氯过氧化物酶对苯酚生物降解的促进作用

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苯酚废水的电催化氧化-生物降解工艺研究

１Ａ，Ｏ电流增大约一倍，明ｐ值越大苯酚的氧化表Ｈ速率越快。同时，随着ｐ值的增大，化电位也发生Ｈ氧
收稿日期：０１３２２１一Ｏ一Ｏ
作者简介：振东（９４魏１８一）男，东曲阜人，士研究生，究方向：，山硕研生物化工；讯作者：慧勇，教授。Ｅｍａｌｈｌ＠ｆｕｅｕ通刘副 — ｉｙｉｚ．ｄ．：ｕ
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恒温水浴摇床，上海精密科学仪器有限公司；Ｋ１０Ｓ７０ｓＯ型可调式直流电源，科企业；Ｔ９７４型ＩＡ１三Ｅ９２
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明尽管氯离子浓度的增大对苯酚的直接氧化有促进作
用，氯离子达到一定浓度时，酚的电化学氧化峰的但苯
峰电流增加缓慢，明苯酚的直接氧化是以电化学控表制为主。

苯酚降解菌的分离和鉴定

目录目录 (1)摘要 (2)Abstract (3)第一章绪论 (4)1.1 苯酚降解菌的定义及分类 (4)1.2苯酚降解菌的性质及其用途 (4)1.3苯酚降解的研究现状 (5)1.4苯酚降解菌生产菌的筛选 (6)1.5本课题的研究思路及意义 (6)第二章材料与方法 (7)2.1试验材料 (7)2.2试验方法 (8)2.2.2苯酚降解菌的驯化 (8)2.2.3菌种在不同条件下的降解能力 (9)2.2.4最优菌种的鉴定 (9)3.1苯酚降解菌筛选结果及性状初步研究 (11)3.11筛选结果 (11)3.1.1.1初步筛选的结果 (11)3.1.1.2 菌种驯化中的结果 (11)3.1.2 H-1菌株的性状初步结果 (13)3.2 H-1菌株分类鉴定结果 (13)第四章结论 (14)4.1菌种的筛选结果 (14)4.2菌种的鉴定 (14)参考文献 (15)致谢.......................................................................................... 错误!未定义书签。

一株苯酚降解菌的分离和鉴定摘要为了寻找能高效降解苯酚的微生物, 从土壤中筛选得到了一株苯酚降解菌,通过逐渐增加苯酚的浓度,然后驯化出一株高效降解苯酚的细菌H-1. 当在30 ℃培养48h 时其降解率高达92.11%. 经理化特征测定及外观鉴定,将其初步鉴定为假单胞菌属.再经过对比实验测各种因素(碳源、温度、pH、通气) 对该菌生长及降解苯酚能力的影响,得知该菌能以苯酚作为唯一碳源,最适生长温度为32 ℃,最适pH 为7.0. 该菌为好氧菌,在空气充足的条件下可提高降解能力.该菌菌落较小，菌落呈微黄色。

菌体呈直或微弯的杆装，没有菌柄也没有鞘。

不产芽孢。

对该菌做生化鉴定，可知该菌革兰氏染色为阴性，可水解苯酚，生长温度为32℃，生长pH为pH 6.5～7.5。

微生物降解苯酚污染的研究进展

许雅洁，张怡洋，刘阳，等.微生物降解苯酚污染的研究进展［J ］.中南农业科技，2023，44（5）：233-241．苯酚是一种具有强毒性且难去除的工业污染物，是从工业过程中排放出来的，如纺织加工、煤气化、炼油、皮革制造、树脂合成、香水生产等［1-5］。

苯酚具有毒性、致突变性和致癌性，对环境有严重的破坏作用［6］。

由于大规模的工业应用，苯酚不可避免地被引入水或土壤环境，造成水体和土壤污染，由于其毒性大，即使在低浓度下也可能构成严重的生态危害。

苯酚及酚类化合物对水体的污染主要以焦化废水为主（焦化废水是指化工类企业在工业加工过程中产生的高毒性、高污染废水），其主要来源于生产煤和汽油的企业，以及加工液化气、运输制冷等过程。

同时化工厂附近的土壤也会受到一定程度的污染，进而污染农作物及其制作的食品，最终危害人类健康。

苯酚不仅在环境中具有明显的累积效应，而且容易与其他有机化合物共存形成新的复合污染物，或在水中发生取代或其他化学反应转化为比苯酚毒性更高的酚类化合物，如氯酚、甲基酚和烷基酚等，而且在生物体内难以分解。

酚类化合物的毒性随结构和官能团的不同而变化，这些物质的顽固性和持久性更大，增加了对苯酚污染治理的难度，间接增加了对人体的危害程度［7，8］。

苯酚作为重要的有机化工原料和工业商品，生产的相关下游产品涉及人们生活的很多方面，如可生产作为汽车外壳涂料的双酚A 以及生产为水杨酸［7］。

此外，苯酚还可用作溶剂、试验试剂和消毒剂等，如作为具有杀菌特性的乳膏和剃须皂，或被用作内部防腐剂和胃麻醉剂。

因此，苯酚在染料、制药、化肥、塑料、玻璃纤维、食品工业和石化等各种行业都有应用［9，10］。

2019年，全球苯酚需求量约为1200万t ，预计未来需求量还会增加。

随着中国经济的飞速发展，国内产业对苯酚的需求也在不断上升，2016—2021年中国苯酚消费量呈稳步增长态势，2021年中国苯酚表观消费量为367.3万t ，依据往年增长速率预计2023年中国苯酚表观消费量将达到400万t 以上［11，12］。

氯过氧化物酶催化降解环境激素西维因的研究

；收稿日期：２０１７０９０７修回日期：２０１８０１２０基金项目：陕西省教育厅科研计划项目（１６）资助ＪＫ１８２７联系人简介：高丰琴（１９７８），女，副教授，主要从事生物化工方面的研究。Ｅｍａｉｌ：ｇａｏｆｑ０８＠１２６ｃｏｍ；蒋育澄（１９６５），女，教授，主要从事酶工程方面的研究。：Ｅｍａｉｌｊｙｃ＠ｓｎｎｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
ｃａｒｂａｒｙｌ．
：；；；Ｋｅｙｗｏｒｄｓｃｈｌｏｒｏｐｅｒｏｘｉｄａｓｅｃａｒｂａｒｙｌｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｃａｔａｌｙｓｉｓ
随着科学技术和工农业生产的快速发展，大体内，能降低生育能力［１］、破坏体内激素平衡，影量的环境激素类物质被合成而应用于日常生活响人类的健康。环［２，３］境激素类物质还具有致癌中。这类物质严重影响了人类的健康及安全，它的作用，引起的癌症主要有乳腺癌、前列腺癌等，可以通过各种方式直接或间接地进入人体或动物还具有内分泌毒性、免疫毒性和生殖毒性等，还能
留量较大，是第二个在地表水中检测出的分布比较广泛的杀虫剂。欧盟于２００８年将西维因定位
调节两者和所需的不同· ＫＨ２ＰＯ４
０１ｍｏｌＬ－１ｐＨ
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用
盐
酸
为环境类激素和第Ⅱ类致癌物。目前，常用的处１２３氯过氧化物酶催化降解西维因的方法
理环境激素的方法主要有膜分离技术法、物理吸附法和化学氧化法等。膜分离技术由于膜组件的价格比较昂贵，又时常存在堵塞及溶胀的状况［５，６］；物理吸附法在处理过程中处理得不彻底并且不确定性多［７，８］；高级氧化技术在处理过程中成本高，将其用于工业废水的全程处理上还存在着一些困难。因［９，１０］此，应寻找合理高效的方法降解此类环境毒物。

过氧化钡催化苯酚降解性能研究

过氧化钡催化苯酚降解性能研究摘要：过氧化钡是一种常见的催化剂，在环境保护领域具有广泛的应用。

本文通过对过氧化钡在苯酚降解过程中的催化效果进行研究，探讨了不同催化剂用量、反应温度和反应时间对苯酚降解性能的影响。

实验结果表明，适当的过氧化钡催化剂用量、较高的反应温度和适当的反应时间可以显著提高苯酚的降解效果。

1. 引言苯酚是一种常见的有机物污染物，具有毒性和致癌性，对水体和土壤环境造成严重的污染。

因此，苯酚的高效降解具有重要的环境意义。

过氧化钡是一种常见的氧化剂，具有较高的氧化还原能力，被广泛应用于有机物的降解过程中。

本文旨在研究过氧化钡在苯酚降解过程中的催化性能，为苯酚废水的治理与净化提供理论依据。

2. 实验方法2.1 实验材料实验所需材料包括苯酚、过氧化钡和去离子水。

2.2 实验装置实验采用密闭反应釜进行，配备温度控制仪、搅拌器等设备。

2.3 实验过程首先，在密闭反应釜中加入一定量的去离子水，并加热至设定的反应温度。

随后，向反应釜中加入适量的过氧化钡作为催化剂，并充分搅拌使其溶解。

最后，将苯酚缓慢添加到反应釜中，并控制搅拌速度和反应时间。

收集反应釜中的样品，对苯酚的降解效果进行分析和评估。

3. 结果与讨论3.1 过氧化钡催化剂用量的影响根据实验结果，我们可以得出以下结论：过氧化钡催化剂的用量对苯酚的降解有显著影响。

当催化剂的用量过低时，反应速率较慢，降解效果较差。

当催化剂的用量适中时，反应速率较快，苯酚的降解效果明显提高。

然而，当催化剂的用量过多时，虽然反应速率仍然较快，但会产生大量的副产物，从而降低苯酚的降解效果。

3.2 反应温度的影响实验结果显示，反应温度对过氧化钡催化苯酚降解性能有重要影响。

当反应温度较低时，反应速率较慢，苯酚的降解效果较差。

随着反应温度的升高，反应速率逐渐增加，苯酚的降解效果显著提高。

然而，当反应温度过高时，会导致过氧化钡的催化活性下降，从而降低苯酚的降解效果。

3.3 反应时间的影响实验结果表明，反应时间对过氧化钡催化苯酚降解效果有显著影响。

苯酚降解菌的筛选、鉴定及其降解特性的研究

上海师范大学硕士学位论文苯酚降解菌的筛选、鉴定及其降解特性的研究姓名：何小丽申请学位级别：硕士专业：微生物学指导教师：肖明20090501上海师范大学硕士学位论文摘要论文题目：苯酚降解菌的筛选、鉴定及其降解特性的研究学校专业：微生物学学位申请人：何小丽指导教师：肖明摘要酚类化合物为细胞原浆毒物，属高毒性物质。

这类物质来源广泛，通常污染水源，毒死鱼虾，危害农作物，并严重威胁人类的健康。

含酚有机物的毒性还在于其只能被少数的微生物分解。

从自然界中筛选分离出能够降解特定污染物的高效菌种，有针对性的投加到已有的污水处理系统中的生物强化技术，能够快速提供大量具有特殊作用的微生物，在有毒有害污染物治理中显示出巨大的潜力。

1、本研究从胜利油田河口采油厂的飞雁滩油田土壤样品中分离得到10株能够利用并降解苯酚的菌株P1-P4、P7、P9-P13。

该10株苯酚降解菌能够在以苯酚为唯一碳源和能源的培养基上生长，经16S rDNA分子鉴定和生理生化检测，该10株降酚菌分别被鉴定到属或种。

其中降酚菌株P1、P3和P4这3株菌株分别属于劳尔氏菌属(Ralstonia)、贪噬菌属（Variovorax）和节杆菌属（Arthrobacter）里的种。

其它7株降酚菌株P2、P7、P9-P13都属于假单胞菌属（Pseudomonas）里的种。

这4个属里的细菌在国内外都已被报道有降解苯酚的特性，其中有关假单胞菌降解环境有机物的报道较多。

2、培养液中的苯酚含量通过4-氨基安替比啉分光光度法测定，通过苯酚降解效率的比较，菌株P2降解苯酚的能力较其它9株菌株要强。

于是将菌株P2作为本研究中进一步研究的对象，研究了不同的环境条件下该菌株降解苯酚和菌体生长的情况。

3、通过苯酚羟化酶特异性引物的设计，从菌株P2扩增出苯酚羟化酶大亚基基因，该基因片段编码对苯酚有催化活性的多肽，催化苯酚代谢的第一步反应；表明菌株P2能降解苯酚是由于细胞具有降解苯酚的遗传基础。

苯酚的生物降解特性研究_丁霞

“有机污染物——苯酚的生物降解特性研究”设计方案丁霞一、实验目的酚类化合物为原生质毒物，毒性较大。

焦化、煤气、石油、木材防腐、造纸、合成氨等工业废水中都含有高浓度的苯酚。

含酚废水在我国水污染控制中被列为重点解决的有害废水之一。

利用降解菌来控制苯酚的污染，越来越受到人们的重视。

本项目拟采用微生物培养、苯酚生物降解的途径及其降解关键酶的分析、微生物DNA的提取、分光光度计测定、PCR、TA克隆等实验技术，阐明苯酚降解菌株的生长特性和苯酚的生物降解特性，苯酚降解菌的系统发育。

对学生从事有机污染工业废水的生物处理以及有机污染的土壤或水体的生物原位修复方面的科学研究具有深远的意义。

二、实验原理利用以苯酚为唯一碳源和能源的无机盐溶液作为驯化液，对某废水处理厂活性污泥进行驯化培养，从中分离筛选出苯酚降解菌。

利用比浊法测定微生物生长量，4-氨基安替比林直接光度法测定苯酚浓度，分析苯酚生物降解的途径及其降解关键酶，PCR扩增细菌的16s RNA进行苯酚降解菌的系统发育分析。

1）微生物生长量的测定方法——比浊法比浊法是实验室中常用的用来测定微生物生长量的方法，以反映微生物数量或浓度的一种指标。

该方法是根据当某一波长的光线通过混浊的液体后，光的强度将被减弱。

入射光与透过光的强度比与样品液的浊度和液体的厚度相关。

根据所测得的吸光值，就可以得到微生物的生长量。

本实验采用的波长为600nm，使用空白培养基作为对照。

2) 苯酚浓度的测定方法见后面附录。

3）苯酚降解菌的系统发育分析16S rRNA基因是细菌染色体上编码rRNA相对应的DNA序列，存在于所有细菌的染色体基因组中。

16S rRNA具有高度的保守性和特异性。

随着PCR技术的出现及核酸研究技术的不断完善，16S rRNA基因检测技术已成为微生物检测和鉴定的一种强有力工具。

该技术主要有三个步骤：首先，基因组DNA的获得；其次，16S rRNA基因片段的PCR扩增，并进行TA克隆用于测序分析；最后，进行16S rRNA基因序列的系统发育分析。

过氧化物酶在有机废水处理中的应用

过氧化物酶在有机废水处理中的应用魏池泉1（云南师范大学生命科学院，云南昆明650092）摘要介绍了过氧化物酶在有机废水处理中的应用，其中包括辣根过氧化物酶、木质素过氧化物酶及从植物中提取的过氧化物酶在含酚废水及含难降解的芳香族化合物废水、造纸废水处理中的研究和应用。

不仅可降低有毒有机污染物的含量，而且使用固定化酶技术，必然会降低处理废水的成本，提高酶的使用效果。

关键词过氧化物酶废水处理有机废水Application of peroxidase in the waste water pollution controlWei Chiquan（School of Life Sciences，Yunnan Normal University，Kunming Yunnan 650092）Abstract：The application of peroxidase in environmental pollution control，inc luding the application of horseradish peroxidase，HRP，lignin peroxidase in the treatment of wastewater of containing phenol and aromatic compounds exchanged from petrochemical and pulping industry.Keywords：peroxidase；waste water treatment；summary随着现代工业的发展，人们生活水平的提高，环境污染问题将是21世纪人们最关心的问题之一。

目前我国有些地方严重的环境污染，已引起高度重视，加强环境保护和治理力度已成为社会各界的共识。

在各种污染物中，有机污染物已成为重点污染源之一。

现常用物理和化学方法对污染物进行处理,但这些方法设备投资很大，运转费用也昂贵，并且不能从根本上解决问题。

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ｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｔｈａｔｔｈｅｂｉｏｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｏｆｐｈｅｎｏｌｗａｓｇｒｅａｔｌｙｉｍｐｒｏｖｅｄｗｉｔｈｔｈｅｅｘｉｓｔｅｎｃｅｏｆＣＰＯ．Ｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｃａｔａｌｙ —
ｄｅｒｔｈｅｓｅｏｐｔｉｍａｌｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ．ＴｈｅｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔＣＰＯｃｏｕｌｄｑｕｉｃｋｌｙｒｅｍｏｖｅｔｈｅｐｈｅｎｏｌｉｎｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｎｄｉｍｐｒｏｖｅｔｈｅｐｈｅｎｏｌｂｉｏｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｃｈｌｏｒｏｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ；ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ；ｐｈｅｎｏｌｒｅｓｉｄｕｅｓ；ｐｒｏｍｏｔｉｏｎ
ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｐｈｅｎｏｌｗａｓ５００，１０００ｍｇ／Ｌ。ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｒａｔｅｏｆｐｈｅｎｏｌｗａｓ８６．６ａｎｄ８３．８ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙｕｎ —
ｓｕｂｓｔｒａｔｅｓ．Ｉｔｃａｎｂｅｕｓｅｄｆｏｒｃａｔａｌｙｚｉｎｇｔｈｅｐｅｒｏｘｉｄａｔｉｏｎｏｆｈａｌｏｇｅｎｉｏｎ，ａｒｏｍａｔｉｃｈｙｄｒｏｃａｒｂｏｎｓ，ａｌｃｏｈｏｌｓｅｃｔ．Ｉｎｔｈｉｓ
用氯过氧化物酶催化氧化苯酚，考察其对苯酚生物降解的促进作用。结果表明，５００、１０００ｍｇ／Ｌ苯酚在氯过氧化物酶为ｌ０Ｕ／ｍＩ、ｐＨ为６．５、ＨｚＯ２投加量为１０ｍｇ／Ｉ时８ｈ苯酚降解率分别达到８６．６和８３．８，比单纯菌株降解显著提高。说明氯过氧化物酶能
Ｊｕｎ，ＺＨＡＮＧＹｏｎｇｍｉｎｇ．（ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅａｎｄＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔＳｃｉｅｎｃｅ，ＳｈａｎｇｈａｉＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ
环境污染与防治第３５卷第７期２０１３年７月
氯过氧化物酶对苯酚生物降解的促进作用＊
夏志华张书翠许超陈军张永明
（上海师范大学生命与环境科学学院，上海２００２３４）
摘要氯过氧化物酶是一种底物广泛的手性催化剂，可以催化卤素离子、芳香族化合物和醇类化合物等进行过氧化反应。利
ｐａｐｅｒ，ｐｈｅｎｏｌｗａｓａｐｐｌｉｅｄａｓｓｔｕｄｙｏｂｊｅｃｔｔＯｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｐｒｏｍｏｔｉｏｎｅｆｆｅｃｔｏｆＣＰＯｏｎｐｈｅｎｏｌｂｉｏｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ．Ｔｈｅ
快速清除苯酚污染的危害，提高苯酚的生物降解速率。
关键词氯过氧化物酶生物转化苯酚残留促进作用
ＳｔｕｄｙｏｎｔｈｅｐｒｏｍｏｔｅｄｂｉｏｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｏｆｐｈｅｎｏｌｂｙｃｈｌＯｒＯｐｅｒｏｘｉｄａｓｅＸＪＡＺｈｉｈｕａ，ＺＨＡＮＧＳｈｕｃｕｉ，ＸＵＣｈａｏ，ＣＨＥＮ
２００２３４）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｃｈｌｏｒｏｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ（ＣＰＯ）ｉｓａｋｉｎｄｏｆｃｈｉｒａｌｃａｔａｌｙｓｔｗｈｉｃｈｈａｓｅｘｔｅｎｓｉｖｅｃａｔａｌｙｔｉｃａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｆｏｒｖａｒｉｏｕｓ
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