平卧菊三七组织培养技术研究

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平卧菊三七的种植方法和技术

平卧菊三七的种植方法和技术

平卧菊三七的种植方法和技术平卧菊三七,这可是个有趣的植物呢!好多人可能对它还不太熟悉,但要是你知道了它的好处,保准会对它感兴趣。

要种植平卧菊三七呀,首先得选好地方。

它就像个有点娇气的小孩子,喜欢阳光充足但又不能太晒的地方。

就好比我们人,也喜欢在温暖但不炙热的环境里待着不是吗?所以,找个能让它舒舒服服晒太阳又不会被晒伤的地儿很重要。

土壤呢,最好是疏松肥沃的,这样它的根才能在里面自由自在地伸展、吸收养分。

你想想,要是把你塞在一个又硬又贫瘠的地方,你能舒服吗?肯定不能呀!所以给平卧菊三七准备一个“安乐窝”很关键呢。

然后就是播种啦!把种子均匀地撒在土里,可别撒得太密或太疏哦,就像我们排队,不能太挤也不能太松垮。

撒好种子后,轻轻盖上一层薄土,就好像给它盖上了一层小被子。

接下来就是等待啦!就像等待一个小生命的诞生一样,是不是很期待呀?这时候可别心急,得给它时间慢慢成长。

在它成长的过程中,可不能偷懒哦!要经常去看看它,就像照顾小朋友一样。

要是土干了,就给它浇点水,让它喝得饱饱的。

但也别浇太多水呀,不然它会被“淹”着的,就像我们喝水喝多了也会不舒服一样。

要是看到有杂草长出来了,得赶紧拔掉,可不能让杂草抢走了平卧菊三七的营养和阳光呀!这就像是有坏人来抢你的东西,你肯定得把坏人赶跑呀!等它慢慢长大,你就会发现它变得越来越可爱,越来越有生机。

这时候,你心里是不是会有一种成就感呀?哈哈,这可都是你的功劳呢!还有啊,别忘了给它通风,让它呼吸新鲜的空气。

这就像我们人一样,要是老待在一个不透气的地方,肯定会觉得闷得慌。

哎呀,种植平卧菊三七就是这么有趣又有意义的一件事。

你想想,看着自己亲手种下的平卧菊三七一点点长大,最后收获满满的,那该是多么让人开心的事呀!所以呀,还等什么呢?赶紧行动起来吧,去种属于你的平卧菊三七,去收获那份属于你的快乐和成就感!它真的会给你带来很多惊喜哦!。

菊三七组织培养的研究_黄慧莲

菊三七组织培养的研究_黄慧莲

0.5h后煎提2次(1小时/次)为好(见样品含量测定项)。

3.2 在样品纯化方面,比较了丙酮、乙酸乙酯及水饱和正丁醇等溶剂的萃取及加热回流等方法,确定水饱和正丁醇萃取,且萃取的次数为6次(第7次萃取液TLC法检测无鞣料云实精色斑显示)。

3.3 以上实验结果表明,叶下珠中鞣料云实精的含量因采收时间和产地的不同差异较大,采收期以8, 9月采收的鞣料云实精的含量较高,且同种植物不同地区的叶下珠鞣料云实精的含量也有较大的差异,以西安的含量最高,为1.78%。

以海南和贵州的含量最低,仅0.58%。

其原因可能与所采植物的生长环境,样品干燥条件和存放时间等有关,故本数据仅供参考。

致谢:本文得到赵世萍研究员的帮助;并由文中所提湖北中医学院附院肝病脏象研究所等7个单位提供叶下珠样品;特致谢意!参考文献:[1] 江苏新医学院.中药大辞典[M].下册.上海:上海人民出版社,1997.[2] 方 蕾,任丽娟.叶下珠属植物化学和药理作用研究概况[J].国外医药-植物药分册,1992,7(6):249-255.[3] 任丽娟.叶下珠属植物化学成分研究和临床应用现状[C].全国植物资源和植物化学学术讨论会论文摘要集,1995:11-13.[4] 陈玉武,任丽娟.蜜柑草抗癌有效成分研究Ⅱ、多酚类成分的分离与鉴定[J].中草药,1997,28(4):198-202.菊三七组织培养的研究黄慧莲,刘贤旺,谢 平,张寿文a(江西中医学院,江西南昌 330006)摘 要:目的 探讨菊三七诱导愈伤组织的过程,为快速繁殖幼苗奠定基础。

方法 以菊三七的根、茎、叶为外植体,采用M S培养基,附加不同的植物激素进行实验。

结果 以菊三七的叶片为外植体,在培养基M S+1.0mg/L N AA+4.0mg/L6-BA上,愈伤组织诱导率可达64%。

愈伤组织在适宜的分化培养基上,成苗率可达86.7%。

结论 通过诱导愈伤组织的途径,可以达到快速繁殖菊三七的目的。

平卧菊三七茎段组织培养快速繁殖

平卧菊三七茎段组织培养快速繁殖

第29卷第4期2011年11月贵州师范大学学报(自然科学版)Journal of Guizhou Normal University(Natural Sciences)Vol.29.No.4Nov2011文章编号:1004—5570(2011)04-0001-03平卧菊三七茎段组织培养快速繁殖宋锡全,吴晓英,朱书晟,任茜,吴堂凤(贵州师范大学生命科学学院,贵州贵阳550001)摘要:在平卧菊三七自然繁殖率偏低的情况下,探讨利用组织培养方法解决繁殖问题。

主要利用诱导丛生不定芽培养基培育形成试管苗,移栽成活,能进行大田栽培;同时还试验了3种培养基对茎段带菌液体培养生根生长的影响,研究结果:3种自来水带菌液体培养基对平卧菊三七带顶芽茎段培养长出须根系的条数为:配方3﹥配方1﹥配方2,诱导培养长出须根的长度和根直径的粗度依次为:配方2﹥配方1﹥配方3。

从观察移栽成活率得出统计结果:配方2移栽7d后,最先成活,长势快且茂盛。

关键词:平卧菊三七;组织培养;顶芽茎段培养;培养基;快速繁殖中图分类号:RS567文献标识码:AThe rapid propagation of tissue culture on Gynura Procumbens SONG Xi-quan,WU Xiao-ying,ZHU Shu-sheng,REN Qian,WU Tang-feng (School of Life Sciences,Guizhou Normal University,Guiyang,Guizhou550001,China)Abstract:Under the condition of the low propagation rate of gynura procumbens.Naturally,this paper discusses how to solve the cultural problems by using the tissue culture.The author cultures the test tube seeding which is living successfully by transformation mainly through the method of inducing un-stable bushing buds,and the seeding can be grown in larger space,at the same time,the author also tests the effect of three kinds of culture mediums on the living condition of the root of stem section liq-uid with bacteria.The results are as following:Firstly,the comparing numbers of the roots of gynura procumbens.With culturing the stem section of terminal bud grown by the three kinds of mineral water with bacteria are shown:Formula3>Formula1>Formula2,and the width comparison of the induced beard root are shown:Formula2>Formula1>Formula3.Secondly,the statistic result of success-ful transforming growth by observation is that Formula2is the first one to live in seven days after trans-formation,and is growing quickly and flourishingly.Key words:gynura procumbens;tissue culture;terminal bud;stem section culture;culture medium;rapid propagation平卧菊三七[(Gynura procumbens(Lour.)Merr.]分类上属于菊科[1](Asteraceae)中菊三七属(Gynura Cass.)。

研究平卧菊三七水肥一体化技术的应用情况

研究平卧菊三七水肥一体化技术的应用情况

技术推广研究平卧菊三七水肥一体化技术的应用情况陈炜炜高婷婷廖梦凡许佳清杨丽英李之洪(新余学院公共卫生与健康学院,江西新余338004)摘要:本文分析了水肥一体化系统在平卧菊三七的种植过程中,节省水资源、提高水肥利用率、改善品质等多方面的技术优势,并探讨该技术目前存在的问题和建议,希望对平卧菊三七的种植有所帮助。

关键词:平卧菊三七;水肥一体化技术平卧菊三七,菊科、三七属,系多年生草本植物,又名蔓三七、神仙草,多年生草本,茎直立或斜升,有分枝;全株被硬毛和短伏毛;主根粗壮,淡紫色。

叶基生,通常有50〜80片,披针形至卵状披针形,先端渐尖,基部楔形,深绿色,具长柄;中部和上部叶较小,无基金项目:水肥一体化系统种植平卧菊三七,2019年新余学院第八期大学生创新创业训练计划重点项目,项目编号: DC201901025。

作者简介:陈炜炜(2000-),女,学生。

通讯作者:杨丽英(1965-),女,浙江路桥人,教授,教师,研究方向:生物多样性保护。

种植马铃薯时应合理轮作和加强田间栽培管理可有效控制该病的发生。

多年连作的马铃薯田疮痂病菌大量积累,使得病害日益严重。

宜选择无病种薯种植,在马铃薯生长期间合理浇水和增施绿肥,促进根部的生长,以便植株健壮生长,增强抗病能力。

病害发生时选用70%的五氯硝基苯粉剂对土壤进行消毒处理,每亩用量为1〜1.5kg。

5二十八星瓢虫马铃薯瓢虫又名二十八星瓢虫,属鞘翅目瓢虫科裂臀瓢虫属,因成虫鞘翅上共有28个黑斑得名(见图2)。

马铃薯瓢虫喜欢温、湿度较高的环境,主要为害茄科植物,最为喜食马铃薯。

成虫和幼虫均可取食叶片,被害叶片叶肉被吃掉,表皮残留,出现许多不规则又近乎平行的半透明凹细纹,后变为褐色斑痕,严重会导致叶片枯萎死亡。

受害严重的田块,马铃薯叶片被咬食得仅留下叶脉,导致绝收。

在山区、半山区为害较重,黑龙江省北部的黑河、伊春和铁力等地发病较严重山。

可以释放马铃薯瓢虫天敌如小蜂、瓢虫双脊姬小蜂等控制危害。

盆栽平卧菊三七的无土栽培技术

盆栽平卧菊三七的无土栽培技术

盆栽平卧菊三七的无土栽培技术作者:罗莎莎来源:《现代园艺》2014年第18期平卧菊三七,又名蔓三七草,菊科菊三七属多年生草本植物,其全身都是宝,根茎是中成药上佳的原材料。

其鲜叶和嫩茎嫩茎叶更是营养丰富,是中老年人补钙的绿色食品。

其叶也可生吃,或取鲜叶开水冲泡当茶饮,如把叶子晒干泡水更是别有一番风味。

具有清热解毒、止血止咳、活血通络、提高人体免疫力和抗病毒能力、补钙、抗感冒、降三高、提高免疫力等功效,是一种无毒级的优质特种药食兼可的独特植物。

近年来,随着大家对平卧菊三七研究的深入,越来越多的人开始接触并喜欢它,很多人喜欢把它养在自己的阳台上,极具观赏价值,让人们在享受健康美味的同时又可颐养身心,真是一举两得。

下面笔者就个人经验谈谈平卧菊三七的盆栽种植。

1 栽植类型直立盆栽直立盆栽一般种植1或3根苗,通过修剪,让其长成树体形状,一般放置于窗台或桌面上。

通常1盆需种植多根苗,一般口径20cm的花盆可种6~8棵,其主要以伸长生长为主,当植株生长到一定长度,会自然垂落,顺着盆缘向下伸展。

一般放置于阳台拐角处。

2 繁殖方法盆栽平卧菊三七一般采用茎插繁殖,这种方法简单、快速。

一般将健壮的茎秆,既不能过嫩也不能过硬,过嫩易腐烂,过硬不易生根。

剪下的枝条根据自己的需要剪成3个或多个节插入基质中,保持基质状态,避免阳光直射,一般条件适宜的情况下4~7天便可生根。

此方法一年四季均可进行,但夏季需进行降温和遮阳处理,冬天则需覆膜保温。

3 扦插基质的选择扦插的基质应具有良好的通气条件,不含有机肥料和易发霉的杂质。

可选用清洁的河沙、蛭石和草炭等基质扦插或将2种以上材料混合相互弥补彼此缺点。

根据本人种植经验,锯木屑可谓是不错的扦插基质,它本身作为废料,不但经济实惠,而且干净卫生,不易滋生细菌,疏松透气,保水效果也不错。

更重要是使用简单,只要将其布满育苗盘并用清水浇透,整理平整后便可直接扦插,扦插的成活率较高。

4 容器选择栽培容器要选择适当,常用的有素烧泥盆、塑料容器、陶瓷盆、木筒等,可根据自己的喜好来选择。

菊花植物组织培养的实验步骤

菊花植物组织培养的实验步骤

菊花植物组织培养的实验步骤菊花植物组织培养是一种常用的无菌培养技术,用于研究植物的生长和发育过程,以及繁殖和遗传改良。

本文将详细介绍菊花植物组织培养的实验步骤,以帮助读者了解该技术的原理和操作过程。

1. 实验材料准备准备所需的实验材料,包括菊花的种子、培养基、无菌器皿、无菌器具等。

确保所有材料都是无菌的,以避免外源性污染对实验结果的影响。

2. 种子消毒将菊花种子浸泡在含有消毒剂的溶液中,如75%酒精或10%次氯酸钠溶液中,进行消毒处理。

消毒时间一般为5-10分钟,然后用无菌的蒸馏水冲洗3-5次,以去除残留的消毒剂。

3. 种子发芽将消毒后的种子均匀地分布在含有适宜培养基的培养皿上,然后密封培养皿,放置在恒温培养箱中进行发芽。

培养温度一般为25-28摄氏度,光照强度为1500-2000勒克斯。

4. 菊花愈伤组织诱导当种子发芽后,将发芽的胚乳离体培养,即将胚乳切割成小块,然后放置在含有适宜激素的培养基中进行培养。

常用的激素包括激素类似物2,4-D、NAA、BA等。

培养基的配方和激素浓度根据具体需求进行调整。

5. 菊花愈伤组织增殖愈伤组织在培养基中生长和分裂,形成愈伤组织的增殖体。

为了促进增殖体的生长,可以适当调整培养基的营养成分和激素浓度。

同时,还要注意定期更换培养基,以保持培养环境的稳定。

6. 菊花愈伤组织分化当愈伤组织增殖体生长到一定程度后,可以调整培养基的激素浓度,促使其分化为植株的各个组织。

例如,降低激素浓度可促进根系的形成,增加激素浓度可促进茎的生长。

7. 植株移栽当菊花愈伤组织分化为植株后,可以将其移栽到含有适宜培养基的培养皿中进行继续培养。

同时,注意给予足够的光照和适宜的温度,以促进植株的生长和发育。

通过以上步骤,我们可以成功地进行菊花植物组织培养实验。

该技术可以用于菊花的无性繁殖、基因转化等研究,为菊花的育种和遗传改良提供了有效的手段。

此外,菊花植物组织培养技术还可以应用于其他植物的研究和开发中,具有广泛的应用前景。

平卧菊三七组织培养技术研究

平卧菊三七组织培养技术研究

23 卷 14 期
沈春修等 平卧菊三七组织培养技术研究
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剖刀切成面积大小为 1cm2左右的小块。 1.2.2 平卧菊三七丛生芽诱导培养 将生长状况良好的 愈伤组织切成小块,接种到丛生芽诱导培养基上,培养基 配方为 MS 培养基添加不同量的 6-BA 和 NA情况。 1.2.3 平卧菊三七组培苗生根培养和炼苗移栽 选取生 长良好,长势一致的分化苗接到生根培养基中,平卧菊三 七生根培养基以 1/2MS 为基本培养基,添加不同浓度 IBA,培养一段时间后统计其生根率。当组培苗生长到一 定高度时,从光照培养箱中取出,打开瓶盖,倒入少量无 菌水,置于室内(避免阳光直射),一星期后,洗去根部培 养基,晾干植株表面水分,栽植于不同基质中,45d 后统计 成活率及生长情况。 1.2.4 培养条件 诱导愈伤组织培养条件为暗培养,培 养 温 度 为 25~28℃ ;其 余 阶 段 培 养 条 件 均 为 光 照 强 度 3000lx,光照时间 12h,培养温度为 25~28℃。
平卧菊三七[Gynura procumbens(Lour.)Merr.]为菊科 菊三七属多年生宿根草本植物,是新开发出的一种药食 兼用的特种经济作物,具有通经活络,止痛消肿,消炎止
都是以平卧菊三七茎段为材料,没有获得其愈伤组织,其 繁殖率远没有达到预期的高效,同时,对平卧菊三七品种 后期的改良也不能提供进一步的技术支持。
1 材料与方法
1.1 材 料 平 卧 菊 三 七 采 自 江 西 宜 春 靖 安 县(北 纬 28°46′~29°06′,东经 114°55′~115°31′),栽植于宜春学院 试验基地,剪去当年生枝条上的新叶。 1.2 方法 1.2.1 外植体灭菌 外植体采集时间为晴天上午,取平 卧菊三七生长期内健康无病虫害、生长旺盛植株的当年

药用菊花组织培养技术研究进展

药用菊花组织培养技术研究进展

药用菊花组织培养技术研究进展药用菊花是广泛应用于中药、保健品、化妆品等领域的珍贵植物资源,其化学成分及生物活性特性备受关注。

然而传统的野生菊花采集存在数量不足、品质不一等问题,因此开展药用菊花的组织培养技术研究具有十分重要的意义。

本文将就药用菊花组织培养技术的研究进展进行综述。

1. 药用菊花基本组织培养药用菊花基本组织培养技术包括愈伤组织诱导、再生体系建立、植株再生等环节。

目前,研究者通过组合不同的生长调节剂,建立了适用于药用菊花的基本组织培养体系。

赵品静等 (2017) 以菊花幼叶和幼芽为外植体,通过添加不同浓度的TDZ、NAA,分别诱导出了生长旺盛、无胚性愈伤组织和分生组织,并进而诱导出了生长新苗。

黄华杰等 (2018) 报道了以菊花叶为外植体,利用IBA和BA诱导了菊花愈伤组织并建立了植株再生体系;同时,他们也通过诱导出菊花愈伤组织的手段,检验了AOX基因的表达情况,研究了药用菊花品种的抗氧化能力。

药用菊花细胞中的次生代谢产物具有重要的药理、生物学意义,如蒽醌类化合物、挥发性油等。

因此,研究者们利用药用菊花组织培养技术,研究和提取菊花中的次生代谢产物,目前的研究方向主要集中在以下几个方面。

(1) 菊花挥发油的提取和应用在育种、食品等领域,经常需要进行挥发性油的提取和分离,因此菊花挥发性油也成为研究的热点。

张蓉等 (2015) 利用菊花愈伤组织文化实验,对不同条件下的菊花组织所产生的挥发油进行分析比较,得出添加6-BA浓度为4mg/L是菊花挥发油产量最高的条件;针对菊花挥发油在网店上的质量状况,但玲玲等 (2019) 进行了挥发性油的提取和品质分析,揭示其主要成分。

菊花中蒽醌类化合物具有抗炎、抗肿瘤、抗氧化等多种生物活性,因此研究其提取过程以及应用也得到了广泛关注。

王平等 (2015) 利用快繁体系培养菊花组织,通过GC-MS 分析,检测出菊花组织中有241个化学化合物,其中有66个蒽醌类化合物;彭宏伟等(2019) 也利用菊花愈伤组织培养技术,提取了菊花中的蒽醌类化合物,并进一步研究了有关其体内生合成途径的基因表达情况。

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平卧菊三七组织培养技术研究作者:沈春修郑子峰来源:《安徽农学通报》2017年第14期摘要:该研究以平卧菊三七的叶片为外植体,对影响其愈伤组织诱导及芽分化的相关因素进行了探讨。

结果表明,适合平卧菊三七愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D1mg/L;愈伤组织分化出芽的培养基配方为MS+6-BA 1mg/L+NAA 0.4mg/L。

在1/2 MS+NAA 0.2 mg/L+IBA 0.3mg/L的培养基配方上生根较好,移栽到不同基质中的组培苗,存活率达100%。

关键词:平卧菊三七;组织培养;外植体中图分类号 S565.4 文献标识码 A 文章编号 1007-7731(2017)14-0038-03Abstract:Taking leaf blade of Gynura procumbens(Lour.)Merr as explants material,the factors that influence the callus induction and bud differentiation of Gynura procumbens(Lour.)Merr were studied.The results showed that the initial medium for the callus induction was MS+2,4-D 1 mg/L;the best medium for adventitious was MS+6-BA 1 mg/L+ NAA 0.4mg/L.The best subculture media for shoot proliferation was 1/2 MS+NAA 0.2 mg/L+IBA 0.3mg/L.Tissue culture seedlings were transplanted to a different matrix,the survival rate was 100%.Key words:Gynura procumbens(Lour.)Merr;Tissue culture;Explant平卧菊三七[Gynura procumbens(Lour.)Merr.]为菊科菊三七属多年生宿根草本植物,是新开发出的一种药食兼用的特种经济作物,具有通经活络,止痛消肿,消炎止咳,清热解毒,活血生肌、抗病毒和增强人体免疫力等功效[1]。

目前在江西宜春靖安县有大规模种植,并且已建立平卧菊三七苗木繁育科技示范基地3个,面积约13.33hm2。

平卧菊三七的繁殖方式主要是种子繁殖和扦插繁殖,而这2种传统的繁殖方法易受到季节的影响,远不能满足市场上大规模的需求,急需找到一种快速繁殖种苗的新方法。

植物组织培养是近几十年来发展起来的一项无性繁殖技术,具有繁育周期短、种苗供应量大的特点,并且能很好的保证母本的优良品种特性。

国内有部分研究者对平卧菊三七的组织培养技术进行了研究,如宋锡全等[2]以平卧菊三七的茎段为材料,利用诱导丛生不定芽培养基培育形成试管苗,同时还试验了3种培养基对茎段带菌液体培养生根生长的影响;石泰雷等[3]以平卧菊三七幼嫩茎段为材料,在已有分化培养基和生根培养基的基础上,用市售普通白糖替代分析纯蔗糖,并去除部分有机成分对平卧菊三七的快繁体系进行了优化;黄宝祥等[4]以平卧菊三七茎段为外植体,对其进行增殖培养、生根培养和栽培试验,并取得一些结果。

但以上这些研究都是以平卧菊三七茎段为材料,没有获得其愈伤组织,其繁殖率远没有达到预期的高效,同时,对平卧菊三七品种后期的改良也不能提供进一步的技术支持。

鉴于此,本研究将选取平卧菊三七叶片为初代培养的外植体,通过脱分化诱导愈伤组织,再分化形成芽苗,从而获得平卧菊三七的组培苗,同时进一步加速平卧菊三七的扩繁周期,提高平卧菊三七继代增殖培养速率与质量,优化平卧菊三七生根条件,为最终建立优质高效的平卧菊三七组培快繁技术体系提供理论与实验依据。

1 材料与方法1.1 材料平卧菊三七采自江西宜春靖安县(北纬28°46′~29°06′,东经114°55′~115°31′),栽植于宜春学院试验基地,剪去当年生枝条上的新叶。

1.2 方法1.2.1 外植体灭菌外植体采集时间为晴天上午,取平卧菊三七生长期内健康无病虫害、生长旺盛植株的当年生枝条上的新叶。

先用洗洁精水漂洗5~15min,流水冲洗30min左右。

后浸泡于无菌水中待用,于超净工作台上将外植体用75%的乙醇消毒处理15~20s,无菌水冲洗3~5次,然后用0.1%的升汞浸泡6~8min,再用无菌水冲洗多次,将叶片置于已灭菌的滤纸上吸干表面的水分后,用解剖刀切成面积大小为1cm2左右的小块。

1.2.2 平卧菊三七丛生芽诱导培养将生长状况良好的愈伤组织切成小块,接种到丛生芽诱导培养基上,培养基配方为MS培养基添加不同量的6-BA和NAA(见表1),培养约30d后统计丛生芽的出芽率及生长情况。

1.2.3 平卧菊三七组培苗生根培养和炼苗移栽选取生长良好,长势一致的分化苗接到生根培养基中,平卧菊三七生根培养基以1/2MS为基本培养基,添加不同浓度IBA,培养一段时间后统计其生根率。

当组培苗生长到一定高度时,从光照培养箱中取出,打开瓶盖,倒入少量无菌水,置于室内(避免阳光直射),一星期后,洗去根部培养基,晾干植株表面水分,栽植于不同基质中,45d后统计成活率及生长情况。

1.2.4 培养条件诱导愈伤组织培养条件为暗培养,培养温度为25~28℃;其余阶段培养条件均为光照强度3000lx,光照时间12h,培养温度为25~28℃。

2 结果与分析2.1 平卧菊三七的愈伤组织诱导平卧菊三七叶片组织块接种到诱导培养基中,7d后观察到叶片边缘开始卷曲,并看到有黄色、颗粒状愈伤组织产生,20d后统计其出愈率。

结果见表1和图1A。

由表1可知,不同浓度的2,4-D均可诱导产生愈伤组织,当2,4-D浓度为1mg/L 时,愈伤组织诱导率达到最高;继续增加2,4-D的浓度,愈伤组织诱导率反而下降,且随着培养时间的延长,这些愈伤组织较早出现老化现象。

因此,适合平卧菊三七愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D1mg/L+0.7%琼脂+2%蔗糖。

2.2 平卧菊三七丛生芽诱导培养生长状况良好的平卧菊三七愈伤组织在分化培养基中培养30d后,观察不定芽生长情况,结果见表2和图1C和图1D。

由表2可知,影响平卧菊三七丛生芽生长的植物生长调节剂主要是细胞分裂素6-BA和生长素NAA的协同作用,在6-BA浓度一定的情况下,当NAA浓度从0.2mg/L增加到0.6mg/L时,平卧菊三七丛生芽的出芽率先增加后减少;但是当NAA浓度为0.4mg/L时,随着6-BA的增加,平卧菊三七丛生芽的出芽率程大幅度变化,最高可达71.3%,最低甚至为0%,没有出芽,说明对于平卧菊三七丛生芽的诱导,激素6-BA和NAA的浓度只要达到合适的范围,才能保证出芽率最高。

因此,最适合平卧菊三七愈伤组织分化出芽的培养基配方为MS+6-BA 1mg/L+NAA0.4mg/L+0.7%琼脂+2%蔗糖。

当平卧菊三七丛生芽长到4~5cm高时,随即移到增值壮苗培养基中继续生长。

20d后,苗会进一步长高长壮,就可以进行下一步的生根培养了。

2.3 平卧菊三七组培苗的生根培养和炼苗移栽将平卧菊三七幼苗接入生根培养基中约10d 左右开始生根,20d后随机挑选3瓶统计平卧菊三七生根情况,结果见表3和图1E及图1F。

由表3可知,IBA对平卧菊三七生根有一定的促进作用;当不加IBA时,根系生长缓慢;当IBA浓度从0.1mg/mL增加到0.5mg/mL时,根系生长数量增多,彼此差异变化幅度不大,综合比较,平卧菊三七最适生根培养基为1/2MS+0.5mg/mL IBA+0.2mg/mL NAA。

同时,将生长良好的幼苗经过适当炼苗后,移栽至不同基质中,45d后观察平卧菊三七生长状况,结果表明,平卧菊三七组培苗对土壤要求不是特别严格,在各种基质中都可以存活,存活率达100%。

3 结论与讨论植物离体快速繁殖体系的建立,需要离体的外植体材料在无菌的条件下完成脱分化和再分化,才能培养出组培苗。

本研究中,选用叶片作为外植体,当培养基中2,4-D浓度小于1mg/L时,愈伤组织诱导率逐渐增加;当2,4-D浓度高于1mg/L时,愈伤组织诱导率反而下降,并且培养出的愈伤组织质地也较差,颜色较暗。

说明2,4-D浓度过高或者过低不利于愈伤组织的诱导。

这与一些学者的研究结果是一致的,尽管较高浓度的2,4-D有利于胚性愈伤组织的诱导,但一定程度上2,4-D也是促使愈伤组织褐化的一个因素[5-9]。

故对于愈伤组织的诱导2,4-D使用的浓度不宜过大,从而减少培养过程中材料组织的无性系变异。

本实验中最适合的愈伤组织诱导培养基配方为MS+2,4-D1mg/L+0.7%琼脂+2%蔗糖。

在植物愈伤组织分化中,6-BA是一种重要的植物生长调节剂,单独使用可以使愈伤组织得以分化[10]。

但通常与其他植物生长调节剂配合使用,能起到更好的效果。

本研究中,最适合平卧菊三七愈伤组织分化出芽的培养基配方为MS+6-BA1mg/L+NAA0.4mg/L+0.7%琼脂+2%蔗糖,表明平卧菊三七愈伤组织分化出芽过程中,6-BA和NAA的浓度达到合适配比后,能使其出芽率大幅度提高。

综上所述,本研究成功建立了一套完整的平卧菊三七快速繁殖体系,为其工厂化和规模化育苗提供了技术支持。

参考文献[1]孙伟.菊三七扦插繁殖技术和药用价值[J].中国野生植物资源,2007,26(3):68.[2]宋锡全,吴晓英,朱书晟.平卧菊三七茎段组织培养快速繁殖[J].贵州师范大学学报,2011,29(4):1-3.[3]石泰雷,赵冬冬,禹波宁,等. 平卧菊三七快繁体系优化研究[J].农业科学研究,2012,32(2):69-72.[4]黄宝祥,朱培林,龚斌.平卧菊三七组培快繁研究[J].江西林业科技,2013,5:11-13.[5]张东向,张崇浩,梅玲,等.荷兰芹胚性愈伤组织诱导及胚状体发生与内源 IAA和ABA 关系的初步研究[J] 植物研究,2001,21(1):73-76.[6]杨万年,张秀红,熊永华等.2,4-D和激动素对烟草愈伤组织 IAA 氧化酶和细胞分裂,素氧化酶活性的影响[J].植物生理学通讯,2003,39(6):589-591.[7]黄卓烈,李明,谭绍满,等.吲哚丁酸对桉树插条多酚氧化酶的影响及其与生根的关系[J].广西植物,2003,23(1):77-82.[8]黄璐,卫志明.不同基因型玉米的再生能力和胚性与非胚性愈伤组织DNA的差异[J].植物生理学报,1999,25(4):332-338.[9]王雷,张君,于彦春,等.胚龄和2,4-D浓度对玉米自交系幼胚愈伤组织诱导率的影响[J].玉米科学,2001,9(3):26-28.[10]周宜君,周生闯,刘玉,等.植物生长调节剂对植物愈伤组织的诱导与分化的影响[J].中央民族大学学报(自然科学版),2007,16(1):23-28. (责编:张宏民)。

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