猪弓形虫病的诊疗报告
一起猪弓形虫病诊治报告
第 ３ 卷 第 ５ ４ 期
２ １ 年 ０２
一
起猪 弓形 虫病诊
福 建省 明溪 县动 物疫 病预 防控 制 中心 ３５ ０ ６２ ０
文 章 编 号 ： ０ ３ ４ ３ （０ ２ ０ — ０ ７ ０ １０ — ３ ２ １） ５ ０ ６ — ２ １
郑 建新
文 献 标 识 码 ： Ｂ
８ 小 结与讨 论 １ 夏季 是 猪 弓形 虫病 多 发 季 节 ， 病 临床 症状 ） 该
患猪精神沉 郁 ， 欲减退甚 至废绝 ， 温 ４～ 食 体 ０
４ ２℃， 稽 留热 ， 秘 ， 的腹 泻 ， 吐 ， 呈 便 有 呕 呼吸 困难 ， 呈 腹 式呼 吸或 犬坐姿 势 ， 耳尖 、 端 、 下 皮肤 发红 ， 肢 腹
５ 诊 断
复杂 ， 与 引起 高热 、 吸 困难 、 应 呼 皮肤 发 红 、 绀 的猪 发 瘟 、猪肺 疫 、猪链 球 菌病 等传染 病疾 病进 行 鉴别诊
断， 需要 进行 综合 分析 才 能作 出正确 判 断 。 ２ 加 强屠 宰 场 弓形 虫 检 验 ， 现 患 畜及 其 内脏死亡 。 ３ 病理 变 化
剖检 １ 头濒 临死 亡育 肥猪 ， 体表 淋 巴结肿 大 ， 见
胸 腔 内有 少 量黄 色 透 明液 体 ， 包 积 液 ； 肿 大 ， 心 肝 表 面 有少 量 白色坏 死 点 ； 水肿 出血 ， 间质 增 宽 ， 肺 肺 内
弓形虫病 是 由龚 地 弓形 虫引起 的人 兽 共患 原虫 病， 呈世 界性 分布 。猪 暴 发此病 ， 常引起 整个 猪群 发 病 ， 同阶段 的猪均 易感 ， 不 危害性 极大 ， 养猪业 造成 给 很大 损失 。２ １ ０ ０年 ７月下 旬某个 体养 猪场 育肥猪 发
一例猪弓形虫病的诊疗报告
2019年第04猪弓形虫病是一种较常见的人畜共患传染病，一旦感染可快速蔓延整个猪场。
2018年11月我辖区某饲养户的猪只突然发病，病猪出现咳嗽、体温升高、呼吸困难、皮肤有斑点等症状，经临床及实验室等检测确诊为猪弓形虫病，经治疗，取得了良好效果。
现汇报如下。
1发病情况我们管辖范围内的某养猪场饲养了200多头猪，其中30余头是2月龄。
2018年11月，有20余头仔猪出现精神抑郁、食欲不振或废绝、咳嗽、流鼻液和腹式呼吸等症状。
病情严重的仔猪呈犬坐姿。
体温为40~42℃，眼结膜呈红色，眼睑分泌物较多，有干硬粪便排出。
严重的皮肤有出血斑，腹部下方明显，大部分淋巴结肿大呈棒状。
户主曾注射过清热解毒、抗病毒、抗菌素等相关药物，无效果，疫情继续扩散，有4头病情严重的仔猪死亡。
2临床症状猪急性感染后，潜伏期3~7d，体温升高至40.5~42℃，稽留热可持续7~10d，食欲不振，后肢站立不稳。
走路摇晃，喜欢卧地，鼻镜干燥，被毛粗糙，呈腹部呼吸或犬坐式呼吸。
随着病情的发展，耳、鼻、后肢内侧和下腹皮肤出现紫色红斑或出血点。
病程严重者，病程持续10~15d，呼吸出现严重困难，后躯颤抖或卧地不起。
急性猪一般在2周后恢复，但极易出现僵猪。
怀孕母猪如感染时急性弓形虫病，临床常出现高烧、不进食、精神痛苦等症状，症状持续数天后会产出死胎，畸形怪胎或流产。
生下来活仔猪常会出现急性死亡或发育不全。
3病理变化对濒临死亡的猪进行病理剖解，可见仔猪膘情发育良好，鼻子、耳朵及眼结膜发绀，腹部下有较大的血斑。
腹腔、胸腹有大量的黄色液体。
肺体积增大，水肿严重，肺表面明显变宽，肺表面附着在一层胶冻样物质，大量液体和少量气泡从切片中排出。
肠系膜淋巴结呈紫红色样肿大，腹股沟淋巴结、下颌淋巴结肿大、充血、出血、暗红、大理石样改变。
胃底溃疡面积大，溃疡表面附着，脾脏血斑，肝灰黄色病变，膀胱粘膜血斑。
4实验室诊断取肺门、肠系膜淋巴结切片，自然干燥，染色，用油镜观察多个目视区域，发现香蕉状或新月形弓形虫，其细胞质为浅蓝色，有颗粒，细胞核呈深蓝紫色，偏于钝圆一端。
一例猪弓形虫病的诊治报告
１ 临床 症状
２ ０ １ ５年 ０ ５月 １ ６日， 本人 接 到大 谭镇 大谭 村 严 某 电话 ， 所饲养 ５ ０只 仔 猪 ， 皮 肤 均 出现 紫 红 斑 块 ，
且病猪有高烧 、 精神沉郁现象 。 仔细 检查 病猪 ， 是 ３月龄 仔猪 。整个 猪 群 ， 每 头 病猪体表均 出现了紫色斑块 、 眼结膜 、 鼻粘膜 、 口腔 粘膜高度发绀 、 体温高 ， 达到 ４ ０ — ４ ２ ％、 鼻镜干燥 ， 流 出浆液性 、 粘液性 、 脓性鼻涕 、 咳嗽 、 呼吸困难 、 全身
４ 防 治
４ ． １ 治
疗
磺胺 一 ６ 一甲氧 嘧啶 ， ６ ０ 一 ｌ Ｏ Ｏ ｍ ｇ ／ ｋ ｇ ・ ｂ ｗ
引起的猪 弓形虫病。 将 死后的 ２头病 猪剖检发现 ：全身淋 巴结 肿 大、 出血 、 肝脏 有 点状 出血 、 并 有 灰 白色或 灰黄 色 的 坏 死灶 ， 脾脏 、 肺脏 、 肾脏 、 胃部 均 有 不 同程 度 的 出 血， 胸腔 、 腹腔 、 心包有积水。将淋 巴结切开后 ， 切取
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车前 子各 ６ ｇ ， 滑石 １ ２ ｇ ， 甘草 １ ６ ｇ 。１ 剂／ ｄ ， 加水煎 ２
次， 分 ２次 喂 服 ， 连用 ３ 剂。
行规范的隔离 ， 严防疾病的传播与流行 。 ６ ． ２ 引种 的仔猪 除 了隔离外 还是要 按 照要 求进 行免 疫接种 ， 并注意猪舍的防寒保温 、 通风 ， 并经常对猪 产生的粪便等污染物进行及时的清理、 消毒 ， 保持猪 舍环境的健康卫生 ， 减少饲喂高蛋白质类饲料 ， 要保 证 饲料供 给的全价 均衡 。发现病 例应及 时进 行治疗 ， 做 到早发 现早治疗 ， 减 少疾病 带来 的经济损失 。 ６ ． ３ 在病 发初 期 可适 量投 服 泻盐 类泻 剂等 药 物 ， 以 促进 胃肠的蠕动与分泌 ， 以便排 出肠 内容物 ， 抗 菌 类 药 物也 可 使用 ， 但 不 能单 一 使 用某 一 种抗 菌 消 炎 药， 对 于 该 病应 采取 综 合 的对 症 疗法 进行 治 疗 可 取
一例猪弓形虫病的诊治报告
本次疫情由弓形虫强毒株引起遥 弓形虫往往被误认为是 某种传染病而采用抗生素类治疗．因此出现暴发性蔓延院弓 形虫疫苗已基本研制成功袁养殖场应重视本病的防治遥 弓形
这两种疾病都属于病毒感染性疾病袁 一般情况下每隔 2～3 年是一个发病循环袁但由于发病规律难以掌握袁因此需 要在进入秋季时对母猪注射疫苗遥 如果发病袁成年猪可注射 抗生素,并补充维生素袁一般经药物治疗 5～7d 可恢复遥 但是 没有断奶的幼猪感染发病袁死亡率较高而且无特效药治疗遥 4 猪繁殖和呼吸障碍综合症渊 蓝耳病冤
该病的典型临床症状为母猪生产性能下降袁仔猪体质变 差袁贫血袁肠道及呼吸道感染增加遥 育肥猪病初精神萎顿袁体 温升高至 39.5～42℃袁颤抖转圈或不愿站立袁离群卧地袁便秘 或拉稀遥 病猪耳尧颈下尧胸前尧腹下尧四肢内侧等部位皮肤红 紫,指压不褪色遥 治疗可用血虫净渊 贝尼尔冤 尧阿散酸配合长效 土霉素袁同时补充饲喂生血的药物或饲料添加剂遥 2 猪链球菌病继发混合感染
全身淋巴结肿大尧充血尧出血袁切面湿润并呈髓样肿胀袁 有的有白色米粒大坏死灶曰肺出血袁间质明显水肿曰肝有点状 出血和灰白色或灰黄色坏死灶曰脾有丘状出血点曰胃底部出 血袁有溃疡曰肾有出血点和坏死灶曰大尧小肠均有出血点曰心 包尧胸腹腔有积水遥 主要的病理组织学变化为局灶性坏死性 肝炎和淋巴结炎袁非化脓性脑膜炎袁肺水肿和问质性肺炎遥 急 性死亡者坏死部分及其周围有多量虫体遥 5 实验室诊断
取病猪肺尧脾尧肝等触片袁自然干燥袁甲 醇固定．姬姆萨染色袁镜检袁于肺触片中发现呈香蕉形的弓 形虫滋养体遥
将取自小白鼠腹水或组织培养液所得的 游离的弓形虫袁 分别放在正常血清和待检血清中袁 经 1~2h 后袁取出虫体各加碱性美蓝染色遥 正常血清中的虫体结合良 好袁而待检血清中的虫体染色不良则为阳性遥 6 防治措施
一例猪弓形体病的诊治报告
７ 猪 场 兽 医 ６．
ＬＶ Ｓ Ｏ ＫＡ ＯＰ ｕ Ｔ Ｙ｜Ｄ ｓ Ｒ ｏ２ ３ ｜Ｅ Ｔ ｃ Ｎ ｏ Ｌ Ｒ Ｎ Ｕ Ｔ Ｎ ６ பைடு நூலகம்
．
妊娠 母 猪 多发 。 猪 ＇ 吸 困 难 ． 明显 病 呼 呈
ｍ２育 肥 舍 ０８ ／ ； 一 饲 养 单 元 以 ： ．头 ｍ２每
气 病 弱 毒 冻 干 疫 苗 ． 行 紧急 预 防 。 进
肺脏 膨 大 ． 不 同程 度 的 气 肿 和 水肿 ． 有
体 肺 炎 的发 生 具 有 显 著效 果 猪 ｌ 仔 ２
周 龄 时 首免 ． １周 龄时 二 免 每 头耳 ８ １
猪 场 发 生 支 原 体 肺 炎病 时 ．应 按
照《 中华 人 民共 和 圜动 物 防 疫 法 》 的规
一
６ １ 加 强 饲 养 管理 ． 为猪 提 供 优 良的 生 活环 境 ．保 证
圈 舍 的 空气 清 新 、 风 条 件 良好 、 境 通 环
温 度 和饲 养 密 度 适 宜 ．这 是 有 效 的 预
防 和控 制 方 法
少 地 方 发 现 了猪 的 弓形 虫 病 ．当 猪暴
般猪 急性 感 染 后 ． ～ 的 潜 经３ ７ｄ
鉴 别 诊 断 主要 注 意与 猪 流 行 性 感
杨正伟（ 四川 省 阐 中市石 龙 镇 畜 牧 兽 医站 ， 阆 中 ６ ７ ２ ） 四川 ３ ４ ９ 中 图分 类号 ：８ ８ ８ 文 献标 识 码 ： ￥５ ． ２ Ｂ
冒 、 肺 疫 、 肺 丝虫病和猪 蛔虫病 ， 猪 猪 以及 传 染 性 胸膜 肺 炎 、 肺 疫 、 支 原 猪 猪 体肺 炎 、 肺 炎 、 支 气 管 炎相 鉴 别 。 猪 猪
１ ～ ３ 为 宜 注 意 防 止 猪 群 过 度 拥 ０ １头
猪弓形虫病的诊疗报告
猪弓形虫病的诊疗报告作者：游莺来源：《福建畜牧兽医》 2017年第5期猪弓形虫病的诊疗报告游莺福建省福清市畜牧兽医中心玉屏畜牧兽医站福建福清 350300摘要 2017年福清市某猪场母猪发生体温升高和死亡病例。
根据发病情况、临床症状、病理剖检以及实验室检查，确诊为猪弓形虫病。
经采取综合治疗措施，病情很快得到控制。
关键词猪弓形虫病诊断综合治疗文献标识码：B文章编号：1003-4331（2017）05-0055-01福清市某猪场存栏生产母猪300多头，2017年8月上旬其中一些母猪发生一种以高热、皮肤发绀、流产、精神萎顿、食欲废绝为特征的疾病，病死率接近4%，损失严重。
根据临床症状、病理变化和实验室检查等，确诊为猪弓形虫病，现将病例报告如下。
1 发病情况2017年8月7日上午，该猪场母猪群部分怀孕母猪出现不食或少吃，体温41 ℃左右，精神萎顿。
猪场兽医曾使用青霉素、氨基比林等药物进行治疗2~3 d，但病情得不到控制，越来越多母猪出现不吃。
于12日上午发现3头母猪死亡，下午又死亡4头，此外流产5头。
13日再死亡4头，病死率达3.7%。
2 临床症状患猪精神萎顿，食欲减退甚至废绝，喜卧，体温升高至40.6~41.5 ℃、呈稽留热，渴欲增加，粪便干结、带有黏液，肠黏膜脱落，尿呈桔黄色，眼结膜充血，呼吸困难、呈腹式呼吸，个别患猪有咳嗽症状，鼻腔流出少量鼻液，身体下部及会阴部皮肤有淤血斑或较大面积紫斑，病程稍长的怀孕母猪出现流产，有的患猪出现后躯麻痹，运动障碍斜颈，不愿行走。
3 病理剖检剖检死亡母猪3头，总体表现为：（1）肺脏出现广泛性小灶状坏死病变，肺小叶间质增宽，呈暗红色，充血，肿胀，内含多量浆液，切面流出大量带泡沫的浆液。
（2）腹股沟淋巴结明显肿大，切面有出血点和灰白色坏死点，特别是肠系膜淋巴结最为显著。
（3）肝脏肿胀、充血，表面可见有散在性针尖至黄豆大小的灰白色坏死灶。
（4）脾脏显著肿大，有少量出血点。
一例猪弓形虫病的诊治报告
2018年第4期问题必须得到解决。
在解决过程中可以从管理体制的健全、国家资金的支持的加强、给养殖户普及相关的免疫知识等等几方面入手，将基层的畜牧兽医防疫体系进行完善，有效推动基层经济的发展速度。
参考文献[1]玉珠卓玛.对基层畜牧兽医防疫体系建设的研究[J].农村经济与科技，2016，（2）：32-33.[2]谭启光.对基层畜牧兽医防疫体系建设的研究[J].畜牧兽医科技信息，2015，（09）：40-41.猪弓形虫病是一种人、畜共患的血液原虫病，不同年龄、不同性别的猪均可发病，幼年猪和育肥猪最易感染，常可引起整个猪场发病，仔猪死亡率可高达80%以上。
怀孕母猪感染后可引起发热、流产、早产和死胎。
2017年7月，我市某猪场的部分育肥猪出现高热、呼吸困难、不食等症状，并且在鼻端、下肢、下腹等处出现紫红斑，经临床检查、病理剖检及实验室检查诊断为猪弓形虫病，现将诊治情况报告如下：1发病情况该猪场饲养育肥猪130头，2017年7月，有几头猪发病，表现为食欲下降，体温升高，呼吸不畅，按呼吸道疾病使用抗生素进行治疗，效果不明显，随着病情况发展，猪群中发病猪只增多，而且有3头瘦小体弱的病猪出现了死亡。
2临床症状病猪精神沉郁，少食或不食，体温升高，呈稽留热，呼吸困难，咳嗽，流鼻液，在耳尖、鼻端、下肢和腹底的皮肤上出现紫斑，粪便干，表面覆盖脱落的肠黏膜。
发病后期，病猪后肢无力，行走不稳，出现共济失调，最后因呼吸衰竭而死亡。
3病理剖检病死猪体表皮肤呈紫红色，剖检可见全身淋巴结肿大，质地硬结，尤其肠系膜淋巴结肿大较为明显，切开有硬脆感，切面呈灰红色或者砖红色；肺脏呈灰白色，严重水肿、充血，切面流出大量的液体，气管内存在大量红色泡沫；肝脏表面有点状出血，肿大、质脆，有大小不等的灰白色坏死斑点；脾脏肿大，褐红色，表面有黄豆粒大小的突起；肾外膜有少数出血点，表面有灰白色坏死小点及出血小点；肠道充血，肠黏膜上可见到扁豆大小的坏死灶，肠腔和腹腔内有多量渗出液。
猪弓形体病的诊治报告
猪弓形体病的诊治报告大安市某饲养场是多年从事养猪的国营牧场，每年都注射口蹄疫和猪瘟、猪肺疫、仔猪副伤寒等疫苗，未曾发生过流行病。
今年5月1日第3群中3头仔猪突然发病，而后除种公猪群外相继都发病，用抗生素不见效。
发病83头，发病率32.5%，死亡29头，死亡率34.9%。
1 临床症状病猪精神不振，体温41℃左右，眼结膜潮湿发红，并流出灰黄色粘液样分泌物。
下肢、下腹部有紫红斑，食欲减退乃至废绝，饮水少许。
呼吸加快，呈腹式呼吸及犬坐姿势。
妊娠母猪流产。
耐过病例有后躯不全麻痹，站立不稳，走道打晃及斜行等后遗症。
2 病理变化2.1 剖检变化剖检18例，多数下肢和下腹部呈紫红色。
肺体积稍肿大，肺小叶间质增宽，切面流出泡沫样液样。
肾、肝体积肿大，表面有小出血点和灰白色坏死点，肝小叶界限明显。
淋巴结肿大切面外翻，肠系膜淋巴结呈绳索状。
盲肠、结肠有散在的小米或高粱米大的中心凹陷的溃疡，其表面附有灰黄色伪膜。
2.2 组织学变化肺泡隔中大量细胞增生，肺泡壁增厚，其中有弓形虫假囊。
淋巴结边缘部分坏死，并有细胞浸润，其中偶尔见到弓形虫。
脾脏白髓明显变小，淋巴组织明显增生，亦有红细胞的弥漫性分布和含铁血黄素沉着。
肝小叶有坏死灶，其周边的肝窦内可见假囊。
肾小球呈现严重的颗粒变性和坏死。
3 诊断3.1 脏器涂片检查自然发病死亡的56号病猪肺脏涂片，进行姬姆萨液染色后，在油镜下看到吞噬细胞内的卑体和游离滋养体。
3.2 动物接种用自然发病死亡的39号病猪的肺、肝、生理盐水制成接种物。
10倍乳剂加双抗10001U/mL，吸取上清液给两只20g左右小白鼠腹腔接种0.5mL。
观察20d死亡，取腹腔液涂片，进行姬姆萨染色看到滋养体。
3.3 荧光抗体检查用自然发病死亡的319病猪的肺门淋巴结涂片，在室温下丙酮固定10min，用弓形虫荧光抗体直接染色37℃35min，0.02%尹文思兰染色1min，0.01MpH7.2的PBS洗10min，馏水冲洗1min后甘油封片，荧光显微镜下观察可见苹果绿色荧光的虫体，判为阳性。
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猪弓形虫病的诊疗报告摘要:对一例病猪进行了流行病学调查和实验室检查,结合血清学和聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction, PCR)方法进行病例检测,结果表明,该例病猪是由弓形虫(Toxoplasma gondii Nicolle & Manceaux)感染引起｡关键词:猪;弓形虫病;聚合酶链式反应;诊断弓形体又叫弓形虫､弓浆虫或毒浆虫(Toxoplasma gondii Nicolle & Manceaux),属于一种单细胞原虫,是引发弓形虫病的病原体｡病原体寄生在终末宿主猫科动物体内生长繁殖,形成卵囊并随宿主粪便排出体外,发育成熟而具有感染力｡具有感染力的卵囊污染食物和水源,被中间宿主(人或猪等多种动物)食入或饮入后,经淋巴和血液进入组织器官,并侵入有核细胞内,造成组织器官的严重损害和机体免疫力下降,而出现患病体征｡据相关统计资料表明,一般猪场猪群感染率在20%以上,有的高达60%,死亡率达60%~80%｡弓形虫病一年四季均可发生,但以每年的4~10月多发,任何年龄的猪都可感染,而以10~50 kg的中小猪发病较严重｡临床上生产母猪(包括后备母猪)常有发病,但配种公猪很少发生,这可能与抵抗力有关[1-3]｡高床饲养的猪群少见发病,而平养的猪群则屡见不鲜,可能与猪只接触粪便的程度有关｡河南省信阳市平桥区某商品猪场养猪3 000多头,2010年4~5月期间猪群突然发病,在1个月内陆续死亡5头,20多头病危,另有100多头发病｡发病和死亡的猪以40~50 kg的中小猪为主｡作者主要就这起猪弓形虫病的流行特点､临床症状､诊断方法以及防治处理等方面做如下报告｡1材料与方法1.1材料1.1.1试验动物1头发病死亡的育肥猪;6头活猪,有育肥猪4头､母猪1头和空怀母猪1头,从6头活猪颈静脉随机无菌采集全血,每头约4 mL,得到血液样品｡1.1.2检测试剂Taq酶､PCR缓冲液(含Mg2+)､dNTP为大连宝生物公司产品;蛋白酶K为Merck公司产品;弓形虫抗原ELISA检测试剂盒购自武汉科前生物技术有限公司;小白鼠购自信阳职业技术学院｡染色液有瑞氏染液､HE染液｡1.1.3引物设计根据GenBank中已登录的猪弓形体基因序列(AF146527),利用Primer5.0软件设计一对引物,上游引物P1为5′-CGTGACTCGGGCCCAGCTGCGTCTG-3′;下游引物P2为5′-CGCTGCAGACACAGTGCATCTGGAT-3′｡预计PCR扩增产物长度为463bp｡1.1.4主要仪器为实验室现有的PCR仪(美国AB公司)､高速冷冻离心机(Sigma 公司)､尼康E200显微镜､尼康4500数码照相机｡1.2兽医检查1.2.1涂片对发病死亡的育肥猪进行剖检,剖检时,取病死猪的血液､心包液和腹腔液进行涂片,用瑞氏染色法染色后光学显微镜检查,进行流行病学调查｡1.2.2病理学检查按常规方法对发病死亡的育肥猪进行尸体剖检,记录眼观病变情况｡1.2.3血清学检测将采集到的4头育肥猪的全血在高速冷冻离心机上5 000 r/min离心8 min,分离血清｡采用猪弓形虫酶联免疫吸附试验(ELISA)进行检测｡1.3PCR检测剖解时无菌分别取一块肺脏､肝脏､淋巴结以及脾脏组织,放入无菌塑料袋中,于-70℃环境备用｡1.3.1DNA的提取取病料肺､肝､淋巴结组织研碎,后加10倍生理盐水接种小白鼠腹腔,每只接种0.5 mL｡待小白鼠出现被毛粗乱､呼吸促迫症状,从其腹水收取弓形虫速殖子,计数后加入SDS裂解液和蛋白酶K,混匀后置于37℃消化过夜｡消化好的虫体悬浮液再加入5 mol/L NaCl溶液和5% CTAB溶液,65℃水浴10 min;苯酚∶氯仿∶异戊醇(25∶24∶1)溶液抽提2次,用异丙醇沉淀,70%乙醇洗涤;适量的灭菌水溶解,-20℃保存｡1.3.2PCR反应PCR反应体系为50 μL,DNA模板添加量为0.5 μg｡PCR反应程序为94℃预变性5 min;94℃变性30 s,53℃退火30 s,72℃延伸30 s,35个循环;最后72℃延伸10 min｡PCR产物经12 g/L琼脂糖凝胶电泳观察结果[4-7]｡选取其中一阳性样品的463 bp左右的PCR扩增产物片段,用TaKaRa公司的DNA片段琼脂糖凝胶回收试剂盒回收后,与T-Easy载体(Promega)连接,转化Escherichia coli JM109感受态细胞,筛选阳性重组质粒,送上海生工生物技术服务有限责任公司测序｡2结果与分析2.1临床症状患猪突然减食或废食｡稽留高热,体温常达41.5~42.0℃或更高,并稽留不退,一般持续5~10 d或更长｡咳嗽,有明显的呼吸症状,常呈腹式呼吸｡腹泻,鼻､耳､四肢及股内外侧､胸腹部､臀背部等处皮肤出现紫红色出血点或由出血点融合而成的瘀血斑块,甚至有的遍及全身而遍体紫红(图1)｡2.2病理变化体表瘀血发绀或有坏死结痂斑块;胸腔､腹腔出现积液,色浅黄;肺､脾､肝等实质器官具有特征性病变,肺膨大(水肿),被膜紧张有光泽,表面可见大小不等的紫红色坏死病灶,小叶间质明显增宽(图2);脾肿大,表面有灰白色坏死点,脾髓如泥;肝肿胀浑浊,表面和切面可见灰白色坏死病灶(图3)｡全身淋巴结显著肿大,特别是颌下､肺门､肝门等处淋巴结比正常的大2~3倍｡胃黏膜潮红,肠道明显充血,肠黏膜可见多量坏死病灶,肠系膜淋巴呈绳索样肿大(图4)｡2.3涂片观察血液涂片用瑞氏液染色,镜检发现月牙形滋养体,核为红色,细胞质为蓝色(图5)｡2.4血清学诊断试验设猪弓形虫血清抗体大于0.494判为阳性,小于0.422判为阴性,在0.422~0.494之间为可疑｡得到的猪弓形虫血清抗体ELISA检测结果分别是育肥猪1号0.936､育肥猪2号0.867､育肥猪3号0.927､育肥猪4号0.831､母猪0.922､空怀母猪0.910,由此可见,所检测样品的抗体均为阳性｡2.5PCR结果剖检猪所采样品出现了与预期大小一致的目的条带,且为阳性(图6)｡2.6PCR产物的克隆和序列测定测序分析结果表明,克隆的基因片段长度为463 bp,核苷酸序列经测定提交后证实,所克隆的基因为猪弓形虫的部分基因,其核苷酸序列为:TGACTCGGGCCCAGCTGCGTCTGTCGGGATGAGACCGCGGAGCCGAAGTGCGTTTTCTTTTTTTGACTTTTTTTTGTTTTTTCACAGGCAAGCTCGCCTGTGCTTGGAGCCACAGAAGGGACAGAAGTCGAAGGGGACTACAGACGCGATGCCGCTCCTCCAGCCGTCTTGGAGGAGAGATATCAGGACTGTAGATGAAGGCGAGGGTGAGGATGAGGGGGTGGCGTGGTTGGGAAGCGACGAGAGTCGGAGAGGGAGAAGATGTTTCCGGCTTGGCTGCTTTTCCTGGAGGGTGGAAAAAGAGACACCGGAATGCGATCCAGACGAGACGACGCTTTCCTCGTGGTGATGGCGGAGAGAATTGAAGAGTGGAGAAGAGGGCGAGGGAGACAGAGTCGGAGGCTTGGACGAAGGGAGGAGGAGGGGTAGGAGAGGAATCCAGATGCACTGTGTCTGCAG｡3讨论3.1诊断根据PCR和血清学检测结果为阳性,可以判定该次疫情是由弓形虫感染引起的｡依据其临床症状和病理变化特点,该起猪弓形虫病为急性感染｡3.2猪弓形虫病与猪瘟在临床上的鉴别诊断猪弓形虫病在临床表现上,有些症状与猪瘟颇为相似,这常常导致误诊｡其实,猪弓形虫病与猪瘟在临床上的表现虽然相似,但却不尽相同,只要仔细观察,是不难分辨的,总结我们的临床经验,可从下面几点进行鉴别｡3.2.1体表出血(瘀血)斑点不同猪瘟的体表皮肤出血仅发生于耳尖､四肢内侧､腹下等皮薄处,而猪弓形虫病的出血点或瘀血斑块则全身到处可见,特别是在胸背部､荐臀部等皮肤厚实的部位出现,这是猪瘟患猪所少见的｡猪瘟出血是局限性､散在性的出血点(如火鸡蛋或麻雀蛋样),即使融合也不会形成大斑块,程度较轻微;而猪弓形虫病患猪的出血则呈广泛性､弥漫性的瘀血斑块,甚至有的瘀血斑块互相融合遍及全身｡猪瘟体表出血斑点呈紫黑色或蓝黑色,颜色较深;猪弓形虫病患猪体表瘀血斑块多呈紫红色,颜色相对较浅｡3.2.2排泄物不同猪瘟便秘阶段排出的粒状干硬粪团呈灰黑或灰褐色,后期拉稀呈黄褐色水样腹泻,尿液浅黄色;而猪弓形虫病患猪排的粒状干硬粪团呈暗红色,后期拉稀呈酱油(煤焦油)样半流体黏稠粪便｡尿液呈鲜橘黄色｡3.2.3体温不同猪瘟病猪虽体温升高,但高热稽留时间相对较短,常于高热后不久就下降到40.5℃,而持续低烧不退;猪弓形虫病患猪的高热稽留时间较长,41.5℃以上高热可稽留7~10 d或更长时间｡3.2.4病理变化不同典型临床症状的猪瘟虽已不多见,但解剖病变仍具有特征性,即以全身性出血为主,如皮下组织和实质器官表面的针头状散在性出血,以及全身淋巴结肿大出血,淋巴结切面红白相间(大理石样);而弓形虫病猪内脏器官则以出现大量的坏死病灶为特点,虽然全身淋巴结肿大,但却没有周边出血和切面红(黑)白相间的病理变化｡3.2.5发病季节不同两者虽一年四季均可发生,但猪瘟多发生于寒冷季节(深秋､冬季和初春);弓形虫病病原体(卵囊)需要一定的温度和湿度条件才能发育成熟而具备感染力,所以多在高温高湿季节(4~10月)出现｡3.3预防措施猪弓形虫病一旦在猪场发生,病原很难清除,将会在场内经久不息,必须采取综合措施,全面防范,否则后患无穷｡猫是弓形虫的终末宿主,是传播本病的罪魁祸首,猪场内应禁止养猫和防止野猫进入(毒饵诱杀或人工捕杀);定期灭鼠,加强饲料及原料的保管贮存,避免猫鼠进入饲料仓库,禁止使用被猫､鼠粪尿污染的饲料喂猪;定期全场消毒,清除粪污,减少环境中的病原数量和传播机会;定期在饲料中添加磺胺类药物,新出现病例的猪场或曾发生过猪弓形虫病的猪场,添加药物混饲进行群体预防尤为必要｡应于发现确诊病例之后或于每年4月气温回升之时实行全场加药,实施群体预防;在添加磺胺类药物时,应按常规比例添加磺胺增效剂;为减少磺胺类药物对猪体肾脏的毒害及副作用,还应同时添加小苏打[8]｡3.4治疗猪弓形虫病病原对磺胺类药物敏感,早期和足够疗程治疗,疗效相当确切,应在发现病例后尽快做出确诊并立即用药,以阻止病原体在病猪体内的繁殖和减少对机体的危害｡常用的药物是磺胺六甲(磺胺间甲氧嘧啶)､磺胺五甲(磺胺对甲氧嘧啶)和增效磺胺嘧啶钠注射液(可按75 mL/kg肌注,首剂加倍),这些药物每天2次,连用2 d后,再以同样剂量每天用药1次,继续连用3~5 d[8],一般都会康复｡参考文献:[1] 林曦. 家畜病理学[M]. 第三版. 北京:中国农业出版社,1997. 326-329.[2] 殷震,刘景华. 动物病毒学[M]. 第二版. 北京: 科学出版社,1997.[3] 蒋金书. 动物原虫病学[M]. 北京: 中国农业大学出版社,2000.258-272.[4] 单连玉,杨秀珍,杨树森. PCR技术诊断弓形虫病的研究进展[J]. 国外医学——寄生虫病分册,2002,29(2):58-65.[5] 甘绍伯,佟玉品,尹清源. 聚合酶链式反应检测弓形虫的实验研究[J]. 中国人兽共患病杂志,1999,15(2):27-31.[6] 单连玉,杨秀珍,刘佩梅. PCR技术检测RH 株弓形虫组织内感染的实验研究[J]. 天津医科大学学报,2002,8(4):416-419.[7] 崔平,刘红彬, 方素芳, 等. PCR检测猪弓形虫病方法的建立[J]. 中国动物检疫, 2009,26(5):62-63.[8] 朱芬花. 中西医结合治疗猪弓形体病[J]. 中兽医医药杂志,2010,29(2):32.。