中国药典黄曲霉毒素检测过程有关问题解析
黄曲霉毒素的检查方法
几种黄曲霉素检测方法的特点
免疫亲和层析净化高效液相色谱法
• 试样经过甲醇一水提取，提取液经过滤、稀释后，滤液经过含有 黄曲霉毒素特异抗体的免疫亲和层析净化，此抗体对黄曲霉毒素B1， B2,G1，G2具有专一性，黄曲霉毒素交联在层析介质中的抗体上。用水 或吐温-20/PBS将免疫亲和柱上杂质除去，以甲醇通过免疫亲和层析 柱洗脱，洗脱液通过带荧光检测器的高效液相色谱仪柱后碘溶液衍生 测定黄曲霉毒素的含量。
由于生物传感器具有选择性高，响应快操作简单携 带方便和适合于现场检测等优点，因此各国科研工作者正 积极探索研制新型生物传感器用于检测黄曲霉素。
研
• 试样经过甲醇一水提取，提取液经过滤、稀释后，滤 液经过含有黄曲霉毒素特异抗体的免疫亲和层析净化，此 抗联体在对层黄析曲介霉质毒中素的B抗1，体B上2,G。1，用G2水具将有免专疫一亲性和，柱黄上曲杂霉质毒除素去交 .以甲醇通过免疫亲和层析柱洗脱，加入溴溶液衍生，以 提高测定灵敏度。洗脱液通过荧光光度计测定黄曲霉毒素 (B1+B2+G1+G2)总量。
，经柱层析（它利用吸附剂对不同物质吸附能力的差异，用溶剂将 混合物的组分逐一洗脱分离的一种分离方法）净化后，再在薄板 上展开后分离，利用黄曲霉素的荧光特性,根据荧光斑点 的强弱与标准比较确定其含量，对于一些组分很复杂的试 样要双向展开，才能获得较高的灵敏度
• TLC法设备简单，检测费用低，但操作繁琐费时，萃取和 净化效果不理想，灵敏度差，对操作人员的身体健康存在 较大程度的危害
质，使其被检测到。例如将发色基团或荧光基团键合到样品中去，多极放大检测灵 敏度 柱后衍生系统：有碘衍生化法、溴衍生化法及较为先进的电化学衍生化法和光化学 衍生化法 免疫亲和柱：基于抗原抗体反应，特异性抗体连接在柱体内，选择性吸附样品中的 待检物，杂质不被吸附，流出柱外，柱上结合的目标物再被特定的洗脱液洗下来， 可以用于液相色谱(HPLC)分析或者ELISA含量测定，是一种高效的前处理柱。
食品中黄曲霉毒素的检测与防控措施
食品中黄曲霉毒素的检测与防控措施黄曲霉毒素是一种常见的食品毒素，它产生于霉菌黄曲霉中。
黄曲霉菌存在于许多食品中，如玉米、花生、大米等。
黄曲霉毒素对人体健康有害，长期摄入可能导致肝脏损伤、免疫系统抑制等严重后果。
为了保障食品安全，检测和防控黄曲霉毒素成为迫切的任务。
首先，要进行有效的黄曲霉毒素检测。
食品中的黄曲霉毒素可通过化学和生物学方法进行检测。
化学方法包括高效液相色谱法、气相色谱法等，这些方法可以定量分析黄曲霉毒素的含量。
生物学方法则利用黄曲霉菌的生长和代谢特性进行检测。
例如，可以通过培养细胞来监测黄曲霉毒素的产生，也可以通过生物传感器实时监测食品中的毒素含量。
这些检测方法可以准确快速地检测食品中的黄曲霉毒素，有助于及时发现和控制食品安全问题。
其次，要采取有效的防控措施来降低黄曲霉毒素的产生和传播。
在食品加工和存储过程中，应严格控制黄曲霉菌的生长条件，如控制温度、湿度、通风等。
此外，还可以使用防霉剂和生物控制剂来阻止黄曲霉菌的生长。
防霉剂是一种化学物质，可以抑制霉菌的生长，减少黄曲霉毒素的产生。
生物控制剂则利用有益微生物对黄曲霉菌进行竞争，达到降低毒素产生的效果。
这些措施可以在食品生产过程中降低黄曲霉毒素的含量，减少对人体健康的威胁。
此外，消费者也需要提高自我保护意识，学会正确选择和储存食品。
在购买食品时，应仔细查看包装，并选择有资质的生产商和销售商。
同时，要注意食品的保存方式，避免食品受潮发霉。
如果发现食品有异味或变质现象，应立即停止食用，并向相关部门进行报告。
保持良好的卫生习惯，避免食品与霉菌交叉污染，也是降低黄曲霉毒素风险的重要措施。
食品中黄曲霉毒素的检测与防控需要多方合作。
政府部门应加强监管，确保食品生产和销售的质量安全。
科研机构应不断开展相关研究，提供更准确和可靠的检测方法。
食品生产企业要严格控制生产流程，保证产品的安全性。
消费者要提高食品安全意识，积极参与食品安全监督，共同维护食品安全。
关于中药材上面的黄曲霉毒素的污染现状分析与对策研究
关于中药材上面的黄曲霉毒素的污染现状分析与对策研究发表时间：2019-04-02T11:36:24.770Z 来源：《医师在线》2018年11月22期作者：刘冰灵徐开妍[导读] 本文将研究中药材上面的黄曲霉毒素的污染现状分析与相关的对策（1梁山县拳铺镇徐集中心卫生院；2梁山县小路口中心卫生院；山东济宁272100）【摘要】目的：本文将研究中药材上面的黄曲霉毒素的污染现状分析与相关的对策。
方法：结合黄曲霉菌检测方法研究现状，我们提出了要利用好PCR技术、核酸杂交技术等方式，来建立基于ＬＡＭＰ和ｑPCR技术的黄曲霉菌快速检测技术。
结果：本硏究根据功能基因VER－1的外显子序列设计环介导等温扩增体系的扩增引物，并优化体系获得稳定高效的扩増结果。
结论：每味中药材的基质不同，所采取降毒措施是否有效仍然是值得研究的问题。
开发抗黄曲霉菌中药材品种是一大关注点。
【关键词】中药材上；黄曲霉毒素；污染现状分析；对策 [ 中图分类号 ]R2 [ 文献标号 ]A [ 文章编号 ]2095-7165（2018）22-0292-02 0 引言有毒的黄曲霉属曲霉,是一种应用广泛的微生物。
它们广泛存在于空气、水和土壤等自然环境中。
空气、水和昆虫是中药材的主要污染菌。
在适当的条件下,有毒的黄曲霉会大量繁殖并产生。
黄曲霉毒素在黄曲霉毒素产生后很难消除。
黄曲霉毒素(AFT)是一类具有高毒性的香豆素衍生物。
世卫组织将AFT归类为I类致癌物。
黄曲霉毒素可引起肝癌、慢性肝炎、黄斑肝炎、肝肿大W和肝硬化。
其中黄曲霉毒素B1毒性最强,致癌作用最强。
此外,黄曲霉毒素可以损害肺、肌肉、肾脏和大脑。
黄曲霉本身也会使人生病。
黄曲霉感染可引起肺曲菌病,有时也可引起角膜、耳朵和鼻-眼框架感染。
1 黄曲霉菌污染现状有毒的黄曲霉属曲霉属,是中药材中的主要污染菌之一。
黄曲霉毒素是一类高毒性的黄曲霉代谢产物。
它们耐热,不溶于水。
一般来说,洗涤、刷洗、晒干和加热可以减少被污染的真菌的数量,但不能减少黄曲霉毒素的含量。
黄曲霉毒素检测整体解决方案书
黄曲霉毒素检测整体解决方案书黄曲霉毒素检测之柱后光化学衍生系统一、黄曲霉毒素介绍黄曲霉毒素(AFLATOXIN，简称为AF)是到目前为止所发现的毒性最大的真菌毒素。
它可通过多种途径污染食品和饲料，直接或间接进入人类食物链，威胁人类健康和生命安全，对人体及动物内脏器官尤其是肝脏损害严重，该毒素是黄曲霉和寄生曲霉中产毒菌株的代谢产物，普遍存在于霉变的粮食及粮食制品中。
黄曲霉毒素比较耐热，加热至230℃才能被完全破坏，因此一般烹饪加工也不易消除。
二、黄曲霉毒素对人体的危害1、引起急、慢性中毒：黄曲霉毒素是剧毒物质，其毒性相当于氰化钾的10倍，砒霜的68倍。
黄曲霉毒素属肝脏毒，除抑制DNA、RNA的合成外，也抑制肝脏蛋白质的合成，黄曲霉毒索引起人类的急性中毒事件，国内外均有许多报导，最典型的是印度的霉变玉米事件，该事件直接导致了数十人丧生，数百人患上不同类型的肝脏疾病。
2、致癌性：黄曲霉毒素有极强的致癌性，长期摄入黄曲霉毒素会诱发肝癌。
它诱发肝癌的能力比二甲基亚硝胺大75倍，是目前公认的致癌性最强的物质之一。
另据世界卫生组织报导，黄曲霉毒素含量在30~50UG/KG时为低毒，50~100UG/KG时为中毒，100~1000UG/KG时为高毒，1000UG/KG以上为极毒。
鉴于黄曲霉毒素对人类的巨大危害性，我国对其在食品中的含量作了严格规定，其中，乳制品中黄曲霉毒素最高允许量为5UG/KG（即5PPB）。
三、黄曲霉毒素的种类黄曲霉毒素主要有4种：即B1、B2、G1、G2，其中B1被认为是主要的有毒物质，有2种这些毒素的代谢产物M1和M2。
其中黄曲霉毒素B1主要存在于农产品，动物饲料，中药等产品中；黄曲霉毒素M1是动物摄入黄曲霉毒素B1后在体内经羟基化代谢的产物，一部分从尿和乳汁排出，一部分存在于动物的可食部分，如乳、肝、蛋类、肾、血和肌肉中，其中以乳最为常见。
黄曲霉毒素M1的毒性和致癌性与黄曲霉毒素B1的基本相似。
我国粮食中黄曲霉毒素B1的污染情况及检测方法研究
123食品安全黄曲霉毒素毒性强，且不易分解，能损伤人的肝脏，临床表现有胃部不适、食欲减退、恶心呕吐、腹胀及肝区触痛等。
本文详述了目前我国各类粮食中黄曲霉毒素B1的污染情况及其对人们的危害，并就目前世界上检测黄曲霉毒素B1的方法进行了总结。
一、黄曲霉毒素概述及产生条件黄曲霉毒素（AFT）是黄曲霉和寄生曲霉等某些菌株产生的双呋喃环类毒素，在其20多种衍生物中，黄曲霉毒素B1的毒性最大、致癌性最强。
黄曲霉毒素及其产生菌在自然界中分布广泛，有些菌株产生不止一种类型的黄曲霉毒素，在黄曲霉中也有不产生任何类型黄曲霉毒素的菌株。
人类健康受黄曲霉毒素的危害主要是由于人们食用被黄曲霉毒素污染的食物。
黄曲霉毒素的产生需要特定的条件，不同的玉米植株产毒能力差异很大，除基质以外，温度、湿度、空气均是黄曲霉毒素生长繁殖及产毒的必要条件。
据文献记载，黄曲霉毒素最佳生长条件为33-38℃、pH为5.0、Aw（水分活性）为0.99，其中，温度在24-28℃之间、相对湿度在80%以上，黄曲霉菌产毒量最高。
所以南方及温湿地区在春夏两季极易发生黄曲霉毒素中毒事件，甚至粮食在收获前或收获期就可能已经被黄曲霉毒素污染。
二、粮食中黄曲霉毒素的污染情况1.稻谷中黄曲霉毒素的污染情况。
作为我国人民的第一大口粮作物，稻谷在储存过程中由于储备条件不理想，可能导致黄曲霉毒素的滋生。
笔者对辽宁境内某粮库100份入库时未检测出黄曲霉毒素的储备了两年的稻谷进行了筛查，其中有13份样品检测出黄曲霉毒素。
2.玉米中黄曲霉毒素的污染情况。
玉米是我国第二大作物，也是目前饲料产品的最主要原料。
我国南方高温高湿的天气极易造成黄曲霉毒素污染，尤其梅雨季节更为黄曲霉毒素提供了滋生的温床。
相反北方低温、干燥的天气，更适宜玉米的储存。
3.小麦中黄曲霉毒素的污染情况。
小麦鲜叶中一般不我国粮食中黄曲霉毒素B1的污染情况及检测方法研究含黄曲霉毒素。
针对国标规定，小麦、面粉、发酵食品（酱油、食用醋、豆豉、腐乳制品）等的黄曲霉毒素含量应小于等于5μg/kg。
食品中黄曲霉毒素的测定
食品中黄曲霉毒素的测定食品中黄曲霉毒素的测定黄曲霉毒素是一种常见的食品安全问题，对人体健康有潜在危害。
在食品加工、储存和运输的过程中，黄曲霉菌的生长可能会导致食品受到污染，进而产生黄曲霉毒素。
及时准确地测定食品中的黄曲霉毒素含量对于保障食品安全非常重要。
本文将对食品中黄曲霉毒素的测定方法进行全面评估，并探讨该主题的深度和广度。
1. 黄曲霉毒素的定义和分类黄曲霉毒素是一类由黄曲霉菌产生的真菌毒素，常见的有黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1和黄曲霉毒素G2等。
它们在食品中的存在可能对人体造成不同程度的危害，其中黄曲霉毒素B1是最为常见和有毒的一种。
2. 食品中黄曲霉毒素的来源和污染途径黄曲霉毒素主要通过两种方式污染食品：一是由于黄曲霉菌的生长和繁殖，导致食品受到直接污染；二是由于霉菌在食品加工、储存和运输等过程中的存在，导致黄曲霉毒素的转移和积累。
3. 黄曲霉毒素的危害和影响黄曲霉毒素对人体健康的危害包括致癌作用、免疫毒性和肝毒性等。
长期摄入过量的黄曲霉毒素可能会导致肝脏损伤、肝癌和免疫系统功能下降等疾病。
4. 食品中黄曲霉毒素的测定方法目前，常用的黄曲霉毒素测定方法主要包括高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)和免疫学方法等。
每种方法都有其优点和局限性，选择适当的方法需要考虑到样品类型、检测目标、检测灵敏度和准确性等因素。
5. 黄曲霉毒素的监管标准和控制措施为了保护公众健康，各国都制定了相应的黄曲霉毒素监管标准。
食品生产企业和监管部门需要密切关注黄曲霉毒素的检测结果，并采取相应的措施来控制黄曲霉毒素的风险，确保食品安全。
总结：黄曲霉毒素是一种常见的食品安全问题，其在食品中的存在可能对人体健康造成不同程度的危害。
为了保障食品安全，及时准确地测定食品中黄曲霉毒素的含量非常重要。
本文综合评估了食品中黄曲霉毒素的测定方法，并讨论了黄曲霉毒素的来源和污染途径、危害和影响，以及监管标准和控制措施。
实验黄曲霉毒素测定课件
实验黄曲霉毒素测定
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• 4．植物油：
• 用小烧杯称取4.0g样品，用20.0mL石油醚，将样品移 于125mL分液漏斗中，用20.0mL 甲醇水(55 ＋45）溶 液分次洗烧杯，溶液一并移人分液漏斗中。（精炼油 4.0g样为4.575mL，可直接用移液器加入分液漏斗再加 溶剂后振摇）振摇2min，静置分层后，放出下层甲醇 水溶液于750mL蒸发皿中。再用5.0mL甲醇水溶液重复 振摇提取一次，提取液一并加入蒸发皿中，以下按自 “65℃水浴通风挥干”起，依法操作。
实验黄曲霉毒素测定
4
• 2. 玉米（脂肪含量3.0～5.0％）：
• 样品粉碎后过20目筛，称取20.0g，加入250mL具塞锥形瓶中。准 确加入50.0mL甲醇一水（80+20）溶液和15.0mL石油醚，盖塞后滴 水封严，150rpm振荡30min。用快速定性滤纸过滤于125mL分液漏 斗中,待分层后，放出下层甲醇水溶液于50mL烧杯内，从中取 10.0mL （相当于4.0g样品）于75mL蒸发皿中,以下按上述“65℃水浴 通风挥干”起，依法操作。
13
实验二十、食品中黄曲霉毒素B1的检测
标准依据: GB/T5009.22-2003食品中黄曲霉毒素B1的测定
实验黄曲霉毒素测定
1
• 一、实验目的与要求：
• 1、学习酶联免疫(ELISA)方法测定粮食及食品中黄曲霉 毒素B1的实验原理，掌握实验的操作要点及测定方法
• 2、了解酶联免疫(ELISA)的工作原理，正确熟练使用酶 标仪。
8
五、数据处理及计算结果
• 1、求出各孔的0.D校正值：0.D校正值＝O.D实测值一空白对照孔 0.D值（均值）。
• 2、求出待测样的0.D％值：0.D％＝[O.D校正值/阴性对照孔0.D校 正值（均值）］ × 100％。
黄曲霉毒素检测方法国标
黄曲霉毒素检测方法国标【原创实用版3篇】目录（篇1）1.黄曲霉毒素的危害性2.黄曲霉毒素的检测方法2.1 薄层分析法2.2 酶联免疫法2.3 液相色谱法2.4 生物鉴定法2.5 试剂盒法正文（篇1）黄曲霉毒素是一种致癌物质，长期接触可使人的抵抗力下降，急性中毒可引起恶心、呕吐，发烧、黄疸等肝炎症状，长期接触可引起致癌、致畸。
致癌的话主要导致消化道肿瘤，比如食道癌、胆管癌。
因此，对黄曲霉毒素的检测显得尤为重要。
目前，黄曲霉毒素的检测方法主要有以下几种：1.薄层分析法：此方法操作简单、费用低廉，是国内外用的最多的一种测量方法。
2.酶联免疫法：这是近年来研发出了一种新颖的测量方法。
3.液相色谱法：可准确分离黄曲霉素的各种毒素，检测准确度高。
4.生物鉴定法：其特点是待检样品不需很纯，主要用于定性，共有 10 种。
5.试剂盒法：现在检测粮食，饲料里面霉菌毒素主要就是试剂盒（ELISA) 法。
目录（篇2）1.黄曲霉毒素的危害性2.黄曲霉毒素的检测方法2.1 薄层分析法2.2 酶联免疫法2.3 液相色谱法2.4 生物鉴定法2.5 试剂盒法正文（篇2）黄曲霉毒素是一种致癌物质，长期接触可以使人的抵抗力下降，急性中毒可引起恶心、呕吐，发烧、黄疸等肝炎症状，长期接触可引起致癌、致畸。
致癌的话主要导致消化道肿瘤，比如食道癌、胆管癌。
因此，对黄曲霉毒素的检测显得尤为重要。
目前，黄曲霉毒素的检测方法主要有以下几种：1.薄层分析法：此方法操作简单、费用低廉，是国内外用的最多的一种测量方法。
2.酶联免疫法：这是近年来研发出了一种新颖的测量方法。
3.液相色谱法：可准确分离黄曲霉素的各种毒素，检测准确度高。
4.生物鉴定法：其特点是待检样品不需很纯，主要用于定性，共有 10 种。
5.试剂盒法：这是目前检测粮食，饲料里面霉菌毒素主要采用的方法。
目录（篇3）1.黄曲霉毒素的危害性2.黄曲霉毒素的检测方法2.1 薄层分析法2.2 酶联免疫法2.3 液相色谱法2.4 生物鉴定法2.5 试剂盒法3.检测黄曲霉毒素的重要性正文（篇3）黄曲霉毒素是一种致癌物质，长期接触可以使人的抵抗力下降，急性中毒可引起恶心、呕吐，发烧、黄疸等肝炎症状，长期接触可引起致癌、致畸。
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析
黄曲霉毒素( aflatoxin，AF) 是由黄曲霉( asperillusflavus) ，寄生曲霉( asperillus parasiticus) 等真菌产生的一类分子结构相似的次级代谢产物，是一类毒性和致癌性很强的化合物，为第一类致癌物，是人类原发性肝癌的主要致病因素之一。
中药材在生长和储存过程中，若环境条件适宜便会滋生霉菌从而产生黄曲霉毒素。
目前黄曲霉毒素的检测方法主要有薄层色谱法、高效液相色谱法、酶联免疫法、液相色谱-质谱联用法等，中国药典20XX年版第二增补本采用高效液相色谱柱后衍生法测定。
本文就中国药典黄曲霉毒素检验过程中常遇到的问题以及无衍生快速检测黄曲霉毒素的方法进行初步探讨。
1 仪器与试药
Agilent1200 型高效液相色谱仪; Pickering Vector-PCX 柱后衍生装置; Waters 含FLR 检测器的ACQUITYUPLC H-Class 系统; SB-5200D 超声清洗器( 宁波新芝生物科技有限公司) ; K2042 高速离心机( 美国Kingdom) ; AE-100 电子天平( 瑞士Mettler) 。
免疫亲和层析柱( A、B、C 公司) ; 玻璃纤维滤纸( 北京中检维康科技有限公司) ; 黄曲霉毒素混合对照品溶液( 美国SUPELCO 公司，批号: LB74656，黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1浓度分别为0.302、0.965、0.306、1.021 g /mL) 。
甲醇、乙腈均为色谱纯，所用水为纯化水。
地龙( 批号11008ZY04) 为汕头美宝制药有限公司提供; 陈皮( 批号110901) 为广州中一药业有限公司提供; 薏苡仁( 批号20XX0101B) 为广州市香雪制药股份有限公司提供; 柏子仁
A、B、C 分别购自广州大参林、广州同健和广州采芝林药店，批号自编。
2 方法与结果
2.1 供试品溶液的制备
取本品粉末约5 g( 过二号筛) ，精密称定，加入黄曲霉毒素( aflatoxin，AF) 是由黄曲霉( asperillusflavus) ，寄生曲霉( asperillus parasiticus) 等真菌产生的一类分子结构相似的次级代谢产物，是一类毒性和致癌性很强的化合物，为第一类致癌物，是人类原发性肝癌的主要致病因素之一。
中药材在生长和储存过程中，若环境条件适宜便会滋生霉菌从而产生黄曲霉毒素。
目前黄曲霉毒素的检测方法主要有薄层色谱法、高效液相色谱法、酶联免疫法、液相色谱-质谱联用法等，中国药典20XX年版第二增补本采用高效液相色谱柱后衍生法测定。
本文就中国药典黄曲霉毒素检验过程中常遇到的问题以及无衍生快速检测黄曲霉毒素的方法进行初步探讨。
2.2 超高效液相色谱和荧光检测器无衍生法快速检测黄曲霉毒素
2.2.1 线性关系、检测限和定量限精密吸取黄曲霉毒素混合标准品溶液( 黄曲霉毒素B1浓度为102.1 ng /mL) ，分别加50%甲醇制成浓度为每毫升含AFB10.204 2、0.408 4、2.042 0、6.126 0、20.420 0ng 的标准品溶液，摇匀，即得。
分别精密吸取对照品溶液2 L，注入色谱仪中，记录峰面积，以浓度( ng /mL) 为横坐标，积分值为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。
结果表明 4 种黄曲霉毒素线性关系良好。
按进样浓度分别为信噪比的3 ∶1 和10 ∶1 计算检测。