有机化学实验2-柱色谱
请你总结柱色谱的操作步骤及注意事项
请你总结柱色谱的操作步骤及注意事项
柱色谱是常用的分离和分析技术之一，通常有以下操作步骤及注意事项：
操作步骤：
1. 样品制备：将需要分离的混合物溶解或悬浮在合适的溶剂中，经过过滤或离心等处理，得到样品溶液。
2. 填充柱料：将柱料填充到柱中，常用的柱料有硅胶、脱脂棉、高效液相色谱柱等。
3. 平衡柱料：用适当的溶剂通过柱料进行平衡，以保证柱料内部的平衡状态。
4. 装样：将样品溶液使用适当的方法（如注射器）装载到柱中。
5. 洗脱：通过柱料添加适当的洗脱剂，将混合物中的目标成分逐一洗脱出来。
6. 收集洗脱液：将洗脱液逐一收集到相应的集样器中，可以根据需要选择收集不同时间段或体积段的洗脱液。
7. 分析：对收集的洗脱液进行后续的分析，如测量吸光度、进行色谱质谱分析等。
注意事项：
1. 柱料的选择：根据样品特性选择合适的柱料，以保证分离效果。
2. 柱料的平衡：进行柱色谱操作前，要确保柱内的柱料处于平衡状态，以获得稳定的分离结果。
3. 柱色谱条件的控制：调整洗脱剂的流速、浓度等条件，可以影响分离效果和分离时间。
4. 样品的预处理：对样品进行合适的预处理，如过滤、离心、
浓缩等，以避免堵塞柱料。
5. 柱的保养与维护：定期对柱进行保养和维护，如洗涤、再生、更换等，以保证柱的使用寿命和分离效果。
6. 操作的环境控制：在操作过程中，注意保持干净的工作台和无尘环境，以避免杂质的干扰。
有机化学实验(二)_洛阳师范学院中国大学mooc课后章节答案期末考试题库2023年
有机化学实验（二）_洛阳师范学院中国大学mooc课后章节答案期末考试题库2023年1.柱色谱不需要用哪种仪器答案:分水器2.由正丁醇合成正丁醚的实验是通过什么关键装置来提高产品产率的？答案:分水器3.在正丁醚的精制过程中，先后用水、50%硫酸、水洗涤，最后用氯化钙干燥，各步的目的论述错误的是：答案:最后水洗是为了除去正丁醇4.关于减压蒸馏，下列说法错误的是答案:减压蒸馏完毕，应先通大气，再停止加热，然后关真空泵、冷却水5.用邻苯二甲酸酐和正丁醇反应制备邻苯二甲酸二丁酯的实验中，反应结束后，用5%碳酸钠溶液洗涤的作用是答案:除去反应体系中的酸6.用高锰酸钾氧化环己醇为己二酸时，产生的棕色沉淀是答案:二氧化锰7.安息香缩合反应中NaCN或VB1催化反应的本质是催化剂具有答案:亲核性8.乙酰乙酸乙酯制备实验中，反应启动快慢主要与什么有关答案:乙酸乙酯中乙醇的含量9.促使呋喃甲醛歧化反应发生的条件是答案:浓碱10.使用乙醚萃取分离呋喃甲醇与呋喃甲酸盐时，下列说法错误的是答案:萃取完毕，醚层可用无水氯化钙、硫酸镁、硫酸钠等干燥11.色谱法可用来做以下哪些工作？答案:分离混合物鉴定化合物跟踪反应提纯化合物12.由环己醇制备环己酮的实验中，反应结束后用水蒸气蒸馏提取产物环己酮，这是因为答案:环己酮在100°C左右有一定的蒸气压环己酮不与水反应环己酮几乎不溶于水13.减压蒸馏适用于下列哪些情况？答案:在常压蒸馏时未达沸点即已受热分解、氧化或聚合的物质沸点较高（150 ℃以上）的物质14.在邻苯二甲酸二丁酯的制备实验中用到了过量的正丁醇，其作用是答案:反应原料溶剂带水剂15.使用VB1作催化剂催化安息香缩合反应时，哪些因素影响反应的产率？答案:加料和反应过程的温度VB1的质量反应的pH值苯甲醛的质量16.乙酰乙酸乙酯的制备实验中，要求答案:装置干燥回流时加干燥管试剂无水17.使用金属钠时应当注意答案:要戴手套操作，不可用手接触切钠完毕，用具要放入乙醇中以除去残留的钠切钠的用具无水切下不用的钠放回原瓶中18.用乙酸酐和水杨酸制备阿司匹林的实验中，乙酸酐的作用是答案:酰化试剂溶剂19.适合重结晶用的溶剂应符合以下哪些条件答案:被提纯的有机物应易溶于热溶剂中，而在冷溶剂中几乎不溶沸点适中与被提纯的有机物不起化学反应对杂质的溶解度应很大或很小20.有关色谱法的说法正确的是：答案:色谱法包括薄层色谱、柱色谱和纸色谱薄层色谱可以用来跟踪反应进程薄层色谱适用于分离少量样品21.浓硫酸是正丁醇脱水制备正丁醚的催化剂，所以加入的量越多越好。
大学柱色谱实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 理解柱色谱分离的基本原理和方法。
2. 掌握柱色谱实验的操作技能，包括样品的制备、色谱柱的填充、洗脱剂的选择和样品的收集。
3. 学习如何分析色谱分离的结果，并能够根据分离效果评估实验条件。
二、实验原理柱色谱是一种利用混合物中各组分在固定相和流动相之间分配系数的不同来实现分离的技术。
实验中，将含有目标组分的混合物通过填充有吸附剂的色谱柱，由于不同组分在固定相和流动相中的分配系数不同，它们在色谱柱中的移动速度也会不同，从而实现分离。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：- 柱色谱柱（玻璃或塑料）- 漏斗- 烧杯- 滴定管- 铁架台- 秒表2. 试剂：- 吸附剂（如硅胶、氧化铝等）- 混合样品（含目标组分）- 洗脱剂（根据目标组分的极性选择）- 标准样品（用于对照和定量分析）四、实验步骤1. 准备色谱柱：将吸附剂倒入漏斗中，用滴定管缓慢倒入色谱柱中，使其填充紧密。
2. 样品制备：准确称取一定量的混合样品，用适量的溶剂溶解。
3. 样品上样：将样品溶液缓慢滴加到色谱柱顶部，注意控制流速。
4. 洗脱：将洗脱剂滴加到色谱柱顶部，控制流速，收集流出液。
5. 收集分离组分：观察色谱柱中的分离情况，记录各组分对应的收集时间。
6. 样品分析：将收集到的各组分进行进一步的分析，如薄层色谱、红外光谱等。
五、实验结果与分析1. 分离效果：观察色谱柱中的分离情况，记录各组分对应的收集时间，分析分离效果。
2. 定量分析：根据收集到的各组分量，计算其含量，并与标准样品进行对照。
3. 优化实验条件：根据分离效果，分析实验条件对分离效果的影响，如吸附剂类型、洗脱剂类型、流速等，并对实验条件进行优化。
六、问题与讨论1. 实验中遇到的问题：- 色谱柱填充不均匀，导致分离效果不佳。
- 洗脱剂选择不当，导致分离效果不佳。
- 流速控制不当，导致分离效果不佳。
2. 解决方法：- 优化色谱柱填充方法，确保填充均匀。
- 根据目标组分的极性选择合适的洗脱剂。
色谱分析—柱色谱(分析化学课件)
柱色谱应用
（五）分子排斥色谱 （size- exclusion chromatography） 原理：按分子大小分离。小分子可以扩散到凝
胶空隙，由其中通过，出峰最慢；中等分子只能通 过部分凝胶空隙，中速通过；而大分子被排斥在外 ，出峰最快；溶剂分子小，故在最后出峰。
全部在死体积前出峰； 可对相对分子质量在100-105范围内的化合物按 质量分离。
柱色谱应用
（三）离子交换色谱（ion-exchange chromatography） 原理：组分在固定相上发生的反复离子交换反应； 固定相：阴离子或阳离子离子交换树脂； 流动相：阴离子离子交换树脂作固定相，采用酸性水溶液；阳离子离子 交换树脂作固定相，采用碱性水溶液； 阳离子交换：R-SO3H+M+ =R-SO3 M+H + 阴离子交换：R-NR4OH+X-=R-NR4 X+OH应用：离子、可离解的化合物、氨基酸和核酸等。
柱色谱应用
1.吸附剂 吸附剂为多孔性微粒物质。常用的有硅胶、氧化铝、聚酰胺和大孔吸附树脂等。 需满足以下条件： ❖具有较大的吸附表面和吸附中心； ❖与样品、溶剂和洗脱剂均不发生化学反应； ❖不能被溶剂或洗脱剂溶解； ❖粒度均匀，且有一定的粒度。
柱色谱应用
（1）硅胶 适用于酸性或中性物质 （2）氧化铝 碱性氧化铝 pH 9.0～10.0 适于分析碱性、中性物质 中性氧化铝 pH＞7.5 适于分析酸性碱性和中性物质 酸性氧化铝 pH 4.0～5.0 适于分析酸性、中性物质 （3）聚酰胺 氢键作用，氢键能力↑强，组分越后出柱。 注：吸附剂含水量越大，活性级别越高，吸附活性越低，吸附能力越弱。
柱色谱应用
A
B
C
D
柱色谱应用
化学分析中的柱色谱法基础知识
化学分析中的柱色谱法基础知识柱色谱法是化学分析的基础技术之一，其广泛应用于分离、分析、净化、提纯等领域。
柱色谱法最早应用于有机化学中，主要用于分离各种有机物。
但随着仪器技术的不断升级，柱色谱法已经可以应用于各种领域，包括无机分析、生化分析、环境分析、食品分析等。
柱色谱法的基本原理柱色谱法主要利用物质分子在不同站点处所受的吸附作用差异，来完成分离、分析等任务。
通俗地说，柱色谱法就像是在不同人群中找到不同特征的一样，将不同的物质分开。
整个柱色谱法的过程主要包括三个步骤：样品进样、分离、检测。
其具体过程如下：1、样品进样：将待分离样品注入到柱子中，并通过色谱柱使样品分离。
2、分离：根据不同物质所受吸附作用的差异，在色谱柱中完成不同物质的分离。
3、检测：通过检测器，对分离出来的物质进行鉴定和定量。
柱色谱法的色谱柱柱色谱法的柱子是柱色谱法的核心部件，柱子的质量和种类对整个柱色谱法都至关重要。
目前常用的柱子有液相色谱柱（Liquid Chromatography Column）和气相色谱柱（Gas Chromatography Column）。
在柱子中，分离物质被分子筛分离，根据色谱柱的不同材料、填充物和分子筛分子的大小，可以分为多种柱子，如反相柱、离子柱、手性柱等等。
不同的柱子适用于不同的分离对象和条件，选用合适的柱子能够明显提高柱色谱法的分析效果。
柱色谱法的应用柱色谱法技术的应用领域十分广泛，可用于制药、食品、环境和生物等行业中的质量控制和检验检疫。
以下是柱色谱法的常见应用领域：1、制药工业中，利用反相柱对药物混合物进行消杂，提纯或分离开来。
2、食品工业中，用于检测食品中的添加剂、色素、香料等成分，以及检测食品中的农药残留。
3、环境监测领域，用于污染物检测和土壤分析等。
4、生物科学领域中，利用手性柱分离和分析手性化合物、蛋白质等。
总之，柱色谱法是化学分析领域中最为重要的技术之一，它能够通过选择合适的柱子，分离出不同的化合物和成分，进而实现分析和定量等任务。
柱色谱的原理及应用实验
柱色谱的原理及应用实验1. 柱色谱的概述柱色谱（Chromatography）是一种分离技术，通过样品在固定相和流动相的作用下，使得不同组分在柱上发生吸附和解吸附过程，从而实现分离和测定的方法。
柱色谱是分析化学中常见的实验方法之一，其原理及应用被广泛研究和应用。
2. 柱色谱的原理柱色谱的分离原理基于样品组分在固定相和流动相之间吸附和解吸附的差异。
当样品溶液通过填充在柱子内的固定相时，样品组分会以不同的速率被固定相吸附并解吸附，从而分离出不同的组分。
具体来说，柱色谱可分为液相色谱和气相色谱两种类型：2.1 液相色谱液相色谱（Liquid Chromatography，简称LC）是利用液体作为流动相的柱色谱。
液相色谱中的固定相一般是具有大量微孔的固体颗粒，称为填充剂。
样品在流动相的作用下，通过填充剂与流动相之间的相互作用，进行组分分离。
常见的液相色谱包括高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）和毛细管电泳色谱（Capillary Electrophoresis，CE）等。
2.2 气相色谱气相色谱（Gas Chromatography，简称GC）是利用气体作为流动相的柱色谱。
气相色谱通过样品在气相状态下与固定相之间的相互作用，实现组分的分离。
在气相色谱中，固定相一般是高沸点、官能团化或载体型的吸附剂物质，如活性炭、分子筛等。
样品通过进样器进入气相色谱柱，在高温下通过柱子进行分离。
3. 柱色谱的应用实验柱色谱技术在多个领域中都有广泛的应用，可以用于物质的分离、纯化和分析等方面。
3.1 药物分析柱色谱在药物分析中有着重要的应用。
通过柱色谱技术，可以对药物的纯度、含量和成分进行分离和定量分析。
例如，药物研发过程中会使用高效液相色谱（HPLC）技术对新药品的质量进行评估，为药物研发提供支持。
3.2 食品安全检测柱色谱技术在食品安全检测中也起着重要的作用。
柱色谱分离实验
三、实实验验步 内骤:容 柱色谱操作：
•干法：10g 硅胶 +乙醇
•先用乙醇 后用水
•操作
•组分颜色
装柱
加样 洗脱
收集
鉴定
•1mL样品 •加样操作 •0.5mL×2乙醇洗涤
•组分颜色
三、实 验 内 容
装柱 干法装柱 湿法装柱
吸附剂装填紧密，排除 气泡。最终应使吸附剂的上 端平整，无凹凸面，无断层。
1/2） • （3）填吸附剂：称取10g 硅胶于小烧杯中 ,加入 15mL 蒸馏水 ,用玻
璃棒调好通过漏斗慢慢装入玻璃柱, 使其逐渐沉入底 部。用洗耳球敲打柱身使硅胶装填紧密，打开活塞，用小锥型 瓶承接, 控制滴速为1 滴／秒,装完后在上面加一层脱脂棉（ ，操作时要注意吸附剂始终不能露出液面）。
实验步骤（续）
二、实 验 原 理
液—固色谱法
固定相、流动相的物理状态
气—固色谱法 气—液色谱法
液—液色谱法
柱色谱法（column chromatography）
色 谱
纸色谱法（paper chromatography）
法
操作形式 薄层色谱法（TLC）
分
气相色谱（GC）
类
高效液相色谱（Hห้องสมุดไป่ตู้LC）
分离原理
吸附色谱法 分配色谱法 离子交换色谱法 排阻色谱
级的物质量。 几分钟或几十分钟内可以完成一个试
柱色谱法分离甲基橙和甲基蓝
实验原理
甲基橙和亚甲基蓝均为指示剂,它们的结构式如下所示:
甲基橙
亚甲基蓝
由于甲基橙和亚甲基蓝的结构不同,极性不同,吸附剂对它们 的吸附能力不同,洗脱剂对它们的解析速度也不同,极性小、吸附能
柱色谱实验报告
柱色谱分离实验报告篇二：色谱实验报告色谱实验报告项目一：气相色谱流出曲线的研究一：实验目的1、 2、 3、掌握气相色谱仪的基本结构及工作原理理解色谱流出曲线中各参数的表示方法掌握气相色谱中定性、定量分析方法二、实验原理气相色谱的固定相是涂布在载体表面的固定液，试样气体由载气携带进入色谱柱，与固定液接触时，气相中各组分便溶解在固定液中。
随着载气的不断通入，被溶解的组分又从固定液中挥发出来，挥发出的组分随载气向前移动时又再次被固定液溶解。
由于各组分在固定液中的溶解能力不同，随着载气的流动，各组分在两相间经过反复的溶解-挥发过程，经过一段时间，最终实现彼此分离。
色谱图是指被测组分从进样开始，经色谱柱分离到组分全部流过检测器后，所产生的响应信号随时间分布的图像。
色谱图上有一组色谱峰，每每个峰代表试样中的一个组分。
色谱流出曲线是以组分流出色谱柱的时间或载气流出的体积为横坐标，以检测器对各组分的电信号响应值为纵坐标的一条曲线。
三、仪器与试剂 1、仪器气相色谱仪 2、试剂乙醇、正丁醇四、实验步骤 1、调试气相色谱仪 2、分别进行进样3、进乙醇和正丁醇的混合物样品，分别记录保留时间五、实验记录1、色谱条件:50m 柱经：320μm 固定液：聚乙二醇载气：氮气检测器类型：fid 检测器温度：150℃柱温：95℃气化室温度：165℃气体流量：载气30ml／min 2、色谱图参数六：实验结果分析从实验结果所占百分比可以看出该实验出峰效果较明显，乙醇先出峰，正丁醇后出峰。
在做实验时我们应注意一些问题，比如说乙醇和正丁醇要按一定的比例来混合，柱温要设置合理，最低要高于正丁醇的沸点，也不能过高，否则会使组分不易分开；过低封效果会不明显。
另外进样时要快、准、稳，避免出现拖尾现象。
项目二：白酒中甲醇含量的测定一、实验目的 1、 2、掌握用外标法进行色谱定量分析的方法。
了解氢火焰离子检测器的性能和操作方法。
二、实验原理气相色谱法是一种分离效果好，分离速度快，灵敏度高，操作简单，应用围广的分析方法，它是以气体为流动相，当气体携带着欲分离的混合物流经色谱柱中的固定相时，由于混合物中各组分的性质不同，它们与固定相的作用力大小不同，所以组分在流动相与固定相之间的分配系数不同，经过多次反复分配之后，各组分在固定相中滞留的时间不同，与固定相作用力小的先流出色谱柱，与固定相作用力大的后流出色谱柱，从而实现分离。
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分离效果最好。
荧光黄结构
亚甲基蓝结构
醚＜乙酸乙酯＜丙酮＜乙醇＜甲醇＜水＜乙酸
注意事项
• 2. 洗脱剂的选择：对未知样品先用极性小的溶剂洗脱，再用极性 大的溶剂洗脱；
• 3. 装柱的技术：松紧度； • 4. 吸附剂的用量； • 5. 柱高：柱子太高洗脱慢。
问题及讨论
• 洗脱剂极性的选择原则： • 1. 先极性小的，再极性大的，可以是单一溶剂，也可是混合溶剂； • 2. 溶剂纯度要高，并经干燥过的。溶剂的结构与吸附能力的关系： • 化合物的吸附性与它们的极性成正比，即极性大吸附力强，后
实验步骤
• 5. 清理：分离结束后，应先让溶 剂尽量流干，然后倒置，用吸耳 球从活塞口向管内挤压空气，将 吸附剂从柱顶挤压出。使用过的 吸附剂倒入垃圾桶里，切勿倒入 水槽，以免堵塞水槽。
注意事项
• 1. 吸附剂的选择和活化； • 常用洗脱剂的极性： • 石油醚＜环己烷＜四氯化碳＜甲苯＜苯＜二氯甲烷＜氯仿＜乙
柱色谱法
柱色谱-荧光黄和亚甲基蓝的分离
实验目的
• 1. 掌握色谱法的基本原理； • 2. 学会利用柱色谱分离提纯有机化合物的规范操作
实验原理
➢柱色谱利用吸附剂（硅胶、氧化铝等）对不同组分吸附 能力的差异从而达到分离目的。
➢常用的有吸附色谱和分配柱色谱两类 ➢吸附色谱常用氧化铝和硅胶做固定相 ➢分配柱色谱以硅胶、硅藻土和纤维素做支持剂，以吸收
实验步骤
• 1. 装柱（干法）：在色谱 柱收缩处塞一小团脱脂棉 后向柱内添加厚1cm左右的 石 英 砂 ， 然 后 添 加 100-200 目 的 氧 化 铝 约 18cm 左 右 ， 再在上面加一层1c附剂：向 柱中倒入一定量的 95%乙醇，打开活塞， 赶走气泡，注意控 制流出速度1滴/s左 右；用一大三角烧 瓶接取流出的乙醇；
实验步骤
• 3. 加样：当溶剂刚好流至上层石英 砂面时，立即用滴管沿壁加入1mL荧 光黄与亚甲基蓝的混合液，当溶液 流至石英砂面时，立即用少量的95% 乙醇清洗下管壁的有色物质，如此 连续2-3次，直至洗净为止；
实验步骤
• 4. 洗脱：用95%乙醇作洗脱剂 进行洗脱，当色谱柱内出现 明显谱带即可；
2．溶剂
色层的展开首先使用极性较小的 溶剂，使最容易脱附的组分分离， 然后加入不同比例的极性溶剂配 成的洗脱剂，将极性较大的化合 物洗脱下来。
实验用试剂
• 20cm×1cm层析柱； • 吸附剂：中性氧化铝100-200目；石英砂； • 荧光黄和亚甲基蓝的混合液；95％乙醇；
实验装置
当加入的洗脱剂流下 时，由于不同化合物 吸附能力不同，因而 以不同的速度沿柱向 下流动，继续洗脱时 ，吸附能力弱的组分 随溶剂首先流出。在 连续洗脱过程中，不 同组分或不同色带就 能分别收集，从而达 到分离纯化的目的
较大量的液体做固定相，而支持剂本身不起分离作用。
1．吸附剂
➢常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、氧化镁、碳酸钙等 ➢吸附剂应经过纯化和活化处理，颗粒大小均匀 ➢吸附剂粒子越小、表面积越大，吸附能力就越高，
但颗粒太小，溶剂的流速就太慢，应根据需要确定。
大多数吸附剂都能强烈地吸水，而且水分易 被其它化合物置换，而使吸附剂的活性降低， 通常用加热的方法使吸附剂活化。