CyclinD1和Ki_67在卵巢上皮性癌中的表达及相关性_陈国庆

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对象与方法
临床资料 收集 2011 年 1 月 2015 年 12 月 40 例 EOC 患者手术蜡块标本 （ 观察组 ） ， 另选取同期手术的 卵巢良性腺瘤 10 例 （ 对照组 ） 。 所有患者临床资 料完整， 手术标本均送至病理科经检查证实且术前
未接受过放、 化疗及免疫治疗。 观察组年龄 16 83 岁， 平均 （ 49. 37 ʃ 10. 25 ） 岁。 观察组组织学类 型， 黏液性腺癌 7 例， 浆液性腺癌 33 例； 组织学分 级， 低分化 12 例， 中分化 24 例， 高分化 4 例； FIGO （ 2009 年） 分期： Ⅰ期 14 例， Ⅱ期 6 例， Ⅲ 期 18 例， 7 例有淋巴结转移； 对照组年龄 17 69 Ⅳ期 2 例， 岁， 平均（ 48. 92 ʃ 10. 31 ） 岁， 组织学类型有浆液性 囊腺瘤 3 例， 黏液性囊腺瘤 7 例。 1. 2 方法 Cyclin D1 兔抗人单克隆抗体、 Ki67 鼠抗人单 540
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基金项目］贵州省科技厅联合基金［黔科合 LG 字（ 2011 ） 032 号］ 级同等学历硕士研究生， 现工作于威宁县人民医院
＊＊贵州医科大学 2015
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本文摘自中外医疗 zwylzz@
41 卷
Cyclin D1 and Ki67 in epithelial ovarian cancer may be the factors that promote the pathogenesis and progression of epithelial ovarian cancer． ［ Key words］ ovarian tumor； Cyclin D1 ； proliferating cell nuclear antigen ； cell cycle ； immunohistochemistry 卵巢癌是妇科临床上常见恶性肿瘤类型 ， 其发 病率稍低于子宫颈癌和子宫内膜癌 ， 但其恶性程度 极高， 死亡率在妇科生殖系统恶性肿瘤中位居首 EOC ） 位。卵巢上皮性癌 （ epithelial ovarian cancer， 在卵巢癌中所占比例为 85% 90% ， 好发年龄 50 60 岁， 早期常无明显症状。 由于卵巢位居盆腔 深部， 早期症状不明显， 所以不易早期发现， 因此常 ［1 ］ 错过手术治疗最佳时机 。 临床常规的肿瘤标志 物特异度和敏感度均不高， 因此也影响卵巢癌的预 后， 降低远期生存率。故而积极探寻全新的较为理 想的肿瘤标志物对临床诊断和治疗均具有至关重 要的 作 用。 细 胞 周 期 蛋 白 D1 （ cell cycle protein D1 ， Cyclin D1 ） 和增殖细胞核抗原 （ proliferating cell nuclear antigen ， Ki67 ） 在 EOC 组织细胞增殖和凋 亡过程中具有重要调控作用， 可引起细胞异常增 ［2 ］ ， 殖 最终导致恶性肿瘤发生和发展 。 但是目前 关于两种生物标志物在卵巢上皮性癌不同临床病 理参数条件下的表达情况研究甚少。基于此， 本研 67 在 EOC 中及不同临 究通过检测 Cyclin D1 和 Ki床病理参数条件下的表达情况， 确定二者表达的相 关性， 探讨两者在卵巢癌形成及发展中所起的作用。 克隆抗体及 EnVision 试剂盒 （ 均购自福州迈新生 物技术有 限 公 司 ） ； 采 用 EnVision 免 疫 组 化 法 进 3 μm 连续切片， 行， 将选好的蜡块， 每例切 4 张， 取 其中 1 张做苏木素 － 伊红 （ HE ） 染色， 其余做免疫 组化染色。 一抗工作浓度根据预实验结果调整 ， Ki67 、 Cyclin Dl 均为 1ʒ 100 。免疫组化染色程序严 格按照试剂盒说明方法染色， 所有切片染色均在相 同条件下进行， 每批染色均设阳性对照 （ 试剂公司 提供） 和阴性对照（ PBS 代替一抗） 。 1. 3 观察指标 Ki67 和 Cyclin Dl 于细胞核内出现黄色或棕 黄色反应物颗粒为阳性细胞。 阴性对照用 PBS 液 Ki67 ； 阳性对照， Cyclin 分别代替一抗 Cyclin D1 、 D1 、 Ki67 采用乳腺癌切片作阳性对照。 具体评分 标准参照 Fromowitz 的综合计分法进行， 首先是染 ： 0 ； 色强度评分 无染色为 分 呈现淡黄色颗粒， 明显 高于背景为 1 分； 呈现浅棕黄色颗粒为 2 分； 出现 大量深棕黄色颗粒为 3 分。 根据阳性细胞数进行 评分： 每片随机观察 5 个视野， 计数 500 个细胞中 染色阳性细胞数， 阳性细胞数 ＜ 5% 为 0 分； 阳性细 胞数 5% 25% 为 1 分； 26% 50% 为 2 分； 51% 75% 为 3 分； ＞ 75% 为 4 分。染色强度评分与阳性 2 3 细胞数比例的评分相加之和 ＜ 2 为阴性（ － ） ， 4 5 分为中度阳性 （ + + ） ， 6 分为弱阳性 （ + ） ， 7 分为强阳性 （ + + + ） 。 弱阳、 中阳、 强阳均判为 阳性， 以中度阳性和强阳性为过表达。 1. 4 统计学方法 应用 SPSS 16. 0 统计软件包统计， 两样本率的 2 2 比较采用四格表资料的 χ 检验， 不满足 χ 检验条 件时采用连续校正公式或 FISH 精确概率检验法。 相关性采用 Spearman 秩相关系数分析， 以 ɑ = 0. 05 P ＜ 0. 05 为差异有统计学意义。 为检验水准，
Expression of Cyclin D1 and Ki67 in Epithelial Ovarian Cancer and Expression Correlation
CHEN Guoqing1 ，WANG Xingxing2 ，ZI Dan1
（ 1． Department of Gynaecology and Obstetrics，the Affiliated Hospital of Guizhou Medical University，Guiyang 550004 ，Guizhou， China； 2． Department of Gynaecology and Obstetrics，Weining County People＇s Hospital，Weining 553100 ，Guizhou，China）
［ 关键词］ 卵巢肿瘤； 细胞周期蛋白 D1 ； 增殖细胞核抗原； 细胞周期； 免疫组织化学 ［ ［ ［ 2707 （ 2016 ） 05053904 中图分类号］ Ｒ737. 31 文献标识码］ A 文章编号］ 1000DOI： 10． 19367 / j． cnki． 10002707． 2016． 05． 011
［ Abstract］ Objective： To explore the expression of Cyclin D1 and Ki67 in epithelial ovarian cancer and the correlation between their expression and clinical pathology． Methods： EnVision immunohistochemical assay kit was adopted to detect the expression level of Cyclin D1 and Ki67 protein in 40 cases of patients with epithelial ovarian cancer （ observation group ） and 10 cases of patients with benign ovarian tumors （ control group） ． The relationship between Cyclin D1 protein expression level and Ki67 protein expression level was also observed and compared． Ｒesults： The positive expression rate of Cyclin D1 and the overexpression rate of Ki67 in observation group were higher than those in control group． There were statistical differences in positive expression rates of Cyclin D1 between observation group and control group when compared in terms of pathological parameters such as FIGO clinical staging and histological grading （ P ＜ 0． 05 ） ，but there were no statistical differences between observation group and control group when compared in terms of pathological parameters such as age ，histological type and lymph node metastasisin （ P ＞ 0. 05 ） ． There were statistical differences in overexpression rates of Ki67 between observation group and control group when compared in terms of FIGO clinical staging（ P ＜ 0． 05 ） ． The data showed that the positive expression rate of Cyclin D1 and the overexpression rate of Ki67 was positively correlated （ r = 0 ． 370 ，P ＜ 0． 05 ） ． Conclusion： Coexpression of