(推荐)总多酚的测定
总多酚含量测试试剂盒 分光光度计法
总多酚含量测试试剂盒（C001-96T 分光光度计法）一、测定原理福林酚试剂氧化多酚中-OH基团并使其显蓝色，蓝色的深浅与多酚的含量成正相关，没食子酸一般在该方法中被默认为标准物质，采用没食子酸溶液制作标准曲线，然后将多酚含量表示为等价没食子酸的量，即可求得待测样品中总多酚含量。
二、试剂组成试剂一：酚试剂25mL×1瓶试剂二：显色液 200mL ×1瓶试剂三：1.0mg/mL没食子酸标准溶液 20mL×1瓶三、储存条件及有效期试剂一、试剂二4℃保存，试剂三-20℃保存，可保存3个月。
四、试剂的配制试剂一应用液：将试剂用双蒸水10×稀释，制备成酚应用液，每次测试需使用2.5mL，根据样品数量计算好，用多少配制多少。
例：需要进行38次测试，则可配制40次使用量：40×2.5mL=100mL，量取10mL试剂一加入90mL双蒸水，充分混匀即可。
试剂三应用液：分别采用移液管移取1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL试剂三于100mL容量瓶中，采用双蒸水定容至刻度，摇匀，制成浓度分别为10，20，30，40，50μg/mL的没食子酸应用液。
习惯用使用移液器的老师也可先在15mL离心管中分别加入9.9，9.8，9.7，9.6，9.5mL双蒸水，再采用移液器分别移取100，200，300，400，500 μL 试剂三于相应的离心管中，充分颠倒混匀，制成浓度分别为10，20，30，40，50μg/mL的没食子酸应用液。
五、操作步骤充分混匀，室温静置5min使之充分反应2。
充分混匀，室温静置60min4，使用1cm光径比色皿，765nm处采用分光光度计测定吸光度。
1必须做标准管，以绘制标准曲线；23-8分钟均可，但标准管和所有测定管反应时间应保持一致；3如样品颜色较深，可做对照管，对照管将试剂二改为双蒸水；4最短40min，建议60min以保证反应充分。
六、计算方法1.绘制标准曲线以没食子酸应用液浓度0，10，20，30，40，50μg/mL为横坐标，以分光光度计测得的吸光值为纵坐标，在坐标纸上或利用EXCEL绘制标准曲线。
总酚的测定方法 国标
总酚的测定方法国标
《食品工业用总酚测定(GB/T 5009.11-2017)》是中国国家标准中规定的总酚测定方法，具体实施方法如下：
仪器和试剂：
1.紫外可见分光光度计：波长范围在200~640 nm 之间，波长选择器精度在±1 nm以内。
2.量筒：500 mL。
3.恒温槽：温度稳定度不超过±0.2℃。
4.聚四氟乙烯（PTFE）过滤器：孔径为0.45 μm。
5.乙醇：96% 。
6.乙酸：99% 。
7.苏丹Ⅲ：优级。
8.硫酸：1+1 （V/V）。
9.对甲酚：0.01 mol/L。
10.氯化铵：1 mol/L。
11.硝基苯：优级。
样品处理：
从样品中称取1 g，加入50 mL 95% 乙醇并振荡1 min，使用PTFE 过滤器过滤，将滤液收集于量筒中，定容至50 mL 。
操作步骤：
1.根据试样的吸光度值设定工作曲线，测定标准品对应的吸光度值。
2.将样品移入用量筒配制的乙醇中搅拌均匀，过滤后用苏丹三染色。
3.测定各样品、对照品和空白品的吸光度值，并根据工作曲线计算出总酚含量。
计算公式：
总酚（%）= A×V1×n（1-m/100）/V2×W
其中，
A——样品吸光度；
V1——样品配制容积；
n——对甲酚标准溶液的浓度（mol/L），与能量因数K的比值；m——样品干燥失重率（%）；
V2——乙醇的体积；
W——样品质量（g）。
总多酚标准
总多酚标准
总多酚是植物中一类重要的生物活性物质，具有抗氧化、抗炎、抗菌等多种生物活性。
在食品、医药、保健品等领域中，总多酚的含量是一个重要的质量指标。
因此，测定总多酚的含量对于保障产品质量和消费者健康都具有重要意义。
总多酚的测定方法有多种，其中较为常用的是Folin-Denis法和紫外-可见分光光度法。
这些方法的基本原理是利用酚类物质在特定条件下能够与某些试剂发生化学反应，生成具有颜色的化合物，通过测定该化合物的吸光度值，即可推算出样品中总多酚的含量。
在测定总多酚时，需要注意以下几点：
1. 样品处理：样品需要经过适当的处理，如破碎、提取、浓缩等，以便能够获得准确的测定结果。
2. 试剂选择：不同的测定方法需要使用不同的试剂，选择合适的试剂对于保证测定结果的准确性至关重要。
3. 操作规范：操作过程中需要严格遵守实验规程，确保每一步操作的规范性和准确性。
4. 结果解释：根据测定结果，需要对实验数据进行合理的解释和统计分析，以便能够得出正确的结论。
总之，总多酚的测定需要选择合适的测定方法、严格遵守操作规程、对实验数据进行合理的解释和统计分析，才能得出准确的测定结果。
这对于保障产品质量和消费者健康都具有重要意义。
福林酚比色法测定酸浆宿萼中总多酚含量
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２ ０ １ ６年 １ ２月 第３ ７卷第 ２ ３期
Ｆ ｏ ｏ ｄ Ｒ ｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ Ａ ｎ ｄ Ｄ ｅ ｖ ｅ ｌ ｏ ｐ ｍ ｅ ｎ ｔ
食品研究与并发
检测 分 析
ＤＯＩ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ５ － ６ ５ ２ １ ． ２ ０ １ ６ ． ２ ３ ． ０ ３ ２
总酚含量测定-多酚含量测定-操作流程图-实验图解-李熙灿-Xican Li
多酚含量测定-总酚含量测定(操作流程图) 2017.10【测定方法与操作流程图】【溶液配制】(1)0.25mol/L Folin酚(福林酚)试剂的配制：取2mol/L Folin-Ciocalteu试剂1mL，加蒸馏水7mL，充分混合，得0.25mol/L的Folin-Ciocalteu试剂,共8mL。
(2)15%Na2CO3溶液的配制：取Na2CO3•10H2O溶3.0g，溶于20mL水中，混匀即得。
(3)连苯三酚1标准液的配制：精确称取连苯三酚标准品10mg．用甲醇溶解并定容到50mL，得0.2mg/mL的连苯三酚标准液。
(4)样品液的的配制：精确称取待测样品10mg．用甲醇2溶解并定容到10mL，得1mg/mL的样品液。
【连苯三酚标准曲线的绘制】1本文使连苯三酚作为标准品.当然,也可以使用咖啡酸、槲皮素、儿茶素、芦丁等作为标准品，绘制标准曲线。
2也可以用无水乙醇、95乙醇、水，视样品的溶解性而度。
1.9276670.15 0.35 1.917图Folin酚法测定多酚含量的标准曲线（以连苯三酚为例,平行测三次）（以连苯三酚为例，A = 32.16733*C + 0.06012, R=0.998，线性范围：连苯三酚0.00-0.06mg/mL，A值在0.039-1.928之间）。
【多酚含量的计算】依上述公式A = 32.16733*C + 0.06012, 由A值即可求得浓度C值。
【说明】(1)不同的分光光度计所测得的A值可能不一样，所以，同一次实验要用同一台分光光度计；(2)Folin-Ciocalteu试剂：可向试剂公司购买，一般其浓度为2 mol/L。
也可以自配方法如下：将100g钨酸钠(Na2WO4 ·2H2O), 25g钼酸钠( Na2MoO4·2H2O) ,700 mL蒸馏水，50 mL 85%磷酸及100 mL浓盐酸装入带回流装置的2000mL圆底烧瓶中，充分混合，文火缓慢回流10h,在加入150g硫酸锂(Li2SO4),50 mL蒸馏水及数滴液溴，然后将烧瓶内溶液开口煮15min，以驱除过量的溴，冷至室温后用容量瓶定容至1000mL，过滤。
福林酚法测定多酚含量原理
福林酚法测定多酚含量原理
福林酚法是一种测定多酚含量的方法，其原理如下：
多酚在福林酚的存在下，发生氧化反应，生成吸收波长为760nm的异色体，异色体的强度与多酚的含量成正比关系。
因此，可以通过测定异色体的吸光度来确定样品中多酚的含量。
具体操作步骤如下：
1.将待测的样品与福林酚溶液混合。
2.按照一定比例加入Na2CO3溶液，使样品呈现碱性pH。
3.在30℃下加入定量的氢氧化钾溶液，使福林酚启动氧化反应。
4. 取样品溶液，通过分光光度计测定其在760nm处的吸光度。
5.用标准多酚物质制成的浓度梯度溶液测定其对应的吸光度，建立标准曲线。
6.根据标准曲线计算样品中多酚的含量。
此方法简便易行、操作简单，广泛应用于食品、药物、化妆品等领域中对多酚含量的测定。
Folin_酚法测定水果及其制品中总多酚含量的条件
１．３．２ 总多酚的提取 取试样适量（ 葡萄酒吸取 ２ ｍＬ，
葡萄和柿子称取 ２ ｇ 匀浆 ， 其他水果称取 ５ ｇ 匀浆 ） ， 用 ８０ ｍＬ 蒸馏水洗入 １００ ｍＬ 容量瓶中 ， 至 １００ ℃沸 水浴中保温 ３０ ｍｉｎ， 取出 ， 冷却 ， 定容 ， 过滤 ， 滤液备 用。
果 树 学 报 ２００８ ， ２５ （ １ ） ： １２６～ １３１
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｆｒｕｉｔ Ｓｃｉｅｎｃｅ
Ｆｏｌｉｎ－ 酚法测定水果及其制品中 总多酚含量的条件
李 静 １， 聂继云 １， ２＊， 李海飞 １， 徐国峰 １， 王孝娣 １， 毋永龙 １， 王贞旭 １
（ １ 农业部果品及苗木质量监督检验测试中心 ， 辽宁兴城 １２５１００ ； 摘
收稿日期 ： ２００７－ ０８－ １７ 接受日期 ： ２００７－ １１－ ０６
基金项目 ： 农业部行业标准制订项目“ 水果、 蔬菜及制品中单宁含量的测定” （ 农财发 ［２００５］５８ 号 ） 作者简介 ： 李静 ， 女 ， 助理研究员 ， 在读硕士研究生。 Ｔｅｌ： ０４２９－ ３５９８１８３ ， Ｅ－ ｍａｉｌ ： ｌｉｊｉｎｇ１０４４＠１２６．ｃｏｍ
１．１．３
ＦＤ 显色剂 称取 １００．０ ｇ 钨酸钠和 ２０．０ ｇ 磷 钼酸 ， 溶于 ２００ ｍＬ 蒸馏水 ， 加入 ５０ ｍＬ 磷酸 ， 加热回
ｍｇ／Ｌ 没食子 酸 、 １ ｍＬ 显 色 剂 及 ２．０ ｍＬ ７．５％ 碳 酸 钠 溶液 （ ＦＤ 法 ） 或 ３．０ ｍＬ ７．５％ 碳酸钠溶液 （ ＦＣ 法 ） ， 于 １０ ｍＬ 离心管中 ， 用蒸馏水定容 ， 充分显色 ， 进行 ６００～ １ ０００ ｎｍ 波长扫描， 观察峰形。 ｃ） 准确度比较 ： 通 过添加回收率比较分析 ２ 种方法的准确度。
福林-酚比色法测定桑椹中总多酚
福林-酚比色法测定桑椹中总多酚李巨秀，王柏玉【摘要】摘要：以桑椹为原料，没食子酸为标准物质研究了用福林-酚比色法测定桑椹提取液中多酚类物质含量的最适反应条件。
结果表明，当福林-酚试剂与质量分数为12%的Na2CO3溶液体积比为1:2、反应温度20℃、反应时间2h时，总多酚的含量与吸光度呈良好的线性关系，测定方法的平均回收率为97.63%，相对标准偏差(RSD)为4.5%。
该方法具有所用试剂量少、操作方便、灵敏度高、精密度高、稳定性高等优点，适宜桑椹样品总多酚含量的测定。
【期刊名称】食品科学【年(卷),期】2009(030)018【总页数】4【关键词】桑椹；Folin-Ciocaileu；比色；总多酚含量桑椹(Fructus mori L.)为桑科植物桑的果实，富含多酚类化合物，是桑椹中一类重要的生物活性物质，其主要成分是花色苷[1-2]。
据大量研究报道，多酚化合物具有清除自由基、抗动脉硬化、降血脂、防止衰老和肿瘤等功能[3-6]，已经成为当前功能性食品研究的热点。
近年来对于苹果、葡萄、茶叶等的多酚物质的研究较多和深入[7-9]，而对桑椹多酚研究的报道较少。
陕西有大面积的桑椹种植区，研究桑椹中的多酚化合物，对提高桑椹经济价值，增加桑蚕业的附加值具有一定的推动作用。
多酚含量的测定方法有高锰酸钾法、酒石酸分光光度法、原子吸收法、紫外分光光度法等。
各种方法都有局限性，有的操作繁杂、费时，有的测定结果的重复性差，有的测定的误差大、灵敏度差，只能在很小的范围内加以采用[10-12]。
本工作通过乙醇提取桑椹果实中的多酚化合物，以没食子酸为标准物采用福林-酚法测定桑椹中多酚类物质的含量，分别研究最佳吸收波长、显色剂、显色时间和温度，并对分析方法的精密度实验、稳定性实验和加标回收率等进行评价，以期寻找操作简单、分析准确度高、速度快的桑椹多酚的分析方法，为桑椹果的开发利用提供得科学依据。
1 材料与方法1.1 材料与试剂桑椹于2008年采摘于西北农林科技大学桑蚕研究所，分装于保鲜袋中，放置于-30℃冰箱中保藏。
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一、实验原理
多酚类物质包括花青苷、黄酮苷、单宁等，具体又可分为若干种。
多酚类物
质含有酚羟基，有的还含有羧基，属于极性有机化合物，常用极性溶剂提取，如甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、水以及由这些溶剂按比例组成的复合溶剂。
由以上溶剂直接提取的多酚物质，实质为各种多酚的混合物（总多酚提取液），
不同的原料中所含酚类物质的种类不同，需要进一步的分离鉴定。
常用的植物多酚总量的测定方法中较为普遍使用的方法有:酒石酸亚铁比色法、FD 法、FC 法、普鲁士蓝法等。
其中酒石酸亚铁分光光度比色法应用较多。
酒石酸亚铁分光光度比色法的原理：过量的酒石酸亚铁与提取液中多酚反应
生成稳定的紫褐色络合物，溶液颜色的深浅与溶液中多酚含量成正比。
测定总多酚
时所用的标准物则需根据样品中所含多酚的种类而定，比如测定茶叶中茶多酚含量时，儿茶酚能较好地代表茶多酚，则以儿茶酚作标准物；而测定藤茶多酚时，则以没食子酸作标准物较合适。
二、实验材料、试剂与仪器
材料：茶叶；
仪器：水浴锅，分光光度计，三角瓶，容量瓶，吸管等；
试剂：
（1）酒石酸亚铁溶液：称取1.00g硫酸亚铁（FeSO4·7H2O）和5.00g酒石酸钾钠(C4H4O6NaK·4H2O）混合后加蒸馏水溶解定容到1000mL
（2）pH 7.5磷酸盐缓冲液：称取60.20g Na2HPO4·12H2O和
5.00g NaH2PO4·12H2O混合后加蒸馏水溶解定容到1000ml。
三、操作步骤
（一）标准曲线的制作或茶多酚含量经验值的应用
标准曲线的制作参照GB-8313-87《茶—茶多酚测定》方法。
为简化操作，可用在一定操作条件下吸光度值为1.00时，供试液中茶多酚的浓度为7.826 mg/mL”这一经验值，直接由待测液的吸光度值计算样品中茶多酚的含量。
1.福林试液的配制：取钨酸钠10g与钼酸钠
2.5g，加水70ml、85％磷酸
5ml与盐酸10ml,置200ml烧瓶中,缓缓加热回流10小时，放冷，再加硫酸锂
15g、水5ml与溴滴定液1滴煮沸约15分钟，至溴除尽，放冷至室温，加水使成100ml。
滤过,滤液作为贮备液。
置棕色瓶中,于冰箱中保存。
临用前，取贮备液2.5ml，加水稀释至10ml，摇匀，即得。
用10mL乙醇溶液溶解0.5000g 没食子酸，定容至100mL，分别移取3.0mL到100mL容量瓶中，用蒸馏水定容。
加入福林－薛卡多（Folin-Ciocalteu）试剂显色，在765nm波长下测定吸光度。
每个浓度做三个平行试验，取平均值，根据标准曲线。
取样品溶液1mL，按照上述的制作方法，测定其吸光度，每个样品做三个平行试验，取平均值，计算样品中的多酚含量。
反应原理为酚类化合物在碱性条件下可以将钨钼酸还原，生成蓝色的化合物，颜色的深浅与酚类化合物含量呈正相关，在波长760 nm 左右有最大吸收。
2. 酒石酸亚铁比色法。
其测定原理是茶多酚类物质能与亚铁离子形成紫蓝色络合物。
用分光光度法测定其含量。
茶多酚标准溶液的配制称取提取纯品0.2500g,加水溶解定容至250mL,混匀,即为每毫升含1mg提取纯品的标准溶液(mg/mL) 。
茶多酚的含量。
茶多酚标准曲线的绘制。
分别吸取茶多酚标准溶液1. 0mL、2. 0mL、3. 0mL、4. 0mL 于4 个50mL 容量瓶中,各加水至10mL,再加酒石酸亚铁溶液10mL,加入pH为7. 5的磷酸缓冲液至刻度,混匀后用1㎝比色皿,以空白试剂作参比,于波长540nm处测定吸光度(A) ,绘制出标准曲线。
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