干化学技术简介 (2)
干化学分析技术探析-分析化学论文-化学论文
干化学分析技术探析-分析化学论文-化学论文——文章均为WORD文档，下载后可直接编辑使用亦可打印——干化学是与传统的湿化学相对比较而言的，它与传统湿化学的最大差别在于参与化学反应的媒介不同，它是以待检测样品（血浆、血清、尿液等）中的液体作为反应介质，待测样品直接与固化于载体上的干试剂起反应，最后使用目测或仪器检测显示在载体上的反应信号变化[1].美国Ames 生产的尿糖试验即为干化学分析的第一个项目[2,3],随着酶制备技术及提纯技术、电子科技技术的发展，干化学分析技术在近几十年取得了很大的进步。
干化学和湿化学生化检测的主要区别如下，见表1[4]:1 干化学分析技术1.1 干化学分析技术从干化学试剂的复杂程度来分，可分为二层结构干片、三层结构干片和多层膜结构干片[5].二层结构干片最简单，在支持层塑料基片上有一试剂层纤维素片，在纤维素片中预固相了全部试剂，这种结构只能对待测成分进行定性或半定量测定。
三层结构的干片是在二层结构干片的试剂层上多了一层多孔胶膜过滤层，过滤层可用于过滤掉样品中的杂质，也能消除有色成分或其它杂质的干扰。
多层膜结构的干片包含多个功能分层，可以进行定量测定，根据信号检测方法的不同，将多层膜干片分为三种类型：比色/速率法干片[6]、离子法干片和免疫速率法干片[7,8].以上所提到的各种类型的干试剂都须与反射光度计、差示电位计或荧光光度计配套使用才能对样品进行定量分析。
根据反应原理的不同，干化学式自动化分析仪可分为反射光度法技术分析仪、胶片涂层技术分析仪和袋式分析仪[4].1.2 干化学分析技术的应用与湿化学法相比，干化学分析法有相应的检测仪器，操作简单、测量时间短，得到的结果准确等优点，检测样本从最初的尿液发展到现在全血、血清、血浆或其它体液，试剂（干片）结构从定性或半定量的二层结构到能精确定量的多层膜结构，因此，干片试纸法在临床检验的应用范围扩大，能进行的生化检验项目越来越多。
即时检验(POCT)的技术原理及分类
即时检验（POCT）的技术原理及分类POCT（即时检验）主要得益于一些新技术的应用。
POCT技术的基本原理大致可分为四类：（1）把传统方法中的相关液体试剂浸润于滤纸和各种微孔膜的吸水材料内，成为整合的干燥试剂块，然后将其固定于硬质型基质上，成为各种形式的诊断试剂条。
（2）把传统分析仪器微型化，操作方法简单化，使之成为便携式和手掌式的设备。
（3）把上述二者整合为统一的系统。
（4）应用生物感应技术，利用生物感应器检测待测物。
有关POCT的技术学分类见下表：目前应用的具体技术归纳起来主要有：一、干化学技术干化学技术是将多种反应试剂，干燥在纸片上，用被测样品中所存在的液体作反应介质，被测成分直接与固化于载体上的干试剂进行反应。
加上检验标本后产生颜色反应，用眼观定性或仪器检测（半定量）。
适用于全血，血清，血浆，尿液等各类样品。
例如：前降钙素（PCT）的半定量检测就是使用此种方法。
尿液蛋白质、葡萄糖等一般化学检查也都属于此范畴。
近几年，干化学尿液分析取得了很大的进展，各型尿沉渣分析仪相继问世，为临床提供一个简便、快速的筛选方法，即将完全正常的标本通过干化学尿液分析仪筛选出去，有利于对异常的标本进行规范性检查。
中华医学会经过三次专家研讨会，制定了筛选标准，即在干化学尿试带全部为阴性时，可以免去对红细胞和白细胞的显微镜检查，如果有一项阳性结果，必须同时进行显微镜检查。
换句话说，迄今为止无一台仪器检查能完全替代显微镜检查，尿沉渣显微镜检查以它特有临床价值仍是尿液分析中不可缺少的检查手段。
二、多层涂膜技术多层涂膜技术是从感光胶片制作技术移植而来。
将多种反应试剂依次涂布在片基上，制成干片。
采用多层涂膜技术制成的干片，比干化学纸片平整均匀，用仪器检测，可以准确定量，如目前临床使用的干板化学分析系统，可用于大多数血液化学成分，如蛋白质、糖类、脂类、酶、电解质、非蛋白氮类及一些血药浓度的监测，可供检测的项目达数十项，几乎覆盖了常做的临床生化检验项目。
干化学基础
干化学基础所谓干式生化，就是将原来发生在液相反应物中的反应，转换到一个固相载体上，然后被检测。
其原理是将某项测定所需要的全部试剂成分固化在具有特定结构反应装置（试剂载体）上，当把样品加到载体上之后，液体成分将试剂溶解并发生反应，然后通过检测器检测反应信号。
一、干化学历史1930年PH试纸条的出现，是最早的干化学应用于临床，开创了试纸条法干式化学的先河，后有1956年美国出现的尿糖试纸条及1972年尿试纸条自动分析仪的出现，在1983年的REFLOTRON（BM）和1987年的SPOTCHEM（ARKRAY）系列的出现，把试纸条法干式生化临床应用范围扩大了，Boehringer Mannheim 公司推出了用全血的干式试纸条试剂。
即将血细胞排除于滤膜之外，而血浆与试剂发生反应后显色检测。
干片式干式化学分析仪是 80 年代问世的。
分别由1978年Eastman Kodak和1980年富士DRICHEM （FUJI）制造出了测定血清中血糖、尿素、蛋白质、胆固醇等的干式试剂片。
当加上定量的血清后，在干片的前面产生颜色反应，用反射光度计检测即可进行定量。
这类方法完全革除了液体试剂，故称之为干化学法。
二、仪器结构干片式生化仪由干片(dry sheet)试剂和检测仪器两部分组成。
（一）干片试剂所有检测项目的试剂都做成干片，成为干片试剂，干片试剂的结构从上到下一般分为分布层、试剂层和支持层。
入射光干片不仅包括试剂，也可由电极构成，如富士DRICHEM （FUJI ）的钾、钠、氯三合一试剂片，所以这类分析仪也可进行电解质的测定。
这类干片均为一次性使用，故成本较贵。
（二）检测仪器检测仪器也有半自动和全自动之分。
半自动分析仪在分析过程中试剂片的选择与放入和待测样品的加入均需要由人工逐个去完成，且测定速度较慢。
全自动分析仪则只要在样品盘或样品架上放好待测样品，在操作屏幕上设定好需测定的项目、或者放入需检测项目相对应的干片（干片上印有条码，仪器自动识别所检测的项目），由分析仪自动选取干片试剂、自动进行定量取样、孵育和检测，且测定速度较快。
干化学技术简介.
140／105.211＊100＝133.0 mmol/L
• 直接法没有电解质排斥效应
性能优势
• 一次性电极 • 没有基质效应
• 没有电解质排斥效应
• 没有繁琐的日长保养
免疫速率法干片
竞争性与非竞争性免疫速率反应模式 需要液体反应底物 地高辛、苯妥因、苯巴比妥、CRP、 卡马西平
免疫速率法干片
茶碱干片（THEO)
速率法（多点法）
应用速率法进行测试的项目
谷丙转氨酶干片（ALT)
谷草转氨酶干片（AST)
碱性磷酸酶干片（ALKP)
肌酸激酶干片（CK)
肌酸激酶同工酶干片（CK-MB) 谷氨酰转肽酶干片（GGT) 乳酸脱氢酶干片（LDH) 胆碱酯酶干片（CHE)
比色/速率法干片
扩散层
试剂层
指示剂层
干片法（直接法）
独立电极 / 测试 一次性Tip头 无 无管道 定标周期长、环保 没有
ISE间接法电解质排斥效应
• 标本10微升，非水相5％，水相9.5微升 • 稀释100倍，加入稀释液990微升，水相999.5微升 • 实际稀释倍数＝999.5／9.5＝105.211 • 如果标本中含K 3.50 mmol/L; Na 140 mmol/L • 间接法实测值为：3.50／105.211＊100＝3.33 mmol/L
终点法
应用终点法进行测试的项目 白蛋白干片（ALB） 血氨干片（AMON)
钙离子干片（Ca)
葡萄糖干片（GLU) 镁离子干片（Mg) 总蛋白干片（TP)
胆固醇干片（CHOL)
高密度脂蛋白胆固醇干（HDLC) 磷离子干片（PHOS) 甘油三酯干片（TRIG)
尿素氮干片（BUN/UREA) 尿酸干片（URIC)
值得信赖的干式生化技术
家畜：骆马、绵羊、山羊、猪实验动物：兔、大老鼠、小白鼠、猴爬虫类：蜥蝪、蛇、龟8)检测报告：来自动或者根据客户的要求打印报告，检测报告可提供检测值、参考值范围以及根据检测结果建议追加检查项目、疾病建议诊断等多种信息；9)质控与校正：仪器配备有原厂提供的专用质控品；客户无需日常维护与校正；10)联机：仪器本身就是配置有window XP系统下的实验室管理，可以和生化仪、内分泌仪、尿液检测仪、血气分析仪、血凝检测仪等多种实验室的检测仪器联机，整合为一个实验管理系统。
管理系统可以通过触摸屏进行操作，下达指令给联机的各种检验仪器，同时可以整合系统内的各种检验仪器的报告。
还可以在同一个病历号码下，进行检验结果的趋势分析，便于临床医师进行临床监测与疗效分析；11)耗材：提供27种单项试剂片，和4种组合试剂片，每片试剂片都采用独立锡箔纸包装，可以冷冻或者冷藏保存。
使用时，无需回温到室温，即开即用。
爱德士Catalyst Dx;生化分析仪检测项目灵活而且完整的菜单组合使用Catalyst Dx;生化分析仪，您可以:使用单项试剂片。
自行组合自定义检测套组。
使用预装的检测套夹，测试既经济，而且检测项目全面。
使用锂肝素抗凝的全血分离器将血液从注射器转移到分析仪上。
7个预先装好的检测套组和ＵＰＣ检测套组只需打开铝箔袋，将预装好的检测套夹放在固定器上。
移开套夹，试剂片将自动载入分析仪。
生化17项套夹适用于犬的（健康，生病，急诊）全面检测；也可用于成年或者老年犬的检测，或者术前检查。
ALB, ALB/GLOB, ALKP, ALT, AMYL, BUN, BUN/CREA, Ca, CHOL, CREA, GGT, GLOB, GLU, LIPA, PHOS, TBIL, TP生化15项套夹适用于猫的（健康，生病，急诊）全面检测；也可用于成年或者老年猫的检测，或者术前检查。
ALB, ALB/GLOB, ALKP, ALT, BUN, BUN/CREA, Ca, CHOL, CREA, GGT, GLOB, GLU, PHOS, TBIL, TP生化10项套夹适用于麻醉检查。
干化学技术与应用-医学检验信息网
干化学技术与应用所谓“干化学”是与传统的“湿化学”（即溶液化学）相对比较而言的。
它是以被检测样品中的液体作为反应媒介，待测物直接与固化于载体上的干粉试剂反应的一种方式。
它与传统湿化学的最大区别就在于参与化学反应的媒介不同。
随着生物化学中酶的分离、提纯、存储等技术的发展，传感器、光度计和电极技术的进步，以及计算机应用的普及，干化学技术在近20年里得到了长足的进步，相对于“湿化学”，“干化学”具有如下优点：干化学试剂载体的结构干化学试剂载体的结构分为二层结构，三层结构，和多层膜。
最简单的二层结构用于生化分析的试剂载体最简单的是二层结构，在支持层塑料基片上有一试剂层纤维素片，在纤维素片中预固相了全部试剂。
常见的是尿生化分析试剂条：尿液中的待测成分与预固相在纤维素片上的试剂直接反应，通过反射光度计测定其颜色的改变，从而计算待测成份的浓度。
这种机构只能对待测成分进行定性或半定量测定，这样就限制了它在其它须准确定量的标本的应用。
稍加改进的三层结构在试剂层上加一多孔胶膜过滤层，其作用是将样品中的杂质过滤掉，并起保护试剂层作用。
常见的是微量法测定葡萄糖的试剂条。
三层试剂载体的测定光路是通过透明的塑料基片，而不经过最上面的过滤层，这样消除了样品中干扰成分的影响，保证了待测成分测定的稳定性和准确性。
比较完善的多层膜当代临床检验中的干化学法，最具代表性的就是多层膜法，即干化学的多层膜试剂载体。
它集现代化学、光学、酶工程学、化学计量学和计算机技术于一体。
多层膜分为三种类型：比色/速率法干片、离子法干片和免疫速率法干片1.1 介绍比色/速率法干片比色/速率法干片主要用于常规生化项目的测定，干片模式图(图1)显示了一个临床化学比色/速率法干片模式简图。
在这个试剂片中，多种反应试剂被固化在一张透明聚酯膜上，上面覆以多孔的扩散层，然后被夹在一个塑料结构中。
如图所示，共有4个功能层：扩散层、试剂层、指示剂层和支持层。
每个试剂片的层数视所采用的分析方法而定，干片的大小大致与一枚邮票相同，显色剂层呈现的颜色深浅与待测物浓度成正比。
干化学技术与应用讲解学习
干化学技术与应用干化学技术与应用所谓“干化学”是与传统的“湿化学”（即溶液化学）相对比较而言的。
它是以被检测样品中的液体作为反应媒介，待测物直接与固化于载体上的干粉试剂反应的一种方式。
它与传统湿化学的最大区别就在于参与化学反应的媒介不同。
随着生物化学中酶的分离、提纯、存储等技术的发展，传感器、光度计和电极技术的进步，以及计算机应用的普及，干化学技术在近20年里得到了长足的进步，相对于“湿化学”，“干化学”具有如下优点：干化学试剂载体的结构干化学试剂载体的结构分为二层结构，三层结构，和多层膜。
最简单的二层结构用于生化分析的试剂载体最简单的是二层结构，在支持层塑料基片上有一试剂层纤维素片，在纤维素片中预固相了全部试剂。
常见的是尿生化分析试剂条：尿液中的待测成分与预固相在纤维素片上的试剂直接反应，通过反射光度计测定其颜色的改变，从而计算待测成份的浓度。
这种机构只能对待测成分进行定性或半定量测定，这样就限制了它在其它须准确定量的标本的应用。
稍加改进的三层结构在试剂层上加一多孔胶膜过滤层，其作用是将样品中的杂质过滤掉，并起保护试剂层作用。
常见的是微量法测定葡萄糖的试剂条。
三层试剂载体的测定光路是通过透明的塑料基片，而不经过最上面的过滤层，这样消除了样品中干扰成分的影响，保证了待测成分测定的稳定性和准确性。
比较完善的多层膜当代临床检验中的干化学法，最具代表性的就是多层膜法，即干化学的多层膜试剂载体。
它集现代化学、光学、酶工程学、化学计量学和计算机技术于一体。
多层膜分为三种类型：比色/速率法干片、离子法干片和免疫速率法干片1.1 介绍比色/速率法干片比色/速率法干片主要用于常规生化项目的测定，干片模式图(图1)显示了一个临床化学比色/速率法干片模式简图。
在这个试剂片中，多种反应试剂被固化在一张透明聚酯膜上，上面覆以多孔的扩散层，然后被夹在一个塑料结构中。
如图所示，共有4个功能层：扩散层、试剂层、指示剂层和支持层。
干化学技术介绍ppt课件
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干干片片分分类类
CM/RT 比色/速率法干片
PM 电极法干片
IR 免疫-速率法干片
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比色/速率法干片
通过测定干片颜色变化来确定化合物浓度 终点法、固定时间法、速率法
竞争法结果
高浓度
低
浓度
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VITROS 干化学技术在 抗干扰方面 具有突出优势
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去除干扰的原理
u 清道夫层
u
使用氧化酶或特异性结合物去除干扰物
u
以镁离子干片为例
扩散层 试剂层 指示剂层
表面活性剂
Mg+2+ Ca +2
Mg +2 + Ca +2 – 螯合剂 复合
钙螯合剂
Mg+2 + 甲蜡染料衍生物
200
180
胆红素引起的干扰 J&J V750
160
140
( FINAL /
ORIGNAL ) 120
100
= RESULT
×100%
80
60
40 20
*ALB *ALKP *AMYL *AST *ECO2 *CA
*CHOL *CREAT *GLU *K *LDH *Mg
PROT
*
*NA *CL *URCA *UREA *TRIG *CK
*CL *GLU
*CHOL
*GLOB *CREAT *D.BILI
*BUN *CO2 *NA *CA