实验室拟南芥常用种植方法
种拟南芥的步骤
种拟南芥的步骤
种拟南芥的步骤
1、紫外线照实验台15-20分钟。
准备：1/2MS培养基；平皿；枪；灭菌水；
0.1%Agar溶液（高温高压灭菌）；灭菌枪头（黄枪头要剪）；marker笔；无
水乙醇；95%乙醇；封口膜。
2、数种子于1.5ml的EP管中，做好标记。
3、微波炉化1/2MS培养基，倒板。
需要加抗生素的要加抗生素（潮霉素：每
100ml培养基加56ul；卡纳：每100ml培养基加100ul），无菌操作。
4、洗种子：
A、向盛种子的EP管中加1ml 75%的乙醇（250ul的无菌水加750ul的无水
乙醇，现配现用，且要先加无菌水），剧烈晃动8分钟。
【或者洗两次，每次4分钟】
B、将上述酒精倒出后，加入95%的乙醇冲洗5遍。
【3遍也可以】
C、用无菌水清洗2遍，倒掉水。
【1遍也可以】
5、将种子悬起。
加入100—200ul的0.1%的Agar溶液，将种子用枪吹起。
【Agar
的量要视情况而定】
6、点种子。
用200ul的枪和剪过的黄枪头吸取种子，在培养基上依次点种，尽
量分散均匀，晾干。
7、封皿，并做好标记。
8、层化。
放于4度的冰箱处理3天。
9、将层化的种子置于光照培养箱中育苗一周，培养皿要倾斜放置。
10、移栽于土中。
拟南芥的栽培
拟南芥的栽培拟南芥生长周期短，6∽8周即可完成从种子到种子的整个生活周期。
1.播种腐殖质土：珍珠岩或赭石=2 : 1，播种前土壤混合物进行高压灭菌30 min，以杀死可能混有的害虫。
通常使用培养皿点播拟南芥种子，点播时使用琼脂糖浓度为0.8 %的1/2 MS培养基进行点播种子（因为该琼脂糖浓度有利于在不伤根的情况下取出培养基中的小苗，移植至土壤中）。
直接土壤播种后，将播有种子的容器移至低温条件下（2∽4 ℃）2∽4 d，以破除种子休眠（对新鲜收获的种子尤为重要），在种子发芽期间必须保持土壤高湿度，故容器需要用塑料膜覆盖1周左右揭去。
2.生长发育条件控制光：光强度为120∽150 umol/(m2•s)，光周期为16 h光照，8 h黑暗。
长日照促进拟南芥提前开花，使叶数量减少且降低种子生成，较短日照有利于营养生长。
温度：拟南芥最适生长温度为25 ℃左右（对于迟开花拟南芥生态型来说，幼苗期要给以4 ℃左右几周的春化处理，以破除休眠）。
水分：拟南芥两片真叶开始伸展之前必须避免干旱，但供水过量会引起土表藻类和真菌的生长；当真叶长出后，灌水频率可相应减少（如每周一或两次），至长角果充实阶段必须保证水分供应，以利于种子形成，但当长角果进入成熟阶段时，较低湿度（< 50 %）是有利的。
营养：营养贫瘠的植株叶呈微淡绿色，植株矮、提早开花，且种子着生少；营养充足的健壮植株呈暗绿色。
防止杂交：防止昆虫进入导致杂交，各品系种植之间的距离>20 cm，从而防止不同品系的花相互接触。
3.拟南芥的花浸法注意事项：当拟南芥花序枝刚伸出时，摘除初生花序枝，促进其长出更多的花序枝，并移至长日照（16∽24 h光照/d）下生长，约一周后进行转化。
正常的生长条件下，转化约3周后收获种子以供鉴定。
确认再生植株为转基因植株的方法有：Southern印迹，报告基因的活性测定和组织化学等鉴定。
在取得一系列突变体后，可用功能互补的转化法来鉴定一个基因，即：用某种途径取得的DNA片段去转化一个功能缺失的突变体，如果转化后能够补偿基因功能突变表型的话，那么这个片段即为含目的基因片段。
[转载]拟南芥培养
![[转载]拟南芥培养](https://img.taocdn.com/s3/m/d965915f68eae009581b6bd97f1922791688bed3.png)
[转载]拟南芥培养一、拟南芥播种种子装入dorf管内，20μl种子加1ml 75% 乙醇消毒1分钟；吸去乙醇，加入1ml 50%次氯酸钠：50%无菌水：0.05%吐温（or 5%漂白粉），震荡洗涤15-20分钟；稍离心使种子沉于下部，吸去次氯酸钠或漂白粉，加入无菌蒸馏水清洗（清洗3次，每次洗完后稍离心，吸净水分）；将种子用接种环均匀铺于MS培养基上，用封口膜封口，放入4℃冰箱内冷处理2-3天（春化）。
MS培养基的用量：直径为9cm的培养皿用25ml，直径为6cm 的培养皿用12.5ml。
加培养基时先将凝固的培养基用微波炉高温5分钟左右至全部解冻，然后慢慢冷却至不太烫手时倒板，如要加潮霉素等抗生素也是在此次加，加入后摇匀然后倒板。
倒板后至自然冷却即可铺种，如水分较多或板不够硬，亦可于倒板后将培养皿盖打开晾10分钟左右（此时超净台要关闭）。
种子的杀菌、清洗、铺板等过程在超净工作台上无菌操作，操作者进入超净工作台要用酒精棉球擦拭手、器具、超净台，防止感染细菌、真菌。
二、MS固体培养基制备1．培养基母液的配制和保存MS培养基含有近30种营养成分，为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量，可将培养基中的各种成分，按原量的20倍或200倍分别称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做培养基母液。
这样每次使用时，取其总量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL)，加水稀释，制成培养液。
现将制备培养基母液所需的各类物质的量列出，供配制时使用。
大量元素(母液Ⅰ，20×) mg／LNH4NO3 33 000KNO3 38 000CaCl2·2H2O 8 800MgSO4·7H2O 7 400KH2PO4 3 400微量元素(母液Ⅱ，200×) mg／LKI 166H3BO3 1 240MnSO4·4H2O 4 460ZnSO4·7H2O 1 720Na2MoO4·2H2O 50CuSO4·5H2O 5CoCl2·6H2O 5铁盐(母液Ⅲ，200×) mg／LFeSO4·7H2O 5 560Na2-EDTA·2H2O 7 460有机成分(母液Ⅳ，200×) mg／LⅣA肌醇 20 000ⅣB烟酸 100盐酸吡哆醇(维生素B6) 100盐酸硫胺素(维生素B1) 100甘氨酸 400上述几种母液都要单独配成1 L的贮备液。
拟南芥种植方法.doc
培养基上点种子：1.种子处理1.1 种子消毒处理在培养基中点样前，必须对种子进行消毒，防止感菌，具体方法为：先将种子倒在干净的纸上，挑去大的杂质，再将种子倒入EP管中，加入1mL70%酒精，振荡10min，将种子放在超净台中吹干。
1.2 点样将消毒处理后的种子，可以利用牙签点到培养基上，每次仅点一粒种子，根据培养皿的大小，确定一个里面能够点多少个种子，每个90mm培养皿上大约种30粒种子，防止植株长大后影响根与子叶的发育。
1.3 春化种子点样完毕后，将培养基密封，置于4℃冰箱里放置72h后，放回温室。
土培法：1.种种子前，要将营养土用自来水混匀后，121℃灭菌30min，待土冷却后，装入种植拟南芥的方盒中，再将方盒放入红色托盘中。
2.将要点的种子平铺在称量纸上，用牙签蘸取一粒种子点在营养土上,每点一个小盒时都用牙签做标记，以免遗种某个盒子。
（每个小盒子种5粒种子，每个大方盒子种9粒种子）3.将点了拟南芥种子的托盘置于22℃温室，并用一个干净的托盘盖在上面，大约两天后就可以打开上面的托盘，待植物长出4片叶子时，可以根据自己的实验需求对植物的幼苗进行取舍。
4.植株生长条件的控制幼苗移植后将花盆置于温室内，保证温室温度恒定在22℃，空气湿度70—80%，光照强度100—150μmol/m2/s，每天浇两次纯净水，上午9点左右一次，下午5点左右一次；一周浇一次营养液（1平匙溶于1L水中），营养液要灌在盆底。
浇水注意事项：1）水不可以浇的过多或过少，用手捏起一些土能挤出水来说明就有点太湿；2）水要浇均匀，托盘四个角的方向如果喷壶喷不到，可以用挤瓶均匀地喷一些水；3）用喷壶浇水时，喷壶的水柱不可以太大，以免把植物连根拔起；4）当植株出现花芽时，一定要保证水分的供应，促进果实的发育。
当植株结有豆荚时，可以适当的减少供水量，每两三天浇一次水便可，以利于种子的成熟。
开花后的植物不能再用喷壶浇水，要从盆底灌水，但不可以一次性灌太多水；5）在盆底灌水后，待植物吸收完水后，可以将盆底多余的水分倒出来；6）拟南芥受到胁迫判断标准：叶柄发紫，叶片发黄，开花期提前等；7）如果做生理实验，植物一旦受到胁迫，需要把植物丢弃，重新种植，以免实验数据不准确。
实验室拟南芥常用种植方法
贮存过程中影响种子寿命的主要是温度和含水量。温度越高，含水量越多，则种子寿命 越短。因此刚采集的种子必须要经过干燥才能保存。最安全的种子干燥的方法是将采集的种 子置于干燥环境下，在室温条件下放置 2-3 周便可。
种子的贮存可根据贮存的目的不同，分为短期、中期、长期贮藏。一般短、中期贮藏是 将种子贮存在 4℃，而长期贮藏是保持在-20℃温度下。当取用长期贮藏的种子前，先将贮 存种子的容器预热到室温，或者将其置于 37℃水浴 10min，以尽量使冰害降至最低。为了 及时了解贮存过程合适与否，一般对种子定期进行生活力测定，而种子发芽率是测定其生活 力的最佳选择。
拟南芥实验室的常用种植方法刘金亮西北师范大学生命科学学院730070摘要拟南芥由于其生活周期短种植和生长不受季节限制并且为自花受粉植物而作为实验最常用的模式植物因此拟南芥如何能够在实验室较好较快地生长便成为实验成败的关键由于拟南芥存在多种生态性各实验室均有各自适合栽培种植的方法如在土壤石英砂琼脂等均可种植但土壤种植种子萌发率低生长过程中受其它方面影响大故本方法重点介绍利用琼脂无菌培养基培养幼苗和移植相结合的方法来快速种植拟南芥该过程主包括种子的处理琼脂无要菌培养基上种子的培养和幼苗的移植以及成熟后种子的保存
过厚或过薄。过薄，点种子后水分蒸发快，培养基有可能干涸；过厚，种子发芽后，有可能 使叶子浸入平板中，影响幼苗后期发育并且过厚平板易开裂。
1.2 种子处理 1.2.1 种子消毒处理
在培养基中点样前，必须对对钟子进行消毒，防止感菌，具体方法为：利用 1%Naclo 浸泡 10min，离心后，倒掉 Naclo，然后用无菌蒸馏水洗涤 5-6 遍，时间间隔为 1min，注意 的是 Naclo 浓度不易过高和种子处理时间不易过长，有可能伤害种子。
拟南芥的种植.doc
一、拟南芥播种种子装入dorf管内，20μl种子加1ml 75% 乙醇消毒1分钟；吸去乙醇，加入1ml 50%次氯酸钠：50%无菌水：0.05%吐温（or 5%漂白粉），震荡洗涤15-20分钟；稍离心使种子沉于下部，吸去次氯酸钠或漂白粉，加入无菌蒸馏水清洗（清洗3次，每次洗完后稍离心，吸净水分）；将种子用接种环均匀铺于MS培养基上，用封口膜封口，放入4℃冰箱内冷处理2-3天（春化）。
MS培养基的用量：直径为9cm的培养皿用25ml，直径为6cm的培养皿用12.5ml。
二、MS固体培养基制备1．培养基母液的配制和保存MS培养基含有近30种营养成分，为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量，可将培养基中的各种成分，按原量的20倍或200倍分别称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做培养基母液。
这样每次使用时，取其总量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL)，加水稀释，制成培养液。
现将制备培养基母液所需的各类物质的量列出，供配制时使用。
大量元素(母液Ⅰ，20×) mg／LNH4NO3 33 000KNO3 38 000CaCl2·2H2O 8 800MgSO4·7H2O 7 400KH2PO4 3 400微量元素(母液Ⅱ，200×) mg／LKI 166H3BO3 1 240MnSO4·4H2O 4 460ZnSO4·7H2O 1 720Na2MoO4·2H2O 50CuSO4·5H2O 5 CoCl2·6H2O 5铁盐(母液Ⅲ，200×) mg／LFeSO4·7H2O 5 560Na2-EDTA·2H2O 7 460有机成分(母液Ⅳ，200×) mg／L ⅣA肌醇20 000ⅣB烟酸100盐酸吡哆醇(维生素B6) 100盐酸硫胺素(维生素B1) 100甘氨酸400上述几种母液都要单独配成1 L的贮备液。
拟南芥
拟南芥种植花序浸染法转化拟南芥（1）种植：选择吸水性好，土质松软的蛭石配合营养土（1：1/2）作为拟南芥种植土壤。
直径9cm的花盆，每盆播种20-30颗。
播种以后在花盆上罩上薄膜，给植株的生长提供一个湿润的环境。
（2）去顶：在拟南芥初次开花时将花蕾剪掉，可以促进侧枝更多的花枝的增生。
适合转化植株的花卉并没有成熟，也没有产生已受精的角果。
（3）配制浸染液：在5%的蔗糖溶液中重悬农杆菌使OD=0.8，为了保持蔗糖溶液的新鲜，可以现配现用，无需灭菌。
100-200ml浸染2-3个小盆植株，400-500ml浸染，2-3个花盆（9cm）植株。
在浸染之前加入表面活性剂至浓度0.05%（500ul/L），如果产生表面活性剂的毒性现象（浸过部分发黄或死亡），将浓度降至0.02%。
（4）浸染：将盛花期拟南芥的花表面部分浸泡在农杆菌悬浮液中2-3s，同时轻轻旋转。
（5）暗培养：将浸染后植株套袋保持高度的湿润状态暗室培养24h。
（6）浸染后培养：隔天浇水，保证水分充足即可。
（7）种子收集：种子成熟，角果自然开裂后可以收种子。
（8）转基因种子筛选：在含有Kan抗生素的平板上培养浸染后所得种子。
40mg的种子大约200颗于含kan 10-50μg/ml 的0.5×MS培养基上春化2天，之后在持续光照条件下培养7-10天。
根据生长状况判断是否为转基因种子。
成功转入重组质粒的种子能够在抗性培养及上正常生长出4片以上真叶。
非转基因种子不能正常生长，仅能长出2片子叶，根的生长也受到严重抑制，一般萌发10天以后死亡。
（9）转基因植株转土栽培。
转基因种子在MS+kan平板上萌发2周以后，将阳性植株转入土壤继续培养。
转基因拟南芥纯合子筛选由于农杆菌介导的花序浸染法只能将目标片段整合到一条DNA单链上，为后续生理性状实验需要，将T0代转基因种子培育至T2代，利用抗性筛选得到纯合子。
根据杂合子在发生性状分离时会产生野生型后代，而野生型种子不能在MS+Kanr（50μg/ml）平板上正常生长，进行转基因植株纯合子的筛选。
拟南芥种植方法
培养基上点种子：1.种子处理1.1种子消毒处理在培养基中点样前，必须对种子进行消毒，防止感菌，具体方法为：先将种子倒在干净的纸上，挑去大的杂质，再将种子倒入EP管中，加入1mL70%酒精，振荡10min，将种子放在超净台中吹干。
1.2点样将消毒处理后的种子，可以利用牙签点到培养基上，每次仅点一粒种子，根据培养皿的大小，确定一个里面能够点多少个种子，每个90mm培养皿上大约种30粒种子，防止植株长大后影响根与子叶的发育。
1.3春化种子点样完毕后，将培养基密封，置于4℃冰箱里放置72h后，放回温室。
土培法：1.种种子前，要将营养土用自来水混匀后，121℃灭菌30min，待土冷却后，装入种植拟南芥的方盒中，再将方盒放入红色托盘中。
2.将要点的种子平铺在称量纸上，用牙签蘸取一粒种子点在营养土上,每点一个小盒时都用牙签做标记，以免遗种某个盒子。
（每个小盒子种5粒种子，每个大方盒子种9粒种子）3.将点了拟南芥种子的托盘置于22℃温室，并用一个干净的托盘盖在上面，大约两天后就可以打开上面的托盘，待植物长出4片叶子时，可以根据自己的实验需求对植物的幼苗进行取舍。
4.植株生长条件的控制幼苗移植后将花盆置于温室内，保证温室温度恒定在22℃，空气湿度70—80%，光照强度100—150μmol/m2/s，每天浇两次纯净水，上午9点左右一次，下午5点左右一次；一周浇一次营养液（1平匙溶于1L水中），营养液要灌在盆底。
浇水注意事项：1）水不可以浇的过多或过少，用手捏起一些土能挤出水来说明就有点太湿；2）水要浇均匀，托盘四个角的方向如果喷壶喷不到，可以用挤瓶均匀地喷一些水；3）用喷壶浇水时，喷壶的水柱不可以太大，以免把植物连根拔起；4）当植株出现花芽时，一定要保证水分的供应，促进果实的发育。
当植株结有豆荚时，可以适当的减少供水量，每两三天浇一次水便可，以利于种子的成熟。
开花后的植物不能再用喷壶浇水，要从盆底灌水，但不可以一次性灌太多水；5）在盆底灌水后，待植物吸收完水后，可以将盆底多余的水分倒出来；6）拟南芥受到胁迫判断标准：叶柄发紫，叶片发黄，开花期提前等；7）如果做生理实验，植物一旦受到胁迫，需要把植物丢弃，重新种植，以免实验数据不准确。
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表二：营养液的配制
物质的量
母液体积（ml）
5 mM 2.5 mM
2.0 mM 2.0 mM 50 microM 70 microM 14 microM 0.5 microM 1 microM 0.2 microM 10 microM 0.01 microM
1000 1000
配 1L 营养液所需母液体 积(ml)
1 培养基配制和种子处理
1.1 培养基的配制
1.1.1 培养基母液配制,如表一： 表一：MS 培养基母液配制（单位：mg）
母液
编号 种类
大
量
1
元
素
2
微 量
元
素
铁
3
盐
成分
规定量
KNO3 NH4NO3 MgSO4·7H2O KH2PO4 CaCl2·2H2O
1900 1650 370 170 440
MnSO4·4H2O ZnSO4·7H2O H3BO3 KI
放入营养液中，轻轻的用镊子拨动根部，可将根部上粘连的琼脂清洗干净，这样移植前幼苗
的处理便算是完成了。
母液 元素成分
种类
大
KNO3
量 元
KH2PO4(ph6.5)
素 MgSO4
Ca(NO3)2
Fe-EDTA
H3BO3
微 MnCl2
量 元 CuSO4
素
ZnSO4
Na2MoO4
NaCl
CoCl2(ph6.5)
50
25
500
10
烟酸
0.5
50
25
肌醇（另配） 100
50
5000
500
10
1.1.2 MS 培养基的配制方法
为了使植株能够很好的在培养基上成长，选用 2.4%蔗糖，0.8%的琼脂（有利于在不伤
根的情况下取出植株并进行移植）在培养基配制过程中先将蒸馏水，母液，琼脂混合，加蒸
馏水至所需要的体积，然后高温加热并搅拌使琼脂完全溶解，溶液呈透明状时加入所需蔗糖，
3.3.3 移植后植株生长条件的控制
幼苗移植后将花盆用塑料薄膜覆盖，然后置于 21℃温度、（6300±300）lx 的光照强度
下，在前 4—6 天内，每隔 2 天浇一次营养液（保持土质湿润）并且继续用塑料薄膜覆盖，
当植株的叶子出现明显伸长，茎开始发育时，便可以取掉塑料薄膜。此后，若培养室空气干
燥，可以每隔一天浇营养液一次，具体视情况而定，但前提是保证土壤湿润。当去掉塑料薄
参考资料：
曹仪植主编，拟南芥，高等教育出版社 刘守伟，刘士勇.拟南芥室内培养技术研究[J].山西大学学报（自然科学版）（2009）SI 0146 03
2 幼苗在培养基中的生长
春化完毕后，将培养基转入培养箱（室）中，培养条件为：温度 21℃，光照强度
5500lx±300lx 光照时间 12h。其正常的生长状况一般为：
生长天数
1—2 天
3--4 天
5—8 天
8—12 天
12—14 天
生长状况
生根
2 片叶子
4 片叶子
6 片叶子
8 片叶子
当生长到 8 片叶子时，将培养皿稍稍倾斜，这样有利于根的伸长，利于以后幼苗的移植，
当植珠生长 3 周时间时，便能进行移植了。
3 幼苗的移植
3.1 土壤混合物的配制
对于栽培拟南芥的介质要求有良好的排水性，因此一般利用混合的沙子，蛭石等惰性 介质，保持良好的排水，防止过湿引起真菌和昆虫幼虫的滋生，常用的混合物有泥炭土，蛭 石，珍珠岩，其比例为泥炭土：蛭石：珍珠岩=1:1:1，将混合物混合均匀后，分装入小花盆 中，为了使介质有更好的排水性和通气性，混合物在花盆中的高度有 3-4cm 便可，并且在配 制混合物的过程中要保持珍珠岩完整和土质膨松。
3.2 营养液的配制见表二 3.3 移植的具体方法
如何把幼苗由培养基完整的移植到土壤混合物并且使幼苗健壮成长，是拟南芥能否种植
成功的关键，该过程主要包括幼苗的处理，移植和移植后幼苗生长条件的控制。
3.3.1 幼苗的处理
用镊子小心的除去幼苗根附近的琼脂，将幼苗从培养基中取出，在此过程要注意保护幼
苗的根部。可在移幼苗前预备一培养皿，向其中加入约 1/3 的营养液，把拿出么幼苗小心的
膜后，为使植株更好的生长和诱导开花可将光照时间延长至 14-16h。当植株出现花芽时， 一定要保证水分的供应，促进果实的发育。当植株结有豆荚时，可以适当的减少供水量，每 周浇一次水便可，以利于种子的成熟。
4 种子的收集和保存
4.1 种子的收集
拟南芥种子处在长角果中，当逐渐成熟时，长角果由绿变黄，最后成褐色。就实验室种 子收获来说，主要是及时收获种子，不至于使种子成熟而退化。此外要避免种系混杂的采集， 使种质得以保存。当长角果变黄时，可以开始单个采集长角果，但此时种子中含有较多的生 长抑制剂。因而，当长角果变褐时及时采集，可得到成熟又易发芽的种子。收获的种子应立 即脱粒、清洁、干燥。
过厚或过薄。过薄，点种子后水分蒸发快，培养基有可能干涸；过厚，种子发芽后，有可能 使叶子浸入平板中，影响幼苗后期发育并且过厚平板易开裂。
1.2 种子处理 1.2.1 种子消毒处理
在培养基中点样前，必须对对钟子进行消毒，防止感菌，具体方法为：利用 1%Naclo 浸泡 10min，离心后，倒掉 Naclo，然后用无菌蒸馏水洗涤 5-6 遍，时间间隔为 1min，注意 的是 Naclo 浓度不易过高和种子处理时间不易过长，有可能伤害种子。
4.2 种子的干燥和贮存
贮存过程中影响种子寿命的主要是温度和含水量。温度越高，含水量越多，则种子寿命 越短。因此刚采集的种子必须要经过干燥才能保存。最安全的种子干燥的方法是将采集的种 子置于干燥环境下，在室温条件下放置 2-3 周便可。
种子的贮存可根据贮存的目的不同，分为短期、中期、长期贮藏。一般短、中期贮藏是 将种子贮存在 4℃，而长期贮藏是保持在-20℃温度下。当取用长期贮藏的种子前，先将贮 存种子的容器预热到室温，或者将其置于 37℃水浴 10min，以尽量使冰害降至最低。为了 及时了解贮存过程合适与否，一般对种子定期进行生活力测定，而种子发芽率是测定其生活 力的最佳选择。
22.3 8.6 6.2 0.83
Na2MoO4·2H2O 0.025
CuSO4·5H2O 0.025
CoCl2·6H2O 0.025
Na2EDTA
37.3
FeSO4·4H2O 27.8
扩大倍数
10 10 10 10 10 100 100 100 100 100 100 100 100 100
称取量
拟南芥实验室的常用种植方法
刘金亮
（西北师范大学，生命科学学院，730070）
摘要：拟南芥由于其生活周期短，种植和生长不受季节限制，并且为自花受粉植 物而作为实验最常用的模式植物，因此拟南芥如何能够在实验室较好较快地生长 便成为实验成败的关键，由于拟南芥存在多种生态性，各实验室均有各自适合栽 培种植的方法如在土壤，石英砂，琼脂等均可种植，但土壤种植种子萌发率低， 生长过程中受其它方面影响大，故本方法重点介绍利用琼脂无菌培养基培养幼苗 和移植相结合的方法，来快速种植拟南芥，该过程主要包括种子的处理，琼脂无 菌培养基上种子的培养和幼苗的移植以及成熟后种子的保存。 关键词：培养基配制；种子处理；种植；移植 Abstract:The Arabidopsis is used as a model plant because its life cycle is short and the growth is not season limited as well as self-pollination.As for those reasons,it is important to make the Arabidopsis growing well and rapidly in laboratory.Our experiment will success or not depending on the Arabidoopsis growth.There are many methods to crop Arabidoopsis in different Labs such as plant crops on the soil , quartz sand,agar and so on.But the plants grow slowly on the soil and are influenced by many elements.To solve this,we adopt the method using the agar culture medium raise seedling and then transplant.This process mainly includes seed treatment,seed culture on agar culture and transplant. Key words：Culture dispensing; seed treatment; plant; transplant
19000 16500 3700 1700 4400 2230 860 620 83 2.5 2.5 2.5 3730 2780
母液体积 配 1L 培养基 （ml） 吸取量（ml）
1000
100
1000
10
1000
10
甘氨酸
2.0
4 维 盐酸硫胺素 0.5 生
素 盐酸吡哆素 0.5
5补充蒸馏水，使总体积保持不变。溶解完成后，调节溶液
PH，使 PH 为 5.8(1MKOH)，然后在琼脂凝固之前将药品分装，与实验中所用的培养皿，枪头，
枪盒，蒸馏水等利用高压蒸气灭菌。
1.1.3 倒平板
将灭菌后的药品及培养皿于无菌室中倒平板，平板厚度一般占培养皿厚度的 1/3，不易