西洋参二醇组皂苷对糖尿病肾病大鼠_省略_转运蛋白_尿_2_微球蛋白的影响_臧晓峰
西洋参叶20s_原人参二醇组皂苷_省略_病大鼠肾功能及肾脏结构的保护作用_臧晓峰
s)
kg - 1 )
n 11 10 8 11
P < 0 01 compared w it h n ormal grou p;
P < 0 05 com par ed wit h model group
2 2
糖尿病肾病大鼠血肌酐及尿素氮的变化
与
常组比较, 模型组肾重明显增加 , 体重明显下降, 脏器系数明显增大 , 尿量升高 ( P < 0 05 或 P < 0 01) ; 与模型组比, P QDS 50 m g kg - 1 组肾重、 体重、脏器系数及尿量变化差异无显著性, P QDS 100 mg kg 组肾重无明显变化, 体重有增加的 趋势, 但无显著性差异 ( P > 0 05) , 脏器系数无 明显变化, 尿量减少 ( P < 0 05) , 见表 3。
西洋参叶 20s 原人参二醇组皂苷对糖尿病肾病大鼠 肾功能及肾脏结构的保护作用
臧晓峰 , 谢湘林 , 吴轶川 , 刘 凯, 李 晔 , 叶秋芳 , 刘宏雁 ( 吉林大学药学院药理学教研室 , 吉林 长春 130021)
[摘
要]
目 的 : 探 讨西 洋 参 叶 20s 原 人 参 二醇 组 皂苷 ( P QDS ) 对 糖尿 病 肾病 大 鼠 的影 响。方 法 : 88 只 kg - 1 组及 100 mg kg- 1 组 , 每组 15 只 , 每天
- 1
灌胃 1 次 , 连 续灌胃 35 d, 每 10 d 测定 1 次血糖 , 35 d 后取血测定血糖、血清肌酐、尿素氮和肾重 , 通过光镜、 kg- 1 组糖尿病大鼠血糖、血肌酐及 12 h 尿量差异 无 kg
- 1
组糖尿病大鼠血糖 降低、血肌酐 及 12 h 尿量减 少 ( P < 0 05) , PQ DS
西洋参茎叶总皂苷对缺血_再灌注大_省略_心肌线粒体膜电位及细胞凋亡的影响_李冬
［收稿日期］2014-04-10
［修回日期］2014-05-29
* ［基金项目］国家中医药管理局国际科技合作项目（ No． 2010DFA31690） ； 国家自然科学基金重点资助项目（ No． 81030063）
△通讯作者 史大卓 Tel： 010-62860499； E-mail： shidazhuo@ 126． com； 刘秀华 Tel： 010-66939774； E-mail： xiuhualiu98@ 163．
10 min 腹腔注射） 组、CsA + I / Ｒ 组和 PQS + CsA + I / Ｒ 组，各组 n = 15。除 sham 组和 CsA 组大鼠开胸后冠状动脉左
前降支（ LAD） 下穿线不结扎外，其余各组大鼠常规麻醉后，结扎 LAD 30 min，再灌注 120 min 复制 I / Ｒ 模型。生化
后的细胞凋亡，是目前医学研究领域的重要问题之 公司 ［许 可 证 号 为 SCXK （ 京） 2012-0001 ］； PQS 粉
一［4］。在心肌 I / Ｒ 损伤过程中，Ca2 + 超载和活性氧 （ 纯度为 99． 0% ） 由吉林省集安益盛药业股份有限
com
·1560·
measured by Evans blue and 2，3，5-triphenyltetrazolium chloride （ TTC） staining． Cardiomyocyte apoptosis was detected by in situ TDT-mediated dUTP nick end labeling （ TUNEL） ． The protein levels of Bcl-2，Bax，cleaved caspase-3 and cytosolic cytochrome C were determined by Western blotting． ΔΨm was measured by laser scanning confocal microscopy and fluorescence microplate reader． ＲESULTS： Compared with I / Ｒ group，the serum content of LDH，the infarction size in PQS + I / Ｒ group，CsA + I / Ｒ group and PQS + CsA + I / Ｒ group and the myocardial apoptotic index were decreased． Compared with I / Ｒ group，the fluorescence intensity of mitochondria after JC-1 staining was enhanced in PQS + I / Ｒ group，CsA + I / Ｒ group and PQS + CsA + I / Ｒ group，and the relative fluorescence units （ ＲFU） of ΔΨm were improved in those 3 groups． In PQS + I / Ｒ group，CsA + I / Ｒ group and PQS + CsA + I / Ｒ group，the protein expression of Bcl-2 was increased，and that of Bax was decreased compared with I / Ｒ group． Moreover，in those 3 groups，the protein levels of cleaved-caspase-3 and cytosolic cytochrome C were decreased compared to I / Ｒ group，respectively． CONCLUSION： PQS attenuates myocardial injury and cardiomyocyte apoptosis during I / Ｒ，and the protective mechanisms of PQS were associated with the modulation of ΔΨm and the inhibition of mitochondrial apoptosis pathway．
西洋参叶二醇组皂苷抑制血管平滑肌细胞增殖及影响原癌基因表达的研究_王智昊
( 吉林大学第一医院 , 吉林 长春 130021)
摘
要 : 观察 PQDS 对 VS MC 增殖及原癌基因 c -m yc 的 mRNA 表达的影响 , 探讨 PQDS 抑制 VS MC
的增殖作用及相关机制。 方法 用组织贴块法培养大鼠胸主动脉 VS M C 作为研究对象 , 用 AngII诱 导 VS M C 增殖, 随机分为: 空白对照组、 Ang II 模型组、 Ang II+ PQDS 25、 50 、 100m g /L 不同剂量组。 用 MTT 法 、 流式细胞术 、 RT-PCR 法观察 PQDS 对细胞增殖 、 细胞周期、 增殖指数及原癌基因 c -m yc 的 mRNA 表达的影响 。 结果 PQDS 可减低 VS MC 的增殖能力, 将增殖的 VS M C 抑制在 G0 /G1 期 , 可 以下调 VS M C 中的原癌基因 c -m yc 的 mRNA 表达 。结论 PQDS 能抑制 VS MC 增殖 , 其机制可能与 下调原癌基因 c -m yc 的表达有关 。 关键词 : 西洋参叶二醇组皂苷; 血管平滑肌细胞增殖 ; 血管紧张素 II ; 原癌基因 中图分类号 : R282 71 ; Q253 文献标识码: A
PQ DS dosage ( m g /L ) 0 0 25 50 100
2 2 PQDS 对 VSM C 的细胞周期及增殖指数的影响 本实验用流式细胞仪测量细胞周期, 观察 PQDS 对 VS MC 细胞周期影响及增殖指数 ( P I) 的变化。 AngII模型组与空白对照组比较 : G0 /G1 期 VS M C 百分率明显减少 ( P< 0 . 05) , S 期、 G2 /M 期 VSMC 百 分率显著增加 ( P < 0 . 05) , 增殖指数也明显升高 ( P < 0 . 05) 。提示 AngII可以促进 VS M C 从 G1 /G0期向 S 期 转化, 可以诱导 VS MC 增殖, 造模成功。 PQDS 药物组与 AngII模型组比较: PQDS 各组 G0 /G1 期的 VS MC 百 分率均显著增加 ( P< 0 . 05); S期的 VS M C 百分率、 增殖指数均显著减少 ( P< 0 . 05) ; PQDS 高、 中剂量组 G2 / M 期 VS M C 百分率显著降低 ( P< 0 . 05), 低剂量组 G2 /M 期百分率降低, 但没有明显差异 ( P > 0 . 05) 。 PQDS 药物组与空白对照组比较 : G0 /G1 期 VS M C 百分率中, PQDS 低、 中剂量组低于空白对照组, PQDS 高剂量组 高于空白对照组 ; S 期、 G2 /M 期 VS M C 百分率和增殖指数中 , PQDS 低、 中剂量组高于空白对照组, 高剂量组 低于空白对照组。在 G0 /G1 期、 S 期 VSMC 百分率和增殖指数中, PQDS 高、 低剂量组与空白对照组之间有 统计学意义 ( P < 0 . 05) , 中剂量组与空白对照组间没有统计学意义 ( P > 0 . 05)。提示 PQDS 高剂量组抑制 VS M C 增殖的作用略强 , 中、 低剂量组抑制作用略弱。 PQDS 各组相比: 随药物剂量增加 , G0 /G1 期 VSMC 百 分率显著增加 ( P < 0 . 05) 。 S 期 VS M C 百分率和增殖指数显著减少 ( P < 0 . 05) 。上述结果显示 PQDS 对 An gII 诱导的 VSMC 增殖有抑制作用 , 主要将细胞抑制在 G1 /G0 期, 抑制作用与 PQDS 剂量大小成正相关, 如表 3 所示。
人参二醇组皂苷对实验性2型糖尿病大鼠血糖及血脂代谢的影响
人参二醇组皂苷对实验性2型糖尿病大鼠血糖及血脂代谢的影响胡翠华;徐华丽;于晓风;曲绍春;睢大员;陈燕萍;马兴元【期刊名称】《吉林大学学报（医学版）》【年(卷),期】2006(32)6【摘要】目的:观察人参二醇组皂苷(PDS)对大鼠实验性2型糖尿病(T2DM)血糖、血脂代谢的影响及其对胰岛素抵抗的改善作用.方法: 将大鼠随机分为正常组、模型对照组、二甲双胍组及PDS 35、70、140 mg·kg-1组,高脂饮食伴小剂量链脲佐菌素(STZ) 55 mg·kg-1建立大鼠实验性2型糖尿病模型.除正常组外,其余各组均治疗性给药4周,每周测空腹血糖1次,4周后检测肝糖原、胰岛素(Ins)、C-肽、游离脂肪酸(FFA)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果: 与模型组比较,PDS 70、140 mg·kg-1组于第3、4周血糖明显降低(P＜0.01),4周后肝糖原含量明显升高(P＜0.05或P＜0.01),TC、TG、FFA、TC/HDL-c、LDL-c/HDL-c及MDA含量显著降低(P＜0.05或P＜0.01),SOD活性、C-肽含量及胰岛素敏感指数(ISI)显著升高(P＜0.05或P＜0.01),HDL-c、LDL-c及Ins含量变化不明显(P＞0.05).结论: PDS可降低T2DM大鼠的血糖,改善血脂代谢紊乱,提高肝脏及外周组织胰岛素敏感性,改善胰岛素抵抗.【总页数】5页(P1004-1008)【作者】胡翠华;徐华丽;于晓风;曲绍春;睢大员;陈燕萍;马兴元【作者单位】吉林大学药学院药理学教研室,吉林,长春,130021;吉林大学药学院药理学教研室,吉林,长春,130021;吉林大学药学院药理学教研室,吉林,长春,130021;吉林大学药学院药理学教研室,吉林,长春,130021;吉林大学药学院药理学教研室,吉林,长春,130021;吉林大学化学院天然药物化学研究室,吉林,长春,130021;吉林大学化学院天然药物化学研究室,吉林,长春,130021【正文语种】中文【中图分类】R2【相关文献】1.《金匮》肾气丸合二甲双胍对实验性2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠血糖血脂影响的研究 [J], 陈伟燕;汪丽佩;郑卫军2.太子参多糖对实验性糖尿病大鼠血糖、血脂代谢和肾脏病理的影响 [J], 姚先梅;段贤春;吴健;谢军;晋霞;高家荣;汪永忠;方朝晖;夏伦祝3.西洋参叶20s-原人参二醇组皂苷对大鼠实验性心室重构的影响 [J], 卢应;董均树;李秀江;刘娅;睢大员4.西洋参叶总皂苷对四氧嘧啶性高血糖大鼠血脂代谢的影响 [J], 殷惠军;张颖;蒋跃绒;刘颖;罗兰;史大卓5.20S-原人参二醇皂苷对高脂血症大鼠血脂代谢的影响及其抗氧化作用(英文) [J], 睢大筼;于晓风;曲绍春;徐华丽因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
西洋参茎叶皂苷对糖尿病大鼠氧化损伤和血管内皮功能的影响
西洋参茎叶皂苷对糖尿病大鼠氧化损伤和血管内皮功能的影响李吉萍;袁野;张文友【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2017(033)012【摘要】目的研究西洋参茎叶皂苷(Panax quinquefolium sap-onins,PQS)对实验性糖尿病大鼠氧化损伤及其对血管内皮功能的保护作用.方法♂Wistar大鼠适应性饲养3 d后,随机抽取56只作为正常对照组,其余均采用链脲佐菌素(STZ,30 mg·kg-1)诱导糖尿病大鼠模型.糖尿病大鼠随机分为模型组、PQS组(100 mg·kg-1)和Vitamin E组(100μmol·kg-1),正常组注射等量柠檬酸盐缓冲液,各组按方案给药4、8、16周后,检测大鼠血糖和血清、心、肾组织中LPO含量及SOD的活性,并记录各组大鼠胸主动脉离体血管环内皮依赖性舒张反应情况.结果与模型组比较,随着PQS给药时间的延长,PQS组大鼠的血糖及血清、心、肾组织中的LPO含量明显下降,血清、心、肾组织中SOD活性明显升高(P<0.05,P<0.01),并且随着PQS给药时间的延长,PQS组大鼠胸主动脉内皮依赖性舒张反应逐渐趋近正常值.结论 PQS能通过提高机体抗氧化功能来改善糖尿病大鼠血管内皮依赖性舒张功能,从而干预糖尿病血管并发症的发生和发展.%Aim To investigate the protective effect of Panax quinquefolium saponins (PQS ) on oxidative damage and function of vascular endothelium. Meth-ods After 3 days of adaptive feeding of Wistar male rats,56 rats were randomly selected as the control group,while others were induced by streptozotocin (STZ,30 mg·kg - 1 ). The diabetic rats were random-ly divided into three groups:the model group,PQS group(100 mg · kg - 1 )and Vitamin E group (100μmol·kg - 1 ).The normal group was injected with e-qual amount of citrate buffer. PQS and Vitamin E groups of diabetic rats were administered orally once a day. After 4,8,16 weeks of administration,the con-centration of blood glucose and LPO,SOD of serum, heart and kidney were measured,and the tension of the aortic vascular ring was determined. Results Compared with model group,with prolongation of med-ication,the concentration of glucose and the LPO of serum,heart and kidney in the PQS group significantly decreased(P < 0. 05,P < 0. 01),then the results of the aortic vascular ring tension showed that acetylcho-line induced vasodilatation and maximum diastolic per-cent were obviously elevated in PQS group(P < 0. 05, P < 0.01). Conclusion PQS could elevate the an-tioxidant function in diabetic rats,thus improving the endothelium-dependent vasodilation function and inter-fering with the occurrence and development of diabetic vascular complications【总页数】5页(P1698-1702)【作者】李吉萍;袁野;张文友【作者单位】扬州大学医学院药理教研室,江苏扬州 225001;雅安职业技术学院药学检验系,四川雅安 625000;扬州大学医学院药理教研室,江苏扬州 225001【正文语种】中文【中图分类】R-332;R284.1;R322.12;R340.5;R587.1;R977.3【相关文献】1.西洋参茎叶皂苷对局灶性脑缺血大鼠血清中S-100β含量的影响 [J], 鲁美君;关利新;赵鑫;王怀刚;朱丹;朱孝娟;苏云明2.西洋参茎叶总皂苷对缺血／再灌注大鼠心肌线粒体膜电位及细胞凋亡的影响 [J], 李冬;刘蜜;陶天琪;宋丹丹;刘秀华;史大卓3.西洋参茎叶总皂苷对心肌肥厚大鼠血管内皮功能的影响 [J], 范宝晶;裴非;赵学忠4.西洋参茎叶皂苷对缺血再灌注损伤大鼠脑组织NO和NOS表达的影响 [J], 任鹏宇;关亚新;张婷婷;夏雪;翟凤国;关利新5.西洋参茎叶皂苷对大鼠局灶性脑缺血损伤炎症反应的影响 [J], 任鹏宇;关亚新;张婷婷;翟凤国;关利新因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
西洋参二醇皂苷对糖尿病肾病大鼠血常规的影响
ｋ ） 阳性药组（ ｇ、 卡托普利 １ ｇｋ ） 连续灌 胃给药 ３ ， １ ０ｍ ／ ｇ ， ５ｄ 每 ０天测定 １ 次血糖 ， ３ ｄ后取全血测白细胞 、 ５ 淋巴细胞 、 红细 胞、 小板、 血 血红蛋白。结果 与模型 组 比较 ， 洋参二 醇皂苷 大剂量 组 大鼠红 细胞、 小板、 红蛋 白明显 降低 （ 西 血 血 Ｐ＜ ０ ０ ） 西洋参二 醇皂苷小剂量血红蛋 白明显降低 （ ００ ） 红细胞及血小板有 降低趋势 ， ．１ ， Ｐ＜ ． １ ， 无统计学意义； 洋参二醇皂 西 苷大剂量组 白细胞明显升高（ ０ ０ ）淋 巴细胞有升 高的趋 势， 无统计学意义 ， Ｐ＜ ．５ 、 但 西洋参二 醇皂苷 小剂量 白细胞及淋 巴
要 有效成分 。我们所测定 的小过路黄挥发油的主要 成分 为： 石竹 １４ 实验步骤 ． 烯 （ ．０ ％ ） １十二烷醇（ ． ２ ％ ） 大根香 叶烯 Ｄ（ ． ５ ％） ３ ６０ ，一 ３ ７６ ， ３６８ ， １４ １ 定 性分 析 取 小过路黄 挥发 油 １ （ ．． 乙醚溶 液） 用气相 ， ａ 叶 烯 （ ．１０ ） 澄 花 叔 醇 （ ． ８ ％） 氧 化 石 竹 烯 ． 桉 ３ ４％ ， ２ ２９ ， 色谱． 质谱联用仪分析鉴定 ， 出 １０个 峰及 对应 的质谱峰 ， 过 检 ２ 通 （ ．２ ％ ） 植醇（ ．３ ％） ７ ３４ ， ６ ２ ３ 等。其 中在挥发 油中的石竹烯 、 ． Ｂ榄 Ｈ ＭＳ Ｐ Ｄ化学工作站检索 Ｎｓ ８标 准质谱 图库和 ＷＩＥ ｉ９ ｔ Ｌ Ｙ质谱 图 香 烯 等活 性 有 效 成 分 ， 别 具 有 镇 痉、 喘 抗 菌 和镇 咳 等作 分 平 库， 并结合有关文献谱 图解析 ， 鉴定出 ６ 个化合物。 １ 贵州 黔南 地 区产 小过 路黄挥 发油有 一定 １４ ２ 峰面积相对含 量分析 通 过 Ｈ ＭＳ ．． Ｐ Ｄ化 学工作 站数据处 用 。实验结果表 明， 的药用价值 ， 可作为医药工业原料 来开发 ， 该研究 数据 对开发利 理系统 ， 按峰面积归一化法进行计算求得各化学成分在挥发油中 用小过路黄资源有一定 的指导作用。 ． 的相对含量。
西洋参治疗胰岛素抵抗大鼠活性部位_省略_肌转运蛋白_4mRNA表达的影响_李冀
10
中 医 药 学 报 Acta Chinese Medicine and Pharmacology
2009 年第 37 卷第 5 期 Vol 37, No 5, 2009
1 1. 1
材料与方法 动ห้องสมุดไป่ตู้ 清洁级 SD 大鼠 100 只, 雄性 , 体重 160~ 180g, 购
大鼠骨骼肌 GLUT- 4 mRNA 表达检测 :
自上 海斯 莱 克实 验 动物 有 限公 司, 动 物 合格 证 号: SCXK( 沪) 2007- 0007。 1. 2 仪器与试剂 PCR 仪 ( 美国 PE 公司 ) ; 梯 度 PCR 仪 ( 德国 Bi ometro 公司) ; 高速冷冻离 心机 ( 美国 Beckman 公司 ) ; 凝胶成像系统( 美国 UVP 公司 ) ; 电泳仪、 电泳槽 ( 北京 市六一仪器厂) ; 西洋参( 黑龙江省世一堂中药饮片厂, 产品批号 : 0703129S) ; 罗格列酮 ( 黑龙江省人民同泰药 店, 产 品 批号 : 0409002) ; 链脲 佐 菌 素 ( STZ, Sigma 公 司) ; RT - PCR3 0 Kit ( 大连 宝 生物 公 司 ) ; oligo 6 0, Primer Premier 5 0( 引物设计 ) 引物由上海博亚生物公 司合成。 1. 3 西洋参不同药用部位的提取分离 西洋参 19kg, 粉碎 , 70% 乙醇回流提取 3 次, 每次
柳宝怡 柳选四家医案 [ M ] 北京 : 中国中医药出版社 , 2008: 26 田代华整理 112 黄帝 内经素 问 [ M ] 北京 : 人民 卫生 出版 社 , 2005:
[ 5] [ 6] [ 7]
顾观光点校 神农本草经 [ M ] 北京 : 学苑出版社 , 2007: 55 王冰注 林亿补注 , 孙国中等点校 重广补 注黄帝内经素问 [ M ] 北京 : 学苑出版社 , 2004: 225 张子和 儒门事亲 [ M ] 北京 : 人民卫生出版社 , 2005: 3
西洋参茎叶总皂苷对胰岛素抵抗脂肪细胞葡萄糖_省略_运_GLUT_4转位和CAP基
- 1
- 1
张 颖 ( 1976 - ) ,博士 ,助理研究员 , 研究方向 : 心血管病 防治 , Tel: 010 2 62875599 2 6408, E 2 mail: zhangyingsjf@ ya2
・1332・
中国药理学通报 Ch inese Pha r m acolog ica l B u lletin 2007 Oct; 23 ( 10 ) : 1332 ～7
西洋参茎叶总皂苷对胰岛素抵抗脂肪细胞葡萄糖 转运 、 GL UT2 4 转位和 CAP基因表达的影响
殷惠军 ,张 颖 ,杨领海 ,白桂荣 ,史大卓 , 陈可冀
・1333・
山羊抗兔 IgG F ITC ( SC 2 2012, lot J2104 ) 、 抗 GLUT2 4 兔多 克 隆 抗 体 ( ab654 2 100, lot 30108 ) 、 Trizol ( In2 votrogen 公司 ) 、 丙酮酸钠 、 4%多聚甲醛 、RT2PCR 试 ( ) 剂盒 TaKaRa 公司 、 蛋白浓度测定试剂盒 ( CALB I2 OCHEM 公司 ) 。 1. 3. 2 仪器 酶标仪 ( TECAN 公司 ) 、 荧光显微镜
(OLY M PUS) 、 PCR 仪 、 液闪仪 ( PerkinElm er 公司 ) 、 Sartorius分析天平 (B P211D Gilson SAS公司 ) 。 1. 4 实验方法
光吸收值 - 调零孔光吸收值 ) × 100% ; 以 B liss法测 - 1 得 PQS半数致死量为 400 m g ・L , 故设该剂量的 - 1 - 1 1 /10 ( 40 mg ・L ) 为中剂量 , 80 m g ・L 为大剂 - 1 量 , 20 mg・L 为小剂量 。 [4] 1. 4. 4. 2 葡萄糖转运的检测 诱导分化成熟的 脂肪细胞传于 6 孔培养板 , 分别设对照组 、 模型组 、 二甲双胍组 、 西洋参茎叶总皂苷大 /中 /小剂量组 ,每 组 6 孔 ,每组同时再相应设 2 个含松胞素的孔 ,作为 3 22 Deoxy2d 2[ 1 2 H ] glucose 的非特异性摄取量 。造模 成功后予相应药物作用 48 h 后 , 用 D 2 Hanks液洗 3 次 ,加入含有 100 nmol ・L 速效胰岛素的 I MDM , 3 37 ℃ 孵育 30 m in。然后加入 2 2 Deoxy2d 2[ 1 2 H ] glu2 - 1 cose 母液 20 μ l (终浓度 50 μmol ・L , 放射强度 7 - 1 317 × 10 Bq ・L ) ,孵育 10 m in。用冰冷的 PBS洗 - 1 2 次 ,用 011 mol ・L NaOH 液裂解细胞 , 1m l/孔 , 裂解液分为两份 ,分装入 2 支 115 m l EP 管 , - 20 ℃ 冻存 。一份取细胞裂解液 100 μ l,加入 200 μ l闪烁 液 ,用液闪计数仪计数 ,测定其放射活性 。另一份取 3 细胞裂解液用于测定蛋白浓度 ,以蛋白浓度较正 H 2 Glucose的摄取量 。所有数据减去相应松胞素组后 , 得到胰岛素刺激后特异性的 H 2Glucose摄取量 。 [5] 1. 4. 4. 3 GLUT2 4 转位 将诱导分化成熟的正 常 3T3 2 L1 脂肪细胞分为 6 组 , 造模方法同上 (见葡 萄糖消耗实验 ) 。让细胞在铺了明胶的盖玻片上生 - 1 长 。加入胰岛素 ( 100 nmol・L )孵育 30 m in,以刺
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
[文章编号] 1000-4718(2008)06-1237-03[收稿日期]2006-11-14 [修回日期]2007-01-18*[基金项目]吉林省中医药管理局科研基金(N o .2004-084) 通讯作者T e:l 0431-********;E-m a i:l hongy@l jl u .edu .cn西洋参二醇组皂苷对糖尿病肾病大鼠肾脏葡萄糖转运蛋白、尿 2-微球蛋白的影响*臧晓峰, 谢湘林, 吴轶川, 刘 凯, 李 晔, 叶秋芳, 刘宏雁(吉林大学药学院药理教研室,吉林长春130021)[摘 要] 目的:初步探讨西洋参二醇皂苷(PQS)对大鼠糖尿病肾病(DN )的治疗作用及其作用机制。
方法:将W istar 大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ )建立DN 模型,按空腹血糖值及体重将大鼠随机分为模型组、西洋参二醇皂苷小、大剂量(西洋参二醇组皂苷100、200mg /kg)组、阳性药组(卡托普利10mg /kg),连续灌胃给药,每10d 测定一次血糖,35d 后酶免法测定尿 2-M G 、免疫组化法检测肾脏GLUT -1。
结果:西洋参二醇皂苷小、大剂量组大鼠 2-M G 、肾脏GLUT -1明显低于模型组(P <0 05,P <0 01),西洋参二醇皂苷大剂量组血糖值明显低于模型组(P <0 05)。
结论:西洋参二醇皂苷对DN 大鼠有治疗作用,其机制可能与其降低血糖及肾脏G LUT -1功能有关。
[关键词] 人参属;糖尿病肾病;葡萄糖转运蛋白1[KEY W ORDS] P anax;D iabetic nephropathies ;G lucose transporter-1 [中图分类号] R 285.5;R587.2 [文献标识码] A 糖尿病肾病即糖尿病肾小球硬化是糖尿病最常见、最严重的慢性并发症之一,是糖尿病病人,特别是1型糖尿病患者死亡的主要原因。
糖尿病肾病的早期防治可降低患者的死亡率,并具有良好的卫生经济学价值。
西洋参具有滋补强壮,养血生津,宁神益智等功能。
西洋参主要成份为西洋参总皂苷,西洋参二醇组皂苷是西洋参总皂苷的主要成份,包括-R b1、-R b2、-R b3、-R e 、-R d 、-F 2、-R H 2、R AO 等多种单体皂甙。
最新研究显示[1],西洋参总皂苷能够降低高糖大鼠血糖,且能够提高胰岛素水平。
西洋参二醇皂苷对糖尿病肾病是否有治疗作用尚未见报道。
本研究通过观察西洋参二醇皂苷对糖尿病肾病大鼠血糖、 2-MG 、肾GLUT -1的影响,验证其对糖尿病肾脏是否有治疗作用并初步探讨其机制。
材 料 和 方 法1 材料1.1 实验动物 健康雄性W ista r 大鼠100只,体重(200-220)g ,由吉林大学实验动物中心提供,合格证号为(吉)2003-0007。
1 2 药品及试剂 西洋参二醇皂苷由本校化学院天然药物化学研究室提供,批号为20050615;STZ 为S i gma 产品,批号为S-10130;卡托普利为上海华氏制药有限公司产品,批号为030202;惠好智能型血糖仪为美国惠好医疗有限公司提供,型号为GC000144;惠好血糖试纸为美国惠好医疗有限公司产品,批号为ns1817。
2 方法2.1 模型复制及分组 大鼠适应性饲养5日后,按体重随机分12只为正常组,其余88只大鼠禁食不禁水24h 后,每只大鼠腹腔注射S T Z 60m g /kg(S T Z 用0 1m o l/L,p H 4 4柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液配制成0 1m o l/L ),制大鼠糖尿病肾病模型,7d 后挑选空腹血糖>16 7mm o l/L 的大鼠为糖尿病模型大鼠。
根据血糖及体重将糖尿病大鼠随机分为4组,模型组、西洋参二醇组皂苷小、大剂量(西洋参二醇组皂苷100、200m g /kg )、阳性药组(卡托普利10mg /kg )。
每天上午灌胃给药1次,并记录体重,连续35d ,每10d 检测1次空腹血糖。
大鼠给药35d 后,置大鼠于代谢笼内禁食不禁水接12h 尿,用于测定 2-M G,10%水合氯醛腹腔注射麻醉,取左肾置于10%的中性甲醛,固定48h ,测定肾GLUT -1。
2.2 检测方法 血糖测定采用血糖试纸(电极法)测空腹血糖。
尿 2-M G 采用酶免法按试剂盒说明书测定吸光度值(A ),通过标准曲线求得 2-微球蛋白含量。
肾GLUT -1采用免疫组化测定;抗体采用1 300的浓度,每张切片在高倍镜( 400)下按顺序取4个视野以出现棕黄色为阳性信号,采用泰盟医学图像分析系统BL -2000进行分析。
3 统计学处理数据用均数 标准差( x s )表示,组间差异用方差分析。
结 果1 一般状态与正常对照组比较,模型组大鼠消瘦、皮毛枯燥、多饮多1237 中国病理生理杂志 Chi nese Jou rnal of Pa t hophy si o logy 2008,24(6):1237-1239食、多尿,尿液浑浊。
西洋参二醇组皂苷较模型组症状明显减轻。
2 西洋参二醇组皂苷对糖尿病肾病大鼠血糖的影响大鼠注射ST Z 后,模型组大鼠呈现持续性高血糖,与空白对照组比较有显著差异(P <0 01)。
阳性对照卡托普利组血糖无明显差异;西洋参二醇组皂苷大剂量组在用药后第10、20、30d 血糖值明显低于模型组(P <0 05);西洋参二醇组皂苷小剂量组用药后血糖值与模型组比较差异不显著,结果见表1。
表1 西洋参二醇组皂苷对糖尿病肾病大鼠血糖的影响T ab 1 E ffect of PQS on blood g l uco se i n DN rats( x s)G roup D ose n B lood g l ucose a fter treated(mm o l/L )0d 10d 20d 30d N o r m al 116.08 1.495.63 1.726.74 2.056.20 2.07M ode l 1018.10 4.61##26.05 10.66##20.36 9.26##16.25 4.16##PQ S 100m g /kg 817.30 3.9822.16 11.2518.32 10.3017.12 7.17200m g /kg 1117.41 4.7215.99 10.74*13.92 5.08*12.02 3.43*Captopr il10m g /kg817.50 3.5320.50 13.8820.40 7.1918.93 6.58*P <0 05vs mode l g roup ;##P <0 01vs nor m al g roup .3 西洋参二醇组皂苷对糖尿病肾病大鼠 2-微球蛋白的影响模型组 2-微球蛋白显著高于正常组(P <0 01);西洋参二醇皂苷小、大剂量组显著低于模型组(P <0 05),卡托普利组无明显变化,见表2。
表2 西洋参二醇组皂苷对糖尿病肾病大鼠 2-微球蛋白的影响T ab 2 Effect o f PQ S on 2-M G i n DN rats( x s )D osen 2-M G (mg /L ) 10-3N or m al 121.97 0.63M ode l 112.71 0.63##PQ S 100m g /kg 111.77 0.91*200m g /kg 112.03 0.90*Captopr il 10m g /kg 122.77 0.54*P <0 05vs m ode l g roup ;##P <0 01vs nor m a l g roup .4 西洋参二醇组皂苷对糖尿病肾病大鼠GLUT -1的影响模型组GLUT -1面积、积分吸光度、平均吸光度明显高于正常组(P <0 01、P <0 01、P <0 05);西洋参二醇皂苷组小剂量组GLUT -1面积明显低于模型组(P <0 05),西洋参二醇皂苷组大剂量组GLUT -1面积、积分吸光度、平均吸光度明显低于模型组(均P <0 01);卡托普利组无明显变化,见表3,图1。
讨 论高血糖是DN 的始动因素[2,3],肾小管周围血管葡萄糖浓度升高,近曲小管细胞的顶端及基底均处于高糖环境中,系膜细胞在高糖环境下表现为基质(EC M )合成增多和细胞肥大,与此同时细胞内出现一系列因葡萄糖摄入过多而导致的糖代谢异常变化,GLUT -1是肾小球系膜细胞上的主要葡萄糖转运体。
有研究显示[4],应用免疫组化和特异性抗体,发现DN 患者肾脏内G LUT -1的表达明显增加,其表达强度与肾脏病变程度相关。
本实验显示,在糖尿病大鼠肾脏GLUT -1的表达与正常组比较明显增加,与文献报道一致。
G LUT -1的过度表达能活化己糖胺通路,己糖胺通路的活化可能在高糖情况下诱导转化生长因子- 1(TGF - 1)产生,TGF - 1在DN 肾小球硬化和细胞外EC M 合成增多中起关键的作用。
西洋参二醇皂苷可能通过降低G LUT -1表达减少活化己糖胺通路,而减少TG F - 1,发挥对肾脏的保护作用。
系膜细胞GLUT -1表达的调控机制目前还不清楚,在糖尿病状态下系膜细胞蛋白激酶C (PK C)与促细胞分裂素活表3 西洋参二醇组皂苷对糖尿病肾病大鼠GLUT-1的影响T ab 3 Effect o f PQ S on GLUT -1i n DN rats( x s)D osen GLUT -1area Integra l photodensity A verage pho t odensity No r m al 11193028 2097770672 133190.34075 0.02080M ode l 10222864 11576##80672 6452##0.35733 0.02201#PQ S 100m g /kg 8202102 22115*78765 123620.37002 0.03331200m g /kg 11189846 21712**61042 10431**0.32243 0.00720**Captopr il 10m g /kg8215723 1760279206 69760.35768 0.02253#P <0 05,##P <0 01vs nor m a l g roup ;*P <0 05,**P <0 01vs m ode l g roup .1238F ig1 E ffect o f PQS on GLUT-1i n DN rats(i m munoh i stoche m istry, 400).A:nor m al group;B:mode l group;C:large does PQ S group;D:l ow does PQ S group;E:captopr il g roup.图1 P Q S对糖尿病大鼠GLUT-1的影响化蛋白激酶(m itogenactivated pr o te i n kinase,MAP K)的活性升高,这2种蛋白激酶可能进一步活化特定的转录因子启动GLUT-1的表达,最新的研究结果表明转录因子U SF2a(upstrea m sti m u lati n g factor2a)介导了糖尿病情况下系膜细胞GLUT-1表达的增高[5],因此西洋参二醇皂苷可能是通过PKC与MAPK或作用于USF2a抑制GL UT-1mRNA表达异常增多,减少了GL UT-1对葡萄糖的转运。