爱德士生化基础知识[调研知识]
生化分析基础知识 共34页

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加入试剂后,测定吸光度(双试剂终点法)
时间(秒) 0 2 4 6 8 10 12 14 16
18 20
22 24 26 28 30
仪器动作 加入R1
加入R2
吸光度 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.2
0.3 0.4
0.8 1.1 1.2 1.2 1.2
……
四川赛德斯医疗器械有限公司
胰腺类
检测项目:AMY 淀粉酶
四川赛德斯医疗器械有限公司
校准品和质控品的概率
校准品
质控品 Control
试剂
分析仪
四川赛德斯医疗器械有限公司
定标液(校准品)的用途
用几个已知浓度的溶液做标准曲线,来测量未 知浓度的样本。
主波图(340nm)
吸光度
21000 18000 15000 12000 9000 6000 3000
GGT (γ-GT) • γ-谷氨酰转肽酶
TBIL
• 总胆红素
DBIL
• 直接胆红素
TP
• 总蛋白
ALB
• 白蛋白
CHE
• 胆碱酯酶
TBA
• 总胆汁酸
GLDH
• 谷氨酸脱氢酶
ICDH
• 异柠檬酸脱氢酶
LAP
• 亮氨酸氨基肽酶
PA
• 前白蛋白
AFU
• α-L-岩藻糖苷酶
心肌酶谱
检测项目:
AST(GOT) 谷氨酸氨基转移酶
LDH
乳酸脱氢酶
CK
肌酸激酶
CK-MB
肌酸激酶同工酶MB
生化重点知识资料

生化重点知识资料生物化学是研究生物体内化学反应和生物分子结构与功能的学科,是生命科学中的重要分支。
本文将介绍生化学中的几个重点知识。
1. 生物大分子:生物大分子是构成生物体的基本单位,包括蛋白质、核酸、多糖和脂类。
蛋白质是生物体内最重要的大分子,由氨基酸组成,具有多种功能,如酶催化、结构支持和信号传导等。
核酸是存储和传递遗传信息的分子,包括DNA和RNA。
多糖是由单糖分子通过糖苷键连接而成,如淀粉和纤维素。
脂类是由甘油和脂肪酸组成,具有能量储存和细胞膜组成的功能。
2. 酶的作用:酶是生物体内催化化学反应的蛋白质,能够降低反应的活化能,加速反应速率。
酶通过与底物结合形成酶底物复合物,在酶活性中心发生催化作用,使底物转化为产物。
酶的活性受到温度、pH值和底物浓度等因素的影响。
3. 代谢途径:代谢是生物体内所有化学反应的总称。
代谢途径包括有氧呼吸、无氧呼吸和光合作用等。
有氧呼吸是指利用氧气将有机物完全氧化为二氧化碳和水,并释放能量。
无氧呼吸是在缺氧条件下进行的代谢途径,能够通过发酵产生能量。
光合作用是植物利用光能将二氧化碳和水转化为有机物,并释放氧气。
4. 酸碱平衡:生物体内的酸碱平衡是指维持体内pH值稳定的能力。
细胞内外的酸碱平衡由多种缓冲系统、呼吸和肾脏调节。
细胞内主要的缓冲系统是碳酸氢盐/二氧化碳系统和磷酸盐系统。
呼吸通过调节呼出二氧化碳的量,影响血液中的碳酸氢盐浓度。
肾脏通过排泄酸性或碱性尿液,调节体内酸碱平衡。
5. 遗传信息的传递:遗传信息的传递是指基因在生物体内的复制和转录、翻译过程。
DNA是存储遗传信息的分子,通过复制过程使得每个细胞都具有相同的基因信息。
转录是将DNA上的基因信息转化为RNA分子的过程。
翻译是将RNA上的信息翻译成蛋白质的过程。
这个过程中,遵循着三联密码子与氨基酸的配对规则。
本文简要介绍了生化学中的几个重点知识,包括生物大分子、酶的作用、代谢途径、酸碱平衡和遗传信息的传递。
生化基础知识

物理学告诉我们,光具有波动和微粒两种性质, 称光的波粒二象性。 光是一种电磁波,可以用振动频率(γ )、波 长(λ ) 、速度(c) 、周期(T)来描述它。 在辐射能量时,光是以单个的、一份一份的能 量(E=h γ )的形式辐射的。式中h是普朗克 常量。同样光被吸收时,其能量也是一份一份 被吸收的。不同波长的光子具有不同的能量。 波长越短,即频率越高,能量越大。
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色比分析理论:朗伯-比尔定律
A= lg I0/I = a b c A : 吸光度 a:摩尔消光系数(物理常数) I : 出射光强度 b:光径 I0 : 入射光强度 c:吸光物质在溶液中的浓度 从上述公式中可以看出:吸光物质在溶液中的浓度(C)与 吸光度(A)成正比。溶液的浓度越大,所吸收的光的 量也越大。
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波长选择
SPECTRA ALBUMINE 1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 500
REAGENT ALONE REAGENT + SAMPLE
OD
550
600 WAVELENGTHS
650
700
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当一束平行光照射到均匀的溶液时,光的一部 分被吸收(I a),一部分反射Ir,一部分透过It。 假设入射光的强度为Io,那么Io= I a+ Ir+ It 实际比色分析时,所有比色皿都是同质料、同 规格的,因此Ir定值。 比色分析中,常把透过光的强度占入射光的强 度的百分比[It / Io )%]称为透过率。
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仪器反应原理
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光的互补及有色溶液的显色原理
我们日常所见的白光是混合而成的复合 光。 若把两种颜色的光按一定比例混合,能 够得到白光的话,这两种颜色的光就称 为互补色。
爱德士生化基础知识

加工、改造 ⒊ 肝脏是酮体生成的重要场所
乙酰CoA
酮体
在糖代谢方面的特殊作用
1. 进食后 G
合成
肝糖原
2.
不进食或空腹
肝糖原
3.
分解
G
维持血糖浓度
相对恒定
饥饿时
非糖物质
糖异生
G
肝脏的生物转化作用
指狭义的转化:非营养物质的代谢转变 各种非营养物质,在肝内经氧化、还原、水解和/或结合反应 等过程,转变为极性强、水溶性大,且容易排泄的物质过程称为 生物的转化作用。
2. 肝脏各项指标解读
涉及指标
TP、ALB、GLO、ALKP、GGT、ALT、AST、NH3、TBIL、 LDH(GLU、CHOL、CK、BILE ACID、COTISOL)
肝脏生理生化功能回顾
肝脏在脂类代谢中的特殊作用
⒈ 促进脂类的消化吸收
约80%胆固醇
转化
胆盐
⒉ 肝脏是脂肪酸分解、合成和改造的主要场所
黄疸的诊断及鉴别
项目
正常
溶血性黄疸 肝细胞性黄疸
阻塞性黄疸
尿胆红素 —
—
++
++
尿胆素原 少量
↑
不一定
↓
粪便颜色 黄褐色
加深
正常或变浅
变浅
胆红素血症/黄疸总结
TBIL = DBIL + IBIL
IBIL升高: 溶血性贫血(贫血、黄疸、脾肿大) 溶血性疾病 药物等免疫介导 传染病:心丝虫、巴贝丝虫、焦虫 氧化性损伤:洋葱、酚类 血液吸收:血肿 UTG (葡萄糖醛酸转移酶)基因变异 DBIL 升高:肝细胞性
尿素
尿素生成部位: 尿素生成的原料:
生化检验基础知识

2. 血液标本的采集 生化检验用的血液标本可来自于静脉、 动脉或毛细血管。静脉血是最常用的标本, 静脉穿刺是最常用的采血方法。毛细血管采 血主要用于儿童,血气分析多使用动脉血。
(1) 采血前准备 为了使实验室结果有效地用于临床,实验室 应了解在收集标本前和收集标本时,所有会 影响实验室的非患者内在疾病因素。采取各 种措施,提出对患者采集标本前以及采集时 的要求,称之为患者准备。
注意事项 ①.血标本必须隔绝空气。因为血气分析是 指当天大气压条件下,用隔绝空气的血标本 与一定浓度的气体相结合,而后测定人体内 PH值、氧分压等,作为监测及追踪观察病人 的血气情况。血标本中若进入空气将产生误 差。因此采血的注射器使用前应检查有无漏 气,针头必须连接紧密,标本采集后立即封 闭针头斜面。 ②.及时送验。标本采集后应立即送验,如 要等待测定,应将标本置于0到4度冰箱内保 存不得超过1小时,以免影响检验结果。
生化检验基础知识
一、常规标本的采集、处理
(一)常规标本的采集 生化检验的标本有血液、尿液、脑脊液 和腹水等,其中以血液标本最为常用。
1. 检验申请单 申请单是实验检查的第一步。一份完整的申请单应 包括:条码号,门诊号,住院号;病人的姓名,性 别,出生日期;病房,床位号;临床诊断,问题或 特殊检验注意事项;申请检查项目;标本类型;采 样时间,标本接收时间(年.月.日.时.分);有关 治疗情况(如用药情况);医生姓名等。其中有关 临床和治疗信息,特别是用药信息是检验师评价结 果的必要条件。药物困难在体外影响分析方法或在 体内引去病理变化,因此,要特别注意在申请单上 提供类信息.。
(4)真空采血法 双向针一端插入真空试管内,另一端在持针 器的帮助下刺入静脉,血液在负压作用下自 动流入试管内。由于在完全封闭状态下采血, 避免了血液外溢引起的污染,并有利于标本 的转运和保存。标准真空采血管采用国际通 用的头盖和标签颜色显示采血管内添加剂种 类和试验用途。
生化基础知识

生
N(15~18%)、 S(0~4%)、…
物
技
• N的含量平均为16%——
术
• 是凯氏定氮法的理论基础
有
限
公
司 2020/8/29
.
7
上
海 三、蛋白质的氨基酸组成
赛
伦 生
• 氨基酸是蛋白质的基本组成单位。
物
技
• 从细菌到人类,所有蛋白质都由20
术
种标准氨基酸(20 standard amino
有
acids)组成。
物
技
• 蛋白质的空间结构包括:
术
•
二级结构
有
•
三级结构
限
•
四级结构。
公
司 2020/8/29
.
29
上
海
1. 蛋白质的二级结构
——指蛋白质多肽链本身的折叠和盘绕方式
赛
伦
• (1)α-螺旋(α-helix)
生
• (2)β-折叠结构(β-pleated sheet)
物
• (3)β-转角(β-turn)
技
• 甘氨酸(Glycine,Gly,G), • 丙氨酸(Alanine,Ala,A), • 缬氨酸(Valine,Val,V)), • 亮氨酸(Leucine,Leu, L), • 异亮氨酸(Isoleucine,Ile,I), • 脯氨酸(Proline,Pro,P), • 苯丙氨酸(Phenylalanine,Phe,F), • 色氨酸(Tryptophan,Trp,W), • 甲硫氨酸(Methionine,Met,M)
2.肽的性质
• 1.肽键可被水解
• 2.肽的解离性质
• 肽是一类多聚两性电解质,随环境pH 的变化,可以电离成带正电荷、负电荷 或者净电荷为零等不同的状态。
爱德士生化基础知识剖析

GGT :胆管上皮
GGT : 肾、胰、肝、脾、肠、脑,以肾脏中含量最高。位于多数 细胞的外表。 为胆汁淤积及皮质醇诱导
犬: 轻微升高提示肝脏疾病 显著升高(大于100U/L)提脂质沉积
同时测定 ALT、AST、ALKP、GGT:
如果前2种酶明显升高,则为肝细胞损害的特征,如果后2种酶 升高则为胆汁郁积性。 当TBIL 持续升高,ALKP 降低:提示病变严重
肝脏的合成功能1 — TP、ALB、GLO
各种血浆蛋白质的合成场所及主要生理功能
组成
白蛋白
合成场所
只在肝内合成
生理功能
维持血浆胶体渗透压
1、2-球蛋白 -球蛋白
主要在肝内合成 较大部分在肝内合成
形成-脂蛋白, 运输脂类 形成β-脂蛋白,运输脂类
γ-球蛋白 纤维蛋白原
凝血酶原
只在肝外合成
只在肝内合成 只在肝内合成
UDP-GA UDP 被Y-蛋白结合、固定和转运 (UDP转-葡化葡萄 糖醛酸胆红素酯
醛酸转移酶) (结合胆红素/肝胆红素)
经胆管排入肠道(排泄) 几乎全部排入毛细胆管
极少量结合胆红素返溢入血
结合胆红素性质:水溶性,无毒性
胆红素在肝外的代谢
↑ AST >↑ ALT; ↑ CK → skeletal muscle injury
AST/ALT 比值:
ALT 主要存在于肝细胞中,AST则有40% 位于线粒体, 另外ALT 在血中的半衰期明显高于AST,所以典型的急性肝炎,ALT 不仅升高 而且持续时间长,随时间延长AST/ALT 比值逐步升高。在慢性活动 性肝炎和肝硬化时,由于细胞进一步坏死,AST 增高程度往往超过 ALT,比值大于1。
非营养物
生化分析基础知识

C=ΔA×F=ΔA×Vt/Vs×1000/ε,
式中:C:酶活力浓度,单位是U/L, F:换算因子, ε:为毫摩尔消光系数 Vt:为总反应量 Vs:为样品量 ΔA:为每分钟吸光度的变化量
A = lg(I0/It) = εb c
朗伯—比耳定律数学表达式
A=lg(I0/It)= εb c
式中A:吸光度;描述溶液对光的吸收程度;
b:液层厚度(光程长度),通常以cm为单位;
c:溶液的物质的量浓度,单位mol·L-1;
ε:摩尔吸光系数,单位L·mol-1·cm-1;
或:
A=lg(I0/It)= a b c
2.不同浓度的同一种物质,其吸收 曲线形状相似。而对于不同物质, 它们的吸收曲线形状和λmax则不 同。
吸收曲线的特性:
3.吸收曲线可以提供物质的结构 信息,并作为物质定性分析的依 据之一 4.不同浓度的同一种物质,在某 一定波长下吸光度 A 有差异,在 λmax处吸光度A 的差异最大。此 特性可作为物质定量分析的依据
Sample Reag. at R1 timing
1st. mp
Last mp
2点速率法2-point Rate
• 指在时间-吸光度曲线上选择两个测光点,此两点既非反应初始吸光 度亦非终点吸光度,这两点的单位时间吸光度差值用于结果计算。
例:读点区读点72个由于采用两点速率法2PA,所以不进行线性验证,曲 线的弯曲导致的线性问题并没有引发报警
一点终点法的特点:
1.不包含样本的本底 2.仅进行一个点的测量
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优选分析
1
内容
• 概述 • 肝脏各项指标解读 • 肾脏各项指标解读 • 胰脏及其它各项指标解读
优选分析
2
1. 概 述
优选分析
3
IDEXX 生化仪的检测项目
TP,ALB: 肝、肾、全身 ALKP, GGT, ALT, AST, NH3 ,TBIL: 肝功能 BUN, CREA ,Ca,PHOS ,UPC : 肾功 CK,LDH: 横纹肌
优选分析
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骨骼来源的ALKP ,通常2-3倍升高。 当ALKP 高于正常值4倍以上 — 80% 为诱导酶,20%为胆汁淤积 ALKP 单独升高,考虑类固醇诱导。 在猫,ALKP 升高对胆汁郁积的特异性较强,但敏感性相对不足。
优选分析
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GGT :胆管上皮
GGT : 肾、胰、肝、脾、肠、脑,以肾脏中含量最高。位于多数
ALT AST
犬 60hr
12hr
猫 3.5 hr
1.5hr
优选分析
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胆汁淤积敏感酶 —— ALKP /GGT
ALKP : 来源与骨骼及肝脏 在肝脏由肝细胞合成分泌,自胆道排出。
ALKP 两种来源:肝脏特异酶 皮质类固醇诱导(胆小管)-库兴氏综合征
库兴氏综合征:ACTH 刺激试验、CORTISOL。
肝脏生理生化功能回顾
优选分析
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优选分析
9
优选分析
10
优选分析
11
肝脏在脂类代谢中的特殊作用
⒈ 促进脂类的消化吸收
约80%胆固醇 转化 胆盐
⒉ 肝脏是脂肪酸分解、合成和改造的主要场所
FA
乙酰CoA
加工、改造 ⒊ 肝脏是酮体生成的重要场所
乙酰CoA
酮体
优选分析
12
在糖代谢方面的特殊作用
1. 进食后
细胞的外表。
为胆汁淤积及皮质醇诱导
犬: 轻微升高提示肝脏疾病 显著升高(大于100U/L)提示胆管增生或肝癌 中度升高提示皮质醇诱发
猫: 胆汁淤积 肝脂质沉积
优选分析
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同时测定 ALT、AST、ALKP、GGT:
如果前2种酶明显升高,则为肝细胞损害的特征,如果后2种酶 升高则为胆汁郁积性。 当TBIL 持续升高,ALKP 降低:提示病变严重
优选分析
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肝脏的合成功能1 — TP、ALB、GLO
各种血浆蛋白质的合成场所及主要生理功能
组成
白蛋白
合成场所
只在肝内合成
生理功能
维持血浆胶体渗透压
1、2-球蛋白 -球蛋白
主要在肝内合成 较大部分在肝内合成
形成-脂蛋白, 运输脂类 形成β-脂蛋白,运输脂类
γ-球蛋白 纤维蛋白原
凝血酶原
只在肝外合成
内源性:激素、胺类、NH3、胆红素等 外源性:药物、食品添加剂、毒物、肠菌腐败产物等
优选分析
14
肝脏疾病检测指标分类
酶: 漏出酶: ALT 、AST 、LDH 胆汁郁积酶: ALKP、GGT 、
肝功能:
合成: ALB、GLU、CHOL 摄取、结合、分泌: TBIL、NH3、Bile Acid
优选分析
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肝脏疾病分类
肝细胞损伤 —— 可逆 ,不可逆 肝炎 —— 感染 ,非感染 ,中毒性 胆道阻塞 —— 肝内 , 肝外 肝病 —— 空泡性(狗、猫),铜沉积(狗),脂质沉积(猫) 肿瘤 —— 原发, 继发 肝功能衰竭 —— 肝硬化
优选分析
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肝细胞漏出酶 —— ALT/AST /LDH
优选分析
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G
合肝成糖原
2. 不进食或空腹
肝糖原
分G 解
3. 饥饿时
维持血糖浓度 相对恒定
糖异生
非糖物质 G
优选分析
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肝脏的生物转化作用
指狭义的转化:非营养物质的代谢转变
各种非营养物质,在肝内经氧化、还原、水解和/或结合反应 等过程,转变为极性强、水溶性大,且容易排泄的物质过程称为 生物的转化作用。
非营养物
只在肝内合成 只在肝内合成
优选分析
形成多种免疫球蛋白,
与凝血有关 与凝血有关
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TP = ALB + GLO
ALB:全部由肝脏合成,小分子量蛋白。 GLO:是一组蛋白。含量较多的是免疫球蛋白及补体。
作用:
ALB:维持胶体渗透压,运输(激素、离子、药物、代谢产物) GLO: 参与机体的免疫反应
优选分析
所有健康的动物,尤其是老年动物,每年需体检一次。 部分就诊的动物。 所有术前的动物。 所有治疗过程中的动物:病程监测,副作用的监测。
优选分析
6
2. 肝脏各项指标解读
优选分析
7
涉及指标
TP、ALB、GLO、ALKP、GGT、ALT、AST、NH3、TBIL、 LDH(GLU、CHOL、CK、BILE ACID、COTISOL)
间接胆红素
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胆红素在肝细胞内的代谢(待用)
ALT :肝细胞浆 AST:肝细胞 60% 胞浆,40% 线粒体,骨骼肌及心肌 LDH:肝细胞胞浆,骨骼肌、心肌、肾、小肠等
常见的升高原因: 肝细胞原因的升高:
其他原因的升高:
急性传染性肝炎 中毒性肝炎 慢性活动性肝炎 肝癌
休克
急性胰腺炎
心衰
肾上腺皮质功能亢进
糖尿病
其它脏器:骨骼、心肌、红细胞
优选分析
LIPA, AMYL, GLU ,TRIG:胰腺 LAC ,Mg, CHOL: 代谢
URIC: 禽类的肾病
优选分析
4
生化检测的定义
检测血(尿)中酶类、蛋白质、脂类、离子及其它 代谢物的含量。判断各系统、各脏器的功能、了解 全身的肉眼可能无法察觉状况。
优选分析
5
生化需求分析
- 什么情况需做生化检查:
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白蛋白下降原因:
来源、合成、丢失
球蛋白升高原因:
炎症、多发骨髓瘤、 淋巴组织增生性疾病
如果白蛋白的量降到了1.5克/dl以下时,容易出现水肿、胸腹水。 白蛋白减少,同时球蛋白增加往往反映了肝脏的炎症活动性。
优选分析
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肝脏的合成功能2 —— TBIL
胆红素的生成
难溶于水, 呈Leabharlann 度脂溶性优选分析— AST 、LDH
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犬猫肝脏和骨骼肌损伤鉴别
↑ ALT >↑ AST; no↑ CK → liver injury
↑ AST >↑ ALT; ↑ CK → skeletal muscle injury
优选分析
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AST/ALT 比值:
ALT 主要存在于肝细胞中,AST则有40% 位于线粒体, 另外ALT 在血中的半衰期明显高于AST,所以典型的急性肝炎,ALT 不仅升高 而且持续时间长,随时间延长AST/ALT 比值逐步升高。在慢性活动 性肝炎和肝硬化时,由于细胞进一步坏死,AST 增高程度往往超过 ALT,比值大于1。