黄酮的提取实施方案
中药中黄酮提取

中药中的黄酮提取是一种具有广泛应用价值的天然药物提取技术。
黄酮类化合物是一类存在于植物中的天然化合物,具有多种生物活性,如抗氧化、抗炎、抗肿瘤等。
因此,从中药中提取黄酮类化合物对于医药、食品等领域具有重要意义。
一、中药中黄酮的种类和分布中药中的黄酮类化合物主要包括黄酮、黄酮醇、异黄酮等。
这些化合物主要分布在植物的根、茎、叶、花和果实中。
一些常见的中药,如甘草、黄芪、柴胡等,都含有丰富的黄酮类化合物。
二、黄酮提取的方法1. 溶剂提取法:溶剂提取法是黄酮提取中最常用的方法之一。
该方法主要是利用黄酮类化合物易溶于有机溶剂的性质,采用乙醇、甲醇等有机溶剂进行提取。
其中,乙醇提取法应用最为广泛,因为乙醇对黄酮类化合物的溶解度较大,同时又具有较为良好的安全性。
2. 超声波辅助提取法:超声波辅助提取法是一种利用超声波破碎植物细胞,加速黄酮类化合物释放的方法。
该方法具有操作简便、提取效率高等优点,但需要使用大量的有机溶剂。
3. 微波辅助提取法:微波辅助提取法是一种利用微波能加速黄酮类化合物提取的方法。
该方法具有提取时间短、提取效率高等优点,但需要使用较为昂贵的设备。
4. 酶解法:酶解法是一种利用酶分解植物细胞壁,加速黄酮类化合物释放的方法。
该方法具有操作条件温和、提取效率高等优点,但需要使用较为昂贵的酶制剂。
三、黄酮提取的应用中药中黄酮的提取技术在医药、食品等领域具有广泛的应用价值。
例如,从银杏叶中提取的黄酮类化合物可以用于治疗心血管疾病;从甘草中提取的黄酮类化合物可以用于治疗肝炎、糖尿病等疾病;从黑芝麻中提取的异黄酮类化合物可以用于治疗骨质疏松等疾病。
此外,黄酮类化合物还具有抗氧化、抗炎等作用,可以作为保健食品的添加剂。
总之,中药中黄酮的提取技术对于医药、食品等领域具有重要意义。
随着科学技术的不断发展,相信未来还会有更多的黄酮类化合物被发现和应用。
黄精中黄酮的提取

黄精中黄酮的提取
黄精是一种具有滋补作用的中药材,其中含有丰富的黄酮类化合物。
为了充分利用黄精中的黄酮成分,需要对其进行提取。
以下是黄精中黄酮的提取方法:
首先,将黄精进行预处理。
将黄精切片,并在45℃下烘干至恒重。
这样做是为了确保黄精中的水分含量较低,有利于后续的提取过程。
烘干后的黄精将被粉碎成粉末状,以便于与提取溶剂充分接触。
接下来,按照一定的料液比将黄精粉末与提取溶剂混合。
料液比是指黄精粉末与提取溶剂的比例,通常为1:6-1:24。
混合后的溶液将被置于水浴中加热,以促进黄酮类化合物的溶出。
经过一段时间的加热后,离心分离上清液与底部黄精粉。
这一步是为了将黄酮类化合物与黄精残渣分离,得到较为纯净的提取液。
对于分离出的黄精粉,可以重复上述水浴提取过程,再次离心获得上清液。
通过合并上清液,可以增加黄酮类化合物的提取率。
最后,将上清液用提取溶剂定容至一定体积,得到最终的提取溶液。
此时的提取溶液已经去除了大部分杂质,含有较高浓度的黄酮类化合物。
通过离心处理,可以得到更为纯净的提取液。
上述方法能够有效地从黄精中提取出黄酮类化合物,为充分利用这一中药材提供了理论依据和技术支持。
这种提取方法简单易行,适用于大规模生产。
在未来的研究中,可以进一步优化提取条件和参数,以提高黄酮类化合物的提取率和纯度。
黄酮的提取方案

黄酮提取实验方案1材料与仪器1.1 材料1.2 试剂芦丁,无水乙醇,氢氧化钠,石油醚,硝酸铝,三氯化铁,三氯化铝,浓氨水,浓盐酸,镁粉,亚硝酸钠(以上均为国产分析纯),实验所用水均为蒸馏水。
1.3 实验仪器电热恒温水浴锅电子天平(感量0.0001g)722型光栅分光光度计索氏提取器量筒(100ml,10ml)25ml比色管移液管小试管白瓷板圆底烧瓶 100m容量瓶锥形瓶2 实验原理2.1 提取原理2.2 分离方法及原理3 实验部分3.1原料的预处理金星科厥类叶→除杂→水洗→晾干→粉碎3.2 芦丁—标准溶液的配制将芦丁在干燥箱里用120℃条件下恒重1.5h,然后精确称取芦丁标准品0.01g用85%的乙醇溶液配制成100.00mL的溶液,备用。
3.3 测定波长的选择精确移取芦丁标准溶液0.50mL,置于25.00mL的比色管中,用质量分数为85%的乙醇稀释到10.00mL处,加人5%的亚硝酸钠溶液0.80mL,混匀,放置10min;加入10%硝酸铝溶液0.80mL , 混匀,放置10min,再加入4%的氢氧化钠溶液10.00mL, 混匀,放置10min,加入85%的乙醇溶液至刻度,摇匀,10min后在460~560nm处测定吸光度,[4](以试剂样品做空白)选择最大吸收波长。
3.4 芦丁标准曲线的绘制精确吸取芦丁标准溶液0.00、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00 mL于6支25.00mL的比色管中,用质量分数为85%的乙醇稀释到10.00mL处,加人5%的亚硝酸钠溶液0.80mL,混匀,放置10min;加入10%硝酸铝溶液0.80mL , 混匀,放置10min,再加入4%的氢氧化钠溶液10.00mL, 混匀,放置10min,加入85%的乙醇溶液至刻度,摇匀,10min后于波长500nm处测定吸光度,(以第一瓶为空白溶液)然后以吸光度和芦丁溶液浓度做图,绘制标准曲线。
3.5 黄酮类化合物的特征性实验[5]-[6]在一定条件下对提取的黄酮类化合物进行特征性实验,具体容如下:(1)盐酸—镁粉反应:取1.00mL提取液于试管中加适量镁粉摇匀,再加入浓盐酸数滴(1次加入),观察其泡沫颜色。
黄酮的提取方案

黄酮的提取⽅案黄酮提取实验⽅案1材料与仪器1.1 材料1.2 试剂芦丁,⽆⽔⼄醇,氢氧化钠,⽯油醚,硝酸铝,三氯化铁,三氯化铝,浓氨⽔,浓盐酸,镁粉,亚硝酸钠(以上均为国产分析纯),实验所⽤⽔均为蒸馏⽔。
1.3 实验仪器电热恒温⽔浴锅电⼦天平(感量0.0001g)722型光栅分光光度计索⽒提取器量筒(100ml,10ml)25ml⽐⾊管移液管⼩试管⽩瓷板圆底烧瓶 100m容量瓶锥形瓶2 实验原理2.1 提取原理2.2 分离⽅法及原理3 实验部分3.1原料的预处理⾦星科厥类叶→除杂→⽔洗→晾⼲→粉碎3.2 芦丁—标准溶液的配制将芦丁在⼲燥箱⾥⽤120℃条件下恒重1.5h,然后精确称取芦丁标准品0.01g⽤85%的⼄醇溶液配制成100.00mL的溶液,备⽤。
3.3 测定波长的选择精确移取芦丁标准溶液0.50mL,置于25.00mL的⽐⾊管中,⽤质量分数为85%的⼄醇稀释到10.00mL处,加⼈5%的亚硝酸钠溶液0.80mL,混匀,放置10min;加⼊10%硝酸铝溶液0.80mL , 混匀,放置10min,再加⼊4%的氢氧化钠溶液10.00mL, 混匀,放置10min,加⼊85%的⼄醇溶液⾄刻度,摇匀,10min后在460~560nm处测定吸光度,[4](以试剂样品做空⽩)选择最⼤吸收波长。
3.4 芦丁标准曲线的绘制精确吸取芦丁标准溶液0.00、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00 mL于6⽀25.00mL的⽐⾊管中,⽤质量分数为85%的⼄醇稀释到10.00mL处,加⼈5%的亚硝酸钠溶液0.80mL,混匀,放置10min;加⼊10%硝酸铝溶液0.80mL , 混匀,放置10min,再加⼊4%的氢氧化钠溶液10.00mL, 混匀,放置10min,加⼊85%的⼄醇溶液⾄刻度,摇匀,10min后于波长500nm处测定吸光度,(以第⼀瓶为空⽩溶液)然后以吸光度和芦丁溶液浓度做图,绘制标准曲线。
3.5 黄酮类化合物的特征性实验[5]-[6]在⼀定条件下对提取的黄酮类化合物进⾏特征性实验,具体容如下:(1)盐酸—镁粉反应:取1.00mL提取液于试管中加适量镁粉摇匀,再加⼊浓盐酸数滴(1次加⼊),观察其泡沫颜⾊。
黄酮提取方法 (2)

总黄酮的提取方法1、熔剂法热水提取法、碱性水或碱性稀醇提取法、有机溶剂提取法2、2、1 微波提取法微波提取就是利用不同结构的物质在微波场中吸收微波能力的差异,使基体物质中的某些区域或提取体系中的某些组分被选择性加热,从而使被提取物质从基体或体系中分离,进入介电常数较小,微波吸收能力相对差的提取剂[1]。
这种方法的优点就是对提取物具有较高的选择性、提取率高、提取速度快、溶剂用量少、安全、节能、设备简单[2]。
2、2 超声波提取法用超声波提取法提取黄酮类物质,就是目前比较新的方法。
原理就是利用超声波在液体中的空化作用加速植物有效成分的浸出提取,另外,还利用其次效应,如机械振动、扩散、击碎等,使其加速被提取成分的扩散、释放。
超声波提取法具有设备简单,操作方便,提取时间短,产率高,无需加热,同时有利于保护热不稳定成分,省时,节能,提取率高的优点。
2、3 超临界流体萃取法超临界流体萃取技术就是利用超临界流体处于临界温度与临界压力以上,兼有气体与液体的双重特点,对物质具有良好的溶解能力,从而作溶剂进行萃取分离。
可做超临界流体的物质很多,一般为低分子量的化合物,如CO2、C2H6、NH3、N2O 等。
目前多采用CO2 做萃取剂,因为它具有密度大、溶解能力强、临界压力适中、临界温度接近常温、不影响萃取物的生理活性、无毒无味、化学性质稳定、生产过程中容易回收、无环境污染、价格便宜等一系列优点。
但单一的CO2作萃取剂只对低极性、亲脂性化合物有较强的溶解能力,对大多数极性较强的组分则不起作用,因此,在其中加入夹带剂,通过影响溶剂的密度与溶质与夹带剂分子间的作用力来影响溶质在二氧化碳流体中的溶解度与选择性[15]。
超临界流体萃取技术有许多传统分离技术不可比拟的优点:过程容易控制、达到平衡的时间短、萃取效率高、无有机溶剂残留、对热敏性物质不易破坏等[16]。
但它所需要的设备规模较大,技术要求高,投资大,安全操作要求高,难以用于较大规模的生产。
黄酮的提取 三种方法

黄酮的提取三种方法黄酮的提取三种方法辣木叶中黄酮的提取具体操作流程1.1材料与试剂辣木叶,老师提供;芦丁标准品、分析纯无水乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝,氢氧化钠等。
1.2仪器与设备kq-300de型数控超声波清洗器;电子分析天平;anketdl-5-a离心机;紫外/可见分光光度计。
1.3辣木叶总黄酮的抽取方法取干燥的辣木叶,粉碎过40目筛。
准确称取辣木叶粉1.0g,置于100ml烧杯中,加入体积分数为80%的乙醇溶液超声提取,提取液离心分离,测定总黄酮的含量。
具体操作流程:辣木叶→潮湿→磨粉→过40目筛→超音波抽取→Vergt→上清液→测量总黄酮含量。
1.4总黄酮的测定方法1.4.1芦丁标准曲线的绘制精确称取潮湿至恒重的芦丁标准品20mg,用体积分数为80%的乙醇溶液熔化,定容至25ml,酿制获得质量浓度为0.80mg/ml的芦丁标准溶液。
精确汲取崭新酿制的芦丁标准溶液0、125、250、500、625、750、1500μl于10ml的比色管中,重新加入体积分数80%的乙醇溶液至9ml,重新加入5%的na-no2溶液300μl,容器,置放6min。
重新加入10%的al(no3)3溶液300μl,容器,置放6min,再重新加入1mol/l的naoh溶液500μl,容器,静置10~15min。
以80%的乙醇溶液为试剂空白作参比液,于510nm波长处测量吸光值。
以芦丁浓度(mg/ml)为横坐标,喷光度值a为纵坐标绘制标准曲线,得回归方程y=ax-b,r2=x,得线性关系。
1.4.2辣木叶总黄酮含量的测定精确汲取适度辣木叶黄酮提取液,按照芦丁标准曲线制作方法测量喷光度。
由喷光度根据回归方程排序出来原提取液中总黄酮的质量浓度(c),测量获得辣木提取液体积(v),然后排序出来辣木叶中总黄酮的抽取率为。
辣木叶中总黄酮抽取率为(以芦丁计)%=c×vm×100其中:c为样液经喷光度求出的原提取液中总黄酮的质量浓度(g/ml);v为提取液的总体积(ml);m为称取的辣木叶粉质量(mg)。
黄酮提取方法

黄酮提取方法黄酮是一类天然植物化合物,具有多种生物活性和药理作用。
以下是黄酮的一种常用提取方法:材料和试剂:-植物材料(如花朵、果实、叶子等)-乙醇或丙酮(有机溶剂)-蒸馏水(无机溶剂)-丙酮-水混合溶液(可选,用于分离黄酮类化合物)步骤:1. 准备植物材料:选择新鲜的植物材料,并将其洗净、晾干,去除杂质和不需要的部分。
根据具体植物材料的性质,可以选择使用花朵、果实、叶子等部位。
2. 粉碎植物材料:将植物材料切碎或研磨成细粉,以增加提取效率。
可以使用搅拌器、研钵或研磨机等设备进行粉碎。
3. 提取溶剂选择:选择适当的有机溶剂,如乙醇或丙酮,作为黄酮的提取溶剂。
这些溶剂具有良好的溶解性,能够高效地提取黄酮类化合物。
4. 溶剂提取:将粉碎后的植物材料与适量的有机溶剂混合,放入容器中,并密封。
让溶剂与植物材料充分接触,并进行提取。
可以选择常温静置提取、加热提取或超声波提取等方法,以增加提取效果。
5. 过滤:将提取液过滤,去除植物材料残渣和固体颗粒,得到澄清的提取液。
6. 浓缩提取液:使用浓缩设备(如旋转蒸发仪)将提取液中的溶剂蒸发掉,使其浓缩。
得到浓缩后的提取物,其中包含了黄酮类化合物。
7. 可选步骤:如果需要分离和纯化特定的黄酮类化合物,可以使用进一步的分离技术,如液相色谱(HPLC)或柱层析等方法。
这可以根据目标黄酮类化合物的性质和目的来选择。
以上是一般黄酮提取的常用方法,但需要根据具体的植物材料和实验条件进行调整和优化。
提取黄酮的方法可以因不同的植物种类和黄酮化合物的特性而有所差异。
因此,在实际操作中,建议参考相关的科学文献、专利或咨询专业人士的建议,以获取更详细和准确的提取方法。
此外,为确保实验操作的安全性和可靠性,请在进行实验之前仔细阅读和遵守相关实验室安全操作规程,并使用适当的个人防护设备。
在进行黄酮提取实验时,应注意溶剂的挥发性和易燃性,确保实验室通风良好,并遵循实验室废弃物管理规定。
最后,对于黄酮的提取和应用,建议与专业领域的研究人员、科学家或专业医疗人员进行深入讨论和咨询,以获取更准确和专业的指导。
黄酮类化合物有哪些提取方法

黄酮类化合物有哪些提取方法
黄酮类化合物是一类具有丰富生物活性的天然产物,常用的提取方法有以下几种:
1. 浸提法:将含有黄酮类化合物的植物材料浸泡在适当的溶剂中,通过浸泡时间和温度来促使黄酮类化合物溶解于溶剂中,最后采用蒸馏或浓缩方法得到提取物。
2. 水蒸气蒸馏法:将含有黄酮类化合物的植物材料放入水蒸气蒸馏器中,通过水蒸气的温度和压力作用使植物材料中的黄酮类化合物挥发出来,再通过冷凝器冷却收集得到提取物。
3. 超声波辅助提取法:将植物材料与提取溶剂放入超声波提取器中,利用超声波作用使黄酮类化合物充分溶解于溶剂中,提高提取效率。
4. 微波辅助提取法:将植物材料与提取溶剂放入微波提取器中,通过微波辐射加热,使黄酮类化合物迅速溶解于溶剂中,提高提取效率。
5. 超临界流体提取法:利用超临界流体(如二氧化碳)具有较高的溶解能力和较低的粘度,在适当的温度和压力下将黄酮类化合物提取出来,再通过减压蒸发或蒸馏得到提取物。
这些方法可以根据不同黄酮类化合物的特性和需求进行选择和优化。
同时,需要
注意提取条件的选择,如溶剂的选择、温度和时间控制等,以达到最佳的提取效果。
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黄酮提取实验方案1材料与仪器1.1材料1.2试剂芦丁,无水乙醇,氢氧化钠,石油醚,硝酸铝,三氯化铁,三氯化铝,浓氨水,浓盐酸,镁粉,亚硝酸钠(以上均为国产分析纯),实验所用水均为蒸馏水。
1.3实验仪器电热恒温水浴锅电子天平(感量0.0001g)722型光栅分光光度计索氏提取器量筒(100ml,10ml)25ml比色管移液管小试管白瓷板圆底烧瓶100m 容量瓶锥形瓶2实验原理2.1提取原理溶剂提取原理游离黄酮黄酮昔备注乙辱溶解范围广+ +(甲醇)著■甘元均可溶(90-95%) (6M)甲醇毒性大沸水多糖昔易于水+ 成本低、安全,水溶性杂质多臓性水或稀氢氧化钠溶出能力强碱性乙醇酚强基的酸性 + +石灰水除杂质效果好分离依据 之间的极性(分配系数K )差异分离工艺回收回收单糖瞽 多糖昔誓元 爸游离黄酮的乙瞇液2黄酮与杂质 昔与昔元 昔元与昔元)溶剂萃取法 2.2分离方法及原理(二)pH 梯度萃取法分离依据:游离黄酮类化合物的酸性差异(见黄酮酸性规律) 分离工艺:依次以 5%NiiH0h . 5%Na2C00. 2%N SL OH. 4%NaOH^取5%NaHCO3< 5%Na2CO3液 0. 2KNaOH 液4%NaOH 液 母液(脂溶性杂石油駆液 乙豔液 乙酸乙酯(脂溶性杂质)||丄酸化 水饱和正丁醇 母液 (水溶性杂质) 减压回收原料的提取苹缩液(水溶液)依次以石油耿、乙馳、 乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取3 实验部分3.1 原料的预处理金星科厥类叶T除杂T水洗T晾干T粉碎3.2 芦丁—标准溶液的配制将芦丁在干燥箱里用120C条件下恒重1.5h,然后精确称取芦丁标准品O.OIg用85%勺乙醇溶液配制成100.00mL 的溶液,备用。
3.3 测定波长勺选择精确移取芦丁标准溶液0.50mL, 置于25.00mL 勺比色管中,用质量分数为85%勺乙醇稀释到10.00mL 处,加人5%勺亚硝酸钠溶液0.80mL, 混匀,放置10min; 加入10%硝酸铝溶液0.80mL , 混匀,放置10min, 再加入4%勺氢氧化钠溶液10.00mL, 混匀,放置10min, 加入85%勺乙醇溶液至刻度,摇匀,10min后在460〜560nm处测定吸光度,⑷(以试剂样品做空白)选择最大吸收波长。
3.4 芦丁标准曲线勺绘制精确吸取芦丁标准溶液0.00、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00 mL于6支25.00mL的比色管中,用质量分数为85%勺乙醇稀释到10.00mL 处,加人5%勺亚硝酸钠溶液0.80mL, 混匀,放置10min; 加入1 0%硝酸铝溶液0.80mL , 混匀,放置10min, 再加入4%的氢氧化钠溶液10.00mL, 混匀,放置10min,加入85%的乙醇溶液至刻度,摇匀,10min后于波长500nm处测定吸光度,(以第一瓶为空白溶液)然后以吸光度和芦丁溶液浓度做图,绘制标准曲线。
3.5 黄酮类化合物的特征性实验[5]-[6] 在一定条件下对提取的黄酮类化合物进行特征性实验,具体内容如下:(1)盐酸一镁粉反应:取 1.00mL提取液于试管中加适量镁粉摇匀,再加入浓盐酸数滴(1次加入),观察其泡沫颜色。
(2)三氯化铝反应:取提取液点在滤纸上,滴加1%三氯化铝乙醇溶液,吹干,观察颜色变化。
(3)三氯化铁反应:取几滴提取液于白瓷板上,滴加1%三氯化铁乙醇溶液,观察其颜色。
(4)浓氨水反应:取乙醇提取液点在滤纸上,将滤纸在浓氨水上方熏0.5min ,观察其颜色变化。
3.6 单因素实验2.6.1 较佳提取剂质量分数的确定准确称取3g 处理好的金星厥科叶样品置于圆底烧瓶中,分别用无水乙醇、95%、85%80%、75%的乙醇60mL对3g金星厥科叶样品在水浴温度为80C下回流提取3h.提取完毕,用与提取剂的质量分数相同的乙醇反复洗涤圆底烧瓶、滤纸包,将其定容于100:00mL 容量瓶中,然后精确吸取0.50mL提取液置于25.00mL的比色管中,用与提取剂质量分数相同的乙醇稀释到10.00mL处,加人5%的亚硝酸钠溶液0.80mL,混匀,放置10min;加入10%硝酸铝溶液0.80mL ,混匀,放置10min,再加入4%的氢氧化钠溶液10.00mL, 混匀,放置10min, 加入85%的乙醇溶液至刻度,摇匀,10min 后于波长500nm处测定其吸光度,同时做三组平行实验。
2.6.2 较佳提取时间的确定准确称取3g 处理好的金星厥科叶样品置于圆底烧瓶中,分别用 2h 、2.5h 、3h 、3.5h 提取时间用60mL 85%的乙醇对3g 金星厥科叶样品在水浴温度为 80C 下回流提取,乙醇提取液的处理方法如前,测定其吸光度,同时做三组平行实验。
2.6.3较佳提取温度的确定称取3g 处理好的金星厥科叶样品置于圆底烧瓶中,分别在75C 、80 C 、85C 、90 C 的水浴温度下用60mL 85%的乙醇对3g 金星厥科叶样品回流提取 2.5 h ,乙醇提取液的处理方法如前,测 定其吸光度,同时做三组平行实验。
2.6.4较佳物料比的确定称取3g 处理好的金星厥科叶样品置于圆底烧瓶中,分别用30mL 45mL 、60mL 、75mL 、90mL的85%的乙醇溶液在水浴温度为 85 C 下对3g 金星厥科叶样品回流提取 2.5 h ,乙醇提取液的处理方法如前,测定其吸光度,同时做三组平行实验。
3.7叶绿素对黄酮类物质的影响称取15g 金星厥科叶样品放于锥形瓶中用 90mL 的石油醚浸泡8个小时对其脱色,过滤、干燥。
然后准确称取处理过的 3g 金星厥科叶样品用质量分数为 85%的60mL 乙醇溶液在水浴温度为 85 C 下 对其回流提取2.5h ,乙醇提取液的处理方法如前,测定其吸光度,同时做三组平行实验。
3.8金星厥科叶中黄酮类化合物含量的测定精密量取石油醚处理过的提取液0.50mL ,置于25.00mL 的比色管中。
力口 85%的乙醇稀释到10.00mL ,加入5%的亚硝酸钠溶液 0.80mL,混匀,放置10min;加入10%硝酸铝溶液0.80mL ,混匀, 放置10min,再加入4%勺氢氧化钠溶液 10.00mL,混匀,放置10min ,加入85%的乙醇溶液至刻度, 摇匀,10min 后于波长500nm 处测定吸光度。
同时做样品空白管.根据标准曲线计算提取物中黄酮类化合物的含量.(把样品所测得吸光度的平均值代入标准曲线方程,再算出0.50mL 提取液中黄酮类化合物的浓度,然后再根据浓度算出样品 中黄酮类化合物的百分含量.)计算方法(公式)如下:设样品中黄酮类化合物的含量为,稀释以后的浓度为 C ;原提取液的浓度为 C0 ;4结果与讨论4.1最大吸收波长的选择将定量的黄酮提取液显色以后在 460〜560nm 处测定吸光度,(以试剂样品做空白)选择最大吸收波长,测定结果如下:表1波长与吸光度的关系波长(nm ) 吸光度(A ) 波长(nm ) 吸光度(A )Co 100ml CoC V Vo从表1中可以知道当波长在什么时候有最大吸收波峰。
4.2芦丁的标准曲线的绘制精确吸取0.00、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00 mL的芦丁标准溶液稀释、显色以后在波长500nm 处测定吸光度(以第一瓶为空白溶液),以浓度(c)为横坐标,吸光度(A)为纵坐标,绘制标准曲线,结果如下:表2芦丁溶液浓度与吸光度的关系浓度(mg/mL)0.002 0.004 0.008 0.012 0.016吸光度实验结果表明黄酮类化合物含量在0〜100ug/mL范围内与吸光度呈良好的线性关系,其回归方程为Y=11.5548X-0.00406 R=0.99342,4.3黄酮类化合物的特征性实验对所提取的黄酮类化合物进行特征性实验的结果如下表:表3定性实验结果试剂现象盐酸一镁粉1%E氯化铝1%E氯化铁浓氨水从表3可知,黄酮类化合物的特征性实验结果较符合黄酮类化合物的特征颜色反应,证明所提取中含有黄酮类化合物。
4.4单因素实验的结果4.4.1较佳提取剂质量分数的确定准确称取3g处理好的金星厥科叶样品置于圆底烧瓶中,分别用无水乙醇、95% 85% 80%、75%的乙醇60mL对3g金星厥科叶样品在水浴温度为80C下回流提取3h.显色后测其吸光度,测定结果如下:表4不同乙醇质量分数对西山中黄酮类物质提取的结果乙醇的质量分数(%)无水乙醇95 85 80 75吸光度1吸光度2吸光度3平均值442 较佳提取时间的确定准确称取3g处理好的金星厥科叶样品置于圆底烧瓶中,分别用2h、2.5h、3h、3.5h提取时间用60mL 85%勺乙醇对3g金星厥科叶样品在水浴温度为80C下回流提取。
显色后测其吸光度,测定结果如下:表5不同提取时间对西山中黄酮类物质的提取结果提取时间(h)2 2.53 3.5吸光度1吸光度2吸光度3平均值4.4.3较佳提取温度的确定称取3g处理好的金星厥科叶样品置于圆底烧瓶中,分别在75 C、80 C、85 C、90 C的水浴温度下用60mL 85%勺乙醇对3g金星厥科叶样品回流提取 2.5 h o显色后测其吸光度,测定结果如下:表6不同提取温度对西山中黄酮类物质的提取结果 ___________________提取温度(C)75 80 85 90吸光度1吸光度2吸光度3平均值4.4.4较佳物料比的确定称取3g处理好的金星厥科叶样品置于圆底烧瓶中,分别用30mL 45mL、60mL、75mL、90mL质量分数为85%勺乙醇在水浴温度为85C下对3g样品回流提取2.5 h。
显色后测其吸光度,测定结果如下:表7 不同物料比对金星厥科叶中黄酮类物质的提取结果______________ 物料比(w/v)1:10 1:15 1:20 1:25 1:30吸光度1吸光度2吸光度3平均值4.5叶绿素对黄酮类物质含量测定的影响准确称取用石油醚脱色过的3g金星厥科叶样品用质量分数为85%勺乙醇60mL在水浴温度为85C下对其回流提取2.5h,显色后测其吸光度,测定结果如下:表8 叶绿素和脂肪对黄酮类物质提取效果的影响样品石油醚浸泡对照样吸光度1 吸光度2吸光度3平均值4.6金星厥科叶中黄酮类化合物含量取黄酮提取液(用石油醚浸泡过的)0.50mL测定其吸光度并按公式计算其含量,实验结果如下:表9金星厥科叶中黄酮类化合物含量项目吸光度(C)浓度(mg/mL )黄酮类化合物含量(%)标准曲线。