LDH检测
乳酸脱氢酶(LDH)活性检测试剂盒说明书

乳酸脱氢酶(LDH )活性检测试剂盒说明书可见分光光度法货号:BC0680规格:50T/24S产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体30 mL×1瓶4℃保存试剂一液体25 mL×1瓶4℃保存试剂二粉剂×1支-20℃保存试剂三液体25 mL×1瓶4℃保存试剂四液体60 mL×1瓶4℃保存标准品液体1 mL×1支4℃保存溶液的配制:1、试剂二:临用时加入1.3 mL 双蒸水充分溶解备用,配好后可分装成小管-20℃保存,可保存两周,禁止反复冻融;2、标准品:2 μmol/mL 丙酮酸钠溶液。
产品说明:LDH (EC 1.1.1.27)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是糖酵解途径的末端酶,催化丙酮酸与乳酸之间的可逆反应,伴随着NAD +/NADH 之间互变。
LDH 催化NAD +氧化乳酸生成丙酮酸,丙酮酸进一步与2,4-二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙,在碱性溶液中显棕红色,颜色深浅与丙酮酸浓度成正比。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:可见分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤:一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)1、细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL )为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL 提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W ,超声3s ,间隔10s ,重复30次);8000g 4℃离心10min ,取上清,置冰上待测。
2、组织:按照组织质量(g ):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g 组织,加入1mL 提取液),进行冰浴匀浆。
基线ldh水平

基线ldh水平基线LDH水平是指人体内的乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,简称LDH)的基准值或正常范围。
LDH是一种酶,存在于人体的多个组织和器官中,包括肝脏、心脏、肌肉和红细胞等。
正常情况下,基线LDH水平可以反映各种组织和器官的正常代谢状态。
LDH是一种催化乳酸转化的酶,参与能量代谢过程中的乳酸产生和消耗。
它存在于细胞内和细胞外,当细胞损伤或破坏时,LDH会释放到血液中。
因此,基线LDH水平的测量可以作为一种常规检查项目,用于评估细胞损伤或疾病的程度。
正常情况下,基线LDH水平的范围在血液中大约为100-190单位/升。
不同实验室可能会有略微不同的测量方法和参考范围。
超出正常范围的LDH水平可能表明存在某种疾病或疾病的恶化。
因此,医生通常会将LDH水平与其他临床症状和实验室检查结果结合起来,以确定可能的诊断。
LDH水平的升高可能与多种疾病和情况有关。
其中一些常见的疾病包括心肌梗塞、肝炎、肝硬化、肺炎、肿瘤、贫血等。
此外,某些药物和药物治疗也可能导致LDH水平的升高。
LDH水平的降低相对较少见,通常与遗传性疾病或特定类型的贫血有关。
然而,LDH水平的降低并不常见,并且通常不是一个独立的诊断指标,需要结合其他临床表现和实验室检查结果来进行综合分析。
需要注意的是,基线LDH水平只是一种参考指标,不能作为唯一的诊断依据。
临床医生通常会根据患者的具体情况,结合其他临床症状、体征和实验室检查结果,综合分析来确定疾病的诊断和治疗方案。
基线LDH水平是评估细胞损伤或疾病的一个重要指标。
通过测量LDH水平,可以帮助医生诊断和监测某些疾病的发展和治疗效果。
然而,需要注意的是,LDH水平的升高或降低并不是一个特异性的指标,需要结合其他临床信息进行综合分析和判断。
细胞乳酸脱氢酶检测意义

细胞乳酸脱氢酶检测意义细胞乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)是一种重要的生物标志物,广泛应用于生物医学领域。
LDH存在于人体内的多种细胞中,包括红血细胞、肝细胞、心肌细胞、肌肉细胞、肺细胞、肾细胞等。
当细胞损伤或死亡时,LDH会释放到血液中。
因此,测量血清中的LDH水平可以帮助医生了解患者是否存在细胞损伤或死亡。
基本原理LDH是一种四聚体酶,可以从细胞内转移乳酸和NADH,将乳酸氧化为丙酮酸,同时还原NADH为NAD+。
LDH的氧化还原反应是维持细胞能量平衡的重要过程之一。
LDH检测方法1. 传统测定法传统的LDH检测方法采用分光光度法,根据LDH催化转化的NADH来分析产生的差异吸光度。
这种方法可以测定LDH总活性,但不能区分各亚型LDH之间的活性。
2. 利用亚型间的差异不同的组织和器官中LDH亚型组成有所不同。
基于不同LDH亚型在不同组织中的分布的差异,可以采用多亚型定量法,比如酵素双抗体方法。
此类方法在血液学、肿瘤学等领域得到应用。
LDH在临床医学中的应用由于LDH广泛存在于人体内,因此它被广泛应用于临床医学中,特别是在肿瘤、心血管疾病、神经系统疾病等领域。
下面将介绍LDH在不同领域中的应用意义。
1. 癌症诊断和治疗LDH在肿瘤的识别和治疗中扮演着重要的角色。
LDH在许多常见的肿瘤中都有升高的趋势,包括淋巴瘤、骨髓瘤和非小细胞肺癌等。
因此,测量患者血清中LDH的水平可以作为肿瘤筛查的一种手段,也可以用于判断肿瘤患者的预后。
此外,LDH水平升高可作为肿瘤治疗的指标之一。
2. 心血管疾病LDH的另一个重要的临床应用领域是心血管疾病。
心肌细胞损伤后,血液中LDH水平升高。
因此,测量血清中的LDH水平可以作为评估患者心肌缺血和心肌梗死程度的指标之一。
3. 神经系统疾病LDH也被用于评估神经系统疾病,如脑膜炎和脑卒中等。
在这些情况下,LDH的水平通常升高,并且可以用作患者疾病严重程度的指标之一。
LDH法的原理及应用

LDH法的原理及应用1. 原理LDH(Lactate dehydrogenase)法是一种用于测定体液中乳酸含量的常用方法。
乳酸是生物体在无氧代谢过程中产生的一种代谢产物,其浓度的升高常常与某些病理状态相关,因此测定乳酸浓度可以帮助医生评估病人的代谢情况和疾病严重程度。
LDH法的原理基于乳酸在存在乳酸脱氢酶(LDH)的催化下与还原型辅酶Ⅱ(NADH)发生氧化还原反应,生成丙酮酸和NAD+。
该反应可通过测定NAD+的减少量或NADH的增加量来间接测定乳酸的浓度。
具体步骤如下:1.取一定体积的待测液样加入反应溶液中,其中包括乳酸脱氢酶、NADH和缓冲剂。
2.反应开始后,乳酸脱氢酶催化乳酸与NADH反应,生成丙酮酸和NAD^+。
3.NADH的减少量可以通过光密度的变化来测定。
乳酸浓度与NADH减少量成正比。
4.通过比对标准曲线,可以确定待测液样中乳酸的浓度。
2. 应用LDH法广泛应用于临床医学、药物研究和生物学等领域。
下面列举了该方法在不同领域的应用:2.1 临床医学LDH法在临床医学中用于测定血液、尿液和其他体液中乳酸的浓度。
这对于评估病人的代谢情况、疾病状态和疾病严重程度非常重要。
LDH法在以下疾病的诊断和监测中有广泛应用:•心肌梗塞:乳酸浓度的升高与心肌梗塞相关。
•肝脏疾病:乳酸浓度的增加可能与肝功能受损有关。
•肾脏疾病:乳酸浓度的变化可以反映肾脏功能的改变。
2.2 药物研究LDH法可用于药物研究中对药物对细胞代谢的影响进行评估。
通过测定细胞中乳酸的浓度变化,可以了解药物对细胞氧化代谢的影响。
该方法可以帮助研究人员了解药物的治疗效果和毒副作用,进而指导药物的研发和应用。
2.3 生物学研究LDH法在生物学研究中也有一定的应用。
乳酸浓度的变化可以反映细胞的能量代谢状态。
通过测定乳酸浓度的变化,可以了解细胞在不同生理和病理条件下的代谢状态。
在细胞培养和细胞凋亡研究中,LDH法可用于评估细胞的损伤程度和细胞死亡情况。
ck、ldh指标

ck、ldh指标全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:血清CK(Creatine Kinase)和LDH(Lactate Dehydrogenase)是两种常见的生化指标,常用于评估肌肉和肝脏等组织损伤程度。
它们也可以在心肌梗死、中风、感染和其他疾病中发挥重要作用。
本文将重点介绍这两种指标的作用、测定方法、临床意义及相关疾病的诊断价值。
一、CK指标1. CK是一种细胞内酶,主要存在于肌肉组织、心脏和脑组织中。
当这些组织受损时,细胞膜破裂会释放大量的CK到血液中,导致其浓度升高。
CK水平的检测可以间接反映肌肉和心肌损伤的程度。
2. CK的测定方法主要包括酶法和免疫法两种。
酶法通过检测CK催化底物的催化反应来测定其活性,而免疫法则是通过特定抗体结合CK并产生颜色反应来检测其浓度。
3. 在临床上,CK常被用于评估骨骼肌和心肌损伤的程度。
在急性心肌梗死中,CK的水平会在几小时内显著增加,达到峰值后逐渐降低。
CK可以作为心肌梗死的诊断和疗效监测指标。
4. 一些其他疾病如横纹肌溶解症、中毒和运动损伤等也会导致CK 水平升高。
CK的测定在临床上具有一定的诊断和监测价值。
二、LDH指标1. LDH也是一种细胞内酶,存在于肝脏、心肌、红细胞等组织中。
当细胞受损后,LDH会释放到血液中,导致其浓度升高。
LDH的测定可以反映组织损伤的程度。
2. LDH的测定方法主要包括酶法和免疫法两种,与CK类似。
酶法测定LDH的活性,而免疫法测定LDH的浓度。
3. 在临床上,LDH常被用于评估肝功能和心肌损伤的程度。
在心肌梗死中,LDH的水平也会升高,与CK一起用于心肌梗死的诊断和疗效监测。
4. LDH水平也常用于肝功能评估。
肝脏受损时,LDH会释放到血液中,因此LDH水平的测定可以反映肝脏损伤的程度。
三、总结CK和LDH是两种重要的生化指标,可用于评估肌肉和肝脏等组织的损伤程度。
它们在心肌梗死、中风、感染和其他疾病的诊断和监测中具有重要价值。
ldh法和mtt法

ldh法和mtt法一、介绍在细胞实验研究中,细胞增殖和生长的检测是必不可少的。
而常用的细胞增殖和生长检测方法有许多种,其中较为常见的是LDH法和MTT法。
这两种方法都是通过细胞的代谢和细胞的状态来反映细胞的增殖和生长情况的。
二、LDH法LDH法全称为乳酸脱氢酶检测法,是利用乳酸脱氢酶的氧化还原作用来检测细胞增殖和生长的方法。
该方法基于细胞膜通透性的变化,当细胞膜发生损伤或破裂时,细胞内的乳酸脱氢酶会释放到培养基中。
而乳酸脱氢酶检测法就是通过检测培养基中乳酸脱氢酶含量的变化来判断细胞是否发生了损伤或破裂,以此来推测细胞的增殖和生长情况。
三、MTT法MTT法全称为四氮唑盐(3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基-二氮杂烷)法,是利用MTT盐的还原作用来检测细胞增殖和生长的方法。
该方法的原理是将MTT盐加入细胞培养液中,MTT盐通过细胞中的酶反应还原成具有紫色的甲醛样代谢产物。
而这个代谢产物则会在细胞中不断积累,从而使细胞颜色越来越深。
最后,通过检测细胞的颜色深浅来推测细胞的增殖和生长情况。
四、LDH法和MTT法的比较1.优点与缺点LDH法的优点是可以反映细胞的状态和增殖情况,适用于不同种类的细胞;缺点是需要时间较长,对细胞损伤有一定影响。
而MTT法的优点是简单易行,可作为高通量筛选的快速方法;缺点则是对细胞形态和生长状态的要求较高,对于一些较小或幼稚的细胞不适用。
2.应用范围LDH法和MTT法都常用于评估各种细胞因素(如生长因子、激素、细胞毒性物质等)对细胞生长的影响;同时也受到在细胞增殖实验和细胞毒性实验中的广泛应用。
此外,LDH法和MTT法也可应用于肿瘤和炎症等疾病的研究。
3.实验难度和操作技巧LDH法和MTT法均需要一定的实验基础和耐心,但LDH法一般操作难度稍高些。
五、总结细胞增殖和生长检测方法是细胞实验研究中非常重要的组成部分。
LDH法和MTT法是两种常用的检测方法,不仅能反映细胞的增殖和生长情况,也广泛应用于肿瘤和炎症等疾病的研究。
乳酸脱氢酶(LDH)法操作说明

乳酸脱氢酶(LDH)法操作说明乳酸脱氢酶(LDH)法操作说明操作简介:乳酸脱氢酶(LDH)法是一种常用的生物化学分析方法。
本文将详细介绍使用乳酸脱氢酶法进行实验操作的步骤。
材料准备:1. 乳酸脱氢酶试剂盒2. 样品溶液3. 乳酸标准品4. 实验用试管和显微管操作步骤:1. 样品制备- 将待测样品装入实验用试管中。
每个样品应分别装入不同的试管,以避免交叉污染。
- 若样品过浓稀,需要进行适当的稀释,确保样品浓度在测试范围内。
2. 标准曲线制备- 准备不同浓度的乳酸标准品溶液,浓度范围可根据实验要求而定。
- 将不同浓度的标准品溶液分别装入实验用试管中。
3. 试剂添加- 分别向样品管和标准品管中加入相同体积的乳酸脱氢酶试剂,充分混匀。
4. 反应温育- 将所有试管置于恒温水浴中,温度设定为适合乳酸脱氢酶反应的温度(一般为37°C)。
- 在设定的反应温度下,将试管保持在水浴中反应一段时间(时间根据实验要求而定)。
5. 反应终止- 在反应时间结束后,以适当的方法终止反应。
常见的终止方式是添加酸性试剂或采用其他合适的方法。
6. 测定乳酸脱氢酶活性- 使用光度计、分光光度计或其他合适的仪器,测定样品和标准品反应后产生的光吸收值。
吸收值与乳酸脱氢酶活性成正比。
- 通过标准曲线,将样品的吸收值转化为对应的乳酸脱氢酶活性。
注意事项:1. 本实验操作需要严格按照实验室安全操作规范进行,避免任何可能导致个人受伤或污染的行为。
2. 实验过程中的试剂、标样和废液等应按照实验室规定的方法处理,不得随意丢弃。
3. 在操作过程中,保持实验器材和试剂的洁净,尽量避免外界因素对实验结果的影响。
4. 操作时需注意避免交叉污染,尤其是样品的装管和试剂的配比过程。
5. 样品和标准品的选择要合适,浓度范围应覆盖实验要求。
6. 温育过程中,确保试管能均匀受热,并避免发生温度不稳定的情况。
总结:乳酸脱氢酶(LDH)法是一种可靠的生物化学分析方法,适用于乳酸脱氢酶活性的测定。
ldh指标

ldh指标
LDH指标,也称为乳酸脱氢酶指标,是以乳酸脱氢酶为指标的一项生物化学检测指标,通常用于评估体内细胞代谢情况和疾病状态。
乳酸脱氢酶是一种催化乳酸转化为丙酮酸的酶,存在于体内多种组织细胞中,如肝脏、心脏、肌肉、肺、肾脏等。
一旦细胞受到损害或疾病侵袭,乳酸脱氢酶会释放到体液中,导致其水平升高,成为血液生化参数监测的重要指标之一。
LDH指标的正常范围一般在100-200 U/L之间,其中不同年龄和性别的人群也有一定差异。
当LDH指标超出正常范围,可能意味着体内存在多种疾病病因,如心肌梗死、肝病、肌肉损伤、肺炎、贫血、白血病等。
因此,LDH指标通常作为辅助诊断指标,需结合其他检测指标和临床表现综合判断。
LDH指标也常用于疾病治疗的评估和监测。
例如,在白血病等恶性肿瘤治疗过程中,LDH指标常常成为评估化疗效果的重要指标之一。
如果LDH指标下降,则可能表示疾病得到了控制和缓解;反之,LDH指标上升,则可能预示着疾病进展和治疗效果不佳。
总之,LDH指标虽然仅是一项生物化学检测指标,但却在临床诊疗中扮演着重要的角色。
仔细监测LDH指标的变化,能够帮助医生更准确地判断病情和治疗效果,并及时进行调整和干预,提高治疗成功率。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
乳酸脱氢酶释放法lactate dehydrogenase release assay
碧云天的乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒(LDH Cytotoxicity Assay Kit),也称乳酸脱氢酶检测试剂盒(LDH Assay Kit)或乳酸脱氢酶释放检测试剂盒(LDH Release Assay Kit),是一种基于diaphorase催化的INT显色反应,通过比色法检测细胞毒性时释放的乳酸脱氢酶活性或检测其它样品中的乳酸脱氢酶活性的试剂盒。
本试剂盒可以用于常规的乳酸脱氢酶活性的检测,更常用于以LDH释放为指标的细胞毒性检测。
同时,基于细胞总乳酸脱氢酶活性的检测,本试剂盒也可以用于检测细胞增殖和细胞毒性检测。
细胞凋亡或坏死而造成的细胞膜结构的破坏会导致细胞浆内的酶释放到培养液里,其中包括酶活性较为稳定的乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)。
通过检测从质膜破裂的细胞中释放到培养液中的LDH 的活性,就可以实现对细胞毒性的定量分析。
LDH释放被看做细胞膜完整性的重要指标,并被广泛用于细胞毒性检测。
LDH释放被认为是以前使用放射性的51Cr标记细胞,随后通过51Cr释放进行细胞膜完整性检测的安全有效的替代方法。
本试剂盒的基本原理是,在乳酸脱氢酶的作用下,NAD+被还原生成NADH,NADH和INT
(2-p-iodophenyl-3-nitrophenyl tetrazolium chloride)被硫辛酰胺脱氢酶(diaphorase)催化反应生成NAD+和强生色物甲臜(formazan),在490nm波长下产生吸收峰,从而可以通过比色来定量乳酸脱氢酶的活性。
吸光度与乳酸脱氢酶活性成线性正相关。
该酶联反应原理的示意图如下:
可检测细胞培养液、细胞裂解液等样品中乳酸脱氢酶的活性。
一个试剂盒可进行100次检测。
包装清单:
保存条件:
-20℃保存,一年有效。
C0016-3需注意避免反复冻融。
C0016-4需避光保存。
试剂盒解冻后可以短期4℃存放,2-3天内有效。
注意事项:
冷冻会使样品中部分乳酸脱氢酶失活,4℃可放置2-3天。
建议样品准备好后尽量当天完成测定。
如果检测细胞培养液中的乳酸脱氢酶,由于血清含有乳酸脱氢酶,建议血清的使用浓度不要超过1%,并最好使用热灭活血清。
如果一定需要使用10%血清,在检测时一定要设置没有细胞,但加入了相同体积培养液的对照孔,以用于消除背景。
细胞过度生长、密度过高、离心速度过大、培养箱内外温差过大,都会造成细胞释放乳酸脱氢酶增加。
如果希望进行乳酸脱氢酶活性的绝对定量,用户需自备乳酸脱氢酶标准品。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。