植物生理指标
植物生理生化指标测定

植物生理生化指标测定植物生理生化指标测定是研究植物生长发育和适应环境的重要手段之一、通过测定植物的生理生化指标,可以了解植物的代谢活动、光合作用强度、水分状况、营养状况等,从而为植物生长调控、抗逆性研究提供依据。
下面将从光合作用测定、水分状况测定和营养状况测定三个方面对植物生理生化指标测定进行详细介绍。
光合作用是植物生长发育的重要过程之一,也是植物蓄积养分和能量的主要途径。
常用的光合作用测定指标有净光合速率、光饱和点、光补偿点和光抑制。
净光合速率是指单位时间内单位叶面积净光合产物的量,可以通过测定二氧化碳吸收量和氧气释放量来计算。
光饱和点是指植物的净光合速率达到最大值时的光强度,可以通过测定不同光强下的净光合速率来得出。
光补偿点是指净光合速率和呼吸速率相等的光强度,可以通过测定不同光强下的净光合速率和呼吸速率来确定。
光抑制是指过高或过低的光强度对植物光合作用的影响,可以通过测定光强对净光合速率的影响来评价。
水分状况是植物生理生化指标测定的重要方面之一,也是植物生长发育和适应环境的关键因素之一、常用的水分状况测定指标有相对含水量、蒸腾速率和水分利用效率。
相对含水量是指植物组织中的相对含水量与干重的比值,可以通过称量植物组织的湿重和干重来计算。
蒸腾速率是指单位时间内单位叶面积水分蒸腾的量,可以通过测定植物的蒸腾量和叶面积来计算。
水分利用效率是指植物单位干物质产量所需要的水分量,可以通过测定植物的干物质产量和水分消耗量来计算。
营养状况是植物生理生化指标测定的另一个重要方面,也是植物生长发育和代谢活动的基础。
常用的营养状况测定指标有叶绿素含量、叶绿素荧光参数和土壤养分含量。
叶绿素含量是评价植物叶绿素合成和叶绿素降解的指标之一,可以通过植物叶片中叶绿素的提取和测定来得出。
叶绿素荧光参数是评价光能利用效率和光能转化效率的重要指标之一,可以通过叶绿素荧光仪来测定。
土壤养分含量是评价土壤中不同营养元素含量的指标之一,可以通过土壤样品的提取和测定来得出。
植物生理生化指标测定(精)

植物生理生化指标测定(精)小黑豆相关生理指标测定1. 表型变化:鲜重、株高、主根长和叶面积鲜重:取处理好的植株,擦干根和叶表面水分,测量整株植物的重量,每个测 6个重复。
株高:取处理好的植株,测量从根和茎分隔处到植株最高点的高度,记录,每个测6个重复。
主根长:取处理好的植株,测量从根和茎分隔处到主根最远点长度,记录,每个测6个重复。
叶面积:取处理好的植株,选择第二节段的叶片,测量叶面积,叶面积测量方法是测每个叶片最宽处长度作为叶的长, 测叶片最窄处长度作为叶的宽, 叶片长和宽的乘积即为叶表面积。
每个测 6个重复。
2. 总蛋白、可溶性糖、丙二醛(MDA 和 H2O2含量测定样品处理:取 0.5g 样品(叶片要去除叶脉、根要先用清水清洗干净 ,速在液氮中冻存,在遇冷的研钵中加液氮研磨,然后加入1.5ml 的Tris-HCl (pH7.4 抽提, 将抽提液转移到 2ml 的 EP 管中, 于4℃, 12000rpm 离心15min , 取上清, 保存在-20℃下,上清液可用于总蛋白、丙二醛(MDA 、可溶性糖和 H2O2含量测定。
总蛋白测定(Bradford 法:样品反应体系(800ul H2O+200ul Bradford+5ul样品, 空白对照为(800ul H2O+200ul Bradford 。
测定后带入标准曲线 Y=32.549X-0.224(Y代表蛋白含量, X 代表 OD595 ,计算得出蛋白含量。
可溶性糖测定:样品反应体系(1ml 蒽酮+180ul ddH2O+20ul样品提取液 ; 空白对照 (1ml 蒽酮 +180ul ddH2O , 测定 OD625后带入标准曲线 :Y=0.0345X+0.0204(Y代表 OD625, X 代表可溶性糖含量(ug蒽酮配方:称取100mg 蒽酮溶于100ml 稀硫酸(76ml 浓硫酸+30mlH2O . 注意:浓硫酸加入水中时,一点一点递加,小心溅出受伤。
植物生理指标测定

植物生理指标测定1.叶绿素含量测定叶绿素是植物进行光合作用的关键分子,它的含量可以反映植物的光合能力和叶片的健康状况。
叶绿素含量的测定可以通过光谱分析或色度法进行。
其中,光谱分析通过测量叶片吸收和反射的可见光波段来计算叶绿素含量;色度法则是通过提取叶片中的叶绿素,然后用乙醇或乙酸乙酯进行溶解,最后通过比色法来测定其含量。
2.蒸腾速率测定蒸腾是植物通过叶片气孔释放水分的过程,蒸腾速率可以反映植物水分的利用和调节能力。
蒸腾速率的测定方法有多种,常用的有质量法和热法。
质量法是通过称量植物在不同时间段内的重量变化来计算蒸腾速率;热法则是利用蒸腾过程中产生的热量来测定蒸腾速率。
3.气孔导度测定气孔是植物调节气体交换的关键结构,气孔导度可以反映植物对环境中各种因素的响应和适应能力。
气孔导度的测定可以通过气体交换技术进行,常用的方法有蒸腾流速法和扩散阻力法。
蒸腾流速法通过测定气孔腔中水蒸气和二氧化碳的浓度来计算气孔导度;扩散阻力法则是通过测定气孔腔中水蒸气的扩散阻力来计算气孔导度。
4.抗氧化酶活性测定氧化应激是植物面临的常见环境胁迫,而抗氧化酶是植物对抗氧化应激的主要防御系统。
抗氧化酶活性的测定可以通过比色法、荧光法和电化学法等进行。
比色法是基于酶催化反应产生的物质的颜色变化来测定酶活性;荧光法是通过检测酶催化反应产生的荧光信号来测定酶活性;电化学法则是通过测量酶催化反应中释放或吸收的电荷来测定酶活性。
这些测定方法可以用于研究植物对不同环境因子的响应和适应能力,也可以用于评估植物的生长和发育状态。
通过测定植物生理指标,研究人员可以更好地了解植物的生理机制和适应策略,为植物的种植和管理提供科学依据。
植物生理指标测定方法

植物生理指标测定方法植物生理指标是指用来衡量植物生理状况的具体参数或指标,在植物生理研究中起到了非常重要的作用。
植物生理指标测定方法主要包括以下几个方面:光合作用指标、呼吸作用指标、蒸腾作用指标、叶绿素指标、产量指标和抗逆性指标等。
1.光合作用指标的测定方法:(1)净光合速率的测定方法:通过光合速率仪测定植物叶片在光照条件下的净光合速率;(2)光饱和点和CO2抗饱和点的测定方法:通过对光合速率与光照强度或CO2浓度的关系进行测定,确定光饱和点和CO2抗饱和点;(3)光合色素含量的测定方法:通过分光光度计或高效液相色谱法测定叶片中的叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素等光合色素的含量;(4)光合机构有效光能利用率的测定方法:通过光合色素荧光分析仪测定叶片的光能利用效率。
2.呼吸作用指标的测定方法:(1)总呼吸速率的测定方法:通过呼吸速率仪或气体分析仪测定植物组织在不同温度条件下的总呼吸速率;(2)细胞内呼吸速率的测定方法:通过氧和二氧化碳分压差法或氧电极法测定细胞内的呼吸速率。
3.蒸腾作用指标的测定方法:(1)蒸腾速率的测定方法:通过蒸腾速率仪测定植物叶片在不同光照和湿度条件下的蒸腾速率;(2)水分利用效率的测定方法:通过测量蒸腾速率和光合速率的比值来反映植物对水分的利用效率。
4.叶绿素指标的测定方法:(1)叶绿素含量的测定方法:通过叶绿素荧光分析仪或高效液相色谱法测定叶片中叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素的含量;(2)叶绿素荧光动力学特性的测定方法:通过荧光指数、叶绿素荧光参数和叶绿素荧光成像等技术来评估叶绿素在光抑制和光保护状态下的变化。
5.产量指标的测定方法:(1)单株产量的测定方法:通过对植株生物量、籽粒数或实际产量的测定来计算出单株产量;(2)单穗产量的测定方法:通过对穗长、穗粒数和粒重的测定来计算出单穗产量;(3)单粒产量的测定方法:通过对单穗粒数和粒重的测定来计算出单粒产量。
6.抗逆性指标的测定方法:(1)抗氧化酶活性的测定方法:通过测定植物组织中抗氧化酶活性,如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和抗坏血酸过氧化物酶等的活性来反映植物的抗氧化能力;(2)渗透调节物质含量的测定方法:通过测定植物组织中渗透调节物质(如脯氨酸、脯氨酸激酶等)的含量来评估植物的胁迫适应能力;(3)膜脂过氧化程度的测定方法:通过测定植物组织中膜脂过氧化程度的指标,如丙二醛和过氧化氢含量来评估植物膜的稳定性。
植物抗旱生理指标测定原理及方法

植物抗旱生理指标测定原理及方法
(1)水分主要能量指标,包括蒸腾量、蒸发力、蒸发强度、蒸腾强
度以及气孔导度等;
(2)水分利用指标,包括水分利用效率、蒸散发相对于叶片重量的
比率、水分充分度指数、叶片含水量和土壤水分饱和度等;
(3)抗旱抗性指标,包括水分拦截能力、水位调节能力、耐旱抗性
降低等;
(4)水分吸收调控指标,包括根冠界面水分拉力、根须分布调控指数、根须结构调控指数、根系活动调控指数等;
(5)水分平衡指标,包括水分主客场平衡指数、水分平衡偏差指数、植株水分贮存和调控指数等;
(6)干旱耐受指标,包括强光耐受指数、植株水分平衡能力、水分
适应状态能力、旱作物叶片蒸发潜力、水分适应性耐受等;
(7)组织构型指标。
植物抗病 生理指标

植物抗病生理指标植物抗病生理指标植物作为生物体,同样会受到各种病原体的侵袭,从而引发疾病。
为了提高植物的抵抗力,科学家们研究出了一些植物抗病的生理指标。
这些指标可以帮助我们了解植物的抗病机制,从而为植物病害的防治提供理论依据。
本文将介绍几个常见的植物抗病生理指标。
1. 植物抗氧化能力植物在遭受病原体侵袭时,会产生一系列的氧化反应。
这些反应会导致细胞内氧自由基的积累,进而破坏细胞结构和功能。
因此,植物能否抵御氧化反应的发生,成为评估其抗病能力的重要指标之一。
一般来说,抗病能力强的植物具有较高的抗氧化酶活性,如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和抗坏血酸过氧化物酶等。
2. 植物抗病物质的积累植物在受到病原体侵袭时,会产生一些抗病物质,如抗菌肽、抗氧化物质和次生代谢产物等。
这些物质能够抑制病原体的生长和繁殖,从而起到保护植物的作用。
因此,抗病物质的积累情况可以作为评估植物抗病能力的指标之一。
一般来说,抗病能力强的植物在受到病原体侵袭时,会产生更多的抗病物质。
3. 植物免疫系统的激活程度植物免疫系统是植物对抗病原体的重要防线。
免疫系统的激活程度可以通过测量植物体内一些重要的免疫相关基因的表达水平来评估。
一般来说,抗病能力强的植物在受到病原体侵袭时,免疫相关基因的表达水平会显著增加。
4. 植物细胞壁的厚度和强度植物细胞壁是植物细胞外层的一层坚硬的保护壳。
细胞壁的厚度和强度可以影响病原体的侵入和扩散。
一般来说,细胞壁厚度和强度较高的植物具有较强的抗病能力,能够有效阻止病原体的入侵。
5. 植物内源激素的水平变化植物内源激素在植物的抗病过程中起到重要的调节作用。
不同的激素在不同的抗病阶段发挥不同的作用。
因此,通过测量植物体内一些重要内源激素的水平变化,可以评估植物的抗病能力。
一般来说,抗病能力强的植物在受到病原体侵袭时,会出现内源激素水平的变化。
总结起来,植物抗病生理指标主要包括植物的抗氧化能力、抗病物质的积累、免疫系统的激活程度、细胞壁的厚度和强度以及内源激素的水平变化等。
植物生理生态指标对氮、干旱、盐处理的响应

植物生理生态指标对氮、干旱、盐处理的响应
植物生理生态指标是用来评价植物生长状况和适应环境的指标,包括叶绿素含量、相对含水量、气孔导度、净光合速率、总非结构
性碳水化合物含量、根系生物量等多个指标。
下面是植物生理生态
指标对氮、干旱、盐处理的响应:
1. 氮
氮是植物生长所必需的元素之一,但过量的氮会对植物产生负
面影响。
在氮限制的条件下,植物的叶绿素含量和净光合速率都会
下降。
而过量的氮则会增加净光合速率,提高植物的生长速度,但
会影响植物的品质和营养价值。
2. 干旱
干旱是植物面临的一种重要的压力因素。
在干旱条件下,植物
的相对含水量下降,气孔导度减小,净光合速率和叶绿素含量也会
降低。
同时,在干旱条件下,植物会积累更多的总非结构性碳水化
合物,从而提高植物对干旱的耐受性。
3. 盐
盐胁迫是植物面临的另一种常见的压力因素。
在高盐浓度下,
植物的相对含水量下降,气孔导度减小,净光合速率和叶绿素含量
也会降低。
与干旱类似,植物在盐胁迫下也会积累更多的总非结构
性碳水化合物,从而提高植物对盐胁迫的耐受性。
此外,在高盐浓
度下,植物的根系生物量会增加,以便更好地吸收水分和养分。
植物生理生化指标的测定方法与意义解读

植物生理生化指标的测定方法与意义解读植物生理生化指标的测定方法与意义解读对于研究植物生长、适应环境以及疾病防治等领域至关重要。
本文将介绍几种常用的植物生理生化指标的测定方法,并解读其意义。
一、叶绿素含量的测定方法与意义解读叶绿素是植物光合作用的关键物质,反映了植物的光合能力和光合效率。
常用的测定叶绿素含量的方法有多种,如色素提取法、光度法和荧光法等。
其中,色素提取法是最常用的方法之一。
该方法通过乙醇提取叶片中的叶绿素,然后用紫外-可见光谱仪分析提取液的吸光度,从而计算出叶绿素含量。
叶绿素含量的测定对植物的研究具有重要意义。
首先,叶绿素含量可以直接反映植物的光合能力和光合效率。
一般来说,叶绿素含量越高,植物的光合作用效率越高,并且可以更好地利用阳光进行光合作用。
其次,叶绿素含量也可以作为植物受到生态环境和生理状态变化的指示器。
例如,在氮素缺乏的条件下,植物体内的叶绿素含量会下降,表明植物养分供应不足。
因此,测定叶绿素含量有助于了解植物在不同环境和条件下的光合适应能力和生长状态。
二、抗氧化酶活性的测定方法与意义解读抗氧化酶是植物体内起重要保护作用的一类酶,包括超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)等。
这些酶能够清除植物体内产生的有害氧自由基,保护细胞免受氧化损伤。
常用的抗氧化酶活性测定方法有多种,如显色法、发光法和酶活测定法等。
抗氧化酶活性的测定在研究植物的环境适应能力和应对氧化胁迫方面具有重要意义。
首先,抗氧化酶活性可以反映植物受到氧化胁迫的程度。
当植物受到氧化胁迫时,抗氧化酶活性会显著增加,以应对有害氧自由基的累积。
其次,抗氧化酶活性还可以用来评估植物的环境适应能力。
例如,在干旱或高温等胁迫条件下,植物体内的抗氧化酶活性通常会增加,以维持细胞内的氧化-还原平衡。
三、渗透调节物质含量的测定方法与意义解读渗透调节物质是植物在干旱、盐碱等逆境环境下维持细胞渗透平衡和稳态的重要物质。
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植物生理指标
1、植物酶液提取:
1)PVPP(固体,PVP单体与金属元素结合) 酚类吸附剂,酚的羟基与蛋白质
的羰基形成氢键,醌导致蛋白质聚合。
或polyclarAT(Polyclar-AT is insoluble PVP, also called as PVPP (PolyVinyl PolyPyrrolidine).
It binds phenols etc more efficiently than PVP and is easily
removable by filtration or a low speed spin)去除酚的毒害防止醌
颜色干扰。
PVP的肽键中的氧与酚羟基上的质子牢固结合,防止酚与酶
中肽键结合,保护了酶。
2)母液制备:0.1mol/L二硫苏糖醇DTT: 100mg至微量离心管,+650ul 水
0.5mo/L EDTA : 93gEDTANa,10g NaOH,定容到500ml
10mg/ml BSA:100mgBSA于9.5ml 水中
2、可溶性总糖测定(蒽酮比色法)
(1)原理:糖+硫酸—糠醛,其与蒽酮形成绿色络合物,620nm下显色。
本实验采用浓硫酸,倒入水中产生大量热,促进反应发生。
(2)标准曲线绘制:取略大于0.01g的葡萄糖,105度烘干至恒重,取0.01g 定容至100ml,配成100ug/ml的溶液。
取200mg蒽酮,溶于100ml 浓硫酸,冷却,保存于棕色瓶。
(注意:不需定容,量取100ml硫酸倒入烧杯即可,定容混匀时产气热溅出。
注意硫酸中是否存在杂质。
蒽酮非常敏感,不能用勺等挖取,只能直接倒,否则就会污染。
溶液配后呈亮黄色,放置
620nm.
实验结果:实际上并不理想,因abs均偏低,可试将标糖浓度适当升高。
葡萄糖含量ug 20 40 60 80 100
abs 0.09 0.169 0.259 0.332 0.427
3、电导率(DDS-11A)
1)接通电源前观
否指零,若有偏
差调节表头下
方凹孔,使其恰
指零。
2)接通电源,仪器预热10分钟。
3)将电极浸入去离子水中,须确保极片浸没,校正零。
4)根据数值选择量程,我选10ms
5)常数设为1
4、培养液PH测定(PHS-3C)
1)PH计在不使用时需使用KCL浸泡液浸泡,用枪从上小孔和帽注满,至
少浸泡24h。
将PH4.0缓冲剂包定容至250ml,再加入56g分析纯KCL,
加热溶解。
2)仪器使用前至少预热30min.
3)首先进行定位调节、斜率调节:将测量头用蒸馏水洗后,根据所测溶液
性质不同,放入不同溶液,待示数平衡,再分别调节定位、斜率至
6.86,4.00.
5、细胞活力测定(TTC法)
1)《植物生理学通讯》TTC法测定红豆杉细胞活力刘华[1] 梅兴园[2][1]湖北
省卫生职工医学院生物教研室,湖北荆州434000 [2]华中理工大学生命科学与技术学院,武汉430074)
2)药品配置:0.4%(m/v)TTC红四氮唑溶液:0.2gTTC, 加1.5ml 95%乙醇溶解,
用蒸馏水定容至50ml。
随配随用,不宜久藏,遮光,变红不可用。
3)原理:TTC氧化态为无色,被呼吸作用产生的H还原成红色的三苯基甲
4)步骤:10ml试管:2.5ml 0.4% TTC+2.5ml PH7.0 0.1mol/L PBS+0.2g鲜细胞,25
度避光13-16h,倒掉液体,以蒸馏水洗细胞三次,加5ml 95%乙醇使细胞完全脱色,70度水浴20min,以乙醇为对照,测485nm处吸光度,此数值可直接作为细胞活力的衡量标准。
一般所得值1-2
6、可溶性蛋白含量测定(考马斯亮蓝G250染色)
1)原理:
2)溶液配置:
a)考马斯亮蓝溶液:100mg G250,溶于50ml 95%乙醇,加入100ml 85%(w/v)的
磷酸,定容至1000ml。
于棕色瓶常温保存30天。
蓝黑色过滤后形成棕褐色稀释成淡蓝色;
b)50mmol/LPBS PBS直接稀释对PH无太大影响。
c)100ug/ml标准蛋白溶液:精确称取牛血清蛋白10mg,加水定容至100ml
3)步骤:
a)标准曲线绘制:6ml反应体系,盖盖摇匀程度均一,放置反应3分钟,
测595nm处吸光度。
比色在1h内完成。
b)样品测定:100ul 样品提取液
900ul 蒸馏水
5ml G250溶液
7、苯丙氨酸解氨酶PAL(陈建勋)
1)原理:PAL催化苯丙氨酸的脱氨反应,使氨释放形成反式肉桂酸,反式肉桂
酸在290nm处有重要吸收。
此酶在植物体内次生物质代谢如木质素等起重要作用。
2)药品配置:PH8.8 0.1mol/L 硼酸缓冲液
0.02mol/L L-苯丙氨酸:0.330g L-苯丙氨酸,上述缓冲液定容至100ml
3)步骤:1ml 0.02mol/L L-苯丙氨酸
2ml PH8.8 0.1mol/L 硼酸缓冲液
100ul 酶液(2份ck : 100ul 提取缓冲液)
混匀,290nm处测起始OD,精确计时,30度保温30分钟后,290nm处测吸光度。
以每30min 吸光度增加0.01所需酶量为1U.
4)计算:PAL活性(U/gFW)= 30min内OD差值*酶液总体积
0.1ml(酶液)*提取酶液时样品重*0.01
5)注意:
a)PAL为诱导酶,除光诱导外,切割受伤,病害感染等也能诱导此酶活性升高。
b)除直接用新鲜材料提取进行测定外,也可将诱导好的材料制成丙酮粉,然后
再提取测定。
8、过氧化氢酶CAT
德]B.施特尔马赫著.钱嘉渊译.酶的测定方法[M].第1版.中国轻工业出版社,1992.p186-188
1)原理:CAT催化H2O2 分解,240nm处检测H2O2 减少量。
CAT以PH7.0,
37度时活性最高,冷冻,阳光,氧气降低酶活。
2)药品:0.18%H2O2 :600ul 30% H2O2 用PH7.0 PBS稀释至100ml.现配。
(一般情况下,配置的双氧水冬天两周用完,夏天一周,避光)
25度预热的蒸馏水
3)步骤:
a)为检查在不加酶的情况下吸光度是否也降低,以蒸馏水为参比,用移液
管将1.0ml底物溶液和1.9ml蒸馏水滴入一只1厘米比色皿,并调水温
至25℃。
在连续5分钟内240nm处测定吸光度,若吸光度的降低幅度超
过0.01,则在计算主值时须减去此值。
b)以蒸馏水为对照,实验组:1ml0.18%H2O2 +1.9ml蒸馏水+100ul酶液,在
连续5分钟内240nm处测定吸光度。
(每隔1分钟读取一次结果,直至
每分钟吸光度的降低值达到稳定为止)
c)计算:在上述条件下,每分钟酶促分解1umol过氧化氢的酶量定为1个
酶活力单位。
×3 /0.0436×Ew
U/mg = E
240
式中:E240—240nm处每分钟内吸光度的降低值
Ew—每0.10ml所用酶液中含酶的重量(mg)
0.0436—240nm处1umol过氧化氢的吸光度
3—反应混合液的总体积。
4)注意:酶液浓度应为5-20u/ml
8、超氧化物歧化酶SOD(NBT光还原法陈建勋)
1)原理:NBT在Met和核黄素存在下,照光后发生光化还原反应生成蓝色甲
腙,蓝色甲腙在560nm处有最大光吸收。
SOD能够抑制这个还原反应,抑制强度与酶活性在一定范围内成正比。
2)药品配制:
a)50mmol/L PH7.8 PBS
b)220mmol/L Met: 3.2824g Met,用50mmol/L PH7.8 PBS溶解定容至100ml.
现配现用,于4度冰箱保存1-2d.
c) 1.25mmol/L NBT(氯化硝基四氮唑兰)溶液:避光现配,0.102gNBT,用
50mmol/L PH7.8 PBS溶解定容至100ml. 于4度冰箱保存2-3d.
d)0.033mmol/L核黄素:2.52mg核黄素,用50mmol/L PH7.8 PBS溶解定容
至200ml于棕色瓶,4度冰箱保存8-10d.
3)步骤:反应总体积5ml ,两个光对照,两个暗对照
比色时终浓度每个管中:50mmol/L PH7.8 PBS 4.05ml
220mmol/L Met 300ul 13mmol/L
1.25mmol/L NBT 300ul 75umol/L
0.033mmol/L核黄素300ul 2umol/L
酶液50ul 对照以缓冲液混匀后,光对照与样品均置于4000lx日光灯(我置于3根2000lx)反应20min,保证受光一致!否则严重影响结果。
以暗对照为参比,检测560nm处吸光度。
4)计算:以抑制NBT光化还原的50%为一个酶活单位。
SOD总活性(u/gFW)= (光对照吸光值—样品吸收值)*酶液总体积
光对照吸光值*0.5*样品重*样液体积(此处为50ul)SOD比活力(u/mg Pro)= SOD总活性
蛋白质浓度
5)加入酶量以抑制反应的50%为最佳?。