使细胞不变形，具有杀菌、防腐作用；不易干燥，能保持较长时间；能防止孢子四处飞散。
20.细菌与霉菌的菌落有何区别
答：细菌菌落光滑，易于基质脱离；霉菌菌落较大、菌丝细长,菌落疏松,呈绒毛状、蜘蛛网状、棉絮状,无固定大小,多有光泽,不易挑。
21.如何区分霉菌与放线菌的菌落什么是扩展性菌落
答：霉菌的菌落形态较大,质地一般比放线菌疏松,细胞分化明显菌丝粗壮有核菌落边缘有粗丝状细胞生长快有霉味。
而霉菌往往形成复杂的孢子囊孢子梗等结构。
放线菌菌落小菌丝细而均匀菌落边缘可见细丝状细胞有泥腥味，放线菌的分生孢子形态结构简单。
扩展性菌落：就是原本培养的细菌由于发生扩散,形成的一些非预期的菌落,通常这些菌落会影响正常实验观察,可以用药物抑制.
22. 能否用血球计数板在油镜下进行计数为什么
答：不能。
计数时滴在血球计数板上的是菌悬液，相当于在镜头和计数板直接加了一层水。
水层会降低视野的亮度和显微镜的分辨率，造成菌体和网格线不清晰。
23. 根据自己体会，说明血球计数板计数的误差主要来自那些方面如何减少误差
答：误差主要来自试剂误差、方法误差、仪器误差；减少误差有保持样品的纯净、细胞溶液必须震荡均匀、样品浓度要适中、血球计数板要整洁清晰。
24. 菌种保藏中，石蜡油的作用是什么
答：作用是密封。
防止空气进入，降低菌种的生理活性。
25. 经常使用的细菌菌株，使用哪种保藏方法比较好
答：用甘油冷冻保藏方法保存，在液体培养基中加入百分子十五的甘油，然后低温冷冻（-7 度）左右。
26. 食品检验为什么要测定细菌菌落总数
答：测定细菌菌落总数是检验食品纯度程度的指标。
也是判断其保存能力的指标。
27. 实验操作如何使数据可靠
答：1、向平皿倾注液体时,平皿仅微微开启即可；
2、检样从开始稀释到倾注最后一个平皿所用时间不宜超过20min.
3、培养液和检液在培养皿内要摇匀；
4、培养液倾注培养皿时温度要在45摄氏度,以免烫死菌落.
28. 食品中检出的菌落总数是否代表该食品上的所有细菌数为什么
答：不能代表该食品上所有细菌数。
因为在实验过程中会造成细菌的损失或死亡、食品上的细菌包括了各种各样的微生物。
29.为什么营养琼脂培养基在使用前要保持在（46±1）℃的温度
答：营养琼脂是用来做菌落总数项目的,如果太热就会将细菌烫死,而太冷则琼脂还没倒就凝固了（凝固点大约在40度）。
30. 大肠菌群检验中为什么首先要用乳糖胆盐发酵管
答：因为乳糖胆盐发酵管中的成分有溴甲酚紫，中性时呈蓝紫色，酸性时呈黄色，如果颜色不变（呈蓝紫色），说明无产酸的大肠菌群；如果颜色变黄色，说明可能出现能分解乳糖产酸的大肠菌群；胆盐可以抑制其它细菌生长繁殖；看杜氏小管中是否有气体，判断是否为分解乳糖产酸产气的大肠菌群。
31. 做空白对照实验的目的
答：目的是检验培养基是否受到污染，验证无菌操作。
32. 为什么大肠菌群的检验要经过复发酵才能证实
答：初发酵是样品的发酵结果，不是大肠菌群纯菌的发酵试验，有可能受其它杂菌影响判断结果。
进行证实试验避免假阳性结果。
33. 复发酵为什么使用乳糖发酵管但不需加胆盐
答：胆盐能抑制革兰氏阳性菌等杂菌生长.在初发酵，培养基已经加入胆盐抑制革兰氏阳性菌生长，并在 EMB 培养基上进行分离培养，因此复发酵培养时无需乳糖发酵管，以免大肠菌肠受到抑制。