植物生理生化指标测定
植物生理生化指标测定
小黑豆相关生理指标测定1.表型变化：鲜重、株高、主根长和叶面积鲜重：取处理好的植株，擦干根和叶表面水分，测量整株植物的重量，每个测6个重复。
株高：取处理好的植株，测量从根和茎分隔处到植株最高点的高度，记录，每个测6个重复。
主根长：取处理好的植株，测量从根和茎分隔处到主根最远点长度，记录，每个测6个重复。
叶面积：取处理好的植株，选择第二节段的叶片，测量叶面积，叶面积测量方法是测每个叶片最宽处长度作为叶的长，测叶片最窄处长度作为叶的宽，叶片长和宽的乘积即为叶表面积。
每个测6个重复。
2.总蛋白、可溶性糖、丙二醛（MDA）和H2O2含量测定样品处理：取0.5g样品（叶片要去除叶脉、根要先用清水清洗干净），速在液氮中冻存，在遇冷的研钵中加液氮研磨，然后加入1.5ml的Tris-HCl（pH7.4）抽提，将抽提液转移到2ml的EP管中，于4℃，12000rpm离心15min，取上清，保存在-20℃下，上清液可用于总蛋白、丙二醛（MDA）、可溶性糖和H2O2含量测定。
总蛋白测定（Bradford法）：样品反应体系（800ul H2O+200ul Bradford+5ul 样品），空白对照为（800ul H2O+200ul Bradford）。
测定后带入标准曲线Y=32.549X-0.224(Y代表蛋白含量，X代表OD595)，计算得出蛋白含量。
可溶性糖测定：样品反应体系（1ml蒽酮+180ul ddH2O+20ul样品提取液）；空白对照（1ml蒽酮+180ul ddH2O），测定OD625后带入标准曲线：Y=0.0345X+0.0204(Y代表OD625，X代表可溶性糖含量（ug）)蒽酮配方：称取100mg蒽酮溶于100ml稀硫酸（76ml浓硫酸+30mlH2O）.注意：浓硫酸加入水中时，一点一点递加，小心溅出受伤。
丙二醛（MDA）测定：在酸性和高温条件下，丙二醛可与硫代巴比妥（TBA）反应生成红棕色的3,5,5-三甲基恶唑2,4-二酮，在532nm处有最大吸收波长，但该反应受可溶性糖的极大干扰，糖与TBA的反应产物在532nm处也有吸收，但其最大吸收波长在450nm处。
植物生理学实验测试
植物生理学实验测试植物生理学是研究植物生长和发育等生理过程的科学学科，通过实验测试可以揭示植物对外界环境因素的响应和适应机制。
本文将介绍几种常见的植物生理学实验测试方法，包括植物生长实验、叶绿素测定实验和逆境胁迫实验等。
一、植物生长实验植物生长实验是研究植物对不同环境条件下的生长反应的一种常见方法。
可以通过改变光照、温度、水分等环境因素来观察植物生长的变化。
在实验中，选取相同种子并进行处理，如将一组种子暴露在高温环境下，另一组放置在低温环境中，然后记录植物的生长情况，并进行数据统计和分析。
通过这种实验方法可以了解植物对温度的适应性以及不同温度对植物生长的影响。
二、叶绿素测定实验叶绿素是植物中起着关键作用的色素，其含量可以反映植物光合作用的强弱。
叶绿素测定实验可以通过测量植物叶片中叶绿素的含量来评估光合作用的效率。
实验中，首先需要采集新鲜叶片样品，并将其研磨得到绿色叶汁，然后通过光度计等仪器测定叶绿素的吸光度值，并根据标准曲线计算叶绿素的含量。
通过叶绿素测定实验可以评估植物对不同环境因素（如光照强度、养分浓度）的响应和适应能力。
三、逆境胁迫实验逆境胁迫实验是模拟植物在环境恶劣条件下的生理反应，如盐胁迫、干旱胁迫、冷热胁迫等。
通过逆境胁迫实验，可以研究植物在逆境条件下的生理适应和耐受机制。
实验中，可以使用不同浓度的盐水浇灌植物或让植物在干旱条件下生长，然后观察植物的生长情况、生理指标的变化，并与正常生长的植物进行比较分析。
逆境胁迫实验可以揭示植物对逆境的敏感性和胁迫响应机制，为育种和改良耐逆植物品种提供理论依据。
总结：植物生理学实验测试是研究植物生理过程的重要手段，通过不同的实验方法可以揭示植物对环境因素的响应和适应机制。
植物生长实验、叶绿素测定实验和逆境胁迫实验是常见的植物生理学实验方法，分别用于研究植物生长、光合作用和逆境胁迫的情况。
通过这些实验测试的结果，可以进一步了解植物的适应性和耐受能力，为培育适应不同环境的优良植物品种提供理论基础。
植物生理生化指标测定
植物生理生化指标测定植物生理生化指标测定是研究植物生长发育和适应环境的重要手段之一、通过测定植物的生理生化指标，可以了解植物的代谢活动、光合作用强度、水分状况、营养状况等，从而为植物生长调控、抗逆性研究提供依据。
下面将从光合作用测定、水分状况测定和营养状况测定三个方面对植物生理生化指标测定进行详细介绍。
光合作用是植物生长发育的重要过程之一，也是植物蓄积养分和能量的主要途径。
常用的光合作用测定指标有净光合速率、光饱和点、光补偿点和光抑制。
净光合速率是指单位时间内单位叶面积净光合产物的量，可以通过测定二氧化碳吸收量和氧气释放量来计算。
光饱和点是指植物的净光合速率达到最大值时的光强度，可以通过测定不同光强下的净光合速率来得出。
光补偿点是指净光合速率和呼吸速率相等的光强度，可以通过测定不同光强下的净光合速率和呼吸速率来确定。
光抑制是指过高或过低的光强度对植物光合作用的影响，可以通过测定光强对净光合速率的影响来评价。
水分状况是植物生理生化指标测定的重要方面之一，也是植物生长发育和适应环境的关键因素之一、常用的水分状况测定指标有相对含水量、蒸腾速率和水分利用效率。
相对含水量是指植物组织中的相对含水量与干重的比值，可以通过称量植物组织的湿重和干重来计算。
蒸腾速率是指单位时间内单位叶面积水分蒸腾的量，可以通过测定植物的蒸腾量和叶面积来计算。
水分利用效率是指植物单位干物质产量所需要的水分量，可以通过测定植物的干物质产量和水分消耗量来计算。
营养状况是植物生理生化指标测定的另一个重要方面，也是植物生长发育和代谢活动的基础。
常用的营养状况测定指标有叶绿素含量、叶绿素荧光参数和土壤养分含量。
叶绿素含量是评价植物叶绿素合成和叶绿素降解的指标之一，可以通过植物叶片中叶绿素的提取和测定来得出。
叶绿素荧光参数是评价光能利用效率和光能转化效率的重要指标之一，可以通过叶绿素荧光仪来测定。
土壤养分含量是评价土壤中不同营养元素含量的指标之一，可以通过土壤样品的提取和测定来得出。
《植物生理生化》实验指导
令狐采学《植物生理生化》实验指导（适用专业：农学类相关专业）黑龙江八一农垦大学植物科技学院生理生化教研室目录生物化学实验部分：实验一、氨基酸的纸层析 (1)实验二、蛋白质含量测定（设计性实验） (5)实验三、酶的基本性质 (7)实验四、维生素C含量的测定 (12)实验五、还原糖和总糖的测定 (14)实验六、淀粉酶活性的测定 (17)实验七、脂肪浸提——索氏脂肪浸提法 (20)实验八、一种简单实用的提取植物DNA的方法 (22)实验九、聚丙烯酰胺电泳法测定大麦、小麦种子纯度 (24)实验十、淀粉酶的诱导、提取和活性测定（综合性实验） (26)植物生理学实验部分:实验一、植物组织水势的测定（小液流法） (28)实验二、植物伤流量的测定 (30)实验三、根系活力的测定 (31)实验四、蒸腾强度的测定 (35)实验五、叶绿体色素的提取、分离、性质和定量测定（综合性实验） (37)实验六、光合强度的测定（改良半叶法） (39)实验七、呼吸强度的测定 (41)实验八、植物抗逆性的鉴定（电导仪法） (43)实验九、植物缺水程度的测定（脯氨酸法） (45)生物化学实验部分实验一氨基酸的纸层析一、目的：层析分析法已广泛用于氨基酸、核酸、激素、维生素、糖类的分离与分析。
其优点是能够分离与分析在组成、结构及性质上极为相似的物质；设备简单，操作容易，样品用量很少，结果也较明确。
本实验的目的在于要求学生掌握纸层析法的一般原理和操作技术。
二、原理：纸层析法是以滤纸作为支持物的分配层析法。
分配层析法是利用物质在两种不同混合溶剂中的分配系数不同，而达到分离的目的。
通常用α表示分配系数。
在一定条件下，一种物质在某溶剂系统中的分配系数是一个常数。
）溶质在流动相的浓度（）溶质在静止相的浓度（l s C C =α 层析溶剂是选用有机溶剂和水组成的。
由于滤纸纤维素对水有较强的亲和力（纸上有很多-OH 基与水以氢键相连），吸附很多水分子，一般达滤纸重的22%左右（其中约有6%的水与纤维素结合成复合物），因此使这一部分水扩散作用降低形成静止相；而有机溶剂与滤纸的亲和力很弱，可以在滤纸的毛细管中自由流动，便形成流动相。
(整理)植物生理指标测定方法
A600—在600nm波长下测得的吸光度值
﹡—1.55×105为摩尔比吸收系数
C糖、CMDA分别是反应混合液中可溶性糖、MDA的浓度。
1.按下式计算提取液中MDA浓度
反应液体积（ml）
CMDA×—————————
1000
提取液中MDA浓度（μmol·ml－1）= ———————————————
四、实验步骤
1、脯氨酸标准曲线的制作
1.1取6支试管，编号，按下表配制每管含量为0～12μg的脯氨酸标准液。加入表中试剂后，置于沸水浴中加热30min。取出冷却。以去离子水溶液为空白对照，在520mm波长处测定吸光度（A）值。
试剂
管号
0
1
2
3
4
5
10μg·ml-1脯氨酸标准液（ml）
蒸馏水（ml）
冰醋酸（ml）
【3】无水酒精和80%丙酮等体积混合提取
实验二、
一、原理
植物组织在受到各种不利的环境条件（如干旱、低温、高温、盐渍和大气污染）危害时，细胞膜的结构和功能首先受到伤害，细胞膜透性增大。若将受伤害的组织浸入无离子水中，其外渗液中电解质的含量比正常组织外渗液中含量增加，组织受伤害越严重，电解质含量增加越多。用电导仪测定外渗液电导率的变化，可反映出质膜受伤害的程度。在电解质外渗透的同时，细胞内可溶性有机物也随之渗出，引起外渗液可溶性糖、氨基酸、核苷酸等含量增加，氨基酸和核苷酸对紫外光有吸收，对紫外分光光度计测定受伤害组织外渗液消光值，同样可反映出质膜受伤害的程度。用电导仪法和紫外法测定结果有很好的一致性。
二、原理
磺基水杨酸对脯氨酸有特定反应，当用磺基水杨酸提取植物样品时，脯氨酸便游离于磺基水杨酸溶液中。然后用酸性茚三酮加热处理后，茚三酮与脯氨酸反应，生成稳定的红色化合物，再用甲苯处理，则色素全部转移至甲苯中，色素的深浅即表示脯氨酸含量的高低。在520nm波长下测定吸光度，即可从标准曲线上查出脯氨酸的含量。
植物的生理生化研究实验
准备实验材料，设置呼吸作用抑制剂处理组和对照组，观察并记录 植物的生长情况。
数据分析
对比处理组和对照组的植物生长数据，分析呼吸作用对植物生长的 影响及机制。
05
植物矿质营养与代谢实验
测定植物体内矿质元素含量
原子吸收光谱法
利用原子吸收光谱仪测定植物样品中矿质元素的含量，该方法具有灵敏度高、选 择性好、精密度高等优点。
应用价值
实验结果可为农业生产、生态环境保护等领域提供科学依据和技术支持。例如，通过了解植物对不同环境条件的 适应机制，可以指导农业生产中合理施肥、灌溉等措施的制定；同时，对于植物抗逆性、抗病性等方面的研究也 可为植物育种和病虫害防治提供新的思路和方法。
提出进一步研究的设想和建议
深入研究特定基因或蛋白质的功能
质壁分离观察
利用显微镜观察质壁分离后的细胞形 态，了解细胞壁的弹性和原生质体的 收缩情况。
分析水分在植物体内的运输途径
长距离运输
通过测定植物不同部位的水势和含水量，分析水分在植物体内的长距离运输途 径和机制。
短距离运输
利用显微技术观察植物细胞间的水分移动，了解水分在细胞间的短距离运输方 式和过程。
信号传导机制探讨
深入研究激素与受体结合后的信号传导过程，揭示激素调控植物生长发 育的分子机制。
03
激素互作分析
研究不同激素间的相互作用关系，探讨它们在植物生长发育中的协同或
拮抗作用。
07
实验结果分析与讨论
对实验数据进行统计分析
数据收集与整理
详细记录实验过程中的各项数据，包括植物的生长情况、生理生 化指标等，并进行分类整理。
分析环境因素对光合作用的影响
实验原理
研究光照强度、温度、CO2浓度等环境因素对光 合作用的影响。
植物逆境胁迫下的生理生化指标研究
植物逆境胁迫下的生理生化指标研究随着全球气候变化的加剧，植物面临着越来越频繁和严重的逆境胁迫。
逆境胁迫对植物的生长发育、生理代谢、生物化学等方面都会产生重大的影响。
因此，研究植物在逆境胁迫下的生理生化指标，对于了解植物适应环境变化的机制，提高植物抗逆能力，具有重要的科学意义和实际价值。
一、植物生理生化指标的选择与意义逆境胁迫下的植物生理生化指标种类繁多，常见指标包括植物的抗氧化酶活性、膜脂过氧化程度、光合作用参数、叶绿素含量、非饱和脂肪酸含量等。
这些指标可以从不同的层面反映植物对逆境胁迫的响应和适应能力。
例如，抗氧化酶活性可以反映植物对逆境胁迫产生的氧化应激的抵抗能力；膜脂过氧化程度可以反映植物细胞膜的稳定性；光合作用参数可以反映植物光能利用的效率；叶绿素含量可以反映植物叶片的光合能力；非饱和脂肪酸含量可以反映植物细胞膜的可流动性。
通过对这些指标的研究，可以揭示植物适应逆境胁迫的机制，为培育抗逆品种、改善植物逆境胁迫抵抗能力提供理论依据。
二、逆境胁迫下植物生理生化指标的变化逆境胁迫下，植物的生理生化指标往往会发生明显的变化。
以抗氧化酶活性为例，逆境胁迫会导致植物体内活性氧的积累，进而激活一系列抗氧化酶，如超氧化物歧化酶、过氧化物酶等的活性增强。
同时，膜脂过氧化程度也会随之增加，导致细胞膜的功能和稳定性下降。
此外，光合作用参数的变化也是逆境胁迫下植物生理生化指标的重要表现形式。
在强光辐射和干旱等逆境条件下，光合作用的光抑制现象明显，表现为光合速率的下降和光系统II的损伤。
这些指标的变化往往与植物对逆境胁迫的响应和适应密切相关。
三、植物逆境胁迫下生理生化指标研究的方法和技术对于植物逆境胁迫下的生理生化指标研究，需要运用一系列的方法和技术进行分析和检测。
常用的方法包括酶活性测定、色谱分析、光合作用测定、光谱分析等。
例如，通过酶活性的测定，可以分析抗氧化酶活性的变化情况；通过色谱分析，可以测定植物中非饱和脂肪酸的含量；通过光合作用测定，可以评估植物的光合能力。
植物生理生化指标的测定方法与意义解读
植物生理生化指标的测定方法与意义解读植物生理生化指标的测定方法与意义解读对于研究植物生长、适应环境以及疾病防治等领域至关重要。
本文将介绍几种常用的植物生理生化指标的测定方法，并解读其意义。
一、叶绿素含量的测定方法与意义解读叶绿素是植物光合作用的关键物质，反映了植物的光合能力和光合效率。
常用的测定叶绿素含量的方法有多种，如色素提取法、光度法和荧光法等。
其中，色素提取法是最常用的方法之一。
该方法通过乙醇提取叶片中的叶绿素，然后用紫外-可见光谱仪分析提取液的吸光度，从而计算出叶绿素含量。
叶绿素含量的测定对植物的研究具有重要意义。
首先，叶绿素含量可以直接反映植物的光合能力和光合效率。
一般来说，叶绿素含量越高，植物的光合作用效率越高，并且可以更好地利用阳光进行光合作用。
其次，叶绿素含量也可以作为植物受到生态环境和生理状态变化的指示器。
例如，在氮素缺乏的条件下，植物体内的叶绿素含量会下降，表明植物养分供应不足。
因此，测定叶绿素含量有助于了解植物在不同环境和条件下的光合适应能力和生长状态。
二、抗氧化酶活性的测定方法与意义解读抗氧化酶是植物体内起重要保护作用的一类酶，包括超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和抗坏血酸过氧化物酶（APX）等。
这些酶能够清除植物体内产生的有害氧自由基，保护细胞免受氧化损伤。
常用的抗氧化酶活性测定方法有多种，如显色法、发光法和酶活测定法等。
抗氧化酶活性的测定在研究植物的环境适应能力和应对氧化胁迫方面具有重要意义。
首先，抗氧化酶活性可以反映植物受到氧化胁迫的程度。
当植物受到氧化胁迫时，抗氧化酶活性会显著增加，以应对有害氧自由基的累积。
其次，抗氧化酶活性还可以用来评估植物的环境适应能力。
例如，在干旱或高温等胁迫条件下，植物体内的抗氧化酶活性通常会增加，以维持细胞内的氧化-还原平衡。
三、渗透调节物质含量的测定方法与意义解读渗透调节物质是植物在干旱、盐碱等逆境环境下维持细胞渗透平衡和稳态的重要物质。
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小黑豆相关生理指标测定
1.表型变化：鲜重、株高、主根长和叶面积
鲜重：取处理好的植株，擦干根和叶表面水分，测量整株植物的重量，每个测6个重复。
株高：取处理好的植株，测量从根和茎分隔处到植株最高点的高度，记录，每个测6个重复。
主根长：取处理好的植株，测量从根和茎分隔处到主根最远点长度，记录，每个测6个重复。
叶面积：取处理好的植株，选择第二节段的叶片，测量叶面积，叶面积测量方法是测每个叶片最宽处长度作为叶的长，测叶片最窄处长度作为叶的宽，叶片长和宽的乘积即为叶表面积。
每个测6个重复。
2.总蛋白、可溶性糖、丙二醛（MDA）和H2O2含量测定
样品处理：取0.5g样品（叶片要去除叶脉、根要先用清水清洗干净），速在液氮中冻存，在遇冷的研钵中加液氮研磨，然后加入1.5ml的Tris-HCl（pH7.4）抽提，将抽提液转移到2ml的EP管中，于4℃，12000rpm离心15min，取上清，保存在-20℃下，上清液可用于总蛋白、丙二醛（MDA）、可溶性糖和H2O2含量测定。
总蛋白测定（Bradford法）：样品反应体系（800ul H2O+200ul Bradford+5ul 样品），空白对照为（800ul H2O+200ul Bradford）。
测定后带入标准曲线Y=32.549X-0.224(Y代表蛋白含量，X代表OD595)，计算得出蛋白含量。
可溶性糖测定：样品反应体系（1ml蒽酮+180ul ddH2O+20ul样品提取液）；空白对照（1ml蒽酮+180ul ddH2O），测定OD625后带入标准曲线：Y=0.0345X+0.0204(Y代表OD625，X代表可溶性糖含量（ug）)
蒽酮配方：称取100mg蒽酮溶于100ml稀硫酸（76ml浓硫酸+30mlH2O）.注意：浓硫酸加入水中时，一点一点递加，小心溅出受伤。
丙二醛（MDA）测定：在酸性和高温条件下，丙二醛可与硫代巴比妥（TBA）反应生成红棕色的3,5,5-三甲基恶唑2,4-二酮，在532nm处有最大吸收波长，但该反应受可溶性糖的极大干扰，糖与TBA的反应产物在532nm处也有吸收，但其最大吸收波长在450nm处。
采用双组分分光光度法，可计算出MDA含量。
MDA的计算公式为：MDA（umol/L）=6.45OD532-0.56OD450.
反应体系为：400ul 0.6%TBA+350ul H2O+50ul样品，80℃水浴10min后，测OD532和OD450。
对照用Tris-HCl.
0.6%TBA配方：称取硫代巴比妥0.6g，溶于少量1M NaOH中，待其完全溶解后用10%TCA（称取10gTCA三氯乙酸，溶于100ml蒸馏水中，待其溶解即可）定容至100ml。
H2O2测定（二甲酚橙法）：样品反应体系（82ul溶液A+820ul溶液B （A:B=1:10）+150ul样品提取液），30℃水浴30min，测OD560。
标准曲线为:Y=0.01734X-0.0555(Y代表OD560，X代表H2O2含量)
溶液A（200ml）：FeSO4.7H2O 0.1835g；(NH4)2SO4 0.0872g；H2SO4(浓硫酸18M)4.58ml，加水定容。
溶液B（200ml）：二甲酚橙0.0234g；山梨醇6g，加水定容到200ml
3.可溶性蛋白、SOD、POD和CAT活性测定
样品处理：取0.5g样品，速在液氮中冻存，在遇冷的研钵中加液氮研磨，然后加入1.5ml的Tris-HCl（pH7.0）（内含有20%甘油、1mmol/L ASA（抗坏血酸）、1mmol/L DTT（二硫苏糖醇）、1mmol/L EDTA、1mmol/L GSH（还原型谷胱甘肽）、5mmol/L MgCl2）抽提，将抽提液转移到2ml的EP管中，于4℃，12000rpm离心15min，取上清，保存在-20℃下，上清液可用于可溶性蛋白、SOD、POD和CAT含量测定。
1mmol/L的ASA配制：先配制10mmol/L的母液—称取176.13mg的ASA，溶于100ml的Tris-HCl（pH7.0）中即可，然后稀释10倍即可。
1mmol/L的DTT配制：先配制10mmol/L的母液—称取154.25mg的DDT 溶于100 ml的Tris-HCl（pH7.0）中即可，然后稀释10倍即可。
1mmol/L的EDTA配制：用30mmol/L的EDTA稀释30倍即可。
5mmol/L的MgCl2配制：称取MgCl2.6H2O的101.5mg溶于100ml的Tris-HCl （pH7.0），即可。
样品提取液的配制（200ml）：取10mmol/L的ASA母液20ml，10mmol/L 的母液DTT20ml，取30mmol/L的EDTA母液7ml，称取203mg的MgCl2.6H2O，最后再量取20ml的甘油，将最终体积定容到200ml，即可。
可溶性蛋白测定（Bradford法）：样品反应体系（800ul H2O+200ul Bradford+5ul样品），空白对照为（800ul H2O+200ul Bradford）。
测定后带入标准曲线Y=32.549X-0.224(Y代表蛋白含量，X代表OD595)，计算得出蛋白含量。
SOD测定：SOD活性的测定是根据照光时，体系中产生氧自由基使硝基四唑蓝还原成蓝色甲(在560nm处有一吸收峰), 而超氧化物歧化酶作为氧自由基的清除剂可抑制此反应。
•一个酶活单位定义为将硝基四唑蓝的还原抑制到对照一半(50％)时所需的酶量。
14.5mmol/L的dl-甲硫氨酸（分子量149.21）（现用现配）：称取甲硫氨酸216.4mg，加少量Tris-HCl(pH7.0)溶解后，用Tris-HCl(pH7.0)定容到100ml，即可。
30mmol/L的EDTA（292.25）（现用现配）：称取EDTA药品876.75mg，加少量Tris-HCl(pH7.0)溶解后，用Tris-HCl(pH7.0)定容到100ml，即可。
2.25mmol/L的NBT（硝基四唑蓝）（817.6）（现用现配）：称取NBT药品18
3.96mg，加少量Tris-HCl(pH7.0)溶解后，用Tris-HCl(pH7.0)定容到100ml，即可。
60umol/L的核黄素(376.36)（现用现配）：先称取225.81mg的核黄素，加少量50mM Tris-HCl(pH7.4)溶解后，用50mM Tris-HCl(pH7.4)定容到10ml，配制成60mmol/L的母液，然后取100ul到100ml的Tris-HCl(pH7.4)中，即可配制成60umol/L的核黄素。
测酶活的反应介质：测定前在54ml的14.5mmol/L的dl-甲硫氨酸中分别加入EDTA、NBT和核黄素各2ml，此为反应混合液。
酶活测定：在盛有 1.0ml反应液的试管中，加入适量的酶液（50ul）（以抑制达50%作用酶浓度为最佳）。
混匀后放在透明的试管架上，于光照培养箱中准确照光10min后，迅速测定560nm处的光密度。
以不加酶液照光液的为对照，计算反应被抑制的百分比。
按下式计算超氧化物歧化酶的活性
△A×N
酶活力＝───────────────
AO×W×T×V×50％
式中：酶活力单位为每min每ｇ鲜重酶活单位数；
AO为对照试管溶液在560nm处的吸光度值;
△A为对照试管溶液在560nm处的吸光值与加入酶液的反应液在560nm处的吸光值的差; N为酶液总体积；W为提取酶液的样品鲜重g；T为照光时间(10min)；V为加入酶液的体积(ml)；
POD测定（愈创木酚法）：过氧化物酶广泛分布于植物的各个组织器官中。
在有过氧化氢存在下，过氧化物酶能使愈创木酚氧化，生成茶褐色物质，可用分光光度计测量生成物的含量。
反应混合液配制：在50ml的50mmol/L的Tris-HCl(pH7.0)缓冲液中加入28ul 的愈创木酚，与磁力搅拌器上加热搅拌直至愈创木酚溶解，再加入19ul的30%的H2O2，混合均匀，4℃保存。
酶活测定：取反应混合液1.0ml，加入0.1ml酶提取液，2min前后，于470nm 处测OD值，每隔1min读数一次，以每分钟OD值的变化表示酶活大小。
（测量时再加入酶液）
CAT测定（H2O2法）
反应缓冲液：20mM的H2O2，使用前在25℃水浴中加热30min。
酶活测定：取反应液1.4ml，加入100ul酶液，每加完一管立即计时，并迅速在波长240nm 下测定30S、1min30S、2min30S时的吸光度，以Tris-HCl的作为空白。
以1min内A240减少0.1的酶量为1个酶活单位。
代入酶活力公式，以△OD*V/0.1*v*t FW表示CAT 活性，所有测定均重复三次。
△OD代表空白的吸光度-样品管的吸光度；V代表酶提取液的总体积，v代表测量是加入的样品体积；t代表反应时间min，FW代表样品鲜重。
0.1mol/LH2O2 配方：称取1.1333g的30%的H2O2，加入100ml的50mmol/L 的Tris-HCl(pH7.4)，即可。
也可以用0.01%的H2O2。
4.叶绿素含量测定
样品处理及测定：取0.1g样品，速于液氮中冻存，在遇冷的研钵中加液氮研磨，然后加入1.5ml的95%乙醇抽提，将抽提液转移到2ml的EP管中，于4℃，12000rpm离心15min，取上清，上清用于叶绿素含量测定。
测OD665和OD649。
空白对照为95%乙醇。
Ca=13.95OD665-6.88OD649
Cb=24.96OD649-7.32OD665
总叶绿素=Ca+Cb。