血型抗体效价测定
500例孕妇ABO血型抗体效价的检测及分析
检 验与临床 ・
２２ ６ 第０ 第８ ０年 月 ５ １ １ 卷 期
５０ ０ 例孕妇 Ａ Ｏ 血型抗体效价 的检测及 分析 Ｂ
孙 莉
上海 市长 宁 区妇 幼保 健 院检验 科 ， 上海
２０ ３ ０３ ３
【 要】目的 了解血 清 中 ＩＧ抗 Ａ（ 血 型抗 体 效 价异 常 在 “ 型孕 妇 中所 占 比率 及 临 床 意义 ， 摘 ｇ Ｂ） Ｏ” 及早 发 现 、 早 治 疗 及
ａ ｔ ｏ ｙｔｔｒ ｅｅ ｔｄ ｕ ｉ ｇＢＩ ｎ ｉ ｄ ｉｅｓｄ ｔｃｅ ｓｎ ＯＶＵＥ ｍｉｒｃ ｌｍｎ ｇ １ Ｒｅ ｕ ｔ ｔ ｄｅ ０ ａ ｅ ｆｐ ｅ ｎ ｎ ｍｅ ｔ ｅｓ ｒ ｍ ｉ ｒ≥ ｂ ｃｏ ｏｕ ｅ． ｓ ｌ Ｓｕ ｉｄ ５ ０ ｃ ｓ ｓｏ ｒ ｇ ａ ｔｗｏ ｎ．ｈ ｅｕ ｔｅ ｓ ｔ １：４ ａ ｃ ｕ ｔｄｆｒ１ ａ ｅ ，ａ ｎ ｒ ｌ ｅｅ ｔ ｎ ｒｔ ｓ３２ ％ ．Ｃｏ ｃｕ ｉｎ Ａｃｉｅｙｃ ｒｙｏ ｔｔｅ ｄ ｔｃｉｎ ｏ ｅＡＢＯ ６ ｃ ｏ ｎｅ ｏ ６ ｃ ｓ ｓ ｂ ｏｍａ ｄ ｔｃｉ ａｅｗａ ．０ ｏ ｎ ｌｓｏ ｔ ｌ ａｒ ｕ ｈ ｅｅ ｔｏ ｆｔ ｖ ｈ ｂｏ ｄ ｇｏ ｐ ａ ｔｂ ｄ ｉ ｒ ｏ ｈ ｒ ｎ ｔｌｃ ｒ ｆｐ ｅ ａ ｔｗｏ ｎ， ａｌ ｅｅ ｔ ｎ ｏ ｎ ｍａｉｓ ａ ｄ ｔ ｌ ｒａｍｅ ｔｔ ｌｏ ｒ ｕ ｎｉｏ ｙ ｔｔ ｆｔｅ ｐｅ ａａ ａｅ ｏ ｒ ｇ ｎ ｍｅ ｅ ｒｙ ｄ ｔｃｉ ｆａ ｏ ｌ ｉ ｙ ｔｅ ｔ ｎ ｏ ｅ ｎ ｏ ｅ ｎ ｍｅ
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98例产前免疫学(血型抗体、效价)检测结果及分析
比及在稀土元素中的含量权重,宋雁等[3]提出“如果在16种稀土元素毒理学资料不充分的情况下,可以考虑用铈、镧、钇、钕这4种稀土元素来代替总稀土元素进行风险评估”。
稀土元素与微量元素不同并非生物体必需元素,稀土元素可能较微量元素更易进入胎儿,王珑[9]、董瑶佳等[10]分别对3360例孕妇血液、九江地区840例儿童微量元素开展了检测分析,表明无论孕妇还是儿童均存在不同程度微量元素缺乏问题,是否与本地稀土元素的含量较高从而影响微量元素的吸收有关,需做进一步深入研究。
目前对茶叶中稀土元素的限量标准一直存在争议,2017年9月《食品安全国家标准食品中污染物限量GB2762-2017》正式实施,认为目前稀土元素的膳食暴露量不会对健康构成潜在危害,取消植物性食品中稀土限量要求,稀土限量去留之争渐渐尘埃落定。
但是,毒理学试验也证明一定剂量下的稀土元素可能具有遗传毒性、生殖发育毒性、慢性毒性、神经毒性、内分泌干扰作用、免疫毒性等作用[11],人体也可能通过空气、皮肤和吸入等其他途径暴露稀土元素。
食品生产经营企业仍然需要就茶叶种植、加工原料采购、验收、产品检验等关键环节制定并实施必要的稀土控制措施,使食品中稀土污染物的含量达到最低水平,从而最大程度维护消费者健康利益。
参考文献[1]刘若,李道和.江西省茶叶产业发展现状与对策分析[J].蚕桑茶叶通讯,2018,194(2):21-25.[2]Hirano S,Suzuki KT.Exposure,metabolism,and toxicity of rare earths and related compounds[J].Environ Health Perspect,1996, 104(Suppl1):85-95.[3]宋雁,刘兆平,张磊,等.我国边销茶中稀土元素含量水平调查及成年消费人群的暴露风险评估[J].中国食品卫生杂志,2016,28(2): 249-253.[4]中华人民共和国卫生部.GB5009.94-2012植物性食品中稀土元素的测定[S].北京:中国标准出版社,2012.[5]李筱薇.中国总膳食研究应用于膳食元素暴露评估[D].北京:中国疾病预防控制中心2012:40-56.[6]朱为方,徐素琴,邵萍萍,等.赣南稀土区生物效应研究稀土日允许摄入量[J].中国环境科学,1997,17(1):63-66.[7]杨秀芳,徐建峰,翁昆,等.茶树成熟新梢不同部位元素含量研究[J].中国茶叶加工,2008,(3):18-20.[8]郭勇全,肖萍,李文蕊,等.茶叶中稀土元素及其健康效应[J].食品与发酵科技,2010,46(5):65-69.[9]王珑,吴霞,谢爱华.赣南部分县市3360例孕妇血液微量元素检测结果分析[J].实验与检验医学,2017,35(3):436-439. [10]董瑶佳,张琴,吴冰.九江地区840例儿童微量元素检测结果分析[J].实验与检验医学,2016,34(4):520-522.[11]宋雁,刘兆平,贾旭东.稀土元素的毒理学安全性研究进展[J].卫生研究,2013,42(5):885-892.(收稿日期2019-02-18,修回日期2019-05-23)·调查报告·98例产前免疫学(血型抗体、效价)检测结果及分析吴学忠，吕蓉，李素萍，於娟，王超，赵阳，蒋菲菲，魏家余，裴丽玲(安徽省血液中心,安徽合肥230031)摘要：目的探讨孕妇ABO血型抗体和ABO以外血型不规则抗体产前免疫学检测在预防新生儿溶血病的前瞻性预示意义。
427例O型血孕妇ABO血型抗体效价检测分析
427例O型血孕妇ABO血型抗体效价检测分析摘要：目的：探讨血型不合妊娠产前免疫性抗体检测在新生儿溶血病预测中的意义。
方法：分别对427例O型血孕妇采集静脉血3 ml，应用直接抗人球蛋白试管凝集法进行IgG抗A或抗B的ABO血型抗体效价检测。
结果：抗体效价大于1:64者占%；IgG抗A大于1:64的孕妇显著多于IgG抗B大于1:64的孕妇（P＜）。
结论：血型不合妊娠夫妇进行ABO血型鉴定，检测孕妇血清中血型特异性抗体及抗体效价对预测新生儿溶血有重要意义。
关键词：O型血孕妇；抗体效价；新生儿溶血新生儿溶血病（HDN）是新生儿期常见病之一，是孕妇与胎儿之间因血型不合而产生的同族血型免疫性疾病。
胎儿由父亲遗传而获得的血型抗原恰为母亲所缺少，此抗原通过胎盘进入母体，刺激母体产生相应的免疫抗体，抗体又通过胎盘进入胎儿体内，抗原抗体相结合而使胎儿红细胞凝集而激活补体导致胎儿红细胞发生溶血。
根据胎儿或新生儿溶血的严重程度，可致新生儿早发性黄疸，心力衰竭或核黄疸后遗症，甚至流产、死胎。
即使幸存，亦后遗智力障碍、听力障碍或运动功能不全。
对ABO母儿血型不合进行产前诊断，孕妇体内的IgG抗A（B）的滴度是目前临床上预测ABO新生儿溶血的常用方法。
当孕妇的IgG抗A（B）效价大于1:64时发病率仅为%，效价大于1:128时，发病率可达20%以上，新生儿ABO 溶血若不及时恰当的治疗，常致并发症[2-4]。
因此，检测孕妇血清特异性抗体及抗体效价对预测HDN有重要意义。
1 资料与方法一般资料：选取20XX年～20XX年来我院孕期检查的427例孕妇，女方血型为O型，男方为A、B、AB型。
试剂标准：AB血球（上海医学生物有限公司），巯基乙醇，生理盐水，抗人球蛋白。
标本采集：男女双方抽取静脉血3 ml，分离血清。
检测方法：ABO及RhD血型鉴定。
IgG抗A（B）效价测定：按《全国临床检验操作规程》进行操作。
2 结果427例O型血孕妇中，抗A 210例，抗B 217例。
红细胞血型抗体效价测定标准操作规程
红细胞血型抗体效价测定标准操作规程本文介绍了红细胞血型抗体效价测定标准操作规程，以规范输血科医务科护理部的技术操作，并适用于评估母婴血型不合的新生儿溶血病的风险程度及产前检查等其他临床需要。
在材料和设备方面，需要3%～5%的A、B型反定型试剂红细胞、0.2 mol/L二巯基乙醇(2-Me)应用液、抗球蛋白试剂、待检者血标本、微柱凝胶抗球蛋白卡等。
在检测环境方面，室温应控制在18-27℃，湿度应控制在30%-70%。
在检测原理方面，对于IgM类红细胞血型抗体，将受检血清经连续倍比稀释后与表达检测目标抗体对应抗原的试剂红细胞反应，以受检血清凝集试剂红细胞的最高稀释倍数的倒数作为受检血清中检测目标抗体的效价，并根据“红细胞凝集强度与评分标准”评分，完成对IgM类红细胞抗体效价的测定。
对于IgG类红细胞血型抗体，则先用巯基试剂2-Me裂解其中的IgM型抗体，经巯基试剂2-Me处理后再测定IgG类红细胞血型抗体。
在操作步骤方面，盐水介质法测定IgM类红细胞血型抗体效价。
具体操作为将受检血清加入一系列稀释盐水中，分别加入A、B型反定型试剂红细胞，静置30分钟后观察凝集情况，以受检血清凝集试剂红细胞的最高稀释倍数的倒数作为受检血清中检测目标抗体的效价，并根据“红细胞凝集强度与评分标准”评分，完成对IgM类红细胞抗体效价的测定。
7.1.1.对12支试管进行排列编号，第2至第12管每管加入0.1ml生理盐水，第1管及第2管分别加入受检者血清0.1ml，混匀后吸出0.1ml移至第3管内，以此类推，连续倍比稀释至第12管（2048倍）。
7.1.2.在12支试管中，分别加入3%检测目标抗体对应抗原的试剂红细胞50μl，轻摇试管架。
7.1.3.使用血型血清学专用离心机进行离心，离心速度为120g，离心时间为1min，观察并记录有无溶血及凝集情况。
7.1.4.结果判读：镜检呈“1+”凝集的最高稀释倍数的倒数即为检查目标抗体的效价，根据“红细胞凝集强度与评分标准”进行评分。
孕妇血清中红细胞血型抗体效价测定标准操作规程
孕妇血清中红细胞血型抗体效价测定标准操作规程1、目的为规范输血科红细胞血型抗体效价测定的技术操作，确保检测结果准确，依据《输血实验室管理程序》4.1.9条款的要求制定本规程。
2、适用范围本文件适用于本院输血科测定IgG抗-A(B)抗体效价，用以评估胎母血型不合妊娠时发生胎儿及新生儿免疫溶血性疾病（HDN）的风险程度及其他临床需要。
3、职责：输血科技术人员负责本实验的技术操作。
4、原理将受检血清（如检测IgG类红细胞血型抗体，先用2-巯基乙醇处理）经连续倍稀释后与表达检测目标抗体对应抗原的试剂红细胞反应，以受检血清凝集试剂红细胞的最高稀释倍数的倒数作为受检血清中检测目标抗体的效价。
5、试剂：生理盐水，0.2mol/L的2-巯基乙醇（2-Me）应用液，博迅的微柱凝胶抗人球蛋白卡，0.8%的A和B型标准试剂红细胞。
6、仪器：XTL-4.7细胞洗涤离心机，博研微术凝胶卡专用孵育器及离心机，电热恒温水浴箱。
7、操作步骤与方法：7.1准备试剂：观察微柱凝胶卡的外观，如有干胶、杂质、气泡不可使用，之后将卡放置室温（18－25℃）平衡，再用专用离心机离心5分钟。
吸取2-Me15μl,加生理盐水至1ml为0.2M 2-Me 应用液。
7.2血清/血浆标本的制备：取血清50ul和150ul的生理盐水作1：4的稀释后再加入0.2M 2-Me应用液200ul混匀，密封试管口，37℃水浴60分钟。
灭活母体血清中IgM时，必须将试管口密封，并经常摇晃试管，以保证灭活效果。
同时用单克隆抗A或抗B作为对照，用来确认2-Me是否有效灭活IgM抗体。
7.3取7只干净试管，做好标记；在第1管中加入处理后的血清200ul和200ul生理盐水，混匀（为1:16稀释）；第2-7管中依次加200ul的生理盐水和前一管中的血清/血浆200ul，做倍比稀释。
7.4将抗人球蛋白卡标记好，从第7管开始到第2管依次将倍比稀释后的相应50ul血清分别加入标记孔中。
血型抗体效价测定标准操作规程(sop)
血型抗体效价测定标准操作规程一、目的为规范红细胞血型抗体效价测定的技术操作，保证结果的准确性从而为临床疾病的诊断和治疗做出正确的评估。
二、适用范围输血科负责红细胞血型抗体效价测定的技术人员。
三、原理：将受检血清（如检测IgG类红细胞血型抗体效价须先用巯基试剂裂解其中的IgM型抗体）经连续倍比稀释后与表达目标抗体对应的抗原红细胞试剂反应，以受检血清凝集试剂红细胞的最高稀释倍数的倒数作为受检血清中检测目标抗体的效价，同时根据“红细胞凝集强度与评分标准”评分。
四、步骤和方法（1）盐水介质法测定IgM类红细胞血型抗体效价1、排试管12支，编号，以第1支试管为原倍进行生理盐水倍比稀释受检血清，第12支试管为2048倍，稀释后容积定为100微升。
2、分别往12支试管加入3%目标抗体对应的抗原红细胞试剂50微升，轻摇混匀。
3、用专用离心机120g离心1min，观察有无溶血和凝集情况。
4、结果判断：镜检呈“1+”凝集的最高稀释倍数的倒数为目标抗体的效价，再根据“红细胞凝集强度与评分标准”评分。
（2）IgG类红细胞血型抗体效价测定1、取200微升受检血清加入0.2mol/L二巯基乙醇（2—Me）应用液200微升混匀，将试管口密封，37℃孵育30min。
2、排11支试管，编号，进行生理盐水倍比稀释2—Me处理过的血清。
由于第1支已经进行了稀释，所以第11支试管为2048倍，稀释后容积定为100微升。
3、凝聚胺法检测时，往11支试管加入3%目标抗体对应的抗原红细胞试剂50微升，轻摇混匀，按照凝聚胺法操作步骤进行试验。
4、抗球蛋白法测定时，往11支试管加入3%目标抗体对应的抗原红细胞试剂50微升，轻摇混匀后置37℃孵育30min后，按照抗球蛋白法操作步骤进行试验。
5、结果判断：镜检呈“1+”凝集的最高稀释倍数的倒数为目标抗体的效价，再根据“红细胞凝集强度与评分标准”评分。
（1）评分标准根据稀释血清各管凝集强度进行评分，凝集强度与评分标准为：4+为12分，3+为10分，2+为8分，1+为5分，+/-或W+为2分，阴性为0分，稀释各管评分之和为积分。
血型不完全抗体检测卡—母体IgG抗体效价检测
5）37℃孵育15分钟；
6）离心5分钟（900rpm2分钟，1500rpm3分钟）；
7）肉眼观察结果。
结果判定：
阳性结果：红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中形成的特异性抗原抗体复合物浮在凝胶表面或胶中，为阳性反应。
阴性结果：红细胞抗原无相应的抗体结合，不出现特异性抗原抗体复合物，红细胞沉于微柱凝胶的尖底部，为阴性反应。
反应强度：特异性红细胞抗原抗体复合物位于胶表面，为强阳性反应；复合物在胶中，为弱阳性反映；愈靠近胶底部颗粒愈小，反应愈弱。
操作步骤：
1）在试管中分别加入200µl母体血清和200µl DTT（或2-Me）应用液，然后置于37℃水浴30-60分钟。以充分破坏血清中IgM类抗体；
2）取6只干净试管，分别做好标记。将处理后的血清做倍比稀释；
3）将准备好的母体IgG抗体效价检测卡做好标记，依次将50µl倍比稀释血清分别加入标记卡中；
3、每日试验前，先取出微柱凝胶卡放置至室温。
4、红细胞悬液的浓度控制在0.5%－0.8%之间。
5、试剂卡应放在18-25℃储存，如若长期放在4℃冰箱，建议每1-2个月取出，用专用离心机离心一次，以防止干胶或产生气泡。
6、每日试验前，先取出微柱凝胶卡放置至室温。
7、红细胞悬液的浓度控制在0.5%－0.8%之间。
**医院
输血科文件编号：**血型不完全抗体检测卡—母体IgG抗体效价检测
版序：2007-12
页码：第1页，共1页
反应原理
300例孕妇ABO血型抗体效价检测分析
型、 Ｂ型 或 ＡＢ型 。
Байду номын сангаас
血 型 抗 体 ， ＡＢ 系 统 新 生 儿 溶 血 病 可 发 生 在任 何 妊 娠 中 ， 故 ０ 所 以在 第 １胎 即 可 发 病 。在 分 娩 时 少 量 的 胎 儿 红 细胞 进 入 母 体 血液循 环 ， 当胎 儿 红 细 胞 所 具 有 的 抗 原 恰 为母 体 所 缺 乏 时 ， 则
文献 标 志 码 ： Ａ
文 章 编 号 ：６ ２ ９ ５ （ ０ ０ １ — ７ ５ ０ １ ７ — ４ ５ ２ １ ） ６１ ２ — ２
母 婴 血 型不 合 是 新 生 儿 溶 血 病 发 生 的重 要 原 因之 一 ， 果 如
孕妇 血 型 是 ０ 型 ， 而胎 儿 血 型 为 Ａ 或 Ｂ型 ， 妇 血 液 中的 ＩＧ 孕 ｇ 抗 Ａ 或抗 Ｂ血 型 抗 体 会 通 过 胎 盘 进 入 胎 儿 血 液 ， 胎 儿 红 细 使 胞 致 敏 ， 致 新 生 儿溶 血 或 黄 疸 。 新 生 儿 Ａ Ｏ 溶 血 病 是 引 起 导 Ｂ
新生儿高胆红素血症的常见原 因， 可致 脑 干 听 觉传 导通 路损 害 和高 胆 红 素 脑 病 ， 响 其 生 存 质 量 ， 重 者 危 及 患 儿 的 生 命 。 影 严 本 文 通 过 ３ ０例 孕 妇 夫 妻 ＡＢ Ｒ ０ Ｏ， ｈ血 型 鉴 定 及 ＡＢ 血 型 抗 ０ 体 Ｉ Ｇ抗 Ａ（ ） 价 检 测 ， 计 新 生 儿 ＡＢ 溶 血 病 的 发 病 率 ， ｇ Ｂ效 统 Ｏ
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血型抗体效价测定
目的了解血型抗体效价测定的操作方法。
原理将被检抗血清作倍比稀释后，加入一定量的抗原红细胞，观察凝集强度。
以抗体稀释后仍能与抗原红细胞出现1个（+）凝集的试管稀释倍数之倒数定为该抗体的效价。
器材小试管、刻度吸管、37°C水浴箱。
试剂1.标准2%A型红细胞生理盐水悬液。
2．生理盐水。
标本被检者血清。
操作以抗A效价测定为例。
1．血清倍比稀释取10支小试管，每管加入生理盐水0.1ml。
在第1管中加入0.1ml被检者血清，混匀后吸取0.1ml加入第2管，依此类推，至第
10管，最后弃去0.1ml。
2．加入抗原红细胞于每管中加入2%A型红细胞生理盐水悬液0.1ml，混匀。
3．温育置15~20°C室温中温育15min。
4．离心和观察结果以1000r/min离心1min，以出现1个（+）凝集强度试管的血清稀释倍数的倒数定为该抗血清效价。
注意事项
1．倍比稀释要准确，避免稀释不匀出现跳管现象。
2．离心后试管内上清液出现溶血，表明不仅有抗原抗体反应，而且有补体激活，具有重要临床意义。
血型抗体效价测定
目的了解血型抗体效价测定的操作方法。
原理将被检抗血清作倍比稀释后，加入一定量的抗原红细胞，观察凝集强度。
以抗体稀释后仍能与抗原红细胞出现1个（+）凝集的试管稀释倍数之倒数定为该抗体的效价。
器材小试管、刻度吸管、37°C水浴箱。
试剂1.标准2%A型红细胞生理盐水悬液。
2．生理盐水。
标本被检者血清。
操作以抗A效价测定为例。
1．血清倍比稀释取10支小试管，每管加入生理盐水0.1ml。
在第1管中加入0.1ml被检者血清，混匀后吸取0.1ml加入第2管，依此类推，至第10管，最后弃去0.1ml。
2．加入抗原红细胞于每管中加入2%A型红细胞生理盐水悬液0.1ml，混匀。
3．温育置15~20°C室温中温育15min。
4．离心和观察结果以1000r/min离心1min，以出现1个（+）凝集强度试管的血清稀释倍数的倒数定为该抗血清效价。
注意事项
1．倍比稀释要准确，避免稀释不匀出现跳管现象。
2．离心后试管内上清液出现溶血，表明不仅有抗原抗体反应，而且有补体激活，具有重要临床意义。