大花红景天多糖特征性的结构表征_蒋开年

华西药学杂志W C J ・P S　2009,24(2)ζ123～125I R 、1HNMR 和13CNMR,中国科学院昆明植物研究所分析测试中心测定F AB -M S 。

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Email:jiangkainian@yahoo 3通讯作者(Corres pondent author ),Email:yongp inghan@mail .china .com大花红景天多糖特征性的结构表征蒋开年,崔志斌,宋学伟,朱　刚,韩泳平3(西南民族大学少数民族药物研究所,四川成都610041)摘要:目的　初步表征分析大花红景天多糖的结构。

方法　采用乙醇分级沉淀和葡萄糖凝胶柱层析法分离纯化,得大花红景天多糖的主要成分(RCPS )。

GC 法进行一级结构分析的基础上,采用I R 、UV 、C D 、SE M 等手段对多糖的光谱学特性、不对称性以及形貌特征进行综合考察,同时还采用热分析仪分析热特性,结果与结论　RCPS 是一酸性杂多糖,相对重均分子量为217876×104,由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖和半乳糖醛酸组成,其摩尔比为1ζ2.96ζ0121ζ0.26ζ0108ζ0.58ζ0.15。

RCPS 在溶液中可能以无规则的方式存在,其粒度大约1～2μm,同时晶体间有非常微小的空隙。

加热过程中,多糖出现了3次明显的质量损失。

关键词:大花红景天多糖;光谱;形貌;热分析中图分类号:R284　文献标识码:A 　文章编号:1006-0103(2009)02-0123-03Spectrum,m orpholog i ca l and therma l character isti cs of R hod io la crenu la ta polys acchar i desJ I A NG Kai -nian,CU I Zhi -bin,S ONG Xue -wei,ZHU Gang,HAN Yong -p ing3(Southw est U niversity For N ationnalitles,Chengdu,S ichuan,610041P .R.China )Abstract:O BJECT I VE To study the constituents of Rhodiola crenulata polysaccharides (RCPS ).M ETHOD S RCPS,a main con 2stituent of RCP,was obtained by fracti onal p reci p itati on with alcohol and Sephadex G -100colu mn chr omat ography .GC,I R,UV,C D and SE M were app lied t o investigate the s pectru m,mor phol ogical and ther mal characteristics of RCPS in Rhodiola crenulata polysaccha 2rides .RESU L TS and CO NCL US I O N It was found that RCPS was a acid heter opolysaccharide using methods of UV,I R,GC .The results showed that the average molecular weight of RCPS was 27876,and it was composed of Rha,A ra,Xyl,M an,Glu,galand,galactur onic acid with a molar rati o of 1ζ2.96ζ0.21ζ0.26ζ0.08ζ0.58ζ0.15.The results als o showed that RCPS,m ight be etisted in an irregular and the particle size was about 1-2m icr ometer,while there was m inute void bet w een crystals .Ther mal analysis of RCPS indicated that 3mass l osses appeared during the heating p r ocess .Key words:R hodiola crenulata Polysaccharides;Spectru m;Mor phol ogy;Ther mal analysis CLC nu m ber:R284 D ocu m en t code :A 　Arti cle I D :1006-0103(2009)02-0123-03 红景天是景天科红景天属多年生草本植物,据《本草纲目》记载,具有扶正固本、醒脑明目、轻身益气、久服通神不老之功效。

红景天多糖的药理作用和成分研究已有报道[1～3]。

据文献[3],现以大花红景天多糖(RCPS)为研究对象,柱层析分离得到主要成分RCPS,在一级结构研究的基础上,采用I R、UV、CD、SE M等手段综合考察了多糖的光谱学特性、不对称性及形貌特征,同时还采用热分析仪分析热特性。

1　实验部分111　仪器与试药201型凝胶色谱系统(美国W aters);C-14B气相色谱仪(日本岛津);OV-225弹性石英毛细管柱(30m×0.25mm);Unica m UV500紫外可见分光光度仪(美国Ther mo electr on);I N OVA-400核磁共振仪(美国Varian);JASCO-500型圆二色谱仪(日本JASCO)。

大花红景天产自西藏林芝地区,由严铸云博士鉴定为R hodiola crenu late(HK.feg.Thom2 as)H.obba;Sephadex G-100、鼠李糖、甘露糖、木糖、半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖等试剂(上海试剂公司);赤藓醇(法国A lfa Aesar,99%),其余试剂均为国产分析纯。

112　方法与结果11211　大花红景天多糖的提取　将大花红景天根状茎粉碎后,80℃、提取料液比1ζ12提取(2h×3),合并药液,用旋转蒸发仪于60℃水浴中减压浓缩合适体积,用95%乙醇调节醇浓度至80%,沉淀,静置过夜,抽滤。

依次用无水乙醇、丙酮、无水乙醚洗涤,收集沉淀物,真空干燥得棕褐色粗多糖粉末RCPS。

所得RCPS粗品的质量分数为3125%。

11212　大花红景天多糖的分离纯化　将2%粗多糖为水溶液,加入95%乙醇使乙醇至30%,静置过夜,离心分离沉淀,得RCPS1,再加入95%乙醇使乙醇至50%,静置过夜,离心分离沉淀,得RCPS2,再加入95%乙醇使乙醇至70%,静置过夜,离心分离沉淀,得RCPS3。

RCPS3经Sevag法脱蛋白,最后用H2O2脱色处理后上Sephadex G-100柱层析(650 mm×20mm),以0.1mol・L-1NaCl溶液30m l・h-1洗脱,每管收集4m l,以苯酚-硫酸法检测糖分布。

合并高峰部分,经透析、浓缩、醇沉、真空干燥得RCPS。

RCPS为淡黄色粉末,溶于水,不溶于二甲亚砜、乙醇等有机溶剂。

11213　多糖的纯度鉴定及基本组成分析　多糖的纯化采用常压凝胶柱层析法[4]。

取2mg RCPS溶于最少量蒸馏水中,上Sephadex G-100柱层析,以011mol・L-1NaCl溶液48m l・h-1洗脱,每管收集115m l,苯酚-硫酸法检测糖分布,结果为单一狭窄对称峰,表明该多糖为单一组分(图1)。

采用高效凝胶渗透色谱测定相对分子量,多糖糖基的水解及衍生采用糖腈乙酸酯衍生物气相色谱法。

以硫酸-咔唑反应、双缩脲反应、碘-碘化钾反应、FeCl3试液反应、斐林试剂检测RCPS,除硫酸-咔唑反应显阳性外,其余反应均显阴性。

证明RCPS 中含有糖醛酸,不含多酚类、蛋白、还原糖等成分,与红外光谱、紫外光谱实验结果一致。

高效凝胶渗透色谱法测得多糖的重均分子量为217876×104Da。

混合标准单糖及RCPS水解产物经乙酰化衍生后,进行气相色谱分析,证明RCPS是由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖和半乳糖醛酸组成的,其摩尔比值为1ζ2.96ζ0.21ζ0.26ζ0.08ζ0.58ζ0.15。