培养基配制使用记录
培养基的制备与细菌的接种的实验报告
培养基的制备与细菌的接种的实验报告篇一：细菌的分离纯化和接种实验环工综合实验细菌的分离纯化和接种实验实验报告环境科学与工程学院实验中心篇二：微生物实验报告细菌微生物实验报告题目年级专业实验者学号小组成员指导老师一、实验目的脓汁和粪便标本中病原菌的检测 2021级临床医学八年制1.了解细菌生长的基本营养条件，熟悉培养基的类型，学习并掌握培养基的原则与方法。
2.掌握无菌操作技术，掌握病原菌的分离与培养方法。
3.了解并比较细菌在固体、半固体和液体培养基的生长特征。
4.学习并掌握空气及人体细菌检测学方法。
5.掌握细菌涂片标本的制备以及革兰染色法，熟悉不同类型细菌的基本形态。
6.掌握糖发酵实验、抗菌素敏感性实验和血浆凝固酶实验的原理与方法。
7.从脓汁和粪便标本中分离培养和检测出病原体。
二、实验器材1.培养基的制备：干粉培养基、天平、蒸馏水、称量皿、药勺、锥形瓶、量筒、电炉、试管、洗耳球、试管筐、移液管、棉塞、牛皮纸、橡皮筋、手套、石棉网2.空气与人体体表细菌学检查：琼脂培养基、酒精、碘酒3.细菌的分离培养：脓汁标本、粪便标本、伊红美蓝平板、营养琼脂平板、接种环、酒精灯、打火机4.细菌的纯培养：接种环、酒精灯、打火机、中性笔、斜面培养基5.细菌的形态学检测：斜面培养物、营养肉汤、生理盐水、镜油瓶、拭镜纸、吸水纸、载玻片、显微镜、接种环、酒精灯、打火机、中性笔、革兰染色试剂、液体培养基6.细菌的生化试验：葡萄糖发酵管、乳糖发酵管、接种针、酒精灯、打火机、中性笔、菌液、营养琼脂平板、接种环、药物纸片（青霉素、庆大霉素、头孢曲松）、玻片、兔血浆、生理盐水7.细菌的血清学试验：玻片、福氏志贺菌诊断血清、生理盐水、接种环、酒精灯三、实验方法与步骤1.培养基的制备称量琼脂粉→蒸馏水→加热溶化→分装→集中放在试管筐里→罩上硫酸纸、牛皮纸→ 用橡皮筋扎好→放入讲台边的灭菌桶或灭菌筐内→送到高压蒸汽灭菌室（洗刷室）→灭菌2.空气与人体体表细菌学检查2.1空气的细菌学检查每组1个营养琼脂平板，选择实验楼女厕所→将平板盖打开，盖朝下放置在平板旁边→平板暴露于空气中15分钟→平板倒扣盖上→作标记→37℃温箱培养24小时→观察结果。
培养基配制SOP
培养基配制SOP1.目的确保各种培养基及稀释液配制过程标准、规范。
2.范围2.1.本SOP适用于pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液的配制，pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液可作为供试品稀释液。
2.2.本SOP适用于营养肉汤培养基的配制，营养肉汤培养基用于一般细菌培养。
2.3.本SOP适用于改良马丁培养基的配制，改良马丁培养基用于生物制品无菌试验，检查真菌和腐生菌。
2.4.本SOP适用于改良马丁琼脂培养基的配制，改良马丁琼脂培养基用于生物制品无菌试验，检查真菌和腐生菌。
2.5.本SOP适用于硫乙醇酸盐流体培养基的配制，硫乙醇酸盐流体培养基用于药品及生物制品等的无菌试验，检查需氧菌和厌氧菌。
2.6.本SOP适用于玫瑰红钠琼脂培养基的配制，玫瑰红钠琼脂培养基用于霉菌总数测定。
2.7.本SOP适用于营养琼脂培养基的配制，营养琼脂培养基用于一般细菌培养。
2.8.本SOP适用于胰酪胨大豆肉汤培养基的配制，胰酪胨大豆肉汤培养基用于真菌、需氧菌无菌检查。
2.9.本SOP适用于0.1％蛋白胨水溶液配制，0.1％蛋白胨水溶液可作为供试品稀释液。
2.10.本SOP适用于胰酪胨大豆琼脂培养基的配制，用于一般细菌分离培养。
2.11.本SOP适用于品红亚硫酸钠琼脂培养基的配制，用于饮用水、水源水中总大肠菌群的选择性分离和鉴别。
2.12.本SOP适用于酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基的配制，用于含蜜浆剂酵母菌数测定。
3.定义无4.职责4.1.QC负责本规程的起草、修订、培训及执行；4.2.QA、QC组长质量管理部经理负责本规程的审核；4.3.质量总监负责批准本规程；4.4.QA负责本规程执行的监督。
5.引用标准厂家说明书6.材料6.1.pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液（干粉），营养肉汤培养基（干粉），改良马丁培养基（干粉），改良马丁琼脂培养基（干粉），硫乙醇酸盐流体培养基（干粉），玫瑰红钠琼脂培养基（干粉），营养琼脂培养基（干粉），胰酪胨大豆肉汤培养基（干粉），蛋白胨（干粉），胰酪胨大豆琼脂培养基（干粉），酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基（干粉），品红亚硫酸钠琼脂（干粉）。
061-00 R2A琼脂培养基培养基适用性检查记录
培养基来源
批号
配制编号
报告日期
R2A琼脂对照培养基
检验依据
《中国药典》2015年版四部通则1105
pH检查
pH检查
检测温度：25℃
pH精密试纸（测量范围：），检测结果为（标准规定：±）
结论：□符合规定 □不符合规定
菌液制备
试验菌株
培养
铜绿假单胞菌[CMCC(B)10104]（菌种编号：）、枯草芽孢杆菌[CMCC(B)63501]（菌种编号：）接种于胰酪大豆胨琼脂培养基（配制编号：），
培养条件：培养箱（型号：，编号：），℃小时（标准：温度30～35℃，培养时间18～24小时）。
菌液
制备
□0.9%无菌NaCl溶液（配制编号：）
取铜绿假单胞菌的新鲜培养物，用9ml0.9%无菌NaCl溶液以10倍系列稀释，稀释
倍数为
使含菌量为≤
100CFU/ml
□取枯草芽孢杆菌的新鲜培养物，用9ml0.9%无菌NaCl溶液以10倍系列稀释，稀释
□一致□不一致
标准判定
被检固体培养基上的菌落平均数与对照培养基上的菌落平均数的比值应在0.5～2范围内，且菌落形大小应与对照培养基上一致。判该培养基的适用性检查符合规定。
结论
□符合规定□不符合规定
检验人：复核人：
倍数为
菌液
期限
□菌液制备后在室温下放置，在2小时内使用；
□保存在2～8℃，可在24小时内使用。
适用性检查
适用性检查
方法
1.分别取铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌此2种悬试验菌悬液各1ml（不大于100cfu∕ml），分别注入平皿中，立刻倾注15-20mL温度不超过45℃的胰酪大豆胨琼脂培养基，每株实验菌平行制备2个平皿。培养条件：培养箱（型号：，编号：），℃小时（标准：温度30～35℃，培养时间不超过3天），计数。
培养基的配制
一、实验所需的仪器设备和用具。
二、实验安排与要求：将全班若干小组（6-7人），每小组配制500 mlMS固体培养基，三、边示范边讲解实验方法和步骤1、计算并填写培养基成分单计算公式：∨母液＝∨配制÷母液倍数∨激素＝∨配制×培养基中所要求的激素浓度÷激素母液浓度2. 每组取500ml的烧杯一只，加300ml蒸馏水，用天平称4g琼脂放入蒸馏水中，在电炉上加热溶解。
称15g蔗糖放入溶解的琼脂中。
3. 按配方取出各种母液，放入到溶解后的琼脂和蔗糖溶液中，用玻璃棒搅动混合，并加蒸馏水定容至500ml。
4. 用1mol/L的NaOH或1mol/LHCL将PH值调至5.8，可用PH精密试纸或酸度计测定。
5. 用培养基分装用具将500ml的培养基分注于15个所选用的培养瓶中。
6. 用封口膜、棉塞或其它封口物包扎瓶口，并做好标记。
7. 把分装好的培养基及所需灭菌的各种用具、蒸馏水等，放入高压灭菌锅的消毒桶内，将外层锅内加水至水位线。
盖好锅盖，上好螺丝，接通电源升温。
待锅内温度达100。
C（0.05kgf/cm2或0.005MPa）左右时，打开排气阀排净锅内冷空气，然后关闭排气阀，继续加热至温度达到121。
C（1.05kgf/cm2或0.103MPa）时，维持20~30min即可切断电源，让锅内气压自然下降，当压力降到零点后，打开排气阀，排出剩余蒸汽，再打开锅盖取出培养基及灭菌物品。
8. 培养基及灭菌物品在室温下自然冷却后，存放于阴凉干燥洁净处待用。
四、总结高压蒸汽灭菌的原理和一般操作步骤实验试验一：培养基的配制学号：200730030120 班级专业：07茶学姓名：张晓菊联系电话：136****3981实验目的：1、了解培养基的组成，掌握培养基的配制原理和步骤。
2、了解影响培养基配制的因素。
3、了解灭菌基本操作。
4、为植物的离体培养创造营养条件。
实验原理：培养基的类别，依据培养基中是否加有固化剂可分为固体培养基和液体培养基，前者因加有固化剂如琼脂或卡拉胶而呈固体状态，后者不加固化剂，培养基为液体。
TSB培养基的配制操作规程
目的Purpose建立TSB培养基配制操作规程，使操作规范化、科学化。
适用范围与通则Scope and general rule在1#生产车间进行TSB培养基配制操作。
责任人Responsibility在1#生产车间进行TSB培养基配制操作的所有人员要遵循本规程。
本文件起草人、班组负责人与生产主管负责本规程的适用性。
程序Procedure目录Contents1.按十万级更衣程序进入配液室,洗手、消毒手臂。
2.配液前物料准备。
2.1根据所配制的体积量，准备需要的容器（洁净的Carboy瓶）、玻璃棒、天平等。
2.2 检查注射用水的电导率是否符合要求。
3.配制：3.1根据所配制的体积量，按照使用说明称取胰蛋白胨大豆肉汤干粉。
以1L为例：量取1L注射水，加入30g胰蛋白胨大豆肉汤，进行加热煮沸溶解，待其充分煮沸溶解后，进行分装，待高压或过滤除菌。
3.2过滤除菌：配制结束后通知万级洁净区班组人员进行过滤除菌。
发文号issued No:____________________复印号Controlled Copy No:______________________3.3高压灭菌：按照高压灭菌柜的操作规程进行溶液121℃，15分钟高压灭菌。
4.清场:将用过的Carboy瓶转出配液间，用洁净消毒抹布、拖布对配液间台面、地面、仪器设备进行清洁消毒，确保无污迹。
垃圾分类后由专用通道转出洁净区。
清洁用具清洗后放指定位置备用。
班组负责人检查合格后挂“已清场”。
5.填写记录。
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培养基配制使用记录
本批灭菌培养基随机抽取5支15 ml置30-35℃培养14天（ 月 日至 月 日）。结果 菌生长。
培养基制备记录 编 号：
培养基名称
营养琼脂培养基
生产批号
PH
制备日期
制备地点
化验室
制备人
培 养 基 制 备
1．取上述脱水培养基 g，加纯化水 ml，微温加热搅拌，使其完全溶解，搅均分装；
以121℃ 灭菌30分钟。
2．将上述培养基的批号定编为 ，贴上品名及批号标签。
3．上述培养基一般临用现配；或将制备好的培养基保存于非密闭容器中，一般在三周内使用。
无菌检验用培养基需进行无菌性检查：
本批灭菌培养基随机抽取5支15 ml置23-28℃培养14天（ 月 日至 月 日）。结果 菌生长。
培养基制备记录 编 号：
以121℃ 灭菌30分钟。
2．将上述培养基的批号定编为 ，贴上品名及批号标签。
3．上述培养基一般临用现配；或将制备好的培养基保存于非密闭容器中，一般在三周内使用。
无菌检验用培养基需进行无菌性检查：
本批灭菌培养基随机抽取5支15 ml置30-35℃培养14天（ 月 日至 月 日）。结果 菌生长。
培养基制备记录 编 号：
以121℃ 灭菌30分钟。
2．将上述培养基的批号定编为 ，贴上品名及批号标签。
3．上述培养基一般临用现配；或将制备好的培养基保存于非密闭容器中，一般在三周内使用。
检验用培养基需进行无菌性检查：
本批灭菌培养基倾注15-20ml至一个不加样品的灭菌空平皿中作空白对照，置30-35℃培养3天（ 月 日至 月 日）。结果 菌生长。
培养基制备记录 编 号：
培养基名称
培养基配制标准操作规程
培养基配制标准操作规程一、目的：规范培养基配制操作流程，确保培养基的质量符合要求。
二、适用范围：本规程适用于实验室培养基配制操作。
三、岗位责任（1）实验员：根据实验需要，按照配方准确称量试剂，按照标准操作流程进行配制，保证培养基的质量。
（2）实验室主任：对实验员所配制的培养基进行审核，对质量不符合要求的培养基要求实验员进行整改，并记录在实验室日志中。
四、基础设施和基本设备实验室应配备足够的天平、电子计时器、玻璃棒、玻璃瓶、蒸馏水机、高压灭菌器等基础设备及设施。
五、培养基配制操作流程（1）准备试剂应先仔细阅读所选培养基的配方，根据试剂名称和精确剂量，准备称量瓶、试剂架、天平等计量仪器。
配制时应避免手触、相沾等操作，避免交叉污染。
（2）称量试剂初次粗择试剂后，建议先将试剂转移到称量室中，配合现代科技的天平，便可精确计算配比比例。
所有试剂称重时必须使用内配计量，不能使用外配以避免误差增大影响试剂配比。
（3）配制溶液将所需试剂依照标准配比和数量先加入容器，再用分度水小心勾兑均匀，用方法如下：先将容器中整量标容量的水加入到标记线以下。
然后倒入试剂，如对称量试剂的总质量要求是1000 ml，而已注入200 ml水时，即将剩余的实验试剂灌入到950毫升，再次将液面加到1000毫升，如此反复操作完整。
（4）用自来水采样，并抽真空去泡水样的采集，我们应该在步入实验室后在首先采用自来水进行放置，保留水样大概20分钟后，用玻璃棒试管器分别进行抽取。
培养基液体所产生的泡沫和气泡需要用抽真空的方式去除，以确保培养基的质量。
（5）实验室水龙头口淋洗容器本次所述的辛勤劳累的操作一旦完成，容器内部的物质已经被彻底摧毁，真正变成了医学科学上可行的培养基，此时我们应该用干净的管子将洗涤水彻底排完，真正保障实验室完全无菌的标准。
（6）高压灭菌用高压灭菌锅进行消毒，根据不同的材质和设备使用说明，对耐高温不锈钢的容器用121度高压灭菌20分钟，可以保证彻底去除培养基中的细菌。
培养基管理规程
1.目的建立培养基的管理规程，确保产品的无菌及微生物限度检查结果真实可靠。
2.范围适用于实验室使用的培养基的管理。
3.职责3.1.实验员及实验室管理员负责对本制度实施。
3.2.QA负责监测本规程的执行。
4.规程4.1.种类和要求：本实验室无菌检查和微生物限度检查所使用的培养基均为脱水、干燥的商品培养基，商品培养基应有处方、使用说明和质量报告书。
培养基包括硫乙醇酸盐流体培养基、胰酪大豆胨液体培养基、胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖液体培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基等培养基，要求来源于正规的生产厂家。
4.2.培养基的购买:岗位实验员要根据培养基使用情况及剩余量及时向部门领导提出申购，经部门领导审批后方可购买。
应当从可靠的供应商处采购，生产厂家应尽量稳定，必要时应当对供应商进行评估；一次购入量不宜过多。
4.3.培养基的接收：培养基购进后，由岗位实验员负责接收，并及时填写《培养基接收登记表》（附件1），如培养基标签未标注效期，则应当在培养基的容器上标注接收日期。
4.4.培养基的保管4.4.1.培养基性状均为粉末，有特殊气味，容易受潮。
岗位实验员负责核对品名、数量后，按标签的要求于阴凉干燥处贮存，防止光照，潮湿。
4.4.2.储存期限:新购进未开瓶的干粉培养基按厂家说明书上的储存期限储存。
开口后的干粉培养基的储存条件和效期均按说明书上的规定执行。
4.4.3.开封后的干粉培养基使用后用3M封口膜缠绕密封。
4.5.培养基的使用4.5.1.在制备培养基时，应按使用说明上的要求操作配制，每次配制前应检查脱水培养基是否变质，如结块、变色、变味等，不得使用结块或颜色发生改变的脱水培养基。
每次使用需在需登记《培养基领用记录》（附件2）。
4.5.2.培养基配制时应准确称量脱水培养基，并做好记录，配制培养基所用容器和配套器具应洁净，配制培养基的溶剂为去离子水或纯化水。
脱水培养基应完全溶解于水中，再进行分装与灭菌。
配制时若需要加热助溶，应注意不要过度加热，以避免培养基炭化颜色变深。
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培养基制备记录编号：
培养基名称
改良马丁培养基
生产批号
PH
制备日期
制备地点
化验室
制备人
培养基制备
1．取上述脱水培养基g，加纯化水ml，微温加热搅拌，使其完全溶解，搅均分装；
以121℃灭菌30分钟。
2．将上述培养基的批号定编为，贴上品名及批号标签。
3．上述培养基一般临用现配；或将制备好的培养基保存于非密闭容器中，一般在三周内使用。
2．将上述培养基的批号定编为，贴上品名及批号标签。
3．上述培养基一般临用现配；或将制备好的培养基保存于非密闭容器中，一般在三周内使用。
无菌检验用培养基需进行无菌性检查：
本批灭菌培养基随机抽取5支15ml置30-35℃培养14天（月日至月日）。结果菌生长。
培养基制备记录编号：
培养基名称
营养肉汤培养基
生产批号
无菌检验用培养基需进行无菌性检查：
本批灭菌培养基随机抽取5支15ml置23-28℃培养14天（月日至月日）。结果菌生长。
培养基制备记录编号：
培养基名称
改良马丁培养基
生产批号
PH
制备日期
制备地点
化验室
制备人
培养基制备
1．取上述脱水培养基g，加纯化水ml，微温加热搅拌，使其完全溶解，搅均分装；
以121℃灭菌30分钟。
1．取上述脱水培养基g，加纯化水ml，微温加热搅拌，使其完全溶解，搅均分装；
以121℃灭菌30分钟。
2．将上述培养基的批号定编为，贴上品名及批号标签。
3．上述培养基一般临用现配；或将制备好的培养基保存于非密闭容器中，一般在三周内使用。
无菌检验用培养基需进行无菌性检查：
本批灭菌培养基随机抽取5支15ml置30-35℃培养14天（月日至月日）。结果菌生长。
本批灭菌培养基随机抽取5支15ml置30-35℃培养14天（月日至月日）。结果菌生长。
培养基制备记录编号：
培养基名称
营养肉汤培养基
生产批号
PH
制备日期
制备地点
化验室
制备人
培养基制备
1．取上述脱水培养基g，加纯化水ml，微温加热搅拌，使其完全溶解，搅均分装；
以121℃灭菌30分钟。
2．将上述培养基的批号定编为，贴上品名及批号标签。
PH
制备日期
制备地点
化验室
制备人
培养基制备
1．取上述脱水培养基g，加纯化水ml，微温加热搅拌，使其完全溶解，搅均分装；
以121℃灭菌30分钟。
2．将上述培养基的批号定编为，贴上品名及批号标签。
3．上述培养基一般临用现配；或将制备好的培养基保存于非密闭容器中，一般在三周内使用。
无菌检验用培养基需进行无菌性检查：
PH
制备日期
制备地点
化验室
制备人
培养基制备
1．取上述脱水培养基g，加纯化水ml，微温加热搅拌，使其完全溶解，搅均分装；
以121℃灭菌30分钟。
2．将上述培养基的批号定编为，贴上品名及批号标签。
3．上述培养基一般临用现配；或将制备好的培养基保存于非密闭容器中，一般在三周内使用。
无菌检验用培养基需进行无菌性检查：
检验用培养基需进行无菌性检查：
本批灭菌培养基倾注15-20ml至一个不加样品的灭菌空平皿中作空白对照，置30-35℃培养3天（月日至月日）。结果菌生长。
培养基制备记录编号：
培养基名称
营养琼脂培养基
生产批号
PH
制备日期
制备地点
化验室
制备人
培养基制备
1．取上述脱水培养基g，加纯化水ml，微温加热搅拌，使其完全溶解，搅均分装；
以121℃灭菌30分钟。
2．将上述培养基的批号定编为，贴上品名及批号标签。
3．上述培养基一般临用现配；或将制备好的培养基保存于非密闭容器中，一般在三周内使用。
3．上述培养基一般临用现配；或将制备好的培养基保存于非密闭容器中，一般在三周内使用。
无菌检验用培养基需进行无菌性检查：
本批灭菌培养基随机抽取5支15ml置30-35℃培养14天（月日至月日）。结果菌生长。
培养基制备记录编号：
培养基名称
硫乙醇酸盐流体培养基
生产批号
PH
制备日期
制备地点
化验室
制备人
培养基制备
培养基制备记录编号：
培养基名称
硫乙醇酸盐流体培养基
生产批号
PH
制备日期
制备地点
化验室
制备人
培养基制备
1．取上述脱水培养基g，加纯化水ml，微温加热搅拌，使其完全溶解，搅均分装；
以121℃灭菌30分钟。
2．将上述培养基的批号定编为，贴上品名及批号标签。
3．上述培养基一般临用现配；或将制备好的培养基保存于非密闭容器中，一般在三周内使用。
3．上述培养基一般临用现配；或将制备好的培养基保存于非密闭容器中，一般在三周内使用。
无菌检验用培养基需进行无菌性检查：
本批灭菌培养基随机抽取5支15ml置30-35℃培养14天（月日至月日）。结果菌生长。
培养基制备记录编号：
培养基名称
营养琼脂培养基
生产批号
PH
制备日期
制备地点
化验室
制备人
培养基制备
1．取上述脱水培养基g，加纯化水ml，微温加热搅拌，使其完全溶解，搅均分装；
以121℃灭菌30分钟。
2．将上述培养基的批号定编为，贴上品名及批号标签。
3．上述培养基一般临用现配；或将制备好的培养基保存于非密闭容器中，一般在三周内使用。
检验用培养基需进行无菌性检查：
本批灭菌培养基倾注15-20ml至一个不加样品的灭菌空平皿中作空白对照，置30-35℃培养3天（月日至月日）。结果菌生长。
无菌检验用培养基需进行无菌性检查：
本批灭菌培养基随机抽取5支15ml置30-35℃培养14天（月日至月）。结果菌生长。
培养基制备记录编号：
培养基名称
营养肉汤培养基
生产批号
PH
制备日期
制备地点
化验室
制备人
培养基制备
1．取上述脱水培养基g，加纯化水ml，微温加热搅拌，使其完全溶解，搅均分装；
以121℃灭菌30分钟。
本批灭菌培养基随机抽取5支15ml置23-28℃培养14天（月日至月日）。结果菌生长。
培养基制备记录编号：
培养基名称
硫乙醇酸盐流体培养基
生产批号
PH
制备日期
制备地点
化验室
制备人
培养基制备
1．取上述脱水培养基g，加纯化水ml，微温加热搅拌，使其完全溶解，搅均分装；
以121℃灭菌30分钟。
2．将上述培养基的批号定编为，贴上品名及批号标签。
2．将上述培养基的批号定编为，贴上品名及批号标签。
3．上述培养基一般临用现配；或将制备好的培养基保存于非密闭容器中，一般在三周内使用。
无菌检验用培养基需进行无菌性检查：
本批灭菌培养基随机抽取5支15ml置23-28℃培养14天（月日至月日）。结果菌生长。
培养基制备记录编号：
培养基名称
改良马丁培养基
生产批号