临床生化检验方法的选择和评价
临床生物化学检验质量控制流程图
临床生物化学检验质量控制流程临床生化检验室全面质量控制（TQC）是利用现代科学管理的方法和技术检测分析过程中的误差，控制与分析有关的各个环节，确保实验结果的准确可靠。
一、分析前质量保证(一) 人员的素质和稳定性凡进入生化专业的工作人员上岗前应培训，了解本专业的实验室工作流程，掌握各种设备的操作、维护、保养，熟练应用实验室LIS系统，掌握各项目检测原理及影响因素，熟练应用比对方法。
(二) 实验室的设置和工作环境实验室布局合理，环境整洁，仪器间应进行防尘处理，温度15~30°C，相对湿度<65%。
(三) 实验仪器的质量保证1. 分析仪器的性能检查1.1 波长校正在更换光源灯、重新安装、搬运或检修后，以及仪器工作不正常时，都要进行波长校正。
就是正常工作的仪器，每隔一个月也要检查一次，这样才能保证读数与通过样品的波长符合，保证仪器的最大灵敏度。
1.2 线性检查包括仪器线性及测定方法线性两个方面的检查。
线性误差表现为溶液的浓度与吸光度不成线性关系，出现正偏离或负偏离的现象。
这种偏离，一是溶液本身不符合比耳定律，此现象叫做化学偏离；二是仪器本身各种因素的影响，使吸光度测定值与浓度之间不成线性关系，这种现象叫做仪器偏离。
仪器偏离的因素很多，如杂光、有限宽带、检测器噪声、环境条件的变化、波长的变动、比色杯的误差、辐射光的非平行性、检测器本身的非线性等。
1.3 稳定性检查当电源电压在220~230V围变化时，仪器读数漂移不应超过透光度标尺上限值的±1.5%。
在电源电压不变的条件下，在3分钟其读数漂移不应超过标尺上限值的±0.5%。
1.4 重复性检查在波长、工作状态、电源电压、比色杯等合格的前提下，可进行重复性检查。
用重铬酸钾溶液（30、60、90、190mg/L）在波长440nm，将各浓度管连续测3~5次，各浓度管中最大差值误差小于1%T为合格。
1.5 灵敏度检查将重铬酸钾液配制成30和32.5mg/L及120和122.5mg/L的4种应用液（浓度差两组各为2.5mg/L）。
《临床生物化学和生物化学检验》
《临床生物化学和生物化学检验》理论教学大纲(供五年制检验本科用)医学检验系《临床生物化学和生物化学检验》教学组2007-01-01前言《临床生物化学和生物化学检验》（第三版）为供医学检验专业用的全国高等医药教材建设研究会规划教材、全国高等医药院校教材。
主编为周新教授（武汉大学医学院）与涂植光教授（重庆医科大学），参与编写本版教材的共有12所高等学校的14位教授。
编写宗旨：适应科学技术的发展和21世纪医学检验教育的需要，力争达到医学检验系本科生的培养目标要求。
教材的编写思路是：突出基本理论、基本知识、基本技能，便于教与学；也注意反映学科发展和教学改革成果，适当介绍本学科及相关学科的新进展，有利于培养学生的创新思维和实践能力。
与第二版比较，本版教材作了较大的更动和补充。
新增了四章，删去了已经另有教材的诊断分子生物学和实验室管理章节，并对原有的章节进行了较大的修改更新。
各章最后均有“小结”，旨在帮助学生掌握该章重点。
书末还附有主要参考文献、汉英和英汉索引，便于教师和学生查阅，以及深入了解有关的详细内容。
全书分为二十章：绪论、临床生物化学实验室基本技术与管理、血浆蛋白质以及非蛋白含氮化合物的代谢紊乱、糖代谢紊乱、血浆脂蛋白及其代谢紊乱、诊断酶学、微量元素与维生素的代谢紊乱、体液平衡与酸碱平衡紊乱、肝胆疾病的生物化学诊断、肾脏疾病的生物化学诊断、心脏疾病的生物化学诊断、胃肠胰疾病的临床生物化学、骨代谢异常的生物化学诊断、红细胞代谢紊乱、内分泌疾病的生物化学诊断、神经、精神疾病的生物化学、妊娠的临床化学、体液肿瘤标志物、治疗药物浓度监测、自动生物化学分析仪的应用与原理。
《临床生物化学和生物化学检验》课程介绍《临床生物化学及其检验》是高等医学检验专业的核心课程，是介于基础医学和临床医学的桥梁学科之一。
本课程是在人体正常的生物化学代谢基础上，研究疾病状态下生物化学病理性变化的基础理论和相关代谢物的质与量的改变，进一步从生物化学代谢和分子水平，认识疾病发病机制，从而为疾病的临床实验诊断、治疗监测、药物疗效和预后判断、疾病预防等方面提供信息和决策依据的一门学科。
临床生化检验的校准验证质量评价结果分析
准验 证 评 价 ３个项 目为验 证 １ ６个 项 目为验 证 ２ 结论 原 校 准 验 证 质 量 存 在 不 足 ， 生 差 异 的 主 要 因 素是 系统 误 差 所 致 ， 改 ， 。 产 经 善 实验 条 件 ， 完善 校 准 方 法 后 ， 准 验 证 实 验 结 果 满 意 。 校 关 键 词 ： 准 ； 准验 证 ； 问质 量 评 价 校 校 室
参 加 定 量 分 析校 准验 证 的 ９个 项 目 中， １个 项 目线 性 评 价 为 线 性 １ ５个项 目为线 性 ２ ３个 项 目为 非 线 性 ； 准验 证 评 价 ４个 项 ， ， 校
目的结 果 为 差 异 ２ ５个 项 目的评 价 结 果 为验 证 ２ 查找 原 因 并更 换 设 备 光 源后 重 复 试验 结 果 ３个项 目为 线 性 １ ６个 为 线 性 ２ 校 ， 。 ， ，
定量 检 查 的 校 准验 证 中的 经验 。方 法 按 设 备厂 家说 明进 行 校 准 ， 照 美 国临 床 实验 室 改 进 修 正 案 （ Ｉ Ａ ８ ） 标 准 ， 按 Ｃ ８ 的 Ｉ 对检 测 的
钙 、 、 、 萄糖 、 素 、 酐 、 蛋 白 、 蛋 白、 酰 甘 油 等 ９个 项 目定量 校 准 验 证 结 果 进行 回 归 方程 评 价 和 百 分 差 异 评 价 。 结 果 磷 镁 葡 尿 肌 总 清 三
实验十五临床生化检验方法学评价试验 - 副本
回收试验
试剂 操作步骤 结果计算 评价标准
——见教科书
回收试验
注意事项: 分析物浓度应选择医学决定水平，血糖 的医学决定水平为2.8，6.7，8.9。 纯标准品溶液的加入体积不得超过血清 样品的10%，避免将血清过度稀释，引 起误差的改变或消失。 准确加量是最关键的技术。
干扰实验
目的要求 掌握方法学干扰试验的设计原理和基
检测能力测定
试剂 操作步骤 结果计算 评价标准
——见教科书
检测能力测定
注意事项
最低检测限量可以表示试验方法的灵敏度，但两者概 念不同。检出限是一种分析方法的最大检测能力的指 标，更具实用性。
灵敏度与分析变异有关，所以有人以斜率/标准差代 替灵敏度，在检测待测物浓度较小差别时，这里的灵 敏度与精密度相混淆。因此，要使用方法的灵敏度保 持稳定，必须结合精密度及准确度全面考虑。
本方法统计分析；熟悉干扰试验的注意 事项和评价标准。客观评价GOD-POD法 测血糖恒定系统误差的大小。
干扰实验
原理
干扰实验是测定特异性和干扰两者引起的 误差。在具体的方法学评价实验中，首先要确 定被试可疑物质是否引起系统误差；若能引起 误差，再进一步探讨其误差的来源是因方法特 异性差还是干扰，若加入的物质本身和分析试 剂反应并产生读数，这是特异性差，若加入的 物质不与分析试剂反应，但它改变了分析物与 分析试剂间的反应，这是干扰。本实验用尿酸 做HO不能参与第二步POD的偶连反应，从而降 低显色强度，产生负的测定误差。因此，尿酸 对反应有干扰，但不是尿酸被测定。
干扰实验
试剂 操作步骤 结果计算 评价标准
——见教科书
干扰实验
注意事项 加入可疑干扰物浓度要明显高于常见浓度的上 限，有可能时应达到病理标本的最高值尿酸升 高的变动范围在0.42~0.9mmol/L之间。 凡可疑干扰物都应做。 无论是方法特异性差或干扰，都影响测定结果 的准确性，影响程度与分析物浓度无关，与分 析物量有关，所以 产生的误差都是恒定系统误 差，常以偏差BIAS作为统计量。 其他注意事项与回收实验相同 。
临床生化检验试剂盒性能评价试验—线性范围试验方案
临床生化检验试剂盒性能评价试验—线性范围试验方案线性范围试验旨在评价试剂盒在一定的浓度范围内是否能够提供准确、可靠的测量结果。
线性范围是指试剂盒能够正常工作的浓度范围，通常以
正常生理范围为基础进行选择。
试验方案包括以下几个步骤：
1.准备样本：选择一种或多种具有不同浓度的标准物质，可以是纯品、混合物或者浓度已知的样本。
确保选取的样本覆盖到试剂盒的线性范围。
2.样本加样：按照试剂盒使用说明书中的方法，将不同浓度的样本加
入到试剂盒提供的反应池中。
同时还可以加入一定浓度的质控品作为质量
控制。
3.反应：按照试剂盒使用说明书中的方法，将试剂盒放入适当的温度
和时间条件下进行反应。
4.测量：使用相应的测量仪器对反应后的样品进行测量。
注意，为了
减小误差，每个样本应重复测量多次。
5.数据分析：根据测量结果，绘制标准曲线。
标准曲线是通过浓度与
测定值之间的关系绘制的，其中浓度为横坐标，测定值为纵坐标。
可以使
用常见的回归分析方法进行数据处理，如线性回归或非线性回归。
6.评价：通过标准曲线的拟合度来评价试剂盒的线性范围。
通常使用
相关系数（R）和决定系数（R^2）来评估标准曲线的拟合度。
相关系数越
接近于1，表明试剂盒的线性范围越好；决定系数越接近于1，表明试剂
盒的拟合度越好。
线性范围试验是评价试剂盒性能的重要指标之一、通过此试验，可以
验证试剂盒在标准浓度范围内测定结果的准确性和可靠性。
同时，线性范
围试验结果还可以用于确定测定结果的限制范围，有助于指导临床医生进行判断和诊断。
临床化学分析方法选择与评价
临床化学分析方法选择与评价本文将就临床生化检测中的试剂选择，试验方法的选择，以及实验结果的评价方法进行简单的阐述。
使大家对试验方法的各种评价指标和评价方法有充分的了解，同时能让大家充分认识到实验室的检测方法评价的重要性。
一、对试剂及试剂盒的选择（一）对试剂的要求为了保证一定质量，对生化试剂的要求，首先实验室使用的检验试剂应通过国家食品药品监督管理局 SFDA 的批准，拿到批准文号；第二，产品的名称，应参照 SFDA 颁布的“体外诊断试剂分类目录”确定产品的名称；三，规格型号，应规定可进行测试的次数，也可用包装规格表示。
（二）对试剂盒的要求对试剂盒的要求都有哪些？第一，检测原理，即方法学原理，简单扼要说明测定原理及名称；第二，试剂组份，要明确说明试剂中组份，组成成份的数量、比例及浓度，应采用国际标准或法定单位；第三，所用校准品应该符合国家食品药品监管管理局（ SFDA ）的标准和要求；第四，试剂的稳定性，应该标明试剂盒的贮存条件与有效期，同时还要注意开瓶后试剂的贮存条件与有效期。
有特殊要求时应该明确说明；第五，检测程序，包括校准和质控的程序；第六，参考区间及其参考人群的说明，实验室给临床发报告时候，必须要给出参考区间，结果的参考区间切忌不要直接使用国外人群的参考值，不能代表中国人群的实际情况。
第七，诊断性试剂的性能评估，它的准确性对临床诊治疾病非常重要。
评估包括试剂的敏感性、特异性、精密度、线性范围或可报告范围、抗干扰能力、准确性、溯源性、方法对比结果等；第八，注意事项，应该注明是体外诊断用，以及化学品危害的说明等。
二、实验方法和标准品的选择实验方法根据准确度与精密度的不同，可以分为三级，即：决定性方法（一级参考方法）、参考方法（二级参考方法）和常规方法（厂家选定方法和终用户实验室常规方法）。
（一）标准品的分级标准品可以分为一级标准品（一级参考物质）、二级标准品（二级参考物质）和校准品，前两级是国家认可的，它有标准物质证书。
临床生化检验方法的选择和评价
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（二）标准品的分级
1．一级标准品（原级参考物，primary reference material ） 是一种稳定而均一 的物质，它的数值已由决定性方法确定，
或由高度准确的若干方法确定，所含杂
质也已经定量，且有证书；用于校正决
定性方法，评价及校正参考方法以及为
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（二）准确度评价
❖ 1．方法比较试验
❖(1)要求 比较方法应是参考方法或推荐 方法，如该测定没有参考方法或推荐方 法亦可用公认的常规方法。
❖ 但须具备：
❖ ①比较试验方法有更好的精密度。
❖ ②干扰影响已知。
❖ ③与试验方法使用相同的计算单位。
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值为回收量。
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❖
（2）回收率计算：理想的回收率为
100%，如某法测血钙的回收率为
95.7%，有4.3%的比例误差，表明一个
含钙真值为2.5mmol/l的标本,若用该方
法测定,约为
2.39mmol/l(2.5×95.79% )，误差为
0.11mmol/L(2.5×4.3%)。
主要用于常规方法的评价或为控制物定
值和常规测定的结果计算。
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3．校准品（calibrator） 用二级标准品和常 规方法测定得到校准品，用于常规测定中 的标准
4 .控制物（control material） 具有与 检测过程相适应的特性，其成分及基质与 检测样本相同或相似，且均匀、稳定。
临床生物化学检验常规检查项目分析质量指标
临床生物化学检验常规检查项目分析质量指标临床生物化学检验是一种通过对人体生理状况进行生化学指标检测，以获得疾病的诊断、评估和监测的方法。
常规检查项目是临床生化检验中最为常见的项目，包括血糖、血脂、肝功能、肾功能、电解质等指标的检测。
这些项目的分析质量指标对于准确、可靠的检验结果具有至关重要的作用。
1.准确性：准确性是衡量检验项目分析质量的最重要指标之一、准确性反映了检验结果与真实值的接近程度。
通常通过比较检验结果与已知参考值或标准方法的结果来评估准确性。
常用的方法包括与参考实验室进行比对、与重复样本进行平行测试等。
2.精密度：精密度是指在一定条件下，同一样本在不同检验仪器上进行重复检测时的结果的变异程度。
精密度主要通过计算变异系数（CV）或标准差来衡量，CV越小，代表精密度越高。
精密度的高低关系到检验结果的可重复性和稳定性。
3.灵敏度：灵敏度是指在样本中存在的低浓度物质能够被检出的能力。
灵敏度是决定检验方法能否用于疾病早期筛查和监测的重要指标之一、通常通过比较阳性对照物质的浓度与最低检出限来评估灵敏度。
4.特异性：特异性是指检验方法能够准确识别和测定特定物质的能力。
特异性评价时需要考虑样本中其他可能影响结果的物质的存在，并通过特异性实验来评估。
5.稳定性：稳定性是指样本在不同存储条件下检测结果的变化程度。
常用的稳定性指标包括冰冻和解冻稳定性、离心稳定性、保存时间稳定性等。
稳定性的好坏直接影响到临床样本的采集、运输和储存要求。
6.参考范围：参考范围是指对于项检验指标的正常人群，其结果的分布范围。
参考范围的制定需要考虑人群特征、年龄、性别、生理状态等因素。
合理的参考范围对于结果的正确解读与评价非常重要。
总结起来，临床生物化学检验常规检查项目的分析质量指标主要包括准确性、精密度、灵敏度、特异性、稳定性和参考范围。
这些指标的评估和控制，可以保证临床生化检验结果的准确性和可靠性，为医生正确判断疾病、制定治疗方案提供了重要的参考依据。
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2 2020/3/3
揭示误差类型的实验
齐齐哈尔医学院生化教研室
误差类别
实验
随机误差（RE）
重复性
比例误差（PE）
回收
恒定误差（CE）
干扰
系统误差（SE）
方法对比
总误差 （TE） 重复性和方法对比
学32院02生0/化3/教3 研室
学22院02生0/化3/教3 研室
决定性方法 用途：评价参考方法 及为一级参考物定值
一级参考物 用途：发展和评价参考方法， 校正决定性方法和参考方法， 产生二级参考物
参考方法
用途：为二级参考物及控制物定值， 评价常规方法（标准化、偏差、干扰 因素）
二级参考物
用途：常规方法的工作 标准及为控制物定值
各级实验方法与参考物的相互关系
学32院02生0/化3/教3 研室
二 常规方法选择的原则
❖（一适用性
❖微量快速 ❖方法简便 ❖安全可靠 ❖成本低廉
❖（二）可靠性
❖较高精密度、准确度 ❖较好检测范围
学42院02生0/化3/教3 研室
（二）方法选择的步骤
❖（一）提出要求 ❖（二）获取资料 ❖（三）选定候选方法 ❖（四）候选方法的初步试验 ❖标准曲线的线性范围和重复性； ❖重复试验——精密度； ❖对比试验——准确度；
学12院02生0/化3/教3 研室
临床生化检验方法的选 择和评价
临床生化检验方法的选择和评价， 是临床生化检验质量控制的重要基础工 作。当建立一个新的方法，或引进新的 方法、都应对它们的技术性能作出评价， 以便科学的选择和应用。
学22院02生0/化3/教3 研室
学32院02生0/化3/教3 研室
学52院02生0/化3/教3 研室
第二节 临床生化检验方法学评价
一、方法学评价的意义和内容
❖方法学评价（evaluation of methodology）通过实验途径测定分析 方法的技术性能，并评价其是否能接 受。 评价实验的过程就是对误差的测定。
学62院02生0/化3/教3 研室
主要的方法技术性能指标： 准确度(accuracy) 灵敏度(sensitivity) 特异度(specificity) 分析测量范围(analytical measure range, AMR)评价实验的过程就是对误 差的测定。
学92院02生0/化3/教3 研室
（二）标准品的分级
1．一级标准品（原级参考物，primary reference material ） 是一种稳定而均一 的物质，它的数值已由决定性方法确定， 或由高度准确的若干方法确定，所含杂 质也已经定量，且有证书；用于校正决 定性方法，评价及校正参考方法以及为 二级标准品定值。
一 检验方法和标准品的分级
❖ （一）方法的分级 临床生化检验方法根据其准确度与精密 度的不同可以分为决定性方法、参考方 法、常规方法等三级。
学42院02生0/化3/教3 研室
❖1．决定性方法（definitive method） 是指准确度最高，系统误差最小，经过 详细的研究，没有发现产生误差的原因 或在某些方面不够明确的方法。用于发 展及评价参考方法和一级标准品。
学02院02生0/化3/教3 研室
❖ 2．二级标准品（次级参考物， secondary reference material ） 包括用于 常规分析的标准液。这类标准品可由实 验室自已配制或为商品，它的示值必须 用一级标准品和参考方法并由训练有素 的，能熟练掌握参考方法的操作者确定； 主要用于常规方法的评价或为控制物定 值和常规测定的结果计算。
学62院02生0/化3/教3 研室
3．常规方法（routine method） 指性 能指标符合临床或其他目的的需要，有 足够的精密度、准确度、特异性和适当 的分析范围，而且经济实用。这类方法 经有关学术组织认可后可称为推荐方法 （recommended method），推荐方法应 具有足够的实验证据
准确度增加 应用范围增加
学72院02生0/化3/教3 研室
三级方法的相互关系
常规方法
参考方法
决定性方法
学82院02生0/化3/教3 研室
（二）标准品的分级
❖ 国际标准化委员会将标准品（参考物） 的定义为：一类具有一种或多种成分、 且含量均匀确定的物质。 ；被用于校正 仪器或用于评价一种测定方法的物质， 并将其分成三级。
差。系统误差或正或负，即具有单向性， 一般由恒定的因素引起，并在一定条件 下多次测定中重复出现。
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2020/三3/3 、误差的分类和表示
2.系统误差分类 齐齐哈尔医学院生化教研室 恒定系统误差（CE） 指测定值与真值之间存在恒定的
误差，其大小与干扰物浓度相关，而与 被测物浓度无关。
比例系统误差（PE） 误差大小与被测物浓度成正比。
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2020/三3/3 、误差的分类和表示
3.随机误差（RE） 齐齐哈尔医学院生化教研室
定义： 多次重复测定某一物质时出现的误
差，误差无一定的大小和方向，数据 呈正态分布。
2020/3/3
试 验 方 法 结 果
恒定系 统误差
随机误差
比例系统误差
比较方法结果
误差类型示意图
齐齐哈尔医学院生化教研室
学12院02生0/化3/教3 研室
3．校准品（calibrator） 用二级标准品和常 规方法测定得到校准品，用于常规测定中 的标准
4 .控制物（control material） 具有与 检测过程相适应的特性，其成分及基质与 检测样本相同或相似，且均匀、稳定。
用于质量控制，控制患者样本的测定误差
学52院02生0/化3/教3 研室
❖2．参考方法（reference method） 是 指准确度与精密度已经充分证实的分析 方法，干扰因素少，系统误差与重复测 定的随机误差相比可以忽略不计，有适 当的灵敏度、特异性及较宽的分析范围。 这类方法在条件许可的实验室中应经常 使用。用于评价常规方法和试剂盒，鉴 定二级标准品。
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2020/3/二3 、方法学评价的基本步骤
齐齐哈尔医学院生化教研室
1. 确定方法的质量目标 2. 选定及进行适当的揭示分析误差类
型的实验 3. 收集试验数据，进行统计学分析 4. 判断方法 的可接受性
学82院02生0/化3/教3 研室
三、误差的分类和表示
1.系统误差（SE）
定义： 指测定值与真值存在的同一倾向的偏