氨基酸(amino acid, AA)含量测定试剂盒使用说明
氨基酸(amino acid, AA)含量测定试剂盒使用说明
氨基酸(amino acid,AA)含量测定试剂盒使用说明分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC1570规格:50T/48S产品内容：试剂一：液体×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体×1瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1瓶（棕色），4℃避光保存。
临用前加入2mL无水乙醇，盖紧后充分混匀，再加入28mL蒸馏水混匀，避光保存。
试剂四：粉剂×1管，4℃避光保存。
临用前加10mL蒸馏水，充分溶解。
标准品：液体×1支，1μmol/mL标准液，4℃避光保存。
产品说明：动物肝脏、肾脏是氨基酸代谢的主要器官，故尿中氨基酸的变化最能反应肝、肾的生理状态。
另外，氨基酸还能反应灼伤、伤寒等方面情况。
植物体内氨基酸含量对研究植物在不同条件下及不同生长发育时期氮代谢变化、植物对氮素的吸收、运输、同化及营养状况等有重要意义。
氨基酸的α-氨基可与水合茚三酮反应，产生蓝紫色化合物，在570nm有特征吸收峰；通过测定570nm吸光度，来计算氨基酸含量。
自备仪器及用品：台式离心机、水浴锅、紫外分光光度计、1ml玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵、无水乙醇、冰和蒸馏水。
操作步骤:一、样品中AA提取：1.按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行室温匀浆，然后转移到1.5mL EP管中，盖紧后（防止水分散失）置于沸水浴提取15min；自来水冷却后，8000g，，4℃离心10min，上清液置冰上待测。
2.细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
总氨基酸含量的测定方法
总氨基酸含量的测定方法测定总氨基酸含量，听上去是不是有点高大上？其实啊，这个过程就像做一道简单的家常菜，虽然听起来复杂，做起来却很有趣。
氨基酸是蛋白质的基本构件，想想看，咱们身体里那一堆营养物质，都是要靠它们搭建起来的。
很多时候，我们吃的食物，里头的氨基酸含量就能告诉我们，这东西到底能不能补充能量，能不能让我们更强壮。
咱们就来聊聊，怎么测定这些小家伙的含量。
准备工作很重要。
你得有样本，可能是牛肉、豆腐或者鸡蛋，反正都是能吃的东西。
咱们就需要一些试剂。
这些试剂呢，像是厨房里的调料，少了可不行。
常见的有氢氧化钠、盐酸，还有一些专门用来显色的试剂，像那种喝了会变色的饮料，嘿嘿，效果可是杠杠的。
要是没这些东西，那就像做菜没盐，味道就不对了。
然后，就是要进行提取。
简单来说，就是把氨基酸从食物里“榨”出来。
这个步骤得小心翼翼，像煮汤时要控制火候，太大了会糊，太小了则不够味。
把样品放进溶液里，加热搅拌，让氨基酸慢慢溶解。
就像在调和一杯鸡尾酒，直到所有的成分都融合在一起。
提取出来的液体就是你的“氨基酸汤”，记得把它过滤掉杂质，留好清汤。
咱们得进入显色阶段。
这个环节可神奇了，氨基酸遇到试剂，颜色会变得好看得很。
不同的氨基酸有不同的显色反应，就像不同的花朵在阳光下各自盛开。
我们可以用分光光度计来测量这些颜色的深浅，深色就代表氨基酸含量高，浅色那就是少得可怜。
这个过程就像在给食物上色，看着渐渐变得绚丽，心里也是美滋滋的。
不过，数据出来后可别急着欢呼。
我们需要做一些计算，把颜色的强度换算成氨基酸的浓度。
这就像在餐馆里结账，得把每样菜的价格加在一起，才能知道最终要花多少银子。
根据标准曲线，把测得的值代入，最终就能得到你食物里的氨基酸总含量。
简简单单，经过一番“烹饪”，就能得到一份“营养报告”。
记得记录结果，像在做日记一样。
无论你测得的结果是高还是低，都代表着不同的营养价值。
要是高，那可得好好利用，加入日常饮食；要是低，也别气馁，可以考虑多吃些高蛋白的食物，像是肉类、鱼类、豆类，保证你身体里的氨基酸不缺。
：饲料添加剂安全使用规范(2021修订版)
附件：饲料添加剂平安使用标准注1：由于测定方法存在精密度和准确度的问题，局部维生素类饲料添加剂的含量规格是范围值，假设测量误差为正，那么检测值可能超过100%，故局部维生素类饲料添加剂含量规格出现超过100%的情况。
钴：来自以下化合物硫酸钴Cobalt sulfateCoSO4CoSO4·H2OCoSO4·7H2O化学制备≥≥≥≥≥≥养殖动物牛、羊0.1~0.3鱼类0~12—氯化钴CobaltchlorideCoCl2·H2OCoCl2·6H2O化学制备≥≥≥≥—乙酸钴Cobalt acetateCo(CH3COO)2Co(CH3COO)2·4H2O化学制备≥≥≥≥牛、羊0.1~0.4鱼类—碳酸钴CobaltcarbonateCoCO3化学制备≥≥反刍动物牛、羊—硒：来自以下化合物亚硒酸钠SodiumseleniteNa2SeO3化学制备≥〔以干基计〕〔以干基计〕养殖动物畜禽0.1~0.3鱼类使用时应先制成预混剂，且产品标签上应标示最大硒含量酵母硒Seleniumyeast complex酵母在含无机硒的培养基中发酵培养，将无机态硒转化生成有机硒发酵生产—有机形态硒含量≥产品需标示最大硒含量和有机硒含量,无机硒含量不得超过总硒的2.0%铬：来自以下化合物烟酸铬Chromiumnicotinate化学制备≥≥生长肥育猪饲料中铬的最高限量是指有机形态铬的添加限量吡啶甲酸铬Chromiumtripicolinate化学制备≥常量元素化合物通用名称化合物英文名称化学式或描述来源含量规格,%适用动物在配合饲料或全混合日粮中的推荐添加量,%在配合饲料或全混合日粮中的最高限量,%其他要求以化合物计以元素计。
氨基酸使用说明书LC98-AAA()
北京温分公司LC98-I AAA 氨基酸分析系统北京温分分析仪器技术开发有限公司第1章简介1.1 LC98-I AAA氨基酸分析系统氨基酸是构成蛋白质的基本单位，是生物、医药、卫生、农牧业、食品、饮料及饲料等行业生产和科研中必须的分析测试项目，氨基酸的定性和定量分析必将成为企业的必备检测项目。
由于氨基酸种类较多，结构接近，大部分没有紫外或荧光响应，使得氨基酸分析一直是高效液相色谱领域较难解决的问题之一。
LC98-I AAA氨基酸分析系统采用二元梯度高效液相色谱系统及专用C18色谱柱使18种氨基酸得到很好的分离，采用紫外检测器完成氨基酸的检测。
1.2 原理反相色谱具有分离效率高、应用范围广、性能稳定等特点，是HPLC中应用最为广泛的分离模式，但是由于氨基酸带电荷，在反相色谱柱上保留弱。
用离子对试剂虽然能够在一定程度上增加保留，但是选择性差异小，分离比较困难；同时氨基酸的检测也是难点。
目前最为常用的氨基酸分析方法是在分离之前使氨基酸与带疏水性基团的衍生试剂反应生成利于在反相柱上保留、分离的化合物，经柱分离后，通过相应的检测器定性、定量。
氨基酸与苯异硫氰酸（PITC）的反应LC98-I AAA氨基酸分析系统采用苯异硫氰酸（PITC）作为柱前衍生的衍生试剂，在弱碱性条件下，氨基酸的α-氨基可与苯异硫氰酸（phenylisothiocyanate, PITC）反应生成相应的苯氨基硫甲酰氨基酸（简称PTC-氨基酸）。
在酸性条件下，PTC-氨基酸环化形成在酸中稳定的苯乙内酰硫脲氨基酸（phenylthiohydantoin，简称PTH）。
蛋白质多肽链N-末端氨基酸的α-氨基也可有此反应，生成PTC-肽，在酸性溶液中释放出末端的PTH-氨基酸和比原来少一个氨基酸残基的多肽链（图1）。
PTH-氨基酸在酸性条件下极稳定并可溶于乙酸乙酯，用乙酸乙酯抽提后，经高压液相就可以确定肽链N-末端氨基酸的种类。
该法的优点是可连续分析出N端的十几个氨基酸。
复方氨基酸注射液（14AA）8.5%中控测定操作规程
复方氨基酸注射液（14AA）8.5%半成品检验操作规程1.目的：建立复方氨基酸注射液（14AA）8.5%半成品检验操作规程，便于检验人员规范操作。
2.范围：适用于复方氨基酸注射液（14AA）8.5%半成品的检验。
3.责任：车间中控检验员对实施本规程负责。
4.程序：4.1 pH值测定4.1.1测定范围：5.5～5.84.1.2测定方法依法对仪器进行校正后，用纯化水冲洗电极，用滤纸吸干，将电极插入被测溶液中，待电极反应平衡，即为供试液的pH值，应反复测定两次，取平均值。
4.2 α-氨基氮含量测定4.2.1测定范围：应为标示量的96.0%～101.0%4.2.2仪器、试剂和试液4.2.2.1氢氧化钠液（0.1mol/L）：称4g氢氧化钠，加水使溶解成1000ml，即得。
4.2.2.2盐酸液（0.1mol/L）：量取9ml浓盐酸，加水稀释成1000ml，即得。
4.2.2.3甲醛：AR级4.2.2.4氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）：由质检科提供4.2.2.5 pH酸度计、搅拌器、搅拌子4.2.3操作方法4.2.3.1先取甲醛溶液10ml，置于50ml烧杯中，内放搅拌子，放在搅拌器上，开动搅拌器，将pH电极置于烧杯中，用0.1mol/L氢氧化钠液和0.1mol/L盐酸液调节甲醛pH 到9.0。
4.2.3.2精密量取本品3ml，加水25ml，摇匀；内放搅拌子，开动搅拌器，将pH电极置于烧杯中，用0.1mol/l氢氧化钠液和0.1mol/L盐酸液调节pH至7.0。
4.2.3.3将已调节好的甲醛（pH=9.0）溶液倒入上述烧杯内，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液pH为9.0，即得。
4.2.4计算公式：α-氨基氮为标示量%= F×V×1.401×100% 3×9.88式中：F-氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）校正因子，V-消耗氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）毫升数，1.401-每1ml氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）相当于α-氨基氮的毫克数，3×9.88-3ml复方氨基酸注射液（14AA）8.5%中含α-氨基氮的理论毫克数。
AMM氨测定试剂盒(谷氨酸脱氢酶法)产品说明书
AMM氨测定试剂盒(谷氨酸脱氢酶法)产品说明书AMM氨测定试剂盒（谷氨酸脱氢酶法）一、产品概述AMM氨测定试剂盒是一种基于谷氨酸脱氢酶法的高精度、高灵敏度氨测定试剂盒，用于测量生物体内氨浓度。
本试剂盒可广泛应用于医学、生物科学研究以及临床实验室等领域。
其准确度和可靠性得到了专业机构的认可。
二、试剂组成1. 测定液：包含谷氨酸脱氢酶、NADH（二磷酸腺苷二核苷酸）、缓冲液等。
2. 校准液：含有已知浓度的氨溶液，用于校准仪器。
3. 样本提取液：用于提取样本中的氨，使其能够反应产生信号。
三、试剂储存和稳定性1. 试剂的储存温度应为2-8摄氏度，避免阳光直接照射。
2. 开封后的试剂应储存在2-8摄氏度，并尽快使用。
3. 严禁冷冻试剂，以免造成试剂失效。
4. 正确存放条件下，试剂的稳定期为12个月。
四、仪器要求本试剂盒适用于多种型号的分光光度计，要求光敏器件工作稳定、精密度高，峰值吸光度范围在340-380nm之间。
五、操作步骤1. 准备工作a. 取出试剂，放置于室温下30分钟，使其回温到室温。
b. 将待检样本从冰箱取出后，回温至室温。
c. 开机并调整光源和光敏器件，确保仪器正常工作。
2. 样本制备a. 取适量样本加入样本提取液中，按照规定的比例稀释，混匀待用。
3. 样本测定a. 取适量测定液加入试管或微孔板中，作为反应底物。
b. 加入适量样本提取液，搅拌均匀。
c. 读取反应开始后一段时间内的吸光度值。
d. 将读数输入分光光度计或计算机，根据标准曲线计算样品中氨的浓度。
4. 结果判定a. 根据标准曲线上的吸光度值和已知浓度的校准液所对应的吸光度值，计算样品中氨的浓度。
b. 根据实验需求，判断测量结果的可靠性和准确性。
六、注意事项1. 操作前请阅读使用说明书。
2. 所有操作都必须在规定的温度下进行，以保证试剂和样本的稳定性。
3. 使用量杯、试管和微孔板等器具时，应保证其清洁干燥，以免发生干扰现象。
4. 实验过程中应避免直接接触皮肤和吸入试剂，如有意外接触，请立即清洗。
氨基酸总量的测定
氨基酸总量的测定(茚三酮比色法)一、方法原理：氨基酸的游离氨基与水合茚三酮作用后，可产生二酮茚一二酮茚胺的取代盐等蓝紫色化合物，其颜色深浅与氨基酸含量成正比，据此可以比色测定氨基酸含量。
二、试剂：1．2％茚三酮溶液：1g茚三酮(C9H403·2H2O)溶于25ml热水中，加入40mg氯化亚锡；(SnCl2·2H2O)，搅拌溶解，滤去残渣，滹液放在冷暗处过夜，用水定容为50ml，保存声冷暗处。
如茚三酮有微红色，配成的溶液也带红色，将影响比色测定，需将茚三酮重结晶后再用方法是：取5g茚三酮溶于20ml热水中，加入0.2g活性炭，轻轻摇动，放三十分钟后过滤，滤液置冰箱中过夜，次日过滤，用1ml冷水淋洗结晶，然后放在干燥器中干燥，装瓶保存。
2。
磷酸盐缓冲液(pH8.0)：①1／15mol/l磷酸二氢钾溶液：取KH2P04 0.9070g溶于lOOml水中。
②1／15mol/l磷酸氢二钠溶液：取磷酸氢二钠(Na2HP04·12H20)23.876g溶于水，加水至1000ml。
取①50ml与②95ml混匀即得。
3．10％醋酸：取lOml冰醋酸加水至lOOml。
4，氨基酸标准溶液(200ppm)：称取干燥的氨基酸(白氨酸，或其它的氨基酸)0.2000g溶解于水，定容为1000ml。
三、仪器：水浴，721分光光度计。
四、操作步骤：(一)标准曲线绘制：分别吸取氨基酸标准溶液(200ppm)0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ml各置于25ml容量瓶中,加水补充至4.0ml，各加入缓冲液lml，加入茚三酮lml，摇匀。
置沸水浴中加热15分钟，取出迅速冷却至室温，—用水定容。
放置15分钟，在570nm波长下测定，绘制标准曲线。
氨基酸浓度分别为0，4.0，8.0，12.0，16.0，20.Oppm。
(二)样品测定：l提取样品：称取1.0 ~2.0g植物样品(新鲜样或干样)，加5m1 10％醋酸，在研钵中研碎，用水洗移入lOOml容量瓶，水定容，过滤到三角瓶中，取滤液测定。
氨基酸检测试剂盒（茚三酮比色法）
氨基酸检测试剂盒（茚三酮比色法）氨基酸(AA)检测试剂盒(茚三酮比色法)简介：氨基酸(Amino acid ，AA)是组成蛋白质的基本单位，也是蛋白质的分解产物。
动物肝脏、肾脏是氨基酸代谢的主要器官，氨基酸(AA)检测试剂盒(茚三酮比色法)(Amino Acid Assay kit)检测原理是在弱酸条件下，氨基酸与茚三酮共热情况下，能定量的产生蓝紫色的二酮茚胺(又称Ruhemans 紫)，其吸收峰在波长570nm 处，在一定范围内颜色深浅(即吸光度)与氨基酸浓度成正比。
该试剂盒主要用于检测血清、尿液、植物组织、食品、药品等中的总游离氨基酸含量。
该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：操作步骤(仅供参考)：1、准备样品：①植物样品：取新鲜植物组织，清洗干净，擦干，切碎，迅速称取，按植物组织：AA Lysis buffer=的比例加入AA Lysis buffer 匀浆或研磨，用去离子水稀释至，混匀，用滤纸过滤，滤液即为氨基酸粗提液，4℃保存备用。
②血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，-20℃冻存，用于氨基酸的检测。
③细胞或组织样品：取恰当细胞或组织裂解液，如有必要用AA Lysis buffer 进行适当匀浆，离心5min ，留取上清即为氨基酸粗提液，4℃保存备用，用于氨基酸的检测。
④高活性样品：如果样品中含有较高浓度的氨基酸，可以使用AA Lysis buffer 进行恰当的稀释。
2、配制茚三酮工作液: 取适量的茚三酮显色液、AAAssaybuffer ，按茚三酮显色液：AAAssaybuffer=的比例混合，即为茚三酮工作液。
4℃避光密闭保存，2周有效。
3、配制维生素C 工作液: 取出1支维生素C ，准确溶解于10ml 去离子水，混匀。
4℃预冷备用。
-20℃保存1周有效。
注意：该试剂盒提供的维生素C 及其配制的工作液为过编号名称TC2153 100T Storage试剂(A): 氨基酸标准(50μg/ml) 1ml 4℃ 试剂(B): AALysisbuffer 250ml RT 试剂(C): 茚三酮显色液120ml RT 避光试剂(D):AAAssaybuffer 10.5ml RT 试剂(E): 维生素C 2支RT 使用说明书1份量。
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氨基酸(amino acid,AA)含量测定试剂盒使用说明
分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC1570
规格:50T/48S
产品内容：
试剂一：液体×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体×1瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1瓶（棕色），4℃避光保存。
临用前加入2mL无水乙醇，盖紧后充分混匀，再加入28mL蒸馏水混匀，避光保存。
试剂四：粉剂×1管，4℃避光保存。
临用前加10mL蒸馏水，充分溶解。
标准品：液体×1支，1μmol/mL标准液，4℃避光保存。
产品说明：
动物肝脏、肾脏是氨基酸代谢的主要器官，故尿中氨基酸的变化最能反应肝、肾的生理状态。
另外，氨基酸还能反应灼伤、伤寒等方面情况。
植物体内氨基酸含量对研究植物在不同条件下及不同生长发育时期氮代谢变化、植物对氮素的吸收、运输、同化及营养状况等有重要意义。
氨基酸的α-氨基可与水合茚三酮反应，产生蓝紫色化合物，在570nm有特征吸收峰；通过测定570nm吸光度，来计算氨基酸含量。
自备仪器及用品：
台式离心机、水浴锅、紫外分光光度计、1ml玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵、无水
乙醇、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、样品中AA提取：
1.按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL
试剂一）进行室温匀浆，然后转移到1.5mL EP管中，盖紧后（防止水分散失）置于沸水浴提取15min；自来水冷却后，8000g，，4℃离心10min，上清液置冰上待测。
2.细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量
（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
3.血清等液体：直接检测。
二、测定操作：
1.分光光度计预热30min，调节波长到570nm，蒸馏水调零。
2.空白管：取EP管，加入50μL蒸馏水，500μL试剂二，500μL试剂三和50μL试剂四，混匀后盖紧瓶盖（防止水分散失），置于沸水浴中保温15min，冷却后反复颠倒EP管数次，于570nm测定吸光值，记为A空白管。
显色后务必在30min内测完。
3.标准管：取EP管，加入50μL标准品，500μL试剂二，500μL试剂三和50μL试剂四，混匀后盖紧瓶盖（防止水分散失），置于沸水浴中保温15min，冷却后反复颠倒EP管数次，于570nm测定吸光值，记为A标准管。
显色后务必在30min内测完。
4.测定管：取EP管，加入50μL上清液，500μL试剂二，500μL试剂三和50μL试剂四，混匀后盖紧瓶盖（防止水分散失），置于沸水浴中保温15min，冷却后反复颠倒EP管数次，
于570nm测定吸光值，记为A测定管。
显色后务必在30min内测完。
注意：空白管和标准管只需要测定一次。
三、氨基酸含量计算公式：
（1）按蛋白浓度计算
氨基酸含量（μmol/mg prot）=[C标准品×V标准品×(A测定－A空白)÷(A标准－A空白)]÷（V样×Cpr）=1×(A测定－A空白)÷(A标准－A空白)÷Cpr
（2）按样本质量计算
氨基酸含量（μmol/g）=[C标准品×V标准品×(A测定－A空白)÷(A标准－A空白)]÷（V样总÷V样）÷W=1×(A测定－A空白)÷(A标准－A空白)÷W
（3）按细胞数量计算
氨基酸含量（μmol/104cell）=[C标准品×V标准品×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)]×（V样总÷V样×细胞数量）=1×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)÷细胞数量
（4）按照液体体积计算
氨基酸含量（μmol/mL）=[C标准品×V标准品×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)]÷V样=1×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)
C标准品：标准品浓度，1μmol/mL；V标准品：反应体系中加入标准品体积，0.05mL；W：样品质量，g；V样：反应体系中加入样品提取液体积，0.05mL；V样总：样品提取液总体积，1mL；；Cpr：上清液蛋白质浓度，mg/mL。
注意事项：
1.试剂盒中试剂三和试剂四均需临用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且
3天内使用完毕。
2.为保证实验结果的准确性，需先取1-2个样做预实验，如果测定的吸光值过高（高于2.5），
用蒸馏水稀释后再测定。
3.脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应在570nm处无吸收峰，因此，570nm处测定结果不含这
两种氨基酸的量。