几种常见培养基作用.pdf
制药工艺培养基分类
制药工艺培养基分类
制药工艺培养基可以根据其成分和用途进行分类。
根据成分可以分为无机培养基和有机培养基，根据用途可以分为基础培养基和选择性培养基。
1. 无机培养基：无机培养基是由无机盐溶解于水中形成的培养基，主要提供微生物所需的矿物质元素。
常见的无机培养基包括氮气源（如硝酸铵、硝酸钠）、碳源（如葡萄糖、蔗糖）、矿物质元素（如硫酸镁、氯化钠）等。
2. 有机培养基：有机培养基是由有机物质溶解于水中形成的培养基，可以提供微生物所需的有机营养物。
常见的有机培养基包括肉汤培养基、蛋白胨培养基等。
有机培养基通常比无机培养基更适合细菌的生长。
3. 基础培养基：基础培养基是一种通用的培养基，适用于多种微生物的生长。
它包含了微生物所需的基本营养物质，如氮源、碳源、矿物质元素等。
基础培养基的配方通常是比较简单的，以满足多种微生物的生长需求。
4. 选择性培养基：选择性培养基是为了选择某一特定菌种而设计的培养基。
它通过添加特定的抑制剂或选择物质，可以抑制其他非目标菌的生长，从而使目标菌能够快速生长和扩增。
选择性培养基在微生物学实验和临床诊断中经常使用，用于分离和鉴定特定的微生物。
真菌用的培养基
真菌用的培养基
真菌的培养基根据其特点和需求不同，可以分为以下几种常见的培养基：
1. 薄膜培养基：如麦芽琼脂、马铃薯葡萄糖琼脂等。
适用于革兰氏阳性真菌和某些革兰氏阴性真菌的培养。
2. 液体培养基：如液体麦芽琼脂、液体马铃薯葡萄糖琼脂等。
适用于真菌的液体培养、发酵和产生次级代谢产物。
3. 饲养基：如麦麸葡萄糖培养基、马铃薯糖蛋白胨培养基等。
适用于饲养虫化真菌和真菌的寄生菌株。
4. 高营养培养基：如琼脂葡萄糖培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基等。
适用于真菌菌株的快速生长和高产菌。
5. 特殊培养基：如选择性培养基、鉴定培养基等。
根据不同的真菌种类和需求，可以添加抗生素、抑菌剂或特定的营养成分。
此外，还可以根据真菌的特殊要求，进行改良和添加其他成分，从而满足其生长和繁殖的需要。
实验室培养基成分及作用分析
• • • • •
结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA） 蛋白胨和酵母粉提供碳氮源和微量元素； 乳糖是可发酵的糖类； 氯化钠可维持均衡的渗透压； 胆盐和结晶紫抑制革兰氏阳性菌，特别抑 制革兰氏阳性杆菌和粪链球菌； • 中性红为pH指示剂。用以检测细菌能否分 解培养基中的乳糖，如分解乳糖则菌落呈 酸性，中性红变红色，即菌落是红色的， 不分解乳糖则菌落是无色或黄色的 。
• BS成分： • 蛋白胨 牛肉浸粉 硫酸亚铁 亚硫酸铋 磷酸氢二钠 葡萄糖 煌绿 琼脂 pH值 7.7 ± 0.2
• 四硫磺酸盐煌绿增菌液基础(TTB) • 蛋白胨和牛肉粉提供碳源、氮源和维生素 满足细菌生长的需求； • 氯化钠可维持均衡的渗透压； • 碳酸钙能中和细菌产酸及吸收有毒的代谢 产物； • 硫代硫酸钠和四硫磺酸钠结合可抑制肠道 共生菌(四硫磺酸钠是在培养基加入碘和碘 化钾时形成)，而具有四硫磺酸钠还原酶的 细菌能在此培养基中繁殖； • 胆盐可抑制大肠群菌和其它革兰氏阳性杆 菌。
胰蛋白胨大豆蛋白胨氯化钠磷酸氢二钾丙酮酸钠葡萄糖ph值7302马铃薯葡萄糖琼脂pda马铃薯粉葡萄糖琼脂ph值5602孟加拉红培养基孟加拉红作为选择性抑菌剂可抑制细菌的生长并可减缓某些霉菌因生长过快而导致菌落漫延生长
• LST肉汤： • 胰蛋白胨提供碳源和氮源满足细菌生长的 需求； • 氯化钠可维持均衡的渗透压； • 乳糖是大肠菌群可发酵的糖类； • 磷酸二氢钾和磷酸氢二钾是缓冲剂； • 月桂基硫酸钠可抑制非大肠菌群细菌的生 长
• • • • • • • •
EMB成分： 蛋白胨 10.0 乳糖 10.0 磷酸氢二钾 2.0 琼脂 15.0 伊红 0.4 美蓝0.065 pH值7.1 ± 0.2 25℃
• MRS培养基： • 蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉提供氮源、 维生素、生长因子； • 葡萄糖为可发酵糖类； • 磷酸氢二钾为酸碱缓冲剂； • 柠檬酸氢二铵、硫酸镁、硫酸锰、吐温-80 和乙酸钠为培养各种乳酸菌提供生长因子 ，其成分还能抑制某些杂菌； • 琼脂是培养基的凝固剂。
培养基的作用
培养基的作用
培养基是用于细菌、真菌、细胞等微生物的生长和繁殖的基质。
培养基的作用主要有以下几个方面：
1. 提供营养物质：培养基中含有各种微生物所需的营养物质，包括碳源、氮源、矿物质、维生素等。
这些营养物质是微生物生长和繁殖所必需的，可供微生物吸收利用。
2. 提供水分：培养基中含有适量的水分，使微生物能够吸收到所需的水分，维持细胞内部的水分平衡。
3. 提供稳定的pH值：培养基中含有缓冲液或缓冲体系，可以
调节培养基的酸碱度，使微生物能够在适宜的pH条件下生长。
4. 提供适宜的温度：培养基可以被加热或冷却，以提供适宜的温度条件。
不同的微生物对温度有不同的要求，培养基可以根据微生物的特点来提供适宜的温度。
5. 提供适宜的气氛：某些微生物需要特定的气氛来生长，如需氧气的微生物需要提供氧气气氛，而厌氧微生物则需要提供无氧气条件。
培养基可以根据微生物的需求提供适宜的气氛。
6. 促进微生物的生长和繁殖：培养基中的营养物质可以为微生物提供所需的能量和物质基础，促进微生物的生长和繁殖。
7. 提供可观察的指标：培养基中可以添加某些指标物质，如酶底物、染色剂等，来观察微生物的代谢活性、生长特点等。
通
过对这些指标的观察，可以了解微生物的生长状态和代谢活性。
总之，培养基是为微生物生长和繁殖提供营养和环境的基质。
它可以提供微生物所需的营养物质、水分、适宜的pH值、温
度和气氛条件，促进微生物的生长和繁殖。
通过对培养基中的指标物质的观察，可以了解微生物的生长特点和代谢活性。
培养基是微生物学研究和实验的基础，对于微生物的培养和研究具有重要的意义。
各种培养基的作用
马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基（PDA）：霉菌和酵母在PDA培养基上生长良好。
用PDA作平板计数时，必项加入抗菌素以抑制细菌。
孟加拉红（虎红）培养基：该培养基中的孟加拉红和抗菌素具有抑制细菌的作用。
孟加拉红还可抑制霉菌菌落的蔓延生长。
在菌落背面由孟加拉红产生的红色有助于霉菌和酵母菌落的计数。
平板计数琼脂培养基胰蛋白胨提供碳源和氮源；酵母浸粉提供B族维生素；葡萄糖提供能源；琼脂是培养基的凝固剂马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基:马铃薯浸出粉有助于各种霉菌的生长；葡萄糖提供能源；琼脂是培养基的凝固剂。
氯霉素课抑制细菌的生长孟加拉红供霉菌和酵母的计数、分离和培养用; 蛋白胨提供碳源和氮源；葡萄糖提供能源；磷酸二氢钾为缓冲剂；硫酸镁提供必须的微量元素；琼脂是培养基的凝固剂；氯霉素可抑制细菌的生长；孟加拉红作为选择性抑菌剂可抑制细菌的生长，并可减缓某些霉菌因生长过快而导致菌落漫延生长。
伊红美蓝琼脂培养基用以鉴别大肠杆菌和沙门氏菌。
培养基中，伊红与美蓝为指示剂，做成的培养基呈淡紫色。
大肠杆菌能分解培养基中的乳糖而产生酸，能使伊红与美蓝结合成黑色化合物，有时还带有荧光，沙门氏菌不能分解乳糖，故菌落颜色与培养基相同，伊红与美蓝还有抑制革兰氏阳性菌生长的作用。
LST 培养基胰蛋白胨提供碳源和氮源满足细菌生长的需求；氯化钠可维持均衡的渗透压；乳糖是大肠菌群可发酵的糖类；磷酸二氢钾和磷酸氢二钾是缓冲剂；月桂基硫酸钠可抑制非大肠菌群细菌的生长EC;胰蛋白胨提供碳氮源；三号胆盐抑制革兰氏阳性菌，特别抑制革兰氏阳性杆菌和粪链球菌；乳糖是可发酵的糖类；磷酸氢二钾和磷酸二氢钾为缓冲剂；氯化钠可维持均衡的渗透压。
Huang;蛋白胨提供碳氮源；乳糖是可发酵的糖类；牛胆粉和煌绿抑制非肠杆菌科细菌琼脂斜面；蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源；琼脂是培养基的凝固剂WR-VP；月示胨提供碳氮源、维生素和生长因子；葡萄糖为可发酵的糖类；磷酸氢二钾是缓冲剂；氯化钠维持均衡的渗透压。
培养基的类型及应用
培养基的类型及应用培养基种类繁多,根据其成份、物理状态和用途可将培养基分成多种类型。
1．按成份不同划分(1)天然培养基(complexmedium)这类培养基主要以化学成分还不清楚或化学成分不恒定的天然有机物组成,牛肉膏蛋白胨培养基和麦芽汁培养基就属于此类。
基因克隆技术中常用的LB(Luria-Bertani)培养基也是一种复合培养基,其组成见表4-10。
常用的天然有机营养物质包括牛肉浸膏、蛋白胨、酵母浸膏(表4-11)、豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麸皮、牛奶、血清、稻草浸汁、羽毛浸汁、胡罗卜汁、椰子汁等,嗜粪微生物(coprophilousmicroorganisms)可以利用粪水作为营养物质。
复合培养基成本较低,除在实验室经常使用外,也适于用来进行工业上大规模的微生物发酵生产。
(2)合成培养基(syntheticmedium)合成培养基是由化学成份完全了解的物质配制而成的培养基，也称化学限定培养基(chemicallydefinedmedium),高氏1号培养基和查氏培养基就属于此种类型。
配制合成培养基时重复性强,但与天然培养基相比其成本较高,微生物在其中生长速度较慢,一般适于在实验室用来进行有关微生物营养需求、代谢、分类鉴定、生物量测定、菌种选育及遗传分析等方面的研究工作。
2．根据物理状态划分根据培养基中凝固剂的有无及含量的多少,可将培养基划分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基三种类型。
(1)固体培养基(solidmedium)在液体培养基中加入一定量凝固剂即为固体培养基。
理想的凝固剂应具备以下条件:1.不被所培养的微生物分解利用;2.在微生物生长的温度范围内保持固体状态。
在培养嗜热细菌时,由于高温容易引起培养基液化,通常在培养基中适当增加凝固剂来解决这一问题;3.凝固剂凝固点温度不能太低,否则将不利于微生物的生长;4.凝固剂对所培养的微生物无毒害作用;5.凝固剂在灭菌过程中不会被破坏;6.透明度好,粘着力强;7.配制方便且价格低廉。
培养基类型及适用范围
培养基类型及适用范围
培养基是一种用于细胞培养和微生物培养的基础性实验工具。
根据不同的需求，培养基可以分为多种类型。
以下是常见的几种培养基类型及其适用范围。
1. 富含营养物质的复合培养基
富含营养物质的复合培养基是最常用的一种培养基类型，它包含多种有机和无机成分，如氨基酸、糖类、维生素、无机盐等。
这类培养基适用于各种微生物和动植物细胞的生长和繁殖。
2. 选择性培养基
选择性培养基是指通过添加某些化合物或抑制剂来抑制某些微生物或促进某些微生物的生长。
这类培养基适用于对特定微生物进行筛选和分离。
3. 差异性培养基
差异性培养基是指通过改变某些成分来使得不同菌株在该培养基上表现出不同的形态特征，从而实现对菌株的鉴定和分类。
这类培养基适
用于对微生物进行分类和鉴定。
4. 无菌培养基
无菌培养基是指经过高温高压灭菌处理的培养基，用于微生物的纯化和细胞培养实验。
这类培养基适用于对微生物进行纯化和细胞培养实验。
5. 液态培养基
液态培养基是指不含固体成分的液体培养基，适用于微生物的大规模发酵和细胞液体培养实验。
6. 固态培养基
固态培养基是指含有凝胶剂（如琼脂）的固态培养基，适用于微生物的单菌落分离、筛选和鉴定等实验。
总之，不同类型的培养基都有其特定的适用范围和应用场景。
在进行实验时，需要根据具体研究目的选择合适的培养基类型。
基础培养基种类
基础培养基种类
基础培养基是生物实验室中保持细胞或微生物生长、生活活动所必
需的培养基质。
常见的基础培养基主要有以下几种类型：
1. LB培养基
LB（Luria Broth）培养基是一种用于细菌培养的营养丰富的液态培养基。
其成分包括蛋白胨、酵母粉和氯化钠等，能够提供细菌所需的碳源、氮源和矿物质等。
LB培养基适用于大多数细菌的培养，是细菌学
研究中最基础的培养基。
2. YPD培养基
YPD培养基是一种适用于酵母细胞的培养基。
其成分包括葡萄糖、酵
母粉和氯化钠等，能够提供酵母细胞所需的能量和营养物质。
YPD培
养基适用于酵母菌的培养、繁殖和转化。
3. DMEM培养基
DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）培养基是一种适用于哺乳
动物细胞的培养基。
其成分包括葡萄糖、氨基酸、维生素和矿物质等，能够提供细胞所需的营养和生长因子。
DMEM培养基适用于多种哺乳
动物细胞的培养、繁殖和传代。
4. M9培养基
M9培养基是一种用于细菌培养的最小培养基。
其成分包括氨基酸、糖
类和矿物质等，能够提供细菌所需的最基本营养。
M9培养基适用于对
细菌基本营养需求进行研究和筛选特定基因的细菌。
5. SD培养基
SD（Synthetic Defined）培养基是一种适用于酵母细胞的最小培养基。
其成分包括氨基酸、糖和矿物质等，能够提供酵母细胞所需的最基本营养。
SD培养基适用于研究酵母细胞的基本生理过程和筛选突变株。
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1.中国蓝平板：含有牛肉粉、蛋白胨、乳糖、琼脂、氯化钠、中国蓝、玫瑰红等成份。
是一种弱选择性（亦有学者称为无抑制性）选择培养基。
成份中的中国蓝为指示剂，玫瑰红为弱抑制剂，仅能抑制革兰阳性菌生长，而对大肠杆菌没有抑制作用，发酵性革兰阴性杆菌因分解乳糖能力不同，在此平板上的菌落颜色不同，便于鉴别菌种。
根据菌落形态，可做出相应的处理或报告。
例如：大肠埃希菌菌落呈蓝色；痢疾志贺菌呈淡红色；鼠伤寒沙门菌呈淡红色。
2.巧克力平板：普通营养琼脂成份添加进氯化血红素，万古霉素，辅酶A。
用途：除可以分离奈瑟菌，嗜血杆菌外，由于加入了万古霉素，可抑制绝大多数的革兰阳性菌的生长，在分离培养上具有重要意义，不能用血平板来替代。
巧克力平板含有嗜血杆菌生长需要的营养因
子X因子和V因子。
其原理为：绵羊血中的V因子通常处于被抑制状态，加热到80～90℃12Min即可破坏红细胞膜上的不耐热抑制物，可使V因子释放，故嗜血杆菌在加热的血琼脂
培养基即巧克力琼脂培养基上生长较佳。
3. TCBS：含酵母膏粉蛋白胨氯化钠柠檬酸钠硫代硫酸钠胆酸钠牛胆粉蔗糖柠檬酸铁溴麝香草酚兰麝香草酚兰琼脂；其中：氯化钠可刺激弧菌的生长；蔗糖是可发酵的糖类；胆酸钠、牛胆粉、硫代硫酸钠和柠檬酸钠及较高的pH（8.6）可抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群；霍乱弧菌对酸性环境比较敏感，因此该pH值可增强其生长；硫代硫酸钠与柠檬酸铁反应作为检测硫化氢产生的指示剂；溴麝香草酚兰和麝香草酚兰是pH指示剂。
利用指示剂来区分是否发酵蔗糖：副溶血性弧菌不发酵蔗糖，菌落呈蓝绿色。
霍乱弧菌发酵蔗糖产酸，菌落呈黄色。
TCBS常用于致病性弧菌的选择性分离，是GB2008、SN标准指定培养基。
4.MAC平板：即麦康凯琼脂培养基，用于大肠杆菌和大肠菌群的分离培养(05药典)，主要成分：蛋白胨脙胨猪胆盐(或牛、羊胆盐) 氯化钠琼脂乳糖1%结晶紫水溶液0.5%中性红水溶液。
麦康凯平板的原理：利用胆盐来抑制革兰阳性细菌的生长，而对伤寒等沙门菌有促进生长的作用．利用乳糖发酵，中性红的颜色可把分解乳糖和不分解乳糖的细菌区别开．沙门菌及志贺菌呈无色菌落，大肠埃希菌呈桃红色菌落．
SS培养基
2.原理
培养基中牛肉膏、蛋白胨等为营养物;煌绿、胆盐、硫代硫酸钠、枸橼酸钠等抑制非病原菌生长,而胆盐能促进某些病原菌生长。
因大肠埃希菌等能迅速分解乳糖产酸并与胆盐结合成
胆酸,故形成中心混浊的粉红色菌落;病原菌不能分解乳糖。
菌落呈透明无色,枸橼酸铁能指示硫化氢的产生,使菌落中心呈黑色。
硫代硫酸钠有缓和胆盐对志贺菌及沙门菌的有害作用并中和煌绿和中性红染料的毒性作用,且能使大肠埃希菌的红色菌落颜色鲜明。
3.用途
用于分离肠道致病菌。
SS琼脂培养基是分离沙门菌及志贺菌属的强选择性培养基,它对大肠埃希菌有较强的抑制
作用,而对肠道病原菌则无明显抑制作用。
因此,可以增加粪便等标本的接种量,从而提高病原菌的检出率,是目前公认比较满意的培养基。
附注:大肠埃希菌属细菌在此培养基虽不易生长,但亦不被杀灭,故挑选病原菌菌落时,应仅挑取菌落的中心部分,否则易将其四周的杂菌一并挑入,影响结果。