兔支气管败血波氏杆菌的分离培养及初步鉴定_胡北侠

表% 细菌 23% 23% 枸橼酸盐 :! : 赖氨酸 : : 尿素 : : 鸟氨酸 : :
两株波氏杆菌生化试验结果 葡萄糖 磷酸盐 ;" ; 葡磷胨水 ; ; 木胶糖 ; ; 山梨醇 ; ; 8#9 ;# ; 苯丙氨酸 ; ; 靛基质 ; ;
注： ! 表示可以利用该种物质； " 表示不能利用该种物质； # 表示没有 8# 9 生成。
獭兔马杜拉霉素中毒报告
高 跃 * 浙江省丽水市农业局， 浙江丽水 &#&$$$ , 丽水市莲都区九里村、 #$$% 年 & 月 %# ’ %! 日， 凤化村两户规模獭兔场，先后发生兔群四肢麻痹、 尖叫、 绝食， 以内脏出血病变为主的急性病， 一周内 经临床症状、 病理解剖和 分别死亡 (() 只和 !%# 只。 药物添加剂调查，确诊为獭兔马杜拉霉素中毒。现 将发病情况及诊治经过报告如下： % 发病经过 & 月 %# 日，九里村一规模獭兔场畜主为预防 兔球虫病， 变换抗球虫药， 从市区某兽药店购买鸡 用抗球虫药—— — 球敌克粉 * 含 %+ 马杜拉霉素 , ， 按 每吨饲料添加球敌克粉 %!$- 的剂量， 于 %& 日傍晚 投喂 青年兔， % !$$ 只仔兔、 %. 日早晨再次投喂 后饲养员发现几只仔兔死亡， 未引起注意， 到中午 店购买了球敌克， 按每吨饲料添加 %$$-， 饲喂 % %$$ 只仔兔、青年兔后，也发生与九里村相同的兔急性 死亡率达 .(/ !+ 。 病， 一周内死亡 !%# 只， # 临床症状 两养兔户仔兔、青年兔的饲料及添加剂配方与 以前唯一不同的是更换了抗球虫药—— — 球敌克，用 该饲料两次饲喂后，约 1 小时后发生了大批仔兔、 青年兔死亡。病兔发病初期精神沉郁， 呆目仰视， 绝 食，绝水，口吐白沫，尖叫，部分病兔四肢痉挛、抽 搐， 盲目撞笼， 后期高度沉郁， 两腿瘫痪， 角弓反张， 急速衰竭而死， 病程急性的 # ’ . 小时， 也有 % ’ & 天 死亡， 病程长的最终多以腹水增多而渐渐死亡。 & 剖检病变 病死兔解剖后发现，病变以全身性出血为主， 心脏内膜和浆膜面有出血点， 肺部严重充血、 出血， 间质增宽、 水肿； 肝脏初期肿大、 有斑点状出血， 肾、 脾、肠胃等脏器均有出血性病变。后期肝脏色泽暗 红， 硬化萎缩， 出现严重腹水。
— 实践与体会 —
后的粪便， 经带回实验室作卵囊计数 #( ) 投药前、 后发现： 试 & 组至试 ! 组， 服药前后的虫卵囊数不但 未减少， 反而还有所增加； 试 * 组至试 + 组， 投药后 的卵囊数出现减少； 对照组的卵囊数自始至终增、 减 幅度不是太大。见下表。
表 组别 试&组 试#组 试,组 试)组 试!组 试*组 试5组 试2组 试+组 对照组 投药前后的球虫卵囊变化情况 用药前卵囊数 %个 " 0’ * )$$ # #!$ # 2$$ & &!$ & *$$ 2 5$$ ,$ ,$$ *!$ 5 *!$ * *$$ * *!$ ** 2!$ &,+ $$$ 5! $$$ #5 +!$ ! $!$ &5 $!$ 5 !$$ !!$ )$$ 用药后卵囊数 %个 " 0’ ,$ ,$$ *!$ 5 *!$ * *$$ * *!$ ** 2!$ &,+ $$$ 5! $$$ #5 +!$ ! $!$ &5 $!$ 5 !$$ ) )!$ & $$$ #$ *!$ 2!$ 死亡 !$ & $!$ 5$$ !
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参考文献
李桂杰， 刘思当， 朱瑞良等 2 禽波氏杆菌内毒素致病性研 究 2 畜牧畜医学报， #$$% ， &% * . , ： &.) ’ &!# 王玉芝，朱瑞良 2 禽波氏杆菌病原性研究及防治初探 2 中国预防兽医学报， #$$% ， #. * # , ： %%5 ’ %#$ 李文玉等 2 犬波氏杆菌病的诊治 2 中国兽医杂志， #$$$ ， #( * # , ： &1 林悦厚，余柏容等 2 两种培养基对兔支气管败血波氏杆 菌分离培养的比较 2 中国养兔杂志， %)1( ， .： &)$ * 收稿日期： #$$# 6 $5 6 %5 ,
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— 实践与体会 —
两端钝圆， 多 #& # 细菌染色 革兰氏阴性小杆菌， 散在， 少数成双存在。两极染色不明显。 #& ) 培养特性 #& )& % !, 血清营养琼脂上 #- 小时形成灰白色小 菌落， 菌落湿润， 表面隆起， 中央稍凹陷， 边缘不整 齐。-. 小时菌落中等大小。 培养 #- 小时形 #& )& # 麦康凯培养基上生长良好， 成土黄色、针尖大菌落，表面隆起、湿润、光滑、透 明。培养基颜色由红色变为黄色。 灰 #& )& ) %$, 鸡血平板上 #- 小时形成菌落中等， 白色， 表面湿润、 光滑， 边缘整齐， 菌落周围有透明溶 血圈。 培养 #- 小时 #& )& - 马丁肉汤培养基内生长旺盛， 肉汤呈均匀一致浑浊，培养基表面形成一层较厚的 菌膜， 轻轻摇动菌膜沉入底部， 继续培养可再次形成 菌膜。 #& - 细菌毒力鉴定 ! 株波氏杆菌注射小鼠后， 其中有两株 1 分别命名为 23%、23# 4 对小鼠有致病 性， 小鼠在注射后 #- 小时内死亡。 死亡小鼠剖检， 见 皮下有红色胶胨样液体渗出，心脏有针尖大小出血 点， 肾脏、 脾脏出血， 肠道臌气、 粘膜出血。 #& ! 死亡小鼠的细菌分离 分别无菌取死亡小鼠 的脾脏、 肝脏， 经马丁肉汤增菌 # 小时后， 分别在麦 康凯上划线培养， 培养 #- 小时见有土黄色、 针尖大 菌落生长。 #& 5 细菌的的生化鉴定 两株有致病性的支气管 败血波氏杆菌的生化鉴定结果， 见表 %。
#& * 细菌的耐药性 两株波氏杆菌药敏试验结果 基本一致， 均对丙氯哌酸、 环丙沙星、 氯霉素、 诺氟沙
表# 细菌 23% 23% 丙氯哌酸 #-6 -$ #)6 -! 诺氟沙星 %56 )$ %.6 !$
星等较为敏感， 而对红霉素、 链霉素、 青霉素、 丁胺卡 那等有耐药性， 见表 #。
不同抗生素对两株波氏杆菌的抑菌圈直径 1 ’’ 4 氯霉素 #)6 #$ #$6 .$ 红霉素 .6 -$ %$6 -$ 氨苄青霉素 %)6 %$ %#6 !$ 链霉素 .6 !$ *6 )! 青霉素 .6 !. 56 !# 磺胺 %#6 )! %-6 !$ 丁胺卡那 76 !. 76 %$
环丙沙星 %.6 .$ %.6 -!
— 实践与体会 —
& 小结与讨论
中国养兔杂志
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&2 % 本研究通过对患有鼻炎的病兔鼻腔分泌物进 行细菌分离鉴定结果表明，波氏杆菌占细菌总数的 此外还有巴氏杆菌、 葡萄球菌等， 但是小鼠攻 !$+ ， 毒试验结果显示 !$+ 的波氏杆菌对小鼠有致死毒 力，另外一部分波氏杆菌和其他细菌都对小鼠无致 病能力，这说明波氏杆菌是兔鼻炎的主要致病性因 素，其他细菌在兔鼻炎中的致病机制尚有待进一步 研究。 相菌通 &2 # 由于波氏杆菌很容易发生菌相变异，! 常是有致病力的光滑型菌落， 可以变成无致病力的粗 糙型 " 相菌，在两者之间有过渡型的 # 相菌和 $ 相 菌。! 相菌除了含有波氏杆菌属共有的 3 抗原外，还 有一种特异的 4 抗原， 而"相菌没有 4 抗原。因此 4 抗原是波氏杆菌毒力的组成部分。 在机体抵抗力下降 的条件下， 寄生于呼吸道的无致病性的波氏杆菌也可 以通过菌相变异增强毒力， 导致兔群发病。
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,$3 $ 不喂药
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小结与讨论
,( & 据报道，球虫卵囊的孢子形成过程需要一定 氧气充足的 的温度、 氧气和湿度。 温度为 #+- 左右，
兔支气管败血波氏杆菌的分离培养及初步鉴定
胡北侠 任素芳 吴加强 颜世敢 崔锦鹏 % 山东省农科院畜牧兽医研究所， 山东济南 #!$&$$ ’ 波氏杆菌通常寄居于多种哺乳动物的上呼吸 道， 常引起鼻炎和支气管肺炎， 它在兔群中感染率非 常高，所导致的家兔鼻炎的发病率也非常高。特别 是在规模化养兔场， 波氏杆菌与巴氏杆菌、 葡萄球菌
)， !〕 亡〔 。但本试验从投药后的情况可以看出： 在每次
投药量 % ./ ’ $3 !
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投 服 2( $ 1 #$( $./ % 约 合 每 千 克 体 重 $( ! 1 &3 ,0 ’ 后， 其卵囊出现减少， 而投服 ,$( $./ % 约合每千克体 重 &( +0 ’ 后， 粪便中的卵囊减少的最多， 但同时兔也 出现死亡， 说明 &$4 浓度的葫芦茶浸膏剂对兔球虫 的有效剂量是 &( ) 1 &( * 千克体重用 23 $ 1 #$3 $./ % 即每千克体重 $( ! 1 &3 ,0 ’ ，同时也说明兔对葫芦 茶浸膏剂有一定的敏感性， 使用时应予注意。 至于是 何原因， 有待进一步研究。 )
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)3 $ 23 $
参考文献
杨 正 ( 现代养兔学 ( 北京：中国农业出版社， &+++ ， ,*+ 1 ,5$ 全国中草药汇编编写组 ( 全国中草药汇编 ( 北京：人民 卫生出版社， &+5! ， 2!* 1 2!5 左仰贤 ( 球虫学 ( 天津：天津科学技术出版社， &++& ， #+ 1 ,$ 李树荣， 李琦华， 吴艳梅等 ( 葫芦茶粉剂对山羊体内寄生 虫虫卵的效果观察 ( 中兽医医药杂志， #$$# ， #& % & ’ ： &$ 1 &# 李树荣， 李琦华， 杨柱昌等 ( 葫芦茶及浸膏剂对小白鼠毒 性的影响 ( 中兽医学杂志， #$$# ， &： ) 1 !$ % 收稿日期： #$$# 6 $* 6 #) ’