番泻叶粉末显微鉴别
实验四 叶类和花类生药番泻叶和红花的鉴定
实验四叶类和花类生药番泻叶和红花的鉴定一、目的要求1.掌握番泻叶和红花的生药性状及显微鉴别特征。
2.了解红花的理化鉴定方法。
二、实验材料、仪器及试剂番泻叶和红花（生药及粉末）、显微镜、临时制片用具、水合氯醛试液、1%NaOH溶液、稀乙醇、滤纸条、三角瓶、培养皿三、实验内容、方法及步骤1. 观察番泻叶和红花的生药性状番泻叶：狭叶番泻Cassia angustifolia Vahl狭叶番泻叶（1）叶片多完整平坦，呈长卵形或卵状披针形，长1.5～5cm，宽0.4～2cm。
（2）叶端急尖，并有锐刺，全缘，叶基部稍不对称；上表面黄绿色，下表面浅黄绿色，无毛或近无毛，下表面主脉稍突出，有叶脉、叶片压叠线纹。
（3）革质。
（4）气微弱而特异，味微苦，稍有黏性。
尖叶番泻叶与狭叶番泻叶相似，主要区别为：（1）小叶片边缘略卷，有破碎，呈披针或长卵形，叶端短尖或微凸，叶基不对称。
（2）上面浅绿色；下表面灰绿色，两面均有细短毛茸。
（3）无迭压线纹。
（4）质地较薄、脆。
以干燥、叶片大而完整、色绿、枝梗少，无黄叶、碎叶、杂质等为佳。
红花：●不带子房管状花，黄红色或红色。
花冠筒细长，先端5裂，裂片狭线形；雄蕊5枚，花药聚合成筒状，黄白色；柱头微露出花药筒外，长圆柱形，顶端微分叉。
●质轻，柔润。
气微香，味微苦。
花浸水中，水染成金黄色。
●以花冠色红而鲜艳、无枝刺、质柔润、手握软如茸毛者为佳。
2. 观察番泻叶和红花的显微特征番泻叶•横切面：1、上表皮细胞中常含大量粘液质；上下表皮均有气孔和非腺毛，非腺毛单细胞性，壁厚，多疣状突起，基部稍弯曲。
2、叶肉组织为等面型。
上表皮内的栅栏细胞较长，约150μm，通过主脉；细胞下表皮内侧的栅栏细胞较短，约50－80μm，不通过主脉；海绵组织细胞中含有草酸钙簇晶。
3、主脉维管束外韧型，上下两侧均有微木化的纤维束，与含草酸钙棱晶的薄壁细胞形成晶纤维。
•粉末：淡绿色或黄绿色。
晶纤维多，草酸钙方晶直径12～15µm。
番泻叶
753
番瀉葉
表 3 色譜洗脫條件
時間 （分鐘）
0 – 45 45 – 60
0.1% 三氟醋酸 （%, v/v）
85 → 75 75 → 10
乙腈 （%, v/v）
15 → 25
25 → 90
洗脫
綫性梯度 綫性梯度
系統適用性要求 將番瀉苷 A 和番瀉苷 B 混合對照品溶液 Std-AS（各 100 mg/L）10 µL，注入 液相色譜儀，至少重複 5 次。系統適用性參數的要求如下：番瀉苷 A 和番瀉 苷 B 的峰面積相對標準偏差均應不大於 5.0%；番瀉苷 A 峰和番瀉苷 B 峰的 保留時間相對標準偏差均應不大於 2.0%；理論塔板數按番瀉苷 A 峰和番瀉 苷 B 峰計算分別應不低於 50000 和 30000。
752
番瀉葉
5.6 水分（附錄 X）
烘乾法：不多於 10.0%。
6. 浸出物（附錄 XI）
水溶性浸出物（冷浸法）︰不少於 25.0%。
醇溶性浸出物（冷浸法）︰不少於 18.0%。
7. 含量測定
照附錄 IV（B）進行。
對照品溶液 番瀉苷 A 和番瀉苷 B 混合對照品儲備液 Std-Stock（各 800 mg/L） 精密稱取番瀉苷 A 對照品和番瀉苷 B 對照品各 4.0 mg，置 5-mL 棕色量瓶中， 加 0.1%（w/v）碳酸氫鈉溶液至刻度。 番瀉苷 A 和番瀉苷 B 混合對照品溶液 Std-AS 精密吸取番瀉苷 A 和番瀉苷 B 混合對照品儲備液適量，以 0.1%（w/v）碳酸氫 鈉溶液稀釋製成含番瀉苷 A 和番瀉苷 B 分別為 0.5、50、100、200、300 mg/L 系列的混合對照品溶液。
番泻叶质量标准及检验操作规程
XXXXXXX有限公司成品质量标准及检验操作规程1 品名：1.1 中文名：番泻叶1.2 汉语拼音：Fanxieye2 代码：3 取样文件编号：4 检验方法文件编号：5 依据：《中国药典》（2015年版一部）。
6 质量标准：7 检验操作规程：7.1 试药与试剂：盐酸、无水硫酸钠、氨试液、乙醇、石油醚（60～90℃）、氢氧化钠、正丙醇、乙酸乙酯、5%氢氧化钾的稀乙醇溶液、20%硝酸溶液、5mmol/L四庚基溴化铵的醋酸、醋酸钠缓冲液、氢氧化钠滴定液、甲基红乙醇溶液指示剂、番泻苷A 、番泻叶对照药材、番泻苷B、0.1%碳酸氢钠。
7.2 仪器与用具：离心机、电子天平、烘箱、显微镜、硅胶G板、超声波清洗器、高效液相色谱仪、二氧化硫测定仪。
7.3 性状：取本品适量，自然光下目测色泽，嗅闻气味。
7.4 鉴别：7.4.1 取本品横切面制片显微镜（10×10）观察组织结构特征。
7.4.2 取本品粉末25mg，加水50ml和盐酸2ml，置水浴中加热15分钟，放冷，加乙醚40ml，振摇提取，分取醚层，通过无水硫酸钠层脱水，滤过，取滤液5ml ，蒸干，放冷，加氨试液5ml ，溶液显黄色或橙色置水浴中加热2分钟后，变为紫红色。
7.4.3取本品粉末lg，加稀乙醇10ml，超声处理30分钟，离心，取上清液蒸干，残渣加水10ml使溶解，用石油醚（60～90℃）振摇提取3次，每次15ml，弃去石油醚液，取水液蒸干，残渣加稀乙醇5ml使溶解，作为供试品溶液。
另取番泻叶对照药材l g，同法制成对照药材溶液。
照薄层色谱法(附录7)试验，吸取上述两种溶液各3µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，使成条状，以乙酸乙酯-正丙醇-水（4 ：4：3）为展开剂，展开缸预平衡15分钟，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。
供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；喷以20%硝酸溶液，在120℃加热约10分钟，放冷，再喷以5%氢氧化钾的稀乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
中药鉴定学粉末鉴别汇总(图)
半夏粉末
显微——半夏粉末 淀粉粒众多, 单粒类圆、半圆或多角形, 脐点稍偏心, 复粒2~8分粒。。 草酸钙针晶, 散在或成束。 导管螺纹或环纹。
半夏粉末——淀粉粒
——
半 夏 粉 末 针 晶 束
——
半 夏 粉 末 导 管
显微——半夏粉末 淀粉粒众多, 单粒类圆、半圆或多角形, 脐点稍偏心, 复粒2~8分粒。。 草酸钙针晶, 散在或成束。 导管螺纹或环纹。
甘草纤维束
甘草晶纤维
甘草草酸钙方晶
甘草具缘纹孔导管
甘草棕色块
甘草木栓细胞
甘草粉末 纤维、晶鞘纤维多成束, 胞腔狭窄。 草酸钙方晶存在于薄壁细胞或散出。 主为具缘纹孔导管, 稀见网纹导管。 棕色块形状不一。 淀粉粒多单粒。
人参粉末
人参粉末 管状树脂道碎片, 内含黄色分泌物。 簇晶棱角锐尖。 导管网纹、梯纹。 淀粉粒。
中药鉴定学 粉末汇总
By calf
大黄粉末
掌叶大黄粉末特征 草酸钙簇晶: 多、大、棱角短钝。 导管: 多网纹，有具缘纹孔及螺纹导管。 淀粉粒: 类球或长圆形，脐点多星状；复粒 由2~8分粒组成。
掌叶大黄草酸钙簇晶
掌叶大黄草酸钙簇晶
掌叶大黄草酸钙簇晶
网纹导管
网纹导管
螺纹导管
淀 粉 粒
掌叶大黄粉末特征 草酸钙簇晶: 多、大、棱角短钝。 导管: 多网纹，有具缘纹孔及螺纹导管。 淀粉粒: 类球或长圆形，脐点多星状；复粒 由2~8分粒组成。
黄连粉末
黄连粉末 石细胞形状多样, 黄色, 壁厚, 壁孔明显。 韧皮纤维纺锤或梭形, 壁厚。 木纤维较细长, 壁较薄, 纹孔稀疏点状。 木薄壁细胞类长方形, 壁稍厚, 具纹孔。 导管网纹。 鳞叶表皮细胞壁略连珠状。
中药鉴定学辅导：番泻叶
来源为⾖科植物狭叶番泻或尖叶番泻的⼲燥⼩叶产地：狭叶番泻：主产于红海以东⾄印度⼀带，现盛栽于印度南端的丁内末利，故商品名⼜名“印度番泻叶”或“丁内末利番泻叶”。
尖叶番泻：主产于埃及，故商品名⼜称“埃及番泻叶”或“亚历⼭⼤番泻叶”。
采收加⼯：狭叶番泻：⽤⽔压机打包。
尖叶番泻：⾃然⼲燥。
性状鉴别：“狭叶番泻叶”呈长卵形或卵状披针形，全缘，叶端急尖，叶基稍不对称。
上表⾯黄绿⾊，下表⾯浅黄绿⾊，⽆⽑或近⽆⽑。
⾰质。
⽓微弱⽽特异，味微苦，稍有黏性。
“尖叶番泻叶”呈披针形或长卵形，略卷曲，叶基不对称，两⾯均有细短茸⽑。
显微鉴别：两种番泻叶叶横切⾯①表⽪细胞中常含黏液质；上下表⽪均有⽓孔；⾮腺⽑单细胞，壁厚，多具疣状突起。
②叶⾁组织为等⾯叶型。
上下表⽪内⽅均有1列栅栏细胞，上⾯栅栏组织通过主脉。
③海绵组织细胞中含有草酸钙簇晶。
④主脉维管束外韧型，上下两侧均有微⽊化的中柱鞘纤维束，外有含草酸钙棱晶的薄壁细胞，形成晶鞘纤维。
粉末晶纤维多；有⾮腺⽑；上下表⾯都有⽓孔，⽓孔平轴式；薄壁细胞含草酸钙簇晶。
化学成分：①⼆种番泻叶均含⼆蒽酮苷类化合物，主要为番泻苷A、B、C、D.②游离蒽醌及其苷：⼤黄酸、芦荟⼤黄素、⼤黄酸葡萄糖苷、芦荟⼤黄素葡萄糖苷等。
③黏液质。
理化鉴别：粉末遇碱显红⾊。
附注伪品：为⾖科植物⽿叶番泻树的⼲燥⼩叶。
常混在进⼝的狭叶番泻叶中。
先端钝圆或微凹下并具短刺，灰黄绿⾊或红棕⾊，密被灰⽩⾊常绒⽑，⽆叠压线纹。
叶类药材鉴定
番泻叶 ——等面叶的代表药材
狭叶番泻叶
尖叶番泻叶
番泻叶
1.表皮 表皮细胞常含粘液质 上下表皮具有气孔；单细胞非 腺毛
2.叶肉 等面型 栅栏组织:上下表皮内均有一列 栅栏组织 海绵组织 主脉处上表皮内具栅栏组织， 下表皮内具厚角组织
3.主脉 维管束 外韧型（木质部在上，韧皮部在下） 机械组织 维管束周围有中柱鞘纤维包围 薄壁细胞含草酸钙簇晶的，具有晶纤维。
番泻叶横切面简图
1.气孔 2.海绵组织 3.栅栏组织 4.非腺毛 5.表皮 6.栅栏组织 7.草酸钙结晶8.柱鞘纤维 9.导管 10.筛管群 11.柱鞘组织 12.厚角组织
番泻叶横切面详图
粉末：黄绿色。
番泻叶
1.表皮细胞——多角形，垂周壁平 直；气孔平轴式（狭叶番泻叶气 孔副卫细胞多为3个）
2.非腺毛——单细胞，壁厚，多疣 状突起，基部稍弯曲
主脉维管束外韧型木质部在上韧皮部在下机械组织维管束周围有中柱鞘纤维包围薄壁细胞含草酸钙簇晶的具有晶纤维
番泻叶的鉴定
一、实验目的： 1.掌握叶类药材的组织构造。 2.掌握番泻叶的横切面组织构造和粉末特征。 3.进一步熟练粉末标本片制片方法的操作步骤。
二、实验材料： 三、实验内容：
1.番泻叶横切面标本片观察。 2.番泻叶粉末特征：晶纤维、非腺毛、表皮细胞（气孔）、簇晶 四、实验步骤：——实验报告要求详细描述操作步骤！ 五、实验结果： 写观察结果，绘制番泻叶的显微组织简图、番泻叶的粉末特征图 六、作业： 1.叶类药材的横切面构造有哪些部分？为什么说番泻叶是等面型叶？ 2.番泻叶的草酸钙簇晶与大黄的簇晶有什么区别？
3.晶纤维——方晶 小、多
番泻叶检验标准操作规程
原药材检验标准操作规程目的：建立一个中药饮片原药材检验标准操作程序，确保检验结果准确可靠。
适用范围：中药原药材。
责任人：质量保证部主任、质量控制部主任、化验员。
标准来源：《中华人民共和国药典》2010年版一部、《安徽省中药饮片炮制规范》。
内容：1、性状取本品适量，放入白瓷盘中，用眼观察，可见以下性状特征：狭叶番泻呈长卵形或卵状披针形，长1.5～5cm，宽0.4～2cm，叶端急尖，叶基稍不对称，全缘。
上表面黄绿色，下表面浅黄绿色，无毛或近无毛，叶脉稍隆起。
革质。
气微弱而特异，味微苦，稍有黏性。
尖叶番泻呈披针形或长卵形，略卷曲，叶端短尖或微突，叶基不对称，两面均有细短毛茸。
2、鉴别主要使用仪器：电子分析天平、电子显微镜、紫外光灯等。
2.1显微鉴别：2.1.1 试液配制2.1.1.1水合氯醛试液:取水合氯醛50克，加水15毫升与甘油10毫升使溶解,即得。
2.1.1.2 甘油醋酸试液：取甘油、50%醋酸及水各等份混匀，即得。
2.1.1.3 稀甘油：取甘油33毫升，加水稀释至100毫升，再加樟脑一小块或液化苯酚1滴，即得。
2.1.2 供试品制备2.1.2.1 取本品10g，研细后取少量粉末，置载玻片上，滴加水合氯醛搅拌均匀，置酒精灯上加热透化；加稀甘油数滴，搅拌均匀，分装2~3片，加盖玻片，即得。
2.1.2.2 取研细的粉末少量置载玻片上，加甘油醋酸试液，搅拌均匀，加盖玻片，即得。
2.1.2.3取研细后取少量粉末，置载玻片上，滴加水搅拌均匀，同时滴加少许稀甘油，加盖玻片，即得。
2.1.3 置显微镜下观察本品粉末淡绿色或黄绿色。
晶纤维多，草酸钙方晶直径12～15µm。
非腺毛单细胞，长100～350µm，直径12～25µm，壁厚，有疣状突起。
草酸钙簇晶存在于叶肉薄壁细胞中，直径9～20µm。
上下表皮细胞表面观呈多角形，垂周壁平直；上下表皮均有气孔，主为平轴式，副卫细胞大多为2个，也有3个的。
生药粉末显微特征及彩图(优.选)
麻黄粉末显微特征图表皮：多为碎片，众多，表皮细胞类方形，外壁布满小草酸钙砂晶，角质层极厚。
气孔：为特异的下陷气孔，保卫细胞侧面观呈电话筒状。
大黄粉末显微特征图草酸钙簇晶：众多，完整者直径21-135um，大者可达190um。
淀粉粒：甚多，单粒大多圆球形，也有盔帽形或多圆形，脐点常呈星状，三叉状，十字状，飞鸟状或裂缝状；复粒由2-8分粒组成。
黄连粉末显微特征图石细胞鲜黄色，类圆形，类方形或类多角形，孔沟及纹孔明显。
鳞叶表皮细胞类方形或类长方形，壁薄，垂周壁微波状。
黄柏粉末显微特征图石细胞鲜黄绿色，分枝状、类圆形或纺锤形，分枝状者形大，壁厚，层纹明显纤维鲜黄绿色，常成束，边缘微波状，周围细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维。
厚朴粉末显微特征图石细胞：较多，成群或单个散在，类方形、椭圆形、卵圆形或不规则分枝状，有时可见层。
油细胞：椭圆形或类圆形，含黄棕色油状物。
木栓细胞：多角形，壁稍呈波状，微木化。
肉桂粉末显微特征图纤维：大多单个散在，长梭形，壁极厚，木化，纹孔及孔沟不明显。
石细胞：较多，类方形或类圆形，壁厚，有的一面菲薄木栓细胞：多角形，木化，含红棕色物。
五味子粉末显微特征图甘草粉末显微特征图纤维：众多，成束或散离，细长，壁厚，微木化或非木花，孔沟不明显。
晶纤维易察见，草酸钙方晶类双锥形、长方形或类方形。
木栓细胞：棕红色，壁薄，微木化，表面观呈多角形。
番泻叶粉末显微特征图晶鞘纤维众多，草酸钙方晶非腺毛单细胞，基部稍弯曲，壁厚，具疣状突起。
草酸钙簇晶散在或存在于薄壁细胞中，直径8-15um表皮细胞多角形，气孔平轴式，副卫细胞2个。
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