植物总多酚常用的含量测定方法有Folin
总多酚标准
总多酚标准
总多酚是植物中一类重要的生物活性物质，具有抗氧化、抗炎、抗菌等多种生物活性。
在食品、医药、保健品等领域中，总多酚的含量是一个重要的质量指标。
因此，测定总多酚的含量对于保障产品质量和消费者健康都具有重要意义。
总多酚的测定方法有多种，其中较为常用的是Folin-Denis法和紫外-可见分光光度法。
这些方法的基本原理是利用酚类物质在特定条件下能够与某些试剂发生化学反应，生成具有颜色的化合物，通过测定该化合物的吸光度值，即可推算出样品中总多酚的含量。
在测定总多酚时，需要注意以下几点：
1. 样品处理：样品需要经过适当的处理，如破碎、提取、浓缩等，以便能够获得准确的测定结果。
2. 试剂选择：不同的测定方法需要使用不同的试剂，选择合适的试剂对于保证测定结果的准确性至关重要。
3. 操作规范：操作过程中需要严格遵守实验规程，确保每一步操作的规范性和准确性。
4. 结果解释：根据测定结果，需要对实验数据进行合理的解释和统计分析，以便能够得出正确的结论。
总之，总多酚的测定需要选择合适的测定方法、严格遵守操作规程、对实验数据进行合理的解释和统计分析，才能得出准确的测定结果。
这对于保障产品质量和消费者健康都具有重要意义。
Folin-Ciocalteu比色法测定板栗总苞提取液中总多酚的含量
Folin-Ciocalteu比色法测定板栗总苞提取液中总多酚的含量田桂芝;李绍明;王大超;侯立白【摘要】[目的]探索一种简单、科学、准确的分析多酚的方法,使富含多酚的板栗总苞废弃物得到充分的再利用.[方法]采用Folin-Cio-calteu比色法测定板栗总苞中多酚含量,并对碳酸钠、Folin-Ciocalteu试剂用量及显色温度、显色时间进行优化.[结果]该测定方法的最佳条件为:取0.50 ml板栗总苞提取液,加入3.0ml福林-酚试剂、6.0ml 15％的Na2C03溶液,在40℃务件下反应70 min,测定最佳波长为760 nm.吸光度与多酚含量在0～9 μg/ml范围内有良好的线性关系(y=0.135 1x +0.019 0,R =0.999 3).该方法的平均加标回收率为99.5％,相对标准偏差为1.2％(n=5).[结论]该方法具有精密度高、稳定性好、操作简单、快速、结果准确等优点,可用于板栗总苞多酚含量的测定.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2015(000)006【总页数】4页(P289-291,370)【关键词】板栗总苞;总多酚;Folin-Ciocalteu比色法;含量测定【作者】田桂芝;李绍明;王大超;侯立白【作者单位】沈阳工学院,辽宁抚顺113122;沈阳工学院,辽宁抚顺113122;沈阳工学院,辽宁抚顺113122;沈阳工学院,辽宁抚顺113122【正文语种】中文【中图分类】S509.9;TS207.3板栗(Castanea mollissima Blume)属壳斗科(Fagceae)栗属乔木类经济植物，是世界著名的干果之一［1］。
主要分布于北半球温带及亚热带，在我国大部分地区均有分布，以华北和长江流域各地栽培集中。
我国板栗年总产量达82．5万t，占世界总产量的75%［2］。
据《中药大辞典》［3］记载，板栗具有健脾益气、补肾强筋、散结解毒等功效，能治疗丹毒、肿瘤等疾病，就连板栗壳也具有止咳、化痰、清热、去火的作用，常用于药物治疗。
多酚含量测定法-总酚含量测定法-Folin酚法-Folin-Ciocalteu试剂法-操作图解
多（总）酚含量测定法（Folin-Ciocalteu试剂法）李熙灿/Xican Li（广州中医药大学）[文献] Xican Li, Jing Lin, Yaoxiang Gao, Weijuang Han, Dongfeng Chen. Antioxidant activity and mechanism of Rhizoma Cimicifugae. Chemistry Central Journal. 2012; 6(1):140.操作图解[溶液配制]1Folin-Ciocalteu试剂(0.25mol/L)的配制取2mol/L Folin-Ciocalteu试剂1mL，加蒸馏水7mL，充分混合，得0.25mol/L的Folin-Ciocalteu试剂,共8mL。
2 15%Na2CO3溶液（W/V）的配制取Na2CO3•10H2O溶3.0g，溶于20mL水中，混匀即得。
3 标准溶液的配制（以连苯三酚为例）精确称取连苯三酚标准品10mg．用水溶解并定容到50mL，得0.2mg/mL的对照品标准溶液。
4 连苯三酚标准曲线的绘制APyrogallol Concentration mg/mLA = 32.16733*C + 0.06012, R=0.998线性范围：连苯三酚0.00-0.06mg/mL ，A 值在0.039-1.928之间。
5 样品溶液的配制 样品母液（1mg/mL ）：精确称取样品2mg ，用95乙醇溶解并定容到2mL ，得1mg/mL 样品母液。
试剂+即可，注意观察A 值大小。
6 多酚含量的计算依上述公式A = 32.16733*C + 0.06012, 由A值即可求得浓度C值。
7 说明7.1 不同的分光光度计所测得的A值可能不一样，所以，同一次实验要用同一台分光光度计；7.2 Folin-Ciocalteu试剂：可向试剂公司购买，一般其浓度为2 M，使用前最好稀释。
也可以自配方法如下：将100g钨酸钠(Na2WO4·2H2O), 25g钼酸钠( Na2MoO4·2H2O) ,700 mL蒸馏水，50 mL 85%磷酸及100 mL浓盐酸装入带回流装置的2000mL圆底烧瓶中，充分混合，文火缓慢回流10h,在加入150g硫酸锂(Li2SO4),50 mL蒸馏水及数滴液溴，然后将烧瓶内溶液开口煮15min，以驱除过量的溴，冷至室温后用容量瓶定容至1000mL，过滤。
Folin-Ciocalteu比色法测定阜康阿魏叶中总多酚的含量
ａ ｉ ｎ ｔ ｅｒｎ ｅｏ ． ０ ～ Ｏ ０ ６ｍｇ ｍＩ ｔ ｈ ｅａ ｉｅｓａ ｄ ｒ ｅ ｉｔｏ ｒ一０ ９ ９ ６ ．Ｔｈ ｏ ｔｎ ｃｄ ｉ ｈ ａ ｇ ｆ ０ ２ ． ０ ／ ｗｉｈ ｔ ｅｒｌｔｖ ｔ ｎ ａ ｄｄ ｖａ ｉ源自（ ０ ． ９ ） ｅｃ ｎ ｅ ｔ
报 Ⅲ ＂ 键 词 ：阜 康 阿 魏 ； 多 酚 ； 量 测 定 关 总 含
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学
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中 图分 类号 ： １ Ｒ９ ４
文献标识码 ： Ａ
文章 编 号 ： ０ ９５ ５ （ ０ ２ ０ — １ ３ Ｏ １０ —５ １ ２ １ ）９１ ４一３
Ｃ ｎｅ ｔ ｎ ｌｓ ｆｔｔｌ ｏｙ ｈ ｎ ｌｎ ｔｅｌａ ｅ ｆＦｅｕａｆ ｋ ｎ ｎ ｉ Ｋ． ． ｏ ｔｎ ａｙｉ ｏ ａ ｐ ｌｐ ｅ ｏ ｉ ｈ ｖ ｓｏ ｒ ｌ ｕ ａ ｅ ｓｓ Ｍ ａ ｓ ｏ ｅ
ｔｕ比色 法 对阜 康 阿 魏 叶 中 总 多 酚 含量 进 行 测 定 。 结 果 没 食 子 酸 对 照 品 在 浓 度 为 ０ ０ ２ ０ ０ ６ｇ ｍＩ 范 围 内 ｅ ． ０ ～ ． ０ ／
科 与 吸 光 度 呈 良好 的 线 性 关 系 （ ｒ一０ ９ ９ ６ ； 康 阿 魏 叶 中总 多 酚 含 量 为 ４ ９ ／ ， Ｓ 为 ０ ５ ； 品 溶 液 在 ． ９ ） 阜 ． ９ ｍｇ ｇ Ｒ Ｄ ．２ 样
（Ｃｏ ｌｇ Ｊ ＴＣ ，Ｘｉｊａ ｇ Ｍ ｅ ｉａ ｉｅ ｓｔ ｌｅ ｅｏ Ｍ ｎ ｉ ｎ ｄ ｃ ｌＵｎ ｖ ｒｉｙ，Ｕｒ ｍｑ ３ ０ １ ｕ ｉ８ ０ １ ，Ｃｈ ｎ ｉ ａ； 。 ｎ ｉ ｎ ａ ｇ ｉＨｅ ｌ ｃ ｏ ｌ ｈ ｎ Ｊ ３ １ ０ ｈ ｎ Ｘｉｊａ ｇ Ｃｈ ｎ ｊ ａ ｔ Ｓ ｈ ｏ ，Ｃ ａ ｇ ｉ８ １ ０ ，Ｃ ｉ ａ； ｈ
Folin-ciocalteu比色法测桑叶中多酚含量
Folin-ciocalteu比色法测桑叶中多酚含量张军;李江遐;陆翠珍;宛晓春;刘朝良【摘要】采用以没食子酸为标准,研究了Folin-ciocalteu比色法测定桑叶中多酚含量的适宜条件.结果表明,桑叶提取液在Folin-ciocalteu试剂2.0 mL、20％Na2CO3溶液5.0 mL、反应温度30℃、反应时间2h的条件下,测定其760 nm 处的吸光值,多酚浓度在10.0～100.0 mg/L范围内与吸光值呈良好的线性关系;稳定性、精密度、重现性和回收率实验的相对标准偏差为0.2969％～2.502％.该法是一种简便、快速、准确测定桑叶多酚含量的可靠方法.%A quantitative method for the determination of the total content of polyphenols in the leaf of mulberry was studied by using Folin-ciocalteu colorimetry with gallic acid as standard. The results showed that the total polyphenol contents of the leaf of mulberry could be well calculated according to their colorimetric absorption at 760 nm by applying Folin-ciocalteu reagent 2. 0 mL and 20% Na2CO3 5. 0 mL at 30℃ for 2 h, an d the linear range of standard curve was 10.0～100.0 mg/L. Stability, precision, repetition and recovery rate were in the range of 0. 2969% ～2. 502% by RSD. Therefore, Folin-ciocalteu colorimetry is convenient, fast, and accurate to determine total polyphenols of the leaf of mulbery.【期刊名称】《激光生物学报》【年(卷),期】2012(021)002【总页数】5页(P131-135)【关键词】桑叶;多酚;Folin-ciocalteu比色法【作者】张军;李江遐;陆翠珍;宛晓春;刘朝良【作者单位】安徽农业大学生命科学学院,安徽合肥230036;安徽农业大学资源环境学院,安徽合肥230036;安徽农业大学生物技术中心,安徽合肥230036;安徽农业大学农业部茶叶生物化学与生物技术重点实验室,安徽合肥230036;安徽农业大学生命科学学院,安徽合肥230036【正文语种】中文【中图分类】S888.2桑叶为桑科植物桑(Morus alba L)的叶片，中医又称“铁扇子”。
Folin_ciocalteu法测定黄酒中总多酚含量
１ 实验材料
闽江老酒： 福建宏盛闽侯酒业有限公司， ２００４ 年 １０ 月 ２５ 日 生 产 ； 青 红 酒 ： 福 建 宏 盛 闽 侯 酒 业 有 限 公 司 ， ２００４ 年 １１ 月 ２２ 日生产； 福建老酒： 福建老酒酒业有限公司， ２００５ 年 ６ 月 ２９ 日生 产 ； 沉 缸 酒 ： 福 建 龙 岩 沉 缸 酒 业 有 限 公 司 ， ２００４ 年 ４ 月 ９ 日生产； 绍兴花雕： 中国绍兴黄酒集团， ２００４ 年 ９ 月 １０ 日 生 产 ； 张 裕 干 红 葡 萄 酒 ： 烟 台 张 裕 葡 萄 酿 酒 股份有限公司， ２００４ 年 １０ 月 １８ 日生产 ； 没 食 子 酸 丙 酯 ： 国 药 集 团 化 学 试 剂 有 限 公 司 ， 含 量 ： ９８．５％￣１０２．５％； 其 它 材 料均为分析纯。
图 １ 黄酒可见光区吸收曲线 ２．１ Ｆ ｏｌｉｎ－ｃｉｏｃａｌｔｅｕ 试剂的配制，见参考文献［７］。 ２．２ 对照品溶液的配制
精密称取对照品 ２５０ｍｇ 没食子酸丙酯， 定容至 ２５０ｍｌ。 ２．３ 标准曲线的制备
精 密 吸 取 上 述 对 照 品 溶 液 ０．０２５、０．０５０、０．１００、０．２００、０．４００、０．６００ｍｌ 于 ２５ｍｌ 具 塞 试 管 中 ， 加 入 １．２５ｍｌ Ｆｏｌｉｎ－ ｃｉｏｃａｌｔｅｕ 试剂， 摇匀后再加入 ３．７５ｍｌ ２０％的 Ｎａ２ＣＯ３ 溶液， 定容至刻度， 于 ３０℃反应 ２ｈ， 同时以不加对照品溶液 为空白。在 ７６０ｎｍ 波长处测定对照品溶液的吸光度， 以对照品的含量为横坐标， 以吸收值为纵坐标， 绘制标准曲线， 见图 ２。线性回归方程为： Ｙ＝２．６３２５Ｘ＋０．０１７， ｒ２＝０．９９９４， 在 ０．０２５￣０．６００ｍｇ／ｍｌ 范围内对照品没食子酸丙酯的量与吸收 值呈良好的线性关系。
福林酚法测定总酚含量-操作流程图-实验图解-李熙灿-Xican Li
福林酚法测定总酚含量-操作流程图2017.10【安全事项】本实验所用的福林酚试剂（或称Folin酚试剂、Folin-Ciocalteu试剂）有严重的腐蚀性。
【测定方法与操作流程图】【文献】Xican Li, Qiuping Hu, Shuxia Jiang, Fei Li, Jian Lin, Lu Han,Yuling Hong, Wenbiao Lu, Yaoxiang Gao, Dongfeng Chen. Fl os Chrysanthemi Indici Protects against Hydroxyl-induced Damages to DNA and MSCs via Antioxidant Mechanism: A Chemistry Study. Journal of Saudi Chemical Society, 2015, 19, 454-460【溶液配制】(1)0.25mol/L 福林酚试剂的配制：取原装的福林酚试剂（浓度为2mol/L）2毫升，加蒸馏水14毫升，充分混合，得0.25mol/L的福林酚试剂,共16 毫升。
(2)15%Na2CO3溶液的配制：取Na2CO3•10 H2O溶3.0 克，溶于20毫升水中，混匀即得。
(3)连苯三酚1标准液的配制：精确称取连苯三酚标准品10毫克．用甲醇溶解并定容到50毫升，得0.2毫克/毫升的连苯三酚标准液。
(4)样品液的的配制：精确称取待测样品10毫克．用甲醇2溶解并定容到10毫升，得1毫克/毫升的样品液。
【连苯三酚标准曲线的绘制】0.2毫克/毫升样品液加样量(x毫升) 甲醇(05-x)A760值A760平均值SD0.000 0 0.50 0.030.0386670.0174421本文使连苯三酚作为标准品.当然,也可以使用咖啡酸、槲皮素、儿茶素、芦丁等作为标准品，绘制标准曲线。
2也可以用无水乙醇、95乙醇、水，视样品的溶解性而度。
Folin-Ciocaileu比色法测定刺槐花中的多酚含量
表２葛根素含量测定结果 （ － ） ｎ３
精 密吸取 供试 品溶 液２ Ｌ ０ ｕ ，分别在 制备后 ０ ， ４ ，１ ，２ 进样 ，测定峰面积 ，Ｒ Ｄ＝０ ，８ ２ ４ｈ Ｓ ． ６％。表 明样 品在２ 内稳定。 ４ｈ
２１ 加 样 回收 率 试验 ．０ ３ 讨论
３２ ３
食 品与药 品
Ｆ ｏ ｎ ｒｇ ｏ ｄａ ｄＤ ｕ
２ １ 年第 １ 卷第 ０ 期 ００ ２ ９
Ｆ ｌ ． ｉｃｉ ｕ ｏｉ Ｃ ｏａｌ 比色法测定刺槐花 中的多酚含量 ｎ ｅ
王 晓 阳 ，唐 琳 ，赵 垒 ，栾岩 妮 ，张振 燕
（ 山东师 范大学生命科 学学院食 品科学与工程系 ，山东 济南 ２ ０ １ ） ５ ０ ４
性 、 重 现 性和 回 收率 。 结果 表 明建 立 的 方 法 能 有效 地
２ Ｌ Ｏ“ ，测定峰面积 ，计算 ，结果见表 １ 。
表１加样回收率试验结果 （＝ ） ６
控制葛根汤颗粒的质量。
参考文献
［］ 梁 吉 春 ， 石 任 兵 ，刘 斌 ，等 ． 翘 散 研 究方 法 的新 探 讨 ［］北 １ 银 Ｊ． 京 中 医药 大 学 学 报 ， １ ９ ，２ （ ） ：３ —８ ９９ ２ １ ７３ ． ［］ 国 家药 典 委 员 会 ． 根 ［］中 国 药典 ２ ０ 年 版 一 部 ． 京 ：化 学 ２ 葛 Ｓ． ０５ 北
Ｗ ＡＮＧ ａ ． ａ ｇ ＴＡＮ Ｇ ｎ ＺＨＡＯ ｉ ＬＵＡＮ ｎ ｎ ， Ｘｉｏ ｙ ｎ ， Ｌｉ ， Ｌｅ， Ｙａ ． ｉ ＺＨＡＮＧ ｅ ． ａ Ｚｈ ｎ ｙ ｎ
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植物总多酚常用的含量测定方法有Folin- Ciocalteu 法, 酒石酸亚铁法, 普鲁士蓝法和高锰酸钾法等。
1.福林试液的配制：
取钨酸钠10g与钼酸钠2.5g，加水70ml、85％磷酸5ml与盐酸10ml,置200ml 烧瓶中,缓缓加热回流10小时，放冷，再加硫酸锂15g、水5ml与溴滴定液1滴煮沸约15分钟，至溴除尽，放冷至室温，加水使成100ml。
滤过,滤液作为贮备液。
置棕色瓶中,于冰箱中保存。
临用前，取贮备液 2.5ml，加水稀释至10ml，摇匀，即得。
用10mL乙醇溶液溶解0.5000g没食子酸，定容至100mL，分别移取3.0mL 到100mL容量瓶中，用蒸馏水定容。
加入福林－薛卡多（Folin-Ciocalteu）试剂显色，在765nm波长下测定吸光度。
每个浓度做三个平行试验，取平均值，根据标准曲线。
取样品溶液1mL，按照上述的制作方法，测定其吸光度，每个样品做三个平行试验，取平均值，计算样品中的多酚含量。
反应原理为酚类化合物在碱性条件下可以将钨钼酸还原，生成蓝色的化合物，颜色的深浅与酚类化合物含量呈正相关，在波长760 nm左右有最大吸收。
2. 酒石酸亚铁比色法。
其测定原理是茶多酚类物质能与亚铁离子形成紫蓝色络合物。
用分光光度法测定其含量。
茶多酚标准溶液的配制称取提取纯品0.2500g,加水溶解定容至250mL,混匀,即为每毫升含1mg提取纯品的标准溶液(mg/mL) 。
茶多酚的含量。
茶多酚标准曲线的绘制。
分别吸取茶多酚标准溶液1. 0mL、2. 0mL、3. 0mL、4. 0mL 于4 个50mL 容量瓶中,各加水至10mL,再加酒石酸亚铁溶液10mL,加入pH为7. 5的磷酸缓冲液至刻度,混匀后用1㎝比色皿,以空白试剂作参比,于波长540nm处测定吸光度(A) ,绘制出标准曲线。
实验十七食品中多酚类物质的提取与含量测定
一、实验原理
多酚类物质包括花青苷、黄酮苷、单宁等，具体又可分为若干种。
多酚类物质
含有酚羟基，有的还含有羧基，属于极性有机化合物，常用极性溶剂提取，如甲醇、
乙醇、乙酸乙酯、丙酮、水以及由这些溶剂按比例组成的复合溶剂。
由以上溶剂直接提取的多酚物质，实质为各种多酚的混合物（总多酚提取液），不同
的原料中所含酚类物质的种类不同，需要进一步的分离鉴定。
常用的植物多酚总量的测定方法中较为普遍使用的方法有: 酒石酸亚铁比色法、FD
法、FC 法、普鲁士蓝法等。
其中酒石酸亚铁分光光度比色法应用较多。
酒石酸亚铁分光光度比色法的原理：过量的酒石酸亚铁与提取液中多酚反应生
成稳定的紫褐色络合物，溶液颜色的深浅与溶液中多酚含量成正比。
测定总多酚时所
用的标准物则需根据样品中所含多酚的种类而定，比如测定茶叶中茶多酚含量时，儿
茶酚能较好地代表茶多酚，则以儿茶酚作标准物；而测定藤茶多酚时，则以没食子酸
作标准物较合适。
二、实验材料、试剂与仪器
材料：茶叶；
仪器：水浴锅，分光光度计，三角瓶，容量瓶，吸管等；
试剂：
（1）酒石酸亚铁溶液：称取1.00g硫酸亚铁（FeSO4·7H2O）和5.00g酒石酸钾钠
(C4H4O6NaK·4H2O）,混合后加蒸馏水溶解,定容到1000mL；
（2）pH 7.5磷酸盐缓冲液：称取60.20g Na2HPO4·12H2O和5.00g NaH2PO4·12H2O，混合后加蒸馏水溶解,定容到1000mL。
三、操作步骤
（一）标准曲线的制作或茶多酚含量经验值的应用
标准曲线的制作参照GB-8313-87《茶—茶多酚测定》方法。
为简化操作，可用在一定操作条件下“吸光度值为1.00时，供试液中茶多酚的浓度为
7.826 mg/mL”这一经验值，直接由待测液的吸光度值计算样品中茶多酚的含量。
（二）样品总多酚的提取
准确称取1.0g磨碎并混匀的茶叶样品于200mL三角瓶中，加入80mL沸水，并在沸水
浴中保温浸提30min，然后过滤、洗涤滤渣，将滤液合并、冷却、加蒸馏水定容至
100mL。
（二）样品多酚提取液的多酚总量测定
吸取1mL样品多酚提取液于25mL容量瓶中，加入4mL蒸馏水和5mL酒石酸亚铁
溶液，摇匀，再用pH 7.5磷酸盐缓冲液稀释至刻度，混匀。
同是以蒸馏水代替样品提
取液，加入与样品测定同样的试剂作空白，用0.5cm比色皿在540nm波长处测定吸光
度。
四、计算
式中：A540—样品提取液的吸光度；
T—样品提取液的总体积（mL）；
V—测定时吸取样品液的体积（mL）；
W—称取样品的质量（g）；
7.826—吸光度为1.00时,茶多酚含量的经验值(mg/mL)。