演示版总黄酮的提取方法.doc
举例说明黄酮的提取分离方法
举例说明黄酮的提取分离方法组长：宁组员：翟雪王璐璐子涵子惠罗春雨红成1.提取方法1.1热水提取法热水提取法一般仅限于提取苷类. 在提取过程中要考虑加水量、浸泡时间、煎煮时间与煎煮次数等因素. 此工艺成本低、安全,适合于工业化大生产。
以水做溶剂,同时提高浸提温度、延长浸提时间和增加液料比(60倍) ,可以明显提高芦丁的产率。
实例桑叶：采用热水提取法测定桑叶中各有效成分含量，发现黄酮类化合物含量为1%以上,其中霜后桑叶黄酮类化合物含量最高为1.54% ,其次是晚秋桑叶,春季桑芽和后期桑叶含量最低。
甘草：过去甘草黄酮的提取主要为水提法,其主要原理通过甘草粉与水按一定配比,加热混合至80～95 ℃浸提甘草粉,利用甘草黄酮的水溶性进而提取甘草黄酮。
此法虽然要求设备简单,但因提取杂质多、提取时间长、提取液存放易腐败变质、后续过滤操作困难、收率较低等缺点,现已不常使用。
1.2有机溶剂萃取法其原理是利用黄酮类化合物与混入的杂质极性不同,选用不同的溶剂萃取。
常用的有机溶剂有甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等,一般采取乙醇为提取溶剂。
高浓度的乙醇(如90 %～95 %) 适于提取苷元,浓度60 %左右的乙醇适于提取苷类。
提取次数一般为2～4 次,提取方法有热回流提取和冷浸提取两种方式。
实例桑叶：使用乙醇提取桑叶中总黄酮的最正确工艺条件为：乙醇的浓度为70%，料液比为1:15，在80℃的条件下浸泡3h。
使用多种有机溶剂提取发现桑叶中黄酮类化合物的最正确提取溶剂是60%丙酮。
西芹：使用无水乙醇为提取剂，按西芹鲜重与提取剂的比例(W/ V) 1∶2 ,在80 ℃下回流提取2～4h ,制备西芹总黄酮。
银杏叶：从银杏叶中提取总黄酮时, 随乙醇浓度的增加总黄酮提取率逐渐上升, 当乙醇浓度增至70% 时提取率最高, 之后反而下降, 应选用70% 的乙醇作浸提剂最正确。
生：生黄酮提取用40倍原料的90%甲醇溶液, 在60 ~ 65℃条件下提取4 h 为其优化组合, 而其试验组合中以用40倍原料的75%甲醇溶液,在60~ 65 ℃条件下提取2 h的提取效果最好。
总黄酮的提取方法
总黄酮的提取方法1、熔剂法热水提取法、碱性水或碱性稀醇提取法、有机溶剂提取法2、微波提取法微波提取是利用不同结构的物质在微波场中吸收微波能力的差异，使基体物质中的某些区域或提取体系中的某些组分被选择性加热，从而使被提取物质从基体或体系中分离，进入介电常数较小，微波吸收能力相对差的提取剂[1]。
这种方法的优点是对提取物具有较高的选择性、提取率高、提取速度快、溶剂用量少、安全、节能、设备简单3、超声波提取法用超声波提取法提取黄酮类物质，是目前比较新的方法。
原理是利用超声波在液体中的空化作用加速植物有效成分的浸出提取，另外，还利用其次效应，如机械振动、扩散、击碎等，使其加速被提取成分的扩散、释放。
超声波提取法具有设备简单，操作方便，提取时间短，产率高，无需加热，同时有利于保护热不稳定成分，省时，节能，提取率高的优点。
4、超临界流体萃取法超临界流体萃取技术是利用超临界流体处于临界温度和临界压力以上，兼有气体和液体的双重特点，对物质具有良好的溶解能力，从而作溶剂进行萃取分离。
可做超临界流体的物质很多，一般为低分子量的化合物，如CO2、C2H6、NH3、N2O 等。
目前多采用CO2 做萃取剂，因为它具有密度大、溶解能力强、临界压力适中、临界温度接近常温、不影响萃取物的生理活性、无毒无味、化学性质稳定、生产过程中容易回收、无环境污染、价格便宜等一系列优点。
但单一的CO2作萃取剂只对低极性、亲脂性化合物有较强的溶解能力，对大多数极性较强的组分则不起作用，因此，在其中加入夹带剂，通过影响溶剂的密度和溶质与夹带剂分子间的作用力来影响溶质在二氧化碳流体中的溶解度和选择性[15]。
超临界流体萃取技术有许多传统分离技术不可比拟的优点：过程容易控制、达到平衡的时间短、萃取效率高、无有机溶剂残留、对热敏性物质不易破坏等[16]。
但它所需要的设备规模较大，技术要求高，投资大，安全操作要求高，难以用于较大规模的生产。
5、酶法提取酶解法适用于被细胞壁包围的黄酮类物质，利用酶反应的高度专一性，破坏细胞壁，使其中的黄酮类化合物释放出来。
总黄酮的提取方法【范本模板】
总黄酮的提取方法1、熔剂法热水提取法、碱性水或碱性稀醇提取法、有机溶剂提取法2、2。
1 微波提取法微波提取是利用不同结构的物质在微波场中吸收微波能力的差异，使基体物质中的某些区域或提取体系中的某些组分被选择性加热，从而使被提取物质从基体或体系中分离，进入介电常数较小，微波吸收能力相对差的提取剂［1］.这种方法的优点是对提取物具有较高的选择性、提取率高、提取速度快、溶剂用量少、安全、节能、设备简单3、2。
2 超声波提取法用超声波提取法提取黄酮类物质,是目前比较新的方法。
原理是利用超声波在液体中的空化作用加速植物有效成分的浸出提取，另外，还利用其次效应，如机械振动、扩散、击碎等，使其加速被提取成分的扩散、释放。
超声波提取法具有设备简单，操作方便，提取时间短，产率高，无需加热,同时有利于保护热不稳定成分，省时，节能，提取率高的优点。
4、2。
3 超临界流体萃取法超临界流体萃取技术是利用超临界流体处于临界温度和临界压力以上,兼有气体和液体的双重特点，对物质具有良好的溶解能力，从而作溶剂进行萃取分离。
可做超临界流体的物质很多,一般为低分子量的化合物，如CO2、C2H6、NH3、N2O 等。
目前多采用CO2 做萃取剂，因为它具有密度大、溶解能力强、临界压力适中、临界温度接近常温、不影响萃取物的生理活性、无毒无味、化学性质稳定、生产过程中容易回收、无环境污染、价格便宜等一系列优点.但单一的CO2作萃取剂只对低极性、亲脂性化合物有较强的溶解能力，对大多数极性较强的组分则不起作用，因此，在其中加入夹带剂，通过影响溶剂的密度和溶质与夹带剂分子间的作用力来影响溶质在二氧化碳流体中的溶解度和选择性[15］。
超临界流体萃取技术有许多传统分离技术不可比拟的优点：过程容易控制、达到平衡的时间短、萃取效率高、无有机溶剂残留、对热敏性物质不易破坏等[16］。
但它所需要的设备规模较大,技术要求高，投资大，安全操作要求高，难以用于较大规模的生产.5、 2.4 酶法提取酶解法适用于被细胞壁包围的黄酮类物质，利用酶反应的高度专一性,破坏细胞壁,使其中的黄酮类化合物释放出来。
药用菊花中总黄酮的提取、分离、检识与鉴定PPT课件
将提取出来的总黄酮进行分离 纯化，得到单一组分。
检识
利用化学反应或物理性质对分 离纯化的总黄酮进行检识，确 定其是否为黄酮类化合物。
鉴定
结合鉴定原理和鉴定方法，对 总黄酮进行准确的鉴定，确定
其结构及成分。
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分离过程
2. 过滤
将提取液过滤，去除固体杂质。
4. 纯化
对分离得到的总黄酮进行纯化 处理，如重结晶、柱层析等， 以提高纯度。
1. 提取
将药用菊花粉碎后，加入适量 的溶剂进行提取，提取液中含 有总黄酮。
3. 分离
根据总黄酮的性质选择适当的 分离方法，如溶剂萃取法、沉 淀法或吸附法等。
5. 干燥
将纯化后的总黄酮进行干燥处 理，得到干燥的总黄酮。
超临界流体萃取法利用超临界 流体的特殊性质，使黄酮类化 合物在超临界流体中溶解度增 大，从而实现提取。
提取过程
1. 原料准备
将药用菊花干燥、粉碎成适当大小 的颗粒。
2. 溶剂选择
根据提取方法和原理选择适当的有 机溶剂或超临界流体。
3. 提取
将溶剂与药用菊花颗粒混合，进行 搅拌、加热或超声波、微波处理， 使总黄酮成分充分溶解在溶剂中。
中释放出来。
微波辅助提取法
利用微波的穿透力和热效应， 使药用菊花中的总黄酮成分快
速释放并溶于溶剂中。
超临界流体萃取法
利用超临界流体（如二氧化碳 ）作为萃取剂，从药用菊花中
提取总黄酮成分。
提取原理
黄酮类化合物具有酚羟基，能 够与有机溶剂形成氢键，从而 被溶剂提取出来。
超声波和微波的振动和热效应 能够破坏药用菊花细胞壁，使 黄酮类化合物更容易释放。
检识原理
黄酮提取方法 (2)
总黄酮的提取方法1、熔剂法热水提取法、碱性水或碱性稀醇提取法、有机溶剂提取法2、2、1 微波提取法微波提取就是利用不同结构的物质在微波场中吸收微波能力的差异,使基体物质中的某些区域或提取体系中的某些组分被选择性加热,从而使被提取物质从基体或体系中分离,进入介电常数较小,微波吸收能力相对差的提取剂[1]。
这种方法的优点就是对提取物具有较高的选择性、提取率高、提取速度快、溶剂用量少、安全、节能、设备简单[2]。
2、2 超声波提取法用超声波提取法提取黄酮类物质,就是目前比较新的方法。
原理就是利用超声波在液体中的空化作用加速植物有效成分的浸出提取,另外,还利用其次效应,如机械振动、扩散、击碎等,使其加速被提取成分的扩散、释放。
超声波提取法具有设备简单,操作方便,提取时间短,产率高,无需加热,同时有利于保护热不稳定成分,省时,节能,提取率高的优点。
2、3 超临界流体萃取法超临界流体萃取技术就是利用超临界流体处于临界温度与临界压力以上,兼有气体与液体的双重特点,对物质具有良好的溶解能力,从而作溶剂进行萃取分离。
可做超临界流体的物质很多,一般为低分子量的化合物,如CO2、C2H6、NH3、N2O 等。
目前多采用CO2 做萃取剂,因为它具有密度大、溶解能力强、临界压力适中、临界温度接近常温、不影响萃取物的生理活性、无毒无味、化学性质稳定、生产过程中容易回收、无环境污染、价格便宜等一系列优点。
但单一的CO2作萃取剂只对低极性、亲脂性化合物有较强的溶解能力,对大多数极性较强的组分则不起作用,因此,在其中加入夹带剂,通过影响溶剂的密度与溶质与夹带剂分子间的作用力来影响溶质在二氧化碳流体中的溶解度与选择性[15]。
超临界流体萃取技术有许多传统分离技术不可比拟的优点:过程容易控制、达到平衡的时间短、萃取效率高、无有机溶剂残留、对热敏性物质不易破坏等[16]。
但它所需要的设备规模较大,技术要求高,投资大,安全操作要求高,难以用于较大规模的生产。
黄酮的提取 三种方法
黄酮的提取三种方法黄酮的提取三种方法辣木叶中黄酮的提取具体操作流程1.1材料与试剂辣木叶，老师提供；芦丁标准品、分析纯无水乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝，氢氧化钠等。
1.2仪器与设备kq-300de型数控超声波清洗器；电子分析天平；anketdl-5-a离心机；紫外/可见分光光度计。
1.3辣木叶总黄酮的抽取方法取干燥的辣木叶，粉碎过40目筛。
准确称取辣木叶粉1.0g，置于100ml烧杯中，加入体积分数为80%的乙醇溶液超声提取，提取液离心分离，测定总黄酮的含量。
具体操作流程：辣木叶→潮湿→磨粉→过40目筛→超音波抽取→Vergt→上清液→测量总黄酮含量。
1.4总黄酮的测定方法1.4.1芦丁标准曲线的绘制精确称取潮湿至恒重的芦丁标准品20mg，用体积分数为80%的乙醇溶液熔化，定容至25ml，酿制获得质量浓度为0.80mg/ml的芦丁标准溶液。
精确汲取崭新酿制的芦丁标准溶液0、125、250、500、625、750、1500μl于10ml的比色管中，重新加入体积分数80%的乙醇溶液至9ml，重新加入5%的na-no2溶液300μl，容器，置放6min。
重新加入10%的al（no3）3溶液300μl，容器，置放6min，再重新加入1mol/l的naoh溶液500μl，容器，静置10～15min。
以80%的乙醇溶液为试剂空白作参比液，于510nm波长处测量吸光值。
以芦丁浓度（mg/ml）为横坐标，喷光度值a为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程y=ax-b，r2=x，得线性关系。
1.4.2辣木叶总黄酮含量的测定精确汲取适度辣木叶黄酮提取液，按照芦丁标准曲线制作方法测量喷光度。
由喷光度根据回归方程排序出来原提取液中总黄酮的质量浓度（c），测量获得辣木提取液体积（v），然后排序出来辣木叶中总黄酮的抽取率为。
辣木叶中总黄酮抽取率为（以芦丁计）%=c×vm×100其中：c为样液经喷光度求出的原提取液中总黄酮的质量浓度（g/ml）；v为提取液的总体积（ml）；m为称取的辣木叶粉质量（mg）。
中药化学32黄酮类化学成分的提取分离技术-精选文档75页
R 1O
O
OCH3
HO
O
OH O
OR2
R1
CH3
治冠心病 H
H
OH O
R2
H
银杏素
CH3 异银杏素
H 白果素
OH O
HO
O
HO
O
OH 柏黄酮
OH
OH O
HO
O
OH
HO
O
O
OH O
扁柏黄酮
OH O
九、其他黄酮
口山酮（双苯吡酮或苯色原酮），高异 黄酮，黄酮木脂素，生物碱型黄酮等。
G lc
HO
O
OH
HO
6' 5'
六、花色素类
C环无羰基, 1位氧原子以佯盐形式存 在，带正电荷。在中药中多以苷的形式 存在。
HO
O
OH OH
R1 矢车菊苷元 R1=OH R2=H
OH 飞燕草苷元 R1=R2=OH
R2
天竺葵苷元 R1= R2=H
七、黄烷醇类 1、黄烷-3-醇(儿茶素类)：
主要存在于含鞣质的木本植物中。
2、黄酮苷类： 易溶于热水、甲醇、乙醇中。难溶
或不溶于亲脂性有机溶剂中。 多糖苷在水中的溶解度大于单糖苷。 3-羟基苷的水溶性大于7-羟基苷。
（四）酸碱性
1、酸性 黄酮类化合物分子中具有酚羟基，故显酸性。
酸性强弱顺序： 7，4‘-二羟基>7或4’-羟基> 一般酚羟基 > 5-羟基 5%碳酸氢钠 5%碳酸钠 0.2%NaOH 4%NaOH
O
OH
异芒果素 止咳祛痰
O
O
高异黄酮
HO
水飞蓟素
H O
黄酮的提取
预览：总黄的酮取提法方1、熔剂法热水取提、碱性水或碱法稀性醇提法取有、机溶提取法剂2、2. 1波提取法微微波提是取用利不同结的构物质在微波场中吸收微能波的力差，使基异体质中物某的区些或提域取系体中的某组分被选择些性热，加而从被提取物质从基使或体系体分中离进入，介常电较数小，波吸收能力微对差的相提剂[取]。
1种这法方的优是对点取物提有较具高选择的性、取提高、率取提度速快溶剂、量用少、全安节、、能设简单[2备]。
2. 2声波提取法超用超波声取提提取黄法类物酮，是目前质比较新方法的。
原是利用理超声波液在体的中空化作用加植物有速效分成浸的出提取另外，，还用其利次效，应如械机动振扩散、、击等碎，使加其被速取成分的提扩散释放。
超、波声提取具法设备有单简操，作方便提，取时短间，率产，高需无加热，时有同于保护利不稳热成定，省分，节能时提，取率的高点。
优2. 3临界流体萃取超法超临流界体萃取技术是利超临界流体处于临界用温和临度界力压以，上兼有气和体体的双重液特点对，物具质有良的好溶解力能从而，溶作进剂萃取行离分可做。
临界超体流物的质多，一般为很分低量子化合物的，如OC2、CH26NH3、、N2 O等目前。
多用采O2C做萃剂，因取为具它有度大密溶解、能力强、临压界力适中临界温度、近接常温不、响萃影物的取生理活性无毒无、、化味学质性定、稳产过程中生容回收、易无环污染境、格便价宜一等系列点优但单一。
的CO作2取剂只萃对低极、性脂亲化合物有性较强的解能溶力对，多数大极性强的较分组则起不用作，此，在其中因加夹入剂，通过带响溶影剂密度和溶质的夹带与剂子间分的用作来力影溶响质在二化氧流体碳的溶中度和解选择[性5]。
1超界临流萃体取术有技许多传分离统术不技可比的拟点优过程容易：控、制达到平衡的间时、短取萃效高率、无有机剂溶残留、对热性敏物不质破坏易[等1]。
6但它所需的设要备规模大较技，术要高求，资大投安全操作，要高，求以难于用较大规模生的。
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总黄酮的提取方法
1、熔剂法热水提取法、碱性水或碱性稀醇提取法、有机溶剂提取法
2、 2.1 微波提取法微波提取是利用不同结构的物质在微波场中吸收微波能力的差异，使基体物质中的某些区域或提取体系中的某些组分被选择性加热，从而使被提取物质从基体或体系中分离，进入介电常数较小，微波吸收能力相对差的提取剂[1]。
这种方法的优点是对提取物具有较高的选择性、提取率高、提取速度快、溶剂用量少、安全、节能、设备简单
3、 2.2 超声波提取法用超声波提取法提取黄酮类物质，是目前比较新的方法。
原理是利用超声波在液体中的空化作用加速植物有效成分的浸出提取，另外，还利用其次效应，如机械振动、扩散、击碎等，使其加速被提取成分的扩散、释放。
超声波提取法具有设备简单，操作方便，提取时间短，产率高，无需加热，同时有利于保护热不稳定成分，省时，节能，提取率高的优点。
4、 2.3 超临界流体萃取法超临界流体萃取技术是利用超临界流体处于临界温度和临界压力以上，兼有气体和液体的双重特点，对物质具有良好的溶解能力，从而作溶剂进行萃取分离。
可做超临界流体的物质很多，一般为低分子量的化合物，如CO2、C2H6、NH3、N2O 等。
目前多采用CO2 做萃取剂，因为它具有密度大、溶解能力强、临界压力适中、临界温度接近常温、不影响萃取物的生理活性、无毒无味、化学性质稳定、生产过程中容易回收、无环境污染、价格便宜等一系列优点。
但单一的CO2作萃取剂只对低极性、亲脂性化合物有较强的溶解能力，对大多数极性较强的组分则不起作用，因此，在其中加入夹带剂，通过影响溶剂的密度和溶质与夹带剂分子间的作用力来影响溶质在二氧化碳流体中的溶解度和选择性[15]。
超临界流体萃取技术有许多传统分离技术不可比拟的优点：过程容易控制、达到平衡的时间短、萃取效率高、无有机溶剂残留、对热敏性物质不易破坏等[16]。
但它所需要的设备规模较大，技术要求高，投资大，安全操作要求高，难以用于较大规模的生产。
5、 2.4 酶法提取酶解法适用于被细胞壁包围的黄酮类物质，利用酶反应的高度专一性，破坏细胞壁，使其中的黄酮类化合物释放出来。
黄剑波等[22]采用纤维素酶辅助法从甜茶中提取黄酮类化合物，黄酮类物质的提取率为91%，提取纯度为54%。
王悦等[23]对桔皮细胞进行游离酶、固定化酶和常规法提取，黄酮得率分别是1.43%，0.94% 和0.79%，和传统的方法相比，游离酶法的总黄酮得率提高了81%。
6、2.5 双水相提取法双水相提取技术是瑞典Per Albersson首先发现并研究的一种技术，双水相萃取法属于液- 液萃取，当物质进入双水相体系后，由于表面性质、电荷作用和各种力的作用，溶液环境的影响，其在上、下相中的浓度不同，即各成分在两相间选择性分配，从而达到萃取的目的。
由于双水相体系分相快、使用温度低、容易操作、无污染、提取率高，因此成为黄酮化合物富集分离的一种有效方法。
张春秀等[24]取一定量的银杏叶浸提液，加到PEG1500/ 磷酸盐体系双水相系统中，则黄酮类化合物进入上相PEG，从而将黄酮类化合物分离，提取率可达98.2%。
7、 2.6 半仿生提取法半仿生提取法是将整体药物研究法与分子药物研究法相结合，模拟口服给药后药物经胃肠道转运的环境，为经消化道给药的中药制剂设计的一种新的提取工艺。
这种提取方法的特点是可以提取和保留更多的有效
成分，能缩短生产周期、降低成本。
2.7 膜分离法膜分离法主要有超滤、微滤、纳滤和反渗透等，其中超滤法是膜分离的代表，它是唯一能用于分子分离的过滤方法，是以多孔性半透膜为分离介质，依靠薄膜两侧压力差作为推动力来分离溶液中不同分子量的物质。
由于大多数黄酮类化合物的分子量在1000 以下，而非有效成分如大多数的多糖、蛋白质等分子量多在50000 以上，因而使用超滤能有效去除蛋白质、多肽、大分子色素、淀粉等，达到除菌、除热原、提高药液澄明度以
.精品.
及提高有效成分含量等目的。
这种方法操作简便、不需要加热、不损坏黄酮类化合物，提取效果好、超滤装置可反复使用。
于涛等[26]研究了银杏叶中黄酮类化合物的提取过程及工艺，使用超滤技术对粗提的产品进行精制，对影响超滤的工艺条件进行了考察，超滤后产品中黄酮质量分数达到33.99%。
2.8 热压流体萃取法热压流体萃取法是一种快速、环保、便宜、有效地萃取生物活性物质的方法。
Chaorui Chen等[27]采用热压流体萃取法从巴西蜂胶中提取了7种黄酮类化合物，结果表明，通过热压水萃取的样品中当存在表面活性剂时萃取物的固体含量更高，当使用热压脂溶萃取时，7种黄酮类化合物的含量在脂溶萃取中超过了水溶萃取。
KairHartonen等[28]用热压水萃取法从白杨中萃取了黄酮类化合物，考察了萃取时间、温度和压力等因素的影响，并与超声波萃取、高速逆流色谱做了比较，结果表明用热压水萃取法在150℃萃取35min效果最好。
2.9 高压液相提取法Ying Zhang等[29]通过高压液相萃取法从鱼腥草中萃取了黄酮类化合物，研究了乙醇浓度、流速、温度和压强等因素的影响，并与热浸法和超声波辅助萃取法进行对比，发现高压液相萃取法提取效果较好，当使用50% 乙醇，溶剂流速为1.8mL/min，温度为70℃，压强为8MPa 时，黄酮类化合物的得率和浓度可以达到
3.152% 和23.962%。