TS基因多态性与肿瘤相关研究进展

３４１０煎ｊＥ匡蕴２Ｑ鲤生！兰旦箜！！鲞笠丝捆旦！堕ｉ丛型堡坐』！坚婴坐：兰Ｑ螋：！！！三！旦塑塑竺：丝ＴＳ基因多态性与肿瘤相关研究进展洪雷崔雅静张键慧姜达【关键词】胸苷酸合成酶；基因多态性；肿瘤【中图分类号】Ｒ７３５．２【文献标识码】Ａ【文章编号】１００２—７３８６（２００９）２４—３４１０—０３人类胸苷酸合成酶（ｔｈｙｍｉｄｙｌａｔｅｓｙｎｔｈａｓｅ，ＴＳ）是由两个相同亚单位组成的二聚体蛋白，其基因定位于第１８号染色体上（１８ｐ１１．３２）…。

它是ＤＮＡ生物合成的关键酶，俗的表达与肿瘤的恶性生物学行为密切相关。

ＴＳ基因的多态性有可能导致酶活性或功能的改变，从而影响个体对癌症的易感性以及癌症患者对化疗药物的敏感性甚至预后。

因此，进一步研究幅基因型与表达及其与肿瘤发生、发展关系对于肿瘤的早期诊断、治疗及预后具有重要意义。

１ＴＳ基因多态性１．１Ｔｓ基因５’非编码区多态重复序列偈启动基因结构独特，在５’端转录起始点上游附近存在２８个碱基对（ｂｐ）的串联重复序列（ｔａｎｄｅｍｒｅｐｅａｔｓ）该序列与多种转录调节蛋白结合后可能刺激和增强启动子的活性。

从而影响基因表达效率，故称胸苷酸合成酶启动基因增强子区段旧Ｊ。

应用ＰＣＲ对Ｔｓ随机重复序列扩增得到２个不同的ＤＮＡ片段。

这两个片段含有相同的２８核营酸序列重复，只是重复次数不同。

分别为２次重复（２Ｒ），３次重复（３Ｒ）¨Ｊ。

还有更多重复次数等位基因的报道（４Ｒ，５Ｒ，９Ｒ）¨一Ｊ，但其出现频率较低。

常见的３种基因型为３Ｒ／３Ｒ，２Ｒ／３Ｒ，２Ｒ／２Ｒ。

＇ＩＳ基因５非编码区多态重复序列等位基因出现频率存在种族差异。

但研究显示无论是亚洲人、白种人还是黑种人，３Ｒ／３Ｒ，２Ｒ／３Ｒ，２Ｒ／２Ｒ３种基因型仍为主要基因型，但存在分布频率上的差异。

中国人种中２Ｒ，３Ｒ等位基因频率分别为１８．８２％和８ｌ％，３Ｒ出现频率在中国人口中从６２％到９５％不等。

１．２ＴＳ基因５’非编码区单核苷酸多态性偈基因５’非编码区串联重复序列中存在一单核苷酸多态现象（ｓｉｎｇｌｅｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ，ＳＮＰ）为Ｇ／Ｃ多态”１。

ＭａｎｄｏｌａＭＶ在２Ｒ的第１次重复和３Ｒ的前２次重复中都发现ＵＳＦ家族Ｅ—ｂｏｘ，另外在３Ｒ等位基因第２次重复中存在Ｇ—ｃ单核苷酸多态。

目前已知这一多态位位点于第二次重复序列的第１２个核苷酸处怕Ｊ。

Ｋａｗａｋａｍｉ０７ｊ结合偈基因５端重复序列多态与ＳＮＰ，结果将基因型分为３Ｃ／３Ｃ，３Ｇ／３Ｇ．２Ｒ／３Ｇ，３ｃ／３Ｇ，２Ｒ／２Ｒ，２Ｒ／３Ｃ以及个别少见基因型。

目前对这一多态的报道不多。

１．３佟基因３’非编码区多态性Ｕｌｒｉｃｈ等旧１通过检索表达作者单位：０５００１１石家庄市，河北医科大学第四医院肿瘤内科（洪雷、姜达）；北京市朝阳医院（崔雅静）；国家疾病预防控制中心（张建慧）・综述与讲座・顺序标签库发现，ＴＳｍＲＮＡ３’非编码区（３’ｕｎｔｒａｎｓｌａｔｅｄｒｅｇｉｏｎ，３’－ＵＴＲ）的１４９４ｂｐ处存在６ｂｐ核苷酸片段的缺失或插入。

并将其基因型分＋６ｂｐ／＋６ｂｐ。

＋６ｂｐ／－６ｂｐ和－６ｂｐ／－６ｂｐ基因型，发现于９５名美国白人中偈３’．ＵＴＲ基因型频率分别为４８％，４４％和７％，发现＋６ｂｐ和－６ｂｐ等位基因频率分别为０．７１和０．２９。

他们将．６ｂｐ等位基因称为变异型等位基因，将＿６ｂｐ／－６ｂｐ基因型称为变异型纯合子基因型。

高长明等一１检测了１０７例中国人，发现他们所做出的的基因频率结果与Ｕｌｒｉｃｈ等㈦１的结果有明显差异，认为ＴＳ基因这一多态性存在种族和民族差异性，而将＊６ｂｐ／－６ｂｐ基因型称为变异型纯合子基因型是不合适的。

Ｍａｎｄｏｌａ【ｌ０Ｊ等发现６ｂｐ缺失多态在非西班牙白人中占４ｌ％，在西班牙人中占到２６％，在非洲人中占５２％而在新加坡人中占７６％，它们之间存在差异性。

代谢酶基因多态性在人种或民族中的差异，很可能是因为人类长期为适应生存的环境而做出的自然选择的结果，各种基因型在人群中都有较高的比例，因此仅根据一个人种的基因型分布很难确定一种基因型是野生型或是变异型。

２＂ＩＳ基因的表达２．１ＴＳ基因５’非编码区多态重复序列对表达的影响虽然迄今为止众学者在ＴＳ５’端基因型是否与ｍＲＮＡ转录水平相关的问题ｌ二还存在分歧¨“，但体内外研究显示，３Ｒ等位基因型的蛋白表达效率均高于２Ｒｆｌ“。

Ｉｓｈｉｄａ等【Ｉ到通过实时定量反转录ＰＣＲ分离１１５例胃癌切除组织中ＴＳｍＲＮＡ，提取了７２例可利用标本中的蛋白，将结果于，Ｉ’ｓ基因５’非编码区多态重复序列基因型间比较，发现３Ｒ／３Ｒ基因型的基因蛋白表达明显高于２Ｒ／３Ｒ基闪型，但在各基因型间未发现存在ｍＲＮＡ表达的差异。

这一结果与Ｋａｗａｋａｗｉ等¨４１在直肠癌组织中得到的结果相吻合。

他们认为鸭基因型与蛋白表达有关而与ｍＲＮＡ水平无关。

ＴＳｍＲＮＡ表达与鸭蛋白表达在基因型依赖上不同。

但Ｓｈｉｎｔａｎ等¨纠应用Ｔａｑｍａｎ实时定量反转录ＰＣＲ和免疫组化对７０例Ｉ期和Ⅱ期非小细胞肺癌的研究中，显示在３Ｒ／３Ｒ基因型肺癌组织表达水平以及蛋白水平较２Ｒ／２Ｒ，２Ｒ／３Ｒ高。

而且基因型与ｍＲＮＡ表达水平存在相关性。

２．２偈基因５’非编码区单核苷酸多态性对表达的影响１ｓ基因５’非编码区单核苷酸多态性对表达的影响目前报道甚少，而研究多将其与５’非编码区串联重复序多态联合而共同探讨。

Ｋａｗａｋａｍｉ等¨４１结合鸭基因５’端重复序列多态与ＳＮＰ，并且将结果分为高表达组（２Ｒ／３Ｇ，３Ｃ／３Ｇ，３Ｇ／３Ｇ）和低表万方数据煎ｊＥ医堑呈Ｑ塑生１２旦筮！！鲞箍丝期旦！鲢ｉ丛型ｉ型』２坚望迥：２Ｑ塑：Ｙ旦！！！旦丝堕Ｑ：丝达组（２Ｒ／２Ｒ，２Ｒ／３Ｃ，３ｃ／３ｃ），发现含Ｇ的３Ｒ序列（３Ｇ）翻译表达的效率较含有Ｃ的３Ｒ序列和２Ｒ序列高３—４倍Ｈｊ。

认为３Ｇ基因型与ＴＳｍＲＮＡ高表达有关¨“。

２．３ＴＳ基因３’非编码区多态性对表达的影响多数学者认为３’非编码区多态性在ｍＲＮＡ稳定和翻译中发挥重要作用。

Ｍａｎｄｏｌａ等‘”。

通过体外荧光标记检测功能，体内测定ｍＲＮＡ水平的方法发现，包含＋６ｂｐ多态基因型的荧光活性和ｍＲＮＡ水平出现了约３５％的衰减而包含－６ｂｐ的基因型出现了约７０％的衰减；同时含有－６ｂｐ的基因型与含有＋６ｂｐ的基因型相比出现了较高的降解率；＋６ｂｐ／＋６ｂｐ基因型的ＴＳｍＲＮＡ水平明显高于－６ｂｐ／－６ｂｐ基因型。

因此他们认为－６ｂｐ等位基因在体外降低ＴＳｍＲＮＡ的稳定性，在体内降低偈的表达。

２．４杂合丢失（ＬＯＨ）对表达的影响Ｋａｗａｋａｍｉ等¨７１对１５１例直结肠肿瘤与其相邻正常组织对照研究中，取得ＤＮＡ标本通过ＰＣＲ分析检测基因型。

结果显示在纯合标本中瘤组织与正常组织基因型一致。

但在杂合型标本中观察到２Ｒ，３Ｒ等位基因频率不平衡。

提示：偈位点存在ＬＯＨ。

进一步研究显示６２％的２／３Ｒ存在ＬＯＨ。

在ＬＯＨ与非ＬＯＨ标本中没有发现ＴＳｍＲＮＡ与１ｒｓ蛋白的表达不同。

结合重复序列将存在ＬＯＨ的杂和型标本可细分为２Ｒ／ｌｏｓｓ、３Ｒ／ｌｏｓｓ。

瘤组织中２Ｒ／ｌｏｓｓ蛋白表达水平显著比３Ｒ／ｌｏｓｓ低。

这一结果显示当联合正常组织分析时，由于ＬＯＨ而导致偈基因型在肿瘤组织和正常组织的不同应被考虑，因为其影响鸭蛋白表达。

３佟基因多态性与叶酸代谢叶酸代谢反应与蛋氧酸、胸苷酸合成反应偶联对ＤＮＡ的甲基化和ＤＮＡ合成与修复有重要影响一Ｊ。

而个体的ＤＮＡ甲基化水平以及ＤＮＡ修复能力与癌症的发生有关。

饮食因素可以通过影响体内代谢反应的平衡，进而影响个体对癌症的易感性。

因而研究叶酸代谢酶基因多态性和饮食因素相巨作用与癌症或其他疾病的关系，不仅可以为遗传因素和环境因素相互作用对癌症发生的影响提供有力的证据，同时在癌症的预防、治疗和理论研究中都具有重要的意义。

虽然现在还不清楚ＴＳ３’一ＵＴＲ基因多态性对酶的结构和功能有何影响，但高长明等Ｈ’研究在国内外首先发现ＴＳ－６ｂｐ／－６ｂｐ基因型与吸烟、饮酒和不饮茶的生活习惯以及ＭＴＨＲＦＣ／Ｔ或Ｔ／Ｔ基因型在增加胃癌发生的危险性中有明显的协同作用。

携带ＴＳ－６ｂｐ／－６ｂｐ基因型同时携带ＭＴＨＲＦ等位基因者发生胃癌的风险增加２．６７倍。

Ｕｌｒｉｃｈ等¨引在对Ｔｓ多态与直结肠腺瘤病例对照的研究中。

观察到一显著的ＴＳ５串联序列多态性与叶酸摄入的基因．营养具有相关性。

３Ｒ／３Ｒ个体高叶酸摄人致病危险性降低２倍，而在２Ｒ／２Ｒ个体高叶酸摄入危险性提高１．５倍。

维生素Ｂ１２的摄人呈同样相关趋势。

这一发现提出叶酸分子代谢途径与结直肠癌发病机制联系的问题。

高叶酸摄入对减低肿瘤易感性是否适应于目前所有代谢基因型尚有待于进一步研究。

４＂ＩＳ多态性与肿瘤相关性４．１ＴＳ多态性与肿瘤易感性Ｔｓ多态性基因与多种肿瘤易感性相关【ｌ”篮１。

ＴＳ高表达的个体对肿瘤易感，而ＴＳ基因型多态性能够影响１ｓ蛋白表达和ｍＲＮＡ表达水平，因此髑基因３４１ｌ型多态很有可能是我们评估肿瘤易感的重要指标。

正如前文对鸭基因型多态性与表达相关中所述Ｔｓ基因５’非编码区多态与Ｔｓ蛋白表达密切相关．它可能通过改变蛋白表达的效率或加速其降解，以及导致酶活性或功能的改变，从而改变个体对癌症的易感性。

目前多数学者认为，携带髑高表达基因型２Ｒ／３Ｇ，３Ｃ／３Ｇ，３Ｇ／３Ｇ的人群对肿瘤易感性高于低表达组人群（２Ｒ／２Ｒ，２Ｒ／３Ｃ，３Ｃ／３Ｃ）。

４．２＂ＩＳ多态性与肿瘤治疗幅的表达强度与肿瘤的恶性生物学行为密切相关。

Ｔｓ表达高的患者中肿瘤增值抗原表达、血管侵犯、远隔转移率明显高于鸭表达低者巧活性的抑制将直接影响ＤＮＡ的合成和细胞的分裂增值，因此髑是以叶酸为基础的偈抑制剂化疗中一个理想的靶点。

髑是胸苷酸合成的限速酶，可使ｄＵＭＰ甲基化形成ｄＴＭＰ，ｄＴＭＰ为ＤＮＡ合成基本原料ｄｒＩＴＩ＇Ｐ的前体５－ＦＵ进入体内后转变为５氟一２一脱氧尿苷单磷酸（ＦｄＵＭＰ）。

一方面５－ＦｄＵＭＰ通过抑制嘌呤合成进而产生对ＲＮＡ的抑制作用，并且ＦｄＵＭＰ与偈，四氢叶酸共同形成三元络合物，阻止ｄＵＭＰ形成ｄＴＭＰ，干扰ＤＮＡ合成从而杀死肿瘤细胞一“。

很多报道显示１ｓ多态性会影响ＴＳｍＲＮＡ的表达及稳定性。

导致酶活性或功能的改变，从而影响５．ＦＵ为基础的化疗疗效旧ｊ。

髑基因和蛋白表达较高，应用５－ＦＵ后，ＦｄＵＭＰ不能充分与Ｔｓ结合，难以抑制其活性，不能有效阻止癌细胞合成ＤＮＡ，从而杀灭肿瘤的效果下降。

偈多态性可能是预测肿瘤降期（ｄｏｗｎｓｔａｇｉｎｇ）的指标。

所谓降期是指肿瘤分期的下降。

临床七我们通过放化疗等多种手段，达到提高肿瘤降期的目的，从而提高肿瘤治疗的有效果。