2020届高考生物复习之大题精做13 基因工程 学生版
基因工程高考题
生物基因工程高考真题1、【来源】 2020年高考真题江苏卷第33题8分如果已知一小段DNA的序列，可采用PCR的方法，简捷地分析出已知序列两侧的序列，具体流程如下图（以EcoRⅠ酶切为例）：请据图回答问题：(1) 步骤Ⅰ用的EcoRⅠ是一种酶，它通过识别特定的切割特定位点。
(2) 步骤Ⅱ用的DNA连接酶催化相邻核苷酸之间的3′−羟基与5′−磷酸间形成；PCR循环中，升温到95∘C是为了获得；Taq DNA聚合酶的作用是催化。
(3) 若下表所列为已知的DNA序列和设计的一些PCR引物，步骤Ⅲ选用的PCR引物必须是（从引物①②③④中选择，填编号）。
(4) 对PCR产物测序，经分析得到了片段F的完整序列。
下列DNA单链序列中（虚线处省略了部分核苷酸序列），结果正确的是（）A. 5′−AACTATGCG⋯⋯⋯AGCCCTT−3′B. 5′−AATTCCATG⋯⋯⋯CTGAATT−3′C. 5′−GCAATGCGT⋯⋯⋯TCGGGAA−3′D. 5′−TTGATACGC⋯⋯⋯CGAGTAC−3′1 、【答案】 (1) 限制性核酸内切（或限制）;核苷酸序列;(2) ;DNA单链;以DNA为模板的DNA链的延伸;(3) ②④;(4) B;【解析】 (1) 步骤Ⅰ中的EcoRⅠ酶是一种限制性核酸内切酶，简称限制酶；EcoRⅠ酶能够识别并切割双链DNA分子的某种特定核苷酸序列。
(2) 步骤Ⅱ用的DNA连接酶催化DNA分子每一条链中特定部位的两个核苷酸之间形成磷酸二酯键；PCR循环中，升温到95∘C是为了断开DNA两条链间的氢键，得到DNA单链；Taq DNA聚合酶是一种热稳定性高的DNA聚合酶，其作用是催化以DNA为模板的DNA链的延伸。
(3) 引物是根据目的基因的一段核苷酸序列合成的，且与模板DNA链根据碱基互补配对合成，引物的3′端和DNA模板链的5′端根据碱基互补配对原则连接，由题目中已知序列5′−AACTAT⋯⋯−，对应的引物为3′−TTGATA⋯⋯−即④选项，由题目中另一段已知序列5′−AGAGGC⋯⋯−，对应的引物为3′−TCTCCG⋯⋯−即②选项。
高中生物基因工程复习练习及答案
高中生物基因工程复习练习及答案考试是检测学生学习效果的重要手段和方法，考前需要做好各方面的知识储备，高中生物基因工程复习的怎样呢?下面是店铺为大家整理的高中生物基因工复习练习题，希望对大家有所帮助!高中生物基因工程复习练习及答案解析一、选择题1.(2010年高考浙江理综)在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是( )A.用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸B.用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体C.将重组DNA分子导入烟草原生质体D.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞解析：构建重组DNA分子时，需用同种限制性核酸内切酶切割目的基因和载体，再用DNA连接酶连接形成重组DNA分子，而烟草花叶病毒的遗传物质是RNA，所以A项错误。
重组DNA分子形成后要导入受体细胞(若是植物细胞，则可导入其原生质体)，若导入的受体细胞是体细胞，经组织培养可获得转基因植物。
目的基因为抗除草剂基因，所以未成功导入目的基因的细胞不具有抗除草剂的能力，可用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞。
答案：A2.(2010年高考江苏卷)下列关于转基因植物的叙述，正确的是( )A.转入到油菜的抗除草剂基因，可能通过花粉传入环境中B.转抗虫基因的植物，不会导致昆虫群体抗性基因频率增加C.动物的生长激素基因转入植物后不能表达D.如转基因植物的外源基因来源于自然界，则不存在安全性问题解析：转入到油菜的抗除草剂基因可能会通过花粉被油菜的近缘物种接受，造成意料之外的抗除草剂基因传播，形成基因污染，有可能会对生态系统的平衡和稳定构成威胁，A项正确;在转入抗虫基因后，不能适应这种抗虫植物的昆虫的死亡率将大大增加，只有存在对应的抗性基因的昆虫才能生存下来，增加了昆虫群体中抗性基因的频率，B 项错误;生物界中所有物种基因的转录和翻译用同一套密码子和相同的氨基酸，所以动物的生长激素基因可以在植物体内得到表达，C项错误;即便转基因植物的外源基因来自于自然界，通过转基因工程后，可能会使目标生物出现非正常进化过程中的性状改变，有可能会影响生态系统的稳定性，D项错误。
2020高考生物一轮复习配套试卷：基因工程含解析
配套作业(四十) 基因工程1．天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。
现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是( ) A．提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因BB．利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因BC．利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞D．将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞解析此题考查基因工程及其应用的相关知识。
获取目的基因B，可先提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经逆转录获得互补的DNA，再经PCR技术扩增，A正确；基因文库构建时是将目的基因与载体连接起来，形成重组载体，再导入受体菌中储存和扩增，提取目的基因时不需使用限制酶，B错误；连接目的基因与质粒的酶是DNA连接酶，C错误；将目的基因导入植物细胞，常用农杆菌转化法，不使用大肠杆菌，D错误。
答案 A2．下列关于cDNA文库和基因组文库的说法中，正确的是( )A．同一物种的cDNA文库只有1种B．某真核生物的cDNA文库中的某基因一定比基因组文库中的该基因短C．可以利用反转录法获取cDNA文库和基因组文库D．只有cDNA文库的基因可实现物种间的基因交流解析本题考查基因文库，意在考查考生的理解能力。
在同一个体的不同发育时期获得的cDNA文库不同，因此，一个物种可以有多个cDNA文库，但一个物种的基因组文库只有1个，A错误；cDNA文库的基因是由mRNA经过逆转录获得的，所以，cDNA文库的基因和基因组文库的基因相比，缺少基因中启动子和内含子，因此cDNA文库的基因要短一些，B正确；只有cDNA文库可通过反转录法进行构建，C错误；cDNA文库的基因可实现物种间的基因交流，而基因组文库的部分基因可实现物种间的基因交流，D错误。
答案 B3．利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需的产品。
下列选项中能说明目的基因完成表达的是( )A．棉花细胞中检测到载体上的标记基因B．山羊乳腺细胞中检测到人生长激素的基因C．大肠杆菌中检测到人胰岛素基因的mRNAD．酵母菌细胞中提取到人的干扰素解析基因的表达即控制蛋白质的合成，包括转录和翻译，仅仅转录出mRNA还不能叫表达，只有合成了相应的蛋白质才能证明目的基因完成了在受体细胞中的表达。
高考生物基因工程专题训练
高考生物基因工程专题训练在高考生物中，基因工程是一个重要且具有一定难度的专题。
基因工程作为现代生物技术的核心领域之一，不仅在科学研究中发挥着关键作用，也是高考中的重点考查内容。
基因工程，又称为重组 DNA 技术，是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外 DNA 重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
基因工程的操作工具，包括限制性核酸内切酶、DNA 连接酶和运载体。
限制性核酸内切酶能够识别特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割 DNA 分子。
DNA 连接酶则能将切割后的 DNA 片段连接起来，形成重组 DNA 分子。
而运载体，常见的有质粒、噬菌体和动植物病毒等，它们能够将目的基因导入受体细胞。
在基因工程的操作步骤中，首先要获取目的基因。
这可以通过从基因文库中获取、利用PCR 技术扩增，或者通过人工合成等方法来实现。
获取目的基因后，需要构建基因表达载体。
这是基因工程的核心步骤，目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在并表达。
接下来是将基因表达载体导入受体细胞。
根据受体细胞的不同，导入的方法也有所不同。
例如，将目的基因导入植物细胞可以采用农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；导入动物细胞常用的方法是显微注射法；而导入微生物细胞则通常用感受态细胞法。
导入受体细胞后，还需要对目的基因进行检测与鉴定。
这包括检测转基因生物染色体的 DNA 上是否插入了目的基因，检测目的基因是否转录出了 mRNA，以及检测目的基因是否翻译成蛋白质等。
基因工程在农业、医药、环境保护等领域都有着广泛的应用。
在农业方面，通过基因工程可以培育出抗虫、抗病、抗逆的农作物新品种，提高农作物的产量和品质。
例如，抗虫棉就是通过基因工程技术将苏云金芽孢杆菌中的抗虫基因导入棉花细胞中培育而成的。
在医药领域，基因工程可以用来生产胰岛素、生长激素、干扰素等药物。
利用基因工程生产的药物具有成本低、效率高、质量好等优点。
2024届高三一轮复习生物：必考大题03——基因工程练习
必考大题03 基因工程1. 科研工作者在盐碱地中找到了一种生长良好且耐盐碱的植物(以下简称植物a)。
研究人员发现，植物a的液泡膜上特有一种Na＋/K＋逆向转运蛋白，这种蛋白是植物a耐盐碱的原因，并在植物a 中找到控制该蛋白合成的Na＋/K＋逆向转运蛋白基因(TaNHX2基因)。
该基因就是研究人员要找的耐盐碱的目的基因。
研究人员进一步获得了如下图所示的物质结构。
拟利用这些材料，用基因工程技术培育转基因棉花。
含有目的基因的DNA片段农杆菌Ti质粒结构示意图注：Sau3AⅠ、Eco RⅠ、Bam HⅠ为三种限制酶，Sau3AⅠ、Bam HⅠ切割形成的黏性末端相同。
用基因工程技术培育转基因棉花的操作程序包括四个步骤：(1)目的基因的获取：将植物a不同基因的DNA片段导入受体菌的群体中储存，再根据目的基因的特定序列从受体菌中提取该基因，这种获取目的基因的方法称为。
(2)构建基因表达载体：计划用Eco RⅠ分别切割上图中DNA片段和上图所示质粒，以构建基因表达载体。
①构建表达载体除限制酶外还需要的工具酶是________；②本方案的缺陷是：可能导致______________________以及目的基因与质粒的反向连接。
③为避免上述缺陷，最佳方案是用______________切割上图的DNA片段，用____________切割上图质粒。
(3)将________导入受体细胞。
成功导入受体细胞后，还需要利用________技术才能得到转基因棉花幼苗，这一技术的原理是。
(4)目的基因的检测与鉴定：要在个体生物学水平上检测耐盐新品种的培育效果，检测方法是。
2.研究发现人溶菌酶(hLZ)是天然抗生素替代品。
科学家培育出转人溶菌酶基因山羊，以大规模生产人溶菌酶(从乳汁中提取)，过程如下图所示。
其中编号①～⑨表示过程；质粒S中的基因Leu 通过控制相关酶的合成而影响亮氨酸的合成(亮氨酸是山羊细胞维持生命活动必不可少的一种必需氨基酸)，基因GFP控制合成绿色荧光蛋白。
(通用版)2020版高考生物一轮复习 第十三单元 第一讲 基因工程课件PPT
图(b)
图(c)
(3)DNA 连接酶是将两个 DNA 片段连接起来的酶，常见的
有________________和________________，其中既能连接黏
性末端又能连接平末端的是______________。
解析
2．(2016•江苏高考，有改动)下表是几种限制酶识别序列及其 切割位点，图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，其 中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题：
限制酶 BamHⅠ
BclⅠ
Sau3AⅠ HindⅢ
识别序 列及切 割位点
(1) 用 图 中 质 粒 和 目 的 基 因 构 建 重 组 质 粒 ， 应 选 用
__________________两种限制酶切割，酶切后的载体和目的
基因片段，通过________酶作用后获得重组质粒。为了扩增
重组质粒，需将其转入处于________态的大肠杆菌。
与两条单链DNA结合
温度上升到72 ℃左右，
延伸
Taq酶从引物起始合成互补 链，可使新链由5′端向
3′端延伸
图解
第十三单元 现代生物科技专题(选修3)
第一讲 基因工程
考点一 基因工程的操作工具
[重难深化类]
重温教材·自学区
1．限制性核酸内切酶(简称限制酶) (1)来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。 (2)作用：识别双链 DNA 分子的某种特定的 核苷酸序列 并 切开特定部位的两个核苷酸之间的 磷酸二酯键 。
3．学透教材、理清原因、规范答题用语专练
(1)从图中可以看出，目的基因是________________，使用 的载体是________，将基因表达载体导入受体细胞的方法 是________________。 (2) 请 写 出 两 种 检 测 目 的 基 因 是 否 表 达 的 方 法 ： ________________________________________。 答案：(1)Bt 毒蛋白基因 Ti 质粒 农杆菌转化法 (2)抗 原—抗体杂交法、用棉叶饲喂棉铃虫
基因工程复习资料（含答案）
基因工程复习资料（含答案）基因工程复习题一、名词解释：（10～20%）基因工程基因工程工具酶限制性内切酶限制性内切酶的Star活性PCR引物PCR扩增平台期DNA芯片基因组文库cDNA文库转化限制与修饰系统原位杂交：将细胞或组织的核酸固定保持在原来的位置上，然后用探针与之杂交的一种核酸分子杂交技术，该方法可较好地反映目的基因在细胞或组织中的分布和表达变化。
粘性末端：双链DNA被限制性内切酶切割后，形成的两条链错开几个碱基，而不是平齐的末端。
Northern印迹杂交：将RNA进行变性电泳后，再转移到固相支持物上与探针杂交的一种核酸分子杂交技术，可用于检测目的基因的转录水平。
转位：一个或一组基因片段从基因组的一个位置转移到另一个位置的现象。
基因工程：在体外，用酶学方法将各种来源的DNA与载体DNA 连接成为重组DNA，继而通过转化和筛选得到含有目的基因的宿主细胞，最后进行扩增得到大量相同重组DNA分子的过程称为基因工程，又称基因克隆、DNA克隆和重组DNA等。
目的基因：基因工程中，那些被感兴趣的、被选作研究对象的基因就叫作目的基因。
连接器：人工合成的一段含有某些酶切位点寡核苷酸片段，连接到目的基因的两端，便于基因重组中的切割和连接。
转化：受体细胞被导入外源DNA并使其生物性状发生改变的过程。
停滞效应：PCR中后期，随着目的DNA扩展产物逐渐积累，酶的催化反应趋于饱和，DNA 扩增产物的增加减慢，进入相对稳定状态，即为停滞效应，又称平台期。
逆转录PCR：以mRNA为原始模板进行的PCR反应。
PCR: 即聚合酶链式反应。
在模板，引物，4种dNTP和耐热DNA 聚合酶存在的条件下，特异性地扩增位于两段已知序列之间的DNA区段地酶促合成反应。
α-互补（α-complementation）：指在M13噬菌体DNA或PUC 质粒序列中，插入了lac启动子-操纵子基因序列以及编码β-半乳糖苷酶N-端145个氨基酸的核苷酸序列（又称α-肽），该序列不能产生有活性的β-半乳糖苷酶。
高中基因工程试题及答案
高中基因工程试题及答案一、选择题1. 基因工程是指：A. 基因的自然选择B. 基因的人工选择C. 基因的人工重组D. 基因的自然重组答案：C2. 基因工程中常用的载体是：A. 质粒B. 病毒C. 染色体D. 线粒体答案：A3. 基因枪法属于哪种基因转移技术？A. 化学法B. 物理法C. 生物法D. 机械法答案：B4. 以下哪个不是基因工程的步骤？A. 目的基因的获取B. 目的基因的克隆C. 目的基因的表达D. 目的基因的自然选择答案：D5. 基因工程在医学领域的应用不包括：A. 基因治疗B. 基因检测C. 基因编辑D. 基因克隆答案：D二、填空题6. 基因工程的核心技术是________。
答案：重组DNA技术7. 基因工程中常用的受体细胞有________和________。
答案：大肠杆菌、酵母菌8. 基因工程在农业上的应用包括________和________。
答案：转基因作物、基因改良9. 基因工程在环境保护中的应用包括________和________。
答案：生物修复、污染物降解10. 基因工程在工业生产中的应用包括________和________。
答案：生物催化剂、生物制药三、简答题11. 简述基因工程的基本原理。
答案：基因工程的基本原理是利用分子生物学技术，将目的基因从一种生物体中提取出来，然后通过重组DNA技术将其插入到另一种生物体的基因组中，使其在新的宿主细胞中表达，从而获得具有特定性状的生物体或生产特定的生物产品。
12. 基因工程在医学领域有哪些应用？答案：基因工程在医学领域的应用包括基因治疗，通过将正常基因导入患者体内以治疗遗传性疾病；基因检测，用于疾病诊断和风险评估；基因编辑，通过修改基因序列来治疗疾病；以及生产生物药物，如胰岛素、干扰素等。
四、论述题13. 论述基因工程的伦理问题及其解决途径。
答案：基因工程的伦理问题主要包括对人类基因组的修改可能带来的未知风险、基因歧视、生物多样性的减少等。
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例1．基因工程中可以通过PCR 技术扩增目的基因。
回答下列问题。
(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。
基因文库包括________和________。
(2)生物体细胞内的DNA 复制开始时，解开DNA 双链的酶是________。
在体外利用PCR 技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA 解链为单链的条件是____________________。
上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA 双链分子中的________。
(3)目前在PCR 反应中使用Taq 酶而不使用大肠杆菌DNA 聚合酶的主要原因是 ____________________________。
【答案】(1)基因组文库 cDNA 文库(2)解旋酶 加热至90～95℃ 氢键(3)Taq 酶热稳定性高，而大肠杆菌DNA 聚合酶在高温下会失活【解析】(1)基因工程中的基因文库包括基因组文库和部分基因文库(cDNA 文库)。
(2)生物体细胞内的DNA 复制开始时，通过解旋酶解开DNA 双链。
在体外利用PCR 技术扩增目的基因时，通过高温(90～95℃)使反应体系中的模板DNA 解链为单链。
上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA 双链分子中的氢键。
(3)大肠杆菌DNA 聚合酶不耐高温，在高温下会失活，而PCR 反应体系中加入的聚合酶需耐高温，故在PCR 反应中要用能耐高温的Taq 酶。
例2．青蒿素是有效的抗疟疾药物，但野生黄花蒿青蒿素产量低，为缓解青蒿素供应不足的状况，科学家将tms 基因和tmr 基因导入黄花蒿的愈伤组织从而获得了黄花蒿的冠瘿组织，实验过程用到的部分结构如图。
请据图回答问题：（1）在构建重组Ti 质粒的过程中常使用两种能产生不同黏性末端的限制性核酸内切酶对目的基因和Ti 质粒分别进行切割，这样做的好处有______________________________。
精选大题 基因工程大题精做十三（2）将目的基因导入黄花蒿愈伤组织细胞前：先将目的基因导入到农杆菌，农杆菌的作用是__________。
（3）为了准确鉴别受体细胞中是否含有目的基因并将含有目的基因的细胞筛选出来，所选的Ti质粒至少应包含__________种抗生素抗性基因，以便筛选和鉴别。
（4）与愈伤组织相比，冠瘿组织的生长速度更快，原因可能是____________________。
（5）艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验为证明DNA是遗传物质做出了重要贡献，也可以说是基因工程的先导，如果说他们的工作为基因工程理论的建立提供了启示，那么，这一启示是____________________。
【答案】（1）可以避免目的基因和Ti质粒的自身连接成环和反向连接（可使目的基因定向插入Ti质粒）（2）农杆菌可感染植物将目的基因转移到受体细胞中（3）2（4）tms和tmr基因编码产物控制合成了生长素和细胞分裂素，促进了冠瘿组织的生长（5）DNA可以从一种生物个体转移到另一种生物个体【解析】（1）在构建重组Ti质粒的过程中常使用两种能产生不同黏性末端的限制性核酸内切酶对目的基因和Ti质粒分别进行切割，可以避免目的基因和Ti质粒的自身连接成环和反向连接（可使目的基因定向插入Ti质粒）。
（2）将目的基因导入植物细胞时，常用农杆菌转化法，是因为农杆菌可感染植物并将目的基因转移到受体细胞中。
（3）图中插入了两个目的基因，为了准确鉴别受体细胞中是否含有目的基因，并将含有目的基因的细胞筛选出来，所选的Ti质粒至少应包含2种抗生素抗性基因，以便筛选和鉴别。
（4）据Ti质粒图示可知，Ti质粒中的tms和tmr基因编码产物控制合成了生长素和细胞分裂素，促进了冠瘿组织的生长，因此与愈伤组织相比，冠瘿组织的生长速度更快。
（5）肺炎双球菌转化实验中，S型菌的DNA进入R型菌中并能表达，说明DNA可以从一种生物个体转移到另一种生物个体，为基因工程理论的建立提供了启示。
模拟精做1．马铃薯植株在长期栽培过程中容易遭受病毒的侵染，从而导致严重减产。
科学家通过基因工程技术将抗病毒的PVX基因成功导入马铃薯细胞中，培育出抗病毒的马铃薯植株。
回答下列问题：(1)以相关mRNA为材料，在________酶的作用下，可以获得抗病毒的PVX基因。
将获得的PVX基因在体外进行扩增，可以采用____________(填中文名称)，该技术中所利用的特殊酶是__________________。
(2)若要使抗病毒的PVX基因在受体细胞中复制并表达，需要通过质粒载体而不能直接将抗病毒的PVX 基因导入受体细胞，其原因是目的基因无________________________(答出两点即可)。
(3)在进行基因操作时，将抗病毒的PVX基因导入马铃薯细胞常用的方法为________________。
检测目的基因是否表达出相应的蛋白质，在个体水平上可以采用________________________。
(4)相比于将抗病毒基因导入植物细胞的细胞核中，若将抗病毒基因导入植物细胞的叶绿体基因组中具有很多优势，从环境保护和生物工程安全性问题的角度分析，其优势体现在__________________________。
2．下图表示某质粒载体，图2表示植物甲的抗旱基因，该基因两端分别包括EcoRⅠ、BamHⅠ在内的多种限制酶的酶切位点。
据图回答下列问题：（1）目前获取目的基因的常用方法有：①从_______________中获取目的基因；②利用__________扩增目的基因。
（2）若目的基因和质粒载体分别用EcoRⅠ酶切，酶切产物用DNA连接酶处理后，两两连接对的产物有_________种类型。
将上述连接产物导入无任何抗药性的宿主细胞中，再将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能正常生长的宿主细胞所含有的连接产物是________________________________。
实验中，为了防止目的基因和质粒载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是_________________。
（3）为大量培养抗旱新品种植物，将基因表达载体构建完成后一般不直接导入农杆菌，而是先将其转入处于________的大肠杆菌中，导入大肠杆菌的目的是_______________________。
3．科学工作者将某种海蜇的DNA分子上一段长度为5170个碱基对的片段——绿色荧光蛋白基因，转入到夹竹桃细胞中，培育出一种夜间发光的夹竹桃。
培育过程如下图所示，回答有关问题。
(1)构建图中的重组Ti质粒，还需用到的基因工程基本工具是________________________。
作为受体农杆菌应________________，以方便筛选已导入重组Ti质粒的受体农杆菌。
在将重组Ti质粒转入农杆菌之前，先要用Ca2+处理农杆菌，其目的是使其成为________细胞。
(2)图中将绿色荧光蛋白基因导入夹竹桃细胞的方法称为____________。
转基因夹竹桃幼苗对青霉素____________(填“具有”或“不具有”)抗性，原因是。
(3)绿色荧光蛋白基因含有________，因此在农杆菌细胞中不能正常表达，而在夹竹桃细胞中能正常表达。
(4)夹竹桃转入了该5170个碱基对的DNA片段后能发光，也可以说明基因的本质是__________________。
4．Anti基因是小型猪器官表面抗原基因，人工合成的reAnti基因的模板链与Anti基因的模板链互补。
科学家利用合成的reAnti基因培育出转基因克隆猪，用于解决人类器官移植时免疫排斥。
(l)利用PCR技术对reAnti基因进行扩增，其原理是，在构建基因表达载体时，用两种不同的限制酶切割reAnti基因和运载体DNA来获得不同的黏性末端，原因是。
(2)猪胎儿成纤维细胞培养过程中，需要用酶将组织分散成细胞悬液。
培育转基因猪时，应使用技术将含有reAnti基因的表达载体导入猪成纤维细胞。
再将该转基因猪的细胞核注入时期的卵母细胞中，构建重组胚胎。
(3)胚胎培养液中除了一些无机盐和有机盐外，还需要添加“两酸、两素”以及动物血清，其中的“两酸”是指。
(4)用技术检测出转基因克隆猪的细胞核DNA中含有reAnti基因，但器官表面不含有抗原，原因是。
5．2019年6月17日，新华社发布《屠呦呦团队放“大招”：“青蒿素抗药性”等研究获新突破》，屠呦呦团队近期提出应对“青蒿素抗药性”难题的切实可行治疗方案，。
并在“青蒿素治疗红斑狼疮等适应症”方面取得新进展。
某课题组为得到青蒿素产量高的新品系，让青蒿素合成过程的某一关键酶基因fps在野生青蒿素中过量表达，其过程图如下：回答下列问题：(1)酶1和酶2分别是________。
利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是加热至90—95℃，目的是破坏了DNA分子中的__________键。
在构建重组Ti质粒的过程中，需将目的基因插入到Ti质粒的___________中。
(2)检验目的基因是否整合到青蒿素基因组，可以将放射性同位素标记的_________做成分子探针与青蒿素基因组DNA杂交。
理论上，与野生型相比，该探针与转基因青蒿素DNA形成的杂交带的量_________（填“较多”或“较少”）。
(3)据图分析，农杆菌的作用是。
判断该课题组的研究目的是否达到，必须检测转基因青蒿素植株中的___________。
答案与解析模拟精做1.【答案】(1)逆转录多聚酶链式反应热稳定DNA聚合酶(或Taq酶)(2)复制原点、表达所需的启动子和终止子(3)农杆菌转化法将相应病毒接种到马铃薯植株上的方法(4)花粉中的精子细胞中通常不存在叶绿体，导入叶绿体基因组中的抗病毒基因不会随花粉扩散传播，从而不会产生基因污染【解析】(1)以mRNA为材料，获得抗病毒的PVX基因，可通过逆转录酶的催化获得。
将获得的PVX基因在体外进行扩增，可以采用多聚酶链式反应(PCR)，该技术中所利用的特殊酶是热稳定DNA聚合酶(或Taq 酶)，该酶可以耐受九十几度的高温环境。
(2)目的基因上无复制原点、表达所需的启动子和终止子，故要使抗病毒的PVX基因在受体细胞中复制并表达，需要通过质粒载体而不能直接将抗病毒的PVX基因导入受体细胞。
(3)将抗病毒的PVX基因导入马铃薯细胞常用的方法为农杆菌转化法。
在个体生物学水平鉴定马铃薯植株是否具有抗病毒特性的方法是将相应的马铃薯病毒接种到马铃薯植株上。
(4)从环境保护和生物工程安全性问题的角度分析，将抗病毒基因导入植物细胞的叶绿体基因组比导入植物细胞的细胞核中具有很多优势，花粉中的精子细胞中通常不存在叶绿体，导入叶绿体基因组中的抗病毒基因不会随花粉扩散传播，从而不会产生基因污染。
2.【答案】（1）基因文库PCR技术（2）3 载体--载体连接物(或质粒一质粒连接物) EcoRI和BamHI（3）感受态获取大量重组质粒【解析】（1）目前获取目的基因的常用方法有：从基因文库中获取、利用PCR技术扩增。