PBS缓冲液配制
PBS缓冲液配制

PBS缓冲液配制0.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl 调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。
在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4℃冰箱中。
需要注意的是,通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。
NaCl 8.0g ; KCl 0.2g ; Na2HPO4 1.44g ; KH2PO4 0.24g ;加蒸馏水至 1000ml,调节pH 到 7.4(用Na2HPO4或KH2PO4调节)。
用于免疫反应时可加入 0.1%叠氮钠(0.1g/100ml PBS);当试剂中含有辣根过氧化物酶时,严禁使用叠氮钠,可改用0.01%柳硫汞。
PBS缓冲液配方PH 7.6 7.4 7.2 7.0H2O 1000 1000 1000 1000NaCl 8.5 8.5 8.5 8.5Na2HPO4 2.2 2.2 2.2 2.2NaH2PO4 0.1 0.2 0.3 0.4根据经验来看,新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在7.2-7.4之间,可是在温度的影响下,尤其在夏天,其电离常数发生了改变,在经过昼夜的时间后,PH值会明显改变(我亲自测过偏酸)。
所以做实验的同学可要注意了,PH值可能会影响实验结果,甚至可能导致阴性。
所以务必记得这个时候和天气,要加强实验条件控制问题。
每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS,如果发生偏酸或偏碱,注意重新换新液。
PBS缓冲液称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。
PBS缓冲液的配制方法

PBS缓冲液配方不管是免疫组化,还是细胞培养中,常用到PBS缓冲液,下面是我们实验室的配方,供大家参考。
我们实验室的配方:A液:0.1mol/L磷酸二氢钾:磷酸二氢钾(KH2PO4,MW136.09)1.361g,加双蒸水至100ml。
B液:0.1mol/L磷酸氢二钠:酸酸氢二钠(Na2HPO4.2H2O,MW177.99)1.78g,加双蒸水至100ml。
或者酸酸氢二钠(Na2HPO4.12H2O,MW358.14)3.58g,加双蒸水至100ml。
pH --A液(ml)--B液(ml)5.60 --9.50 --0.255.91 --9.00 --1.006.24 --8.00 --2.006.47 --7.00 --3.006.64 --6.00 --4.006.81 --5.00 --5.006.98 --4.00 --6.007.17 --3.00 --7.007.38 --2.00 --8.007.73 --1.00 --9.008.04 --0.50 --9.50一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4•12H2O(磷酸氢二钠)NaH2PO4•2H2O(磷酸二氢钠)Nacl用于细胞培养的PBS需含有氯化钾称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml 蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L 即可0.01MPBS缓冲液称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。
PBS是最普遍不过的实验室缓冲液,但其配方各异。
以下是我的总结:母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L 的 NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。
PBS缓冲液的配制方法

PBS缓冲液配方不管是免疫组化,还是细胞培养中,常用到PBS缓冲液,下面是我们实验室的配方,供大家参考。
我们实验室的配方:A液:0.1mol/L磷酸二氢钾:磷酸二氢钾(KH2PO4,MW136.09)1.361g,加双蒸水至100ml。
B液:0.1mol/L磷酸氢二钠:酸酸氢二钠(Na2HPO4.2H2O,MW177.99)1.78g,加双蒸水至100ml。
或者酸酸氢二钠(Na2HPO4.12H2O,MW358.14)3.58g,加双蒸水至100ml。
pH -- A液(ml)-- B液(ml)5.60 -- 9.50 -- 0.255.91 -- 9.00 -- 1.006.24 -- 8.00 -- 2.006.47 --7.00 -- 3.006.64 -- 6.00 -- 4.006.81 -- 5.00 -- 5.006.98 -- 4.00 -- 6.007.17 -- 3.00 -- 7.007.38 -- 2.00 -- 8.007.73 -- 1.00 -- 9.008.04 -- 0.50 -- 9.50一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4•12H2O(磷酸氢二钠)NaH2PO4•2H2O(磷酸二氢钠)Nacl用于细胞培养的PBS需含有氯化钾称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml 蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L 即可0.01MPBS缓冲液称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。
PBS是最普遍不过的实验室缓冲液,但其配方各异。
以下是我的总结:母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L 的 NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。
PBS缓冲液配制

0.01M磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8gNaCl、0.2gKCl、1.44gNa2HPO4和0.24gKH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。
在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4℃冰箱中。
需要注意的是,通常所说的浓度0.01M指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na离子或K离子的浓度,Na离子和K离子只是用来调节渗透压的。
如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100u/ml 青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。
?NaCl8.0g;KCl0.2g;Na2HPO41.44g;KH2PO40.24g;加蒸馏水至1000ml,调节pH到7.4(用Na2HPO4或KH2PO4调节)。
用于免疫反应时可加入0.1%叠氮钠(0.1g/100mlPBS);当试剂中含有辣根过氧化物酶时,严禁使用叠氮钠,可改用0.01%柳硫汞。
PBS缓冲液配方PH???????????7.6?????7.4????????7.2???????7.0H2O 1000 1000 1000 1000NaCl 8.5 8.5 8.5 8.5Na2HPO42.2 2.2 2.2 2.2NaH2PO40.1 0.2 0.3 0.4根据经验来看,新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在7.2-7.4之间,可是在温度的影响下,尤其在夏天,其电离常数发生了改变,在经过昼夜的时间后,PH值会明显改变(我亲自测过偏酸)。
所以做实验的同学可要注意了,PH值可能会影响实验结果,甚至可能导致阴性。
所以务必记得这个时候和天气,要加强实验条件控制问题。
每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS,如果发生偏酸或偏碱,注意重新换新液。
PBS缓冲液称取NaCl8g,KCl0.2g,Na2HPO4•12H2O3.63g,KH2PO40.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7. 4,加水定容至1L,常温保存备用。
PBS缓冲液的配制方法

PBS缓冲液的配制方法PBS缓冲液配方不管是免疫组化,还是细胞培养中,常用到PBS缓冲液,下面是我们实验室的配方,供大家参考。
我们实验室的配方:A液:0.1mol/L磷酸二氢钾:磷酸二氢钾(KH2PO4,MW136.09)1.361g,加双蒸水至100ml。
B液:0.1mol/L 磷酸氢二钠:酸酸氢二钠(Na2HPO4.2H2O,MW177.99)1.78g,加双蒸水至100ml。
或者酸酸氢二钠(Na2HPO4.12H2O,MW358.14)3.58g,加双蒸水至100ml。
pH ,, A液 (ml) ,, B液(ml)5.60 ,, 9.50 ,, 0.255.91 ,, 9.00 ,, 1.006.24 ,, 8.00 ,, 2.006.47 ,,7.00 ,, 3.006.64 ,, 6.00 ,, 4.006.81 ,, 5.00 ,, 5.006.98 ,, 4.00 ,, 6.007.17 ,, 3.00 ,, 7.007.38 ,, 2.00 ,, 8.007.73 ,, 1.00 ,, 9.008.04 ,, 0.50 ,, 9.50一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4•12H2O(磷酸氢二钠) NaH2PO4•2H2O(磷酸二氢钠)Nacl用于细胞培养的PBS需含有氯化钾称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可0.01M PBS缓冲液称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml 双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。
PBS是最普遍不过的实验室缓冲液,但其配方各异。
以下是我的总结:母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水 0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制: 先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4, 81ml0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。
PBS缓冲液的配制方法

PBS缓冲液配方不管是免疫组化,还是细胞培养中,常用到PBS缓冲液,下面是我们实验室的配方,供大家参考。
我们实验室的配方:A液:0.1mol/L磷酸二氢钾:磷酸二氢钾(KH2PO4,MW136.09)1.361g,加双蒸水至100ml。
B液:0.1mol/L磷酸氢二钠:酸酸氢二钠(Na2HPO4.2H2O,MW177.99)1.78g,加双蒸水至100ml。
或者酸酸氢二钠(Na2HPO4.12H2O,MW358.14)3.58g,加双蒸水至100ml。
pH--A液(ml)--B液(ml)5.60--9.50--55.91--9.00--1.006.24--8.00--2.006.47--7.00--3.006.64--6.00--4.006.81--5.00--5.006.98--4.00--6.007.17--3.00--07.38--2.00--8.007.73--1.00--9.008.04--0.50--9.50一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4•12H2O(磷酸氢二钠)NaH2PO4•2H2O(磷酸二氢钠)Nacl用于细胞培养的PBS需含有氯化钾称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可0.01MPBS缓冲液称取NaCl 8g,KCl0.2g,Na2HPO4•12H2O3.63g, KH2PO40.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。
PBS是最普遍不过的实验室缓冲液,但其配方各异。
以下是我的总结:母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于1000ml水0.2M NaH2PO4:称取31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml水各种浓度PB(pH= 7.4)的配制:先配0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml0.2mol/L的NaH2PO4,81ml0.2mol/L的Na2HPO4,即可。
PBS缓冲液的配制方法

PBS缓冲液配方不管是免疫组化,还是细胞培养中,常用到PBS缓冲液,下面是常用配方,供大家参考。
用于细胞培养的PBS需含有氯化钾称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml 蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L,灭菌即可。
0.01M PBS缓冲液称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。
一般免疫组化用PBS,主要用来清洗,都只包含Na2HPO4•12H2O(磷酸氢二钠)和NaH2PO4•2H2O(磷酸二氢钠)两种组分,母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L 的 NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。
然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可,如:0.1M PB(PH=7.4):取 500ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
若需要 NaCL 的话,加入 NaCL 至0.9%(g/100ml)即可。
另:其它各种另 PH值的 0.2M PB(100ml)配方:pH 0.2M NaH2PO4(ml) 0.2M Na2HPO4(ml)5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 0.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.7关于磷酸缓冲溶液的一些问答PBS可以为三种溶液的英文缩写,分别是1.磷酸盐缓冲溶液(phosphate buffered solution)、2.磷酸盐缓冲盐水(phosphate buffered saline)及3.磷酸盐缓冲钠(phosphate buffered sodium),其配制方法不同,pH值不同,发挥的生物学作用亦不完全相同。
PBS缓冲液配制

PBS缓冲液配制之邯郸勺丸创作0.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于80 0ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。
在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保管存于室温或4℃冰箱中。
需要注意的是,通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。
NaCl 8.0g ; KCl 0.2g ; Na2HPO4 1.44g ; KH2PO4 0.24g ;加蒸馏水至 1000ml,调节pH 到 7.4(用Na2HPO4或KH2PO4调节)。
用于免疫反应时可加入 0.1%叠氮钠(0.1g/100ml PBS);当试剂中含有辣根过氧化物酶时,严禁使用叠氮钠,可改用0.01%柳硫汞。
PBS缓冲液配方根据经验来看,新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在7.27.4之间,可是在温度的影响下,尤其在夏天,其电离常数发生了改变,在经过昼夜的时间后,PH值会明显改变(我亲自测过偏酸)。
所以做实验的同学可要注意了,PH值可能会影响实验结果,甚至可能导致阴性。
所以务必记得这个时候和天气,要加强实验条件控制问题。
每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS,如果发生偏酸或偏碱,注意重新换新液。
PBS缓冲液称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO 4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保管备用。
PBST缓冲液取300μl Tween20 加入PBS 100ml中,混匀后即刻使用。
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磷酸盐缓冲液
磷酸盐缓冲液,也称为磷酸缓冲液( PBS Phosphate Buffer solution ,),是生物化学研究中使用最为广泛的一种缓冲液,通常使用的有磷酸钠缓冲液(2424&NaH PO Na HPO )和磷酸钾缓冲液(2424&K HPO KH PO ),由于它们有二级解离,缓冲的pH 值范围很广。
需要注意的是,通常所说的磷酸缓冲液的浓度是指溶液中含有的所有的磷酸根离子的浓度,而不是钠离子(Na +
)或者钾离子(K +)的浓度。
正是因为如此,在配制中性缓冲液时,用等浓度的24NaH PO 和24Na HPO 或者等浓度的24KH PO 和24K HPO 溶液混合,并不影响磷酸根离子的浓度,所得的缓冲液浓度仍是等浓度的24NaH PO 和24Na HPO 或者等浓度的24KH PO 和24Na HPO 溶液原来的浓度,但是缓冲液中的钠离子(Na +
)或者钾离
子(K +
)的浓度已经发生变化。
10.05mol L -⋅PBS 的配制方法如下:
甲液:10.05mol L -⋅24Na HPO 溶液,乙液:1
0.05mol L -⋅ 24KH PO 溶液。
将甲乙液
分装在棕色瓶内,于4℃冰箱中保存,用时甲、乙两液各按不同比例混合,即可得所需pH 的缓冲液,见下表:
24Na HPO 分子量:141.96 24KH PO 分子量:136.09。