DNA粗提取与提纯
《DNA 的粗提取及鉴定》 讲义
《DNA 的粗提取及鉴定》讲义一、引言DNA 作为生命的遗传物质，承载着生物体的遗传信息。
对 DNA 的研究有助于我们深入了解生命的奥秘、疾病的发生机制以及进行法医学鉴定等。
DNA 的粗提取及鉴定是分子生物学中的基础实验技术，下面我们就来详细了解一下。
二、实验目的1、了解 DNA 粗提取的原理和方法。
2、学习 DNA 的鉴定方法。
三、实验原理1、 DNA 在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同在014mol/L 的氯化钠溶液中，DNA 的溶解度最低。
利用这一特点，可以使 DNA 从细胞中析出。
2、 DNA 不溶于酒精溶液但细胞中的某些蛋白质则溶于酒精，从而可以将 DNA 与蛋白质进一步分离。
3、 DNA 遇二苯胺会呈现蓝色这一特性可用于鉴定 DNA。
四、实验材料和用具1、材料新鲜的鸡血细胞液（也可以使用菜花、洋葱等材料）2、用具研钵、烧杯、玻璃棒、漏斗、纱布、试管、量筒、体积分数为 95%的酒精溶液、2mol/L 的氯化钠溶液、0015mol/L 的氯化钠溶液、二苯胺试剂等。
五、实验步骤1、制备鸡血细胞液将新鲜的鸡血加入抗凝剂，离心或静置沉淀，除去上清液，得到鸡血细胞液。
2、破碎细胞，释放 DNA取 20mL 鸡血细胞液倒入烧杯中，加蒸馏水到 100mL，搅拌均匀。
然后向鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒沿一个方向快速搅拌，使鸡血细胞破裂，释放出 DNA。
3、去除杂质（1）过滤用纱布过滤含 DNA 的溶液，取滤液。
（2）去除核蛋白向滤液中加入 2mol/L 的氯化钠溶液 40mL，搅拌 1min，使核蛋白充分溶解。
然后缓慢加入蒸馏水，同时轻轻搅拌，直至溶液中氯化钠浓度达到 014mol/L，此时 DNA 会析出，用多层纱布过滤，取纱布上的黏稠物。
4、 DNA 的进一步提纯将上述黏稠物放入 20mL 体积分数为 95%的酒精溶液中，搅拌，使DNA 沉淀。
然后用玻璃棒卷起沉淀，放入试管中。
5、 DNA 的鉴定（1）向两支试管中分别加入 2mol/L 的氯化钠溶液 5mL。
DNA的粗提取与鉴定
DNA 的粗提取与鉴定
一、实验原理：
1、析出DNA 的原理：DNA 在NaCL 溶液中的溶解度是随着NaCL 浓度的变化而变化的，当NaCL 的物质的量浓度为0.14mol/L 时，DNA 的溶解度最低，高于或低于这一浓度溶解度都会增高。
如图：
2、提纯DNA 的原理：
DNA 不溶于冷酒精，而细胞中某些物质可溶于冷酒精。
3、鉴定原理：DNA 遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色。
二、方法步骤：
材料准备：常用鸡血细胞液
柠檬酸钠(抗凝剂)+鸡血−−−→静置或离心
血浆(弃去)+鸡血细胞液。
如图：
说明：①柠檬酸钠防止血液凝固。
②弃去上清液，是因为DNA 存在于血细胞中，血浆很少(没有)。
③用鸟类血细胞是因为鸟类成熟红细胞含DNA ，而哺乳动物成熟红细胞不含DNA ，所以不能用。
④本实验还可以用菜花或动物肝脏等作实验材料。
第一次在2中，使DNA与蛋白质分离
①两次加入高浓度NaCL
第二次在5中，DNA再溶解
第一次在1中，使细胞吸水涨破
②两次加入蒸馏水
第二次在3中，降低DNA的溶解度
第一次在1中，取滤液(含核物质)
③三次过滤第二次在4中，取黏稠物质
第三次在6中，取滤液
说明：在第一、三次取滤液时，纱布1—2层，第二次取黏稠物时纱布应多层。
④5次搅拌均要求超一个方向，轻缓，防止DNA断裂。
(二
璃制品表面带电荷，DNA中的磷酸基带相反的电荷，会被吸附于玻璃表面，减少DNA。
DNA的粗提取与鉴定
二、实验原理 2.DNA的分离和提纯
DNA溶于2mol /L的NaCl溶液,但 不溶于冷酒精，细胞中的其它杂 质溶于冷酒精。
二、实验原理 3.DNA的鉴定
DNA与二苯胺作用生成蓝色沉 淀用来鉴定 DNA（沸水浴）
实验步骤
一、取材：香蕉去皮、洗洁精、食盐溶液、95％酒精等
二、DNA的释放、溶解、获取
实验材料
研磨提取粗提取、提纯恒 温 水 浴 加 热实验现象一
实验现象二及比较
作业： 1.如果选用实验材料是鸡的血细 胞，请写出实验操作步骤； 2.你做的实验现象是怎样的？请 分析或推测原因，并拟定证明你 的推测的进一步实验方案。
1.往研钵香蕉加入10mlNaCl溶液和少量的洗洁进行研磨； 2.用漏斗一层纱布过滤，取滤液； 3.往滤液中加入等量的95%的酒精，静置2--3分钟； 4.用玻棒卷起白色絮状物，用吸水红吸去水分后放入试 管，加入4ml 2mol /L的NaCl溶液充分溶解。
三、DNA的鉴定：找实验老师加4ml二苯胺溶液，在 恒温水浴锅加热2--3分钟，观察现象并分析实验结果。
一、实验目标 1.用15分钟左右的时间尝试对
香蕉组织中的DNA进行粗提取； 2.学会用二苯胺对粗提取的DNA
进行鉴定； 3.能对实验结果进行分析评价。
二、实验原理 1.DNA的释放 洗涤剂等去污剂可以溶解香
蕉细胞的细胞壁，破坏细胞膜， 同时也能使蛋白质变性。 （教材P55)洗涤剂能够瓦解细胞 膜,但对DNA没有影响。
dna的粗提取与鉴定
dna的粗提取与鉴定DNA的粗提取与鉴定一、粗提取粗提取的方法是通过物理和化学方法从一个或多个生物样品中提取DNA样品，通常是为了进行DNA分子生物学分析、基因组学以及其他科学研究。
1. 用拆解液拆解细胞使用拆解液拆解细胞是最常用的粗提取DNA技术。
主要使用的拆解液有Tris-EDTA（TE buffer）、Cetyltrimethyl ammonium bromide （CTAB）、Sarkosyl（SDS）和NaOH溶液等。
各种拆解液的比例和温度可以根据每个实验的要求进行调整。
2. 用磁珠或磁性分选器抽提也可以使用磁珠或磁性分选器来抽提DNA样品。
这种方法可以从多种生物样品中提取DNA，如血清、血浆、细胞粗提物以及血液细胞等。
磁珠抽提的原理是利用磁性珠子来吸附DNA样品，而磁性分选器则是利用磁场将DNA分离出来。
磁珠抽提的优点是简单快捷，缺点是提取的DNA质量不够高。
3. 改良的拆解方式一些改良的拆解方式可以用来考察某一特定细胞类型。
这些方法包括冷冻破碎、湿热破裂、极限温度破裂和化学破裂等。
这些技术可以有效地提高蛋白质和DNA的提取效率，但缺点是需要较高的技术要求，而且操作步骤较多，比较耗时。
二、DNA的鉴定DNA的鉴定是指用特定的方法和技术，明确某个DNA样品的鉴定。
常见的DNA鉴定技术有定性分析、定量分析和活性检测等。
1. 定性分析定性分析是指对DNA样品进行定性鉴定，识别出它们是哪种DNA，以确定其基本性质。
常用的定性分析方法有紫外光检测和酶切检测等。
紫外光检测是将DNA浓度调整至1μg/ml，然后放置在紫外光228纳米的紫外灯管（UV lamp）下，通过分析紫外光吸收光谱来鉴定DNA 样品。
酶切检测是将DNA样品与特定的酶进行反应，用来分析DNA的特征。
常用的酶有限制性内切酶（restriction enzymes），例如EcoRI、BamHI、PstI和HindIII等。
2. 定量分析定量分析是指对某一DNA样品的浓度和数量进行测量，以了解其容量。
dna粗提取与鉴定
dna粗提取与鉴定DNA粗提取与鉴定DNA是生命的基础，它携带了生物体的遗传信息。
在现代分子生物学中，DNA的提取和鉴定是非常重要的技术。
本文将介绍DNA粗提取和鉴定的方法。
一、DNA粗提取1.1 细胞破碎法细胞破碎法是一种常见的DNA粗提取方法。
它通过机械或化学手段破坏细胞膜和核膜，释放出细胞内的DNA。
机械方法包括高压均质和超声波破碎等，化学方法包括SDS、NaOH等。
这些方法都可以有效地破坏细胞结构，但同时也会对DNA造成一定程度的损伤。
1.2 酚/氯仿法酚/氯仿法是一种经典的DNA粗提取方法，它利用酚对蛋白质和核酸有不同的溶解度来分离DNA。
首先用盐水或缓冲液洗涤样品，然后加入酚/氯仿混合液，在离心后上层为水相（含RNA）、中间为界面层（含蛋白质）和下层为有机相（含DNA）。
通过抽取下层的有机相，可以得到粗提的DNA。
1.3 硅胶柱法硅胶柱法是一种高效的DNA粗提取方法，它基于DNA和硅胶之间的亲和力。
首先将样品加入硅胶柱中，然后用盐水或缓冲液洗涤硅胶柱，最后用低盐缓冲液洗脱DNA。
这种方法可以得到较纯的DNA，并且适用于大量样品处理。
二、DNA鉴定2.1 凝胶电泳凝胶电泳是一种常见的DNA鉴定方法，它利用电场将带电的DNA分子移动到凝胶上。
根据不同长度的DNA片段在凝胶中行进速度不同来分离不同大小的DNA片段。
通过比较样品中不同长度的DNA条带，可以确定样品中是否存在目标序列。
2.2 PCR扩增PCR扩增是一种高效、敏感、特异性强的鉴定方法。
它通过引物特异性识别目标序列，在体外进行大量扩增。
PCR扩增可以检测极少量的目标序列，并且能够对复杂混合物进行分析。
2.3 DNA测序DNA测序是一种直接读取DNA序列的方法。
它通过将PCR扩增的目标片段或提取的DNA样品，进行测序仪读取，得到目标序列的具体信息。
这种方法可以检测出极少量的变异或突变，并且可以对整个基因组进行分析。
三、总结DNA粗提取和鉴定是现代分子生物学中非常重要的技术。
实验九DNA的粗提取与鉴定
【实验九】DNA的粗提取与鉴定陈小珺（江西省赣州市第三中学341000）1 教学建议在本实验的教学中，教师应注意以下几点。
1.1 实验材料必须准备充足。
本实验所用的实验材料是鸡血细胞液,由活鸡的鲜血经沉淀后获得。
每组(2个学生)需用5 mL 鸡血细胞液,则每班(50人)至少需要130 mL,而鸡血细胞液与鸡血的体积比为1:3,这样每班至少需要390 mL 鸡血细胞液。
宰杀1只中等大小的活鸡,一般可得120 mL 左右的鲜血,因此,1个班实验需要买4只活鸡。
也可以到市场售活鸡处去索取鸡血,但所带烧杯中必须提前放入抗凝剂。
（每100ml鸡血加入3g柠檬酸钠）1.2 盛放鸡血细胞液的容器,最好是塑料容器。
因为鸡血细胞破碎后释放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,由于细胞内DNA的含量本来就比较少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的DNA就会更少。
1.3 获取较纯净的DNA的关键步骤。
1.3.1 充分搅拌鸡血细胞液：将鸡血细胞液与蒸馏水混合以后,必须用玻璃棒沿一个方向快速搅拌,使鸡血细胞加速破裂,并释放出DNA。
1.3.2沉淀DNA时必须用冷酒精：体积分数为95%的酒精在冰箱中至少存放24 h。
1.3.3正确搅拌含有悬浮物的溶液实验步骤3、5、7,都需要用玻璃棒搅拌。
教师应提醒学生注意,在进行步骤3、5时,玻璃棒不要直插烧杯底部,而且搅拌要轻缓,以便获得较完整的DNA 分子。
进行步骤7时,要将玻璃棒插入烧杯中溶液的中间,用手缓慢转动5 min。
2 实验原理的补充介绍2.1 DNA的释放本实验用鸡血细胞做实验材料有两个原因。
一是因为鸡血细胞核的DNA 含量丰富，材料易得；二是鸡血细胞极易吸水胀破。
DNA位于鸡血细胞的细胞核中,正常情况下不会释放出来。
为了使DNA从细胞核中释放出来,实验中采用了向鸡血细胞液中加入蒸馏水并且搅拌的方法。
蒸馏水对于鸡血细胞来说,是一种低渗液体,水分可以大量进入血细胞内,使血细胞破裂。
dna的粗提取实验报告
dna的粗提取实验报告DNA的粗提取实验报告引言DNA（脱氧核糖核酸）是生物体中负责遗传信息传递的分子，它的提取是进行分子生物学实验的基础步骤之一。
本实验旨在通过简单的方法提取DNA，并观察提取效果。
材料与方法材料：- 植物组织（如洋葱、豆芽等）- 高渗盐溶液（含有盐分的溶液，如食盐溶液）- 咖啡过滤纸- 酒精（酒精浓度为70%）- 水方法：1. 将植物组织切碎，使细胞破裂，释放DNA。
2. 将切碎的植物组织放入一个容器中，加入高渗盐溶液，搅拌均匀。
3. 将搅拌后的溶液过滤，使细胞碎片和其他杂质被滤掉，得到澄清的液体。
4. 将澄清的液体倒入一个试管中，加入等量的酒精，并缓慢倾斜试管，使酒精与液体缓慢混合。
5. 观察酒精与液体的交界面，可以看到白色的DNA沉淀。
6. 使用酒精漂浮在DNA沉淀上方的方法，将DNA转移到另一个容器中。
7. 加入适量的水，溶解DNA。
结果与讨论通过上述方法，我们成功地从植物组织中提取到了DNA。
观察到的白色沉淀物就是DNA，其形状呈线状或颗粒状。
实验过程中，我们注意到以下几个现象：1. 细胞破裂：切碎植物组织的过程中，细胞膜被破坏，使DNA从细胞内释放出来。
这一步骤的重要性在于提供了DNA的来源。
2. 高渗盐溶液：高渗盐溶液的作用是破坏细胞膜和核膜，使DNA从细胞内释放出来。
高渗盐溶液中含有盐分，可以改变细胞内外的渗透压，进而破坏细胞膜和核膜。
3. 过滤：通过过滤，我们可以去除细胞碎片和其他杂质，得到澄清的液体。
这一步骤的目的是减少后续操作中DNA沉淀的杂质。
4. 酒精沉淀：加入酒精后，DNA会从溶液中沉淀出来。
酒精与溶液的混合过程中，DNA会聚集在交界面上形成白色沉淀物。
这是因为DNA在酒精中不溶，而且比较重，所以会沉淀下来。
5. DNA的溶解：将DNA从酒精中转移到水中后，加入适量的水，使DNA溶解。
DNA在水中溶解后，呈现出透明的溶液。
本实验采用的是粗提取方法，所得到的DNA并不纯净。
DNA的粗提取和鉴定分析
DNA的粗提取和鉴定分析DNA(脱氧核糖核酸)是构成生物体遗传信息的重要分子。
DNA的提取和鉴定分析是分子生物学和遗传学等领域中的一项基础技术和研究方法。
DNA的提取过程旨在从生物样品中纯化和提取出DNA分子，而DNA的鉴定分析则旨在确认提取的DNA是否符合特定的特征。
DNA的提取过程通常包括以下几个主要步骤：样品处理、细胞破碎、DNA纯化和DNA溶解。
首先，对于涉及到固体样品的提取，如动物组织样品或植物组织样品，必须先将样品粉碎，通常使用刀片或研钵研磨的方法。
然后，样品细胞被破碎，通常通过各种化学方法或机械方法。
常用的细胞破碎方法包括裂解酶、超声波、热冲击等。
细胞破碎后，通过使用盐水溶解细胞内其他组分，将纯化的DNA从其他细胞组分中分离出来。
这通常涉及到一系列的溶剂溶解步骤以及DNA的沉淀和洗涤。
DNA的纯化过程中，一些常用的技术包括酚/氯仿法、硅胶柱法和离心管法等。
其中，酚/氯仿法是最常用和最早的纯化方法之一、该方法通过将DNA溶解于酚-氯仿混合物中，形成有机相和水相的界面，然后通过离心分离DNA和其他组分。
硅胶柱法则利用硅胶效应，在高盐浓度条件下，DNA吸附在硅胶柱上，然后通过洗脱形成纯净的DNA样品。
离心管法是通过盐溶解和酶处理等步骤，使DNA从细胞中提取并纯化。
DNA提取完成后，可以进行进一步的鉴定分析。
常用的DNA鉴定方法包括聚合酶链式反应(PCR)、限制性酶切和电泳等。
PCR是一种常用的扩增DNA的方法，利用特定的引物和聚合酶在体外模拟自然界中的DNA扩增过程，从而产生大量的特定DNA序列。
限制性酶切是通过使用限制性内切酶切割DNA，然后通过电泳检测DNA片段的大小和形状来鉴定DNA。
电泳是一种将DNA样品通过电场在凝胶中进行分离的方法，通过测量DNA片段的迁移距离和大小来分析和鉴定DNA。
DNA的提取和鉴定分析在许多领域中都具有重要意义。
在法医学中，可以通过DNA分析来确定犯罪嫌疑人和受害者之间的关联；在遗传学中，可以通过DNA分析来确定遗传疾病的相关基因等。
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1．DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的_____ NaCl溶液中 溶解度不同，利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使 DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离 酒精 溶液，但是细胞中的某些 目的。此外，DNA不溶于_____ 蛋白质则溶于_____ 酒精 。利用这一原理，可以将DNA与蛋白 质进一步的分离。 蛋白质 DNA 没有影响。大多数 2．蛋白酶能水解_____ ，但是对_____ 80oC以上才会 蛋白质不能忍受60—80oC的高温，而DNA在________ 细胞膜 ，但对DNA没有影响。 变性。洗涤剂能够瓦解________ 蓝 色， 3．在沸水浴 ______条件下，DNA遇二苯胺 ______会被染成___ 因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
【思维拓展】
如果以植物（菜花，洋葱）为实验材料，如 何进行DNA的粗提取和鉴定？ 植物细胞需要 加入一定的 洗涤剂和食盐。
实例： 提 取 洋 葱 DNA 时 ， 在 切碎的洋葱中加入一定 的洗涤剂和食盐，进行 充分的搅拌和研磨，过 滤后收集研磨液
讨论：加入洗涤剂和食 盐的作用分别是什么？
答：洗涤剂是一些离子去 污剂，能溶解细胞膜，有 利于DNA的释放；食盐的 主要成分是NaCl，有利于 DNA的溶解
答：过滤将滤去的是细胞膜和核膜等物质； 得到的是与蛋白质等物质结合在一起的DNA
步骤2.溶解细胞核内的DNA 将氯化钠的物质的量浓度为 2 mol／L的溶液 40mL加入到滤液中，并用玻璃棒沿一个方向 搅拌1min，使其混合均匀，这时DNA在溶液 中呈溶解状态
步骤3.析出含DNA的粘稠物 沿烧杯内壁缓缓加入蒸馏水，同时用玻璃棒不停 地轻轻搅拌，这时烧杯中有丝状物出现，注意观 察丝状物呈什么颜色。继续加入蒸馏水，溶液中 出现的粘稠物会越来越多。当粘稠物不再增加时 停止加入蒸馏水（这时溶液中氯化钠的物质的量 浓度相当于0.14 mol／L） 讨论：加入蒸馏水的目的？ 降低NaCl溶液浓度到使DNA溶解度最低点， 使DNA从NaCl溶液中析出 注意事项： 实验中应该缓慢贴壁加入蒸馏水，并轻轻地沿 一个方向不停地均匀搅拌，以利于DNA分子的 附着和缠绕
步骤4.滤取含DNA的粘稠物 用放有多层纱布的漏斗，过滤步骤3中的溶液 至 500mL的烧杯中，含 DNA的粘稠物被留在 纱布上 步骤5.将DNA的粘稠物再溶解 取 1个 50 mL烧杯，向烧杯内注入氯化钠的物 质的量浓度为 2 mol／L的溶液 20mL。用钝头 镊子将纱布上的粘稠物夹至氯化钠溶液中，用玻 璃择不停地搅拌，使粘稠物尽多地溶解于溶液中
DNA从哪 提取？
§4.2 DNA的提取和鉴定
怎样将DNA与 细胞中的其他 物质分离？ 怎样鉴定 我们提取 的DNA？
【实验原理】
1.DNA在NaCl溶液中的溶解度，是随着NaCl 的浓度的变化而改变的。当NaCl的物质的 量浓度为0.14 mol／L时,DNA的溶解度最 0.015mol/L 2mol/L 低。利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶 液中的DNA析出。 2.DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些 物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理， 可以进一步提取出含杂质较少的DNA。 3.酸性条件下，DNA遇二苯胺（沸水浴）会 染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA 的试剂。
讨论： （1）为什么要加50mL的冷酒精？ 因为DNA不溶于冷酒精，而其他物质可以溶解 在酒精中，使含杂质较少的DNA丝状物可以析 出,悬浮于溶液中 （2）观察丝状物呈什么颜色？ 白色
步骤8. DNA的鉴定 取两支20 mL的试管，各加入氯化钠的物质 的量浓度为0．015 mol／L的溶液5 mL，将丝状 物放入其中一支试管中， 用玻璃棒搅拌，使丝状 物溶解。然后，向两支 试管中各加入4mlL的 二苯胺试剂。混合均匀 后，将试管置于沸水中 加热 5 min，待试管冷 却后，观察并且比较两 支试管中溶液颜色的变化
4.制备鸡血细胞液过程： 取质量浓度为0．1g/ml的柠檬酸纳溶液 （抗凝剂）100ml，置于500ml烧杯中。注入 新鲜的鸡血（约180ml），同时用玻璃棒搅拌， 使血液与柠檬酸纳溶液充分混合，以免凝血。 将烧杯中的血液置于冰箱内，精置一天，使血 细胞自行沉淀。（也可以将血液倒入离心管内， 用1000r/min（转每分）的离心机离心2min， 血细胞沉淀于离心管底部。 实验时，用吸管除去离心管上部的澄清液， 就可以得到鸡血细胞液。）
【实验总结】
此实验过程中有几次使用蒸馏水？几次过滤？ 几次析出？几次搅拌？分别在哪一步？ 两次蒸馏水： 三次过滤： 答：整个实验共 两次析出： 六次搅拌： 两次蒸馏水： 第1次： 步骤1.细胞吸水胀破 第2次： 步骤3.使 DNA黏稠物析出
三次过滤：
第1次：步骤1. DNA存在于滤液里 第2次：步骤4. DNA被留在纱布上 第3次：步骤6. DNA存在于滤液里
步骤6.过滤含有DNA的氯化钠溶液 取1个100 mL烧杯，用放有两层纱布的漏斗 过滤步骤5中的溶液。取其滤液，DNA溶于 滤液中 步骤7.提取含杂质较少的DNA 在上述滤过的溶液中，加入冷却的、酒精的体积 分数为 95％的溶液 50mL（使用冷却的酒精， 对DNA的凝集效果较佳），并用玻璃棒搅拌， 溶液中会出现含杂质较少的丝状物。用玻璃棒将 丝状物卷起，并用滤纸吸取上面的水分。这种丝 状物的主要成分就是DNA
1．在蛋白质和DNA的混合液中，要想得到较纯 的DNA，可采用的方法有( )。 ①向混合液中加入足量的蒸馏水 ②向混合液中加入DNA水解酶 ③向混合液中加入冷的95％的酒精 ④向混合液中加入蛋白质酶
B
A．①②
B．③④
C．①③
D．②④
2．在“DNA的粗提取和鉴定”实验中有三次过滤： (1)过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液；(2)过滤含黏稠 物的0．14 mol／L NaCI液；(3)过滤溶解有DNA的2 mol／L NaC[溶液。以上三次过滤分别为了获得 ( )
（3）滤去的是什么物质？得到的是什么？
分析： （1）为什么要加入蒸馏水？加入蒸馏水后细胞 会有什么变化？
答：让细胞内浓度大于周围溶液的浓度，细胞 会吸水以至胀破 （2）用玻璃棒搅拌有什么意义？ 答：用玻璃棒搅拌可以加速血细胞和细胞核的 破裂。注意应沿一个方向快速搅拌，但也不能 太快太猛，防止打碎DNA （3）滤去的是什么物质？得到的是什么？
过滤时使用的纱布层数与需用滤液或黏稠 物有关，第二次要用其滤出的黏稠物有关，所 以要使用多层纱布，第一次和第三次均要用其 滤液，使用的纱布为1－2层
两次析出： 第1次： 步骤3.用0.14 mol／L 的NaCI溶液 （含杂质多） 第2次： 步骤7.用冷却的95％的酒精 六次搅拌： 第1、2、3、5、7步 其中除第8步外，其余均要朝一个方向搅 拌，在第三、五步搅动还要轻缓，玻璃棒不 要直插烧杯底部，这样才能保证得到完整的 DNA
讨论： （1）比较两个试管中溶液的颜色有什么不同？ 答：有丝状物的试管变成蓝色，另一试管还是 原来颜色 （2）这一鉴定结果说明什么问题？
答：提取出的丝状Biblioteka 是DNA（3） DNA的直径约为20×10-10 m，实验中出 现的丝状物的粗细是否表示1个DNA分子直径的 大小？
答： DNA分子直径只有2 nm。丝状物是多 个DNA子聚在一起形成的
5.柠檬酸钠作用：
防止血液凝固 6.实验时，为什么用吸管除去离心管上部的澄 清液？ 血液分为两部分，一部分是血浆，一部分是血细 胞。离心后上清液是血浆（不含有血细胞），除 去它就可以得到鸡血细胞液。 7.注意事项： DNA容易被玻璃容器吸附，所以最好使用塑料 的烧杯和试管盛放鸡血细胞液
步骤1.提取鸡血细胞的细胞核物质 将制备好的鸡血细胞液5 mL～10mL，注入到 50 mL烧杯中。向烧杯中加入蒸馏水20 mL， 同时用玻璃棒充分搅拌5 min，使血细胞加速 破裂。然后，用放有纱布的漏斗将血细胞液过 滤至500mL，取其滤液。 讨论： （1）为什么要加入蒸馏水？加入蒸馏水后细胞 会有什么变化？ （2）用玻璃棒搅拌有什么意义？
第四章
遗传的分子基础
§4.2 DNA的提取和鉴定
1. 了解DNA的物理化学性质，理解DNA粗 提取以及DNA鉴定的原理。 2. 尝试对植物或动物组织中的DNA进行 粗提取及鉴定。 3. 培养实事求是的科学态度和探索精神。
认真阅读教学案,思考以下问题：
1.DNA粗提取的选材，思路和鉴定原理 是什么？ 2.DNA与蛋白质的性质差异如何？ 3.破碎动物细胞和植物细胞的方法有何 不同？ 4.根据DNA在NaCl溶液中的溶解度不同如 何控制其溶解和析出？ 5.DNA粗提取和鉴定的步骤是什么？
【实验材料】
1、鸡血细胞液（5~10ml）； 2、体积分数为95%的冷酒精溶液（实验前置于冰箱 内冷却24h）； 3、蒸馏水； 4、质量浓度为0．１g/ml的柠檬酸钠溶液； （抗凝剂）
5、物质的量浓度分别为2mol/L和0．015mol/L的 NaCl溶液； 6、二苯胺试剂。
【实验过程】
制备鸡 血细胞 液 再溶解 DNA的黏 稠物 提取鸡血 细胞的核 物质 滤取含 DNA的黏 稠物 提取含杂 质较少的 DNA 溶解滤 液中的 DNA 析出含 DNA的 粘稠物
A
A.含核物质的滤液,纱布上的黏稠物,含DNA的滤液 B.含核物质的滤液,滤液中DNA黏稠物,含DNA的滤液 C.含核物质的滤液,滤液中DNA黏稠物,纱布上的DNA D.含较纯的DNA的滤液,纱布上的黏稠物,含DNA的滤液
过滤含有 DNA的氯 化钠溶液
DNA的 鉴定
课前制备：鸡血细胞液
1.实验材料的选取: 原则上只要含DNA的生物材料都可以， 但是选取DNA含量相对较高的生物组织，成 功率更大。 →哺乳动物成熟红细 （×） 2.选材：新鲜的猪血 新鲜的鸡血 （√） 胞无细胞核，DNA含量 极少不易提取 3.选择鸡血做实验材料的原因: a.鸡血细胞核的DNA含量丰富，材料易得 b.鸡血细胞极易吸水胀破，而用动物肝脏细胞 作实验材料常常需要匀浆和离心，对设备要求 较高，操作繁琐，历时较长