种子生活力的测定红墨水法教学设计
实验10 种子活力快速测定
三、实验步骤同TTC法
四、思考
1、试比较这二种方法所测定的结果是否相同？ 为什么？
ห้องสมุดไป่ตู้
五、注意
所列方法都是以细胞对物质的透性为前提，只能 快速地了解种子具有的发芽潜力，为急需之用。
（一）材料： 小麦种子
（二）仪器设备：
小烧杯；刀片；镊子；温箱
（三）试剂：
0.12％～0.5％TTC溶液
三、实验步骤
1. 2. 3. 4.
将种子用温水（约30℃）浸泡2～6h 随机取种子100粒，然后沿种胚中央准确切 开，取其一半备用。 将准备好的种子浸于TTC试剂中，于恒温箱 （30～35℃）中保温30min。 反应结束，观察种胚的情况，凡种胚全部 或大部分被染成红色的即为具有生命力的 种子。种胚不被染色的为死种子，如果种 胚中非关键性部位（如子叶的一部分）被 染色，而胚根或胚芽的尖端不染色都属于 不能正常发芽的种子。
实验十 植物种子生命力 的快速测定
Ⅰ.TTC法 一、原理
TTC（2，3，5－三苯基氯化四氮唑）氧化态
是无色的，可被氢还原成不溶性红色三苯甲
月替（TTF）。
用TTC溶液浸泡种子，如果种胚具有生命力，
其脱氢酶就可以将TTC还原成为三苯甲月替而 呈红色;如果种胚死亡便不能染色.
二、材料、仪器设备及试剂
Ⅱ.染料染色法 一、原理
有生命力种子胚细胞的原生质膜具有半透性， 有选择吸收外界物质的能力，一般染料不能进 入细胞内，胚部不染色。 而丧失生命力的种子，其胚部细胞原生质膜丧 失了选择吸收能力，染料可自由进入细胞内使 胚部染色。
教案-种子生活力测定(精)
种子室内检验技术教学单元教师手册
教学项目三种子室内检验技术学生手册（学习方案）
任务6：种子生活力测定资讯单
任务4：种子生活力测定实训任务单
室内检测技术任务六：种子生活力四唑测定原始记载表
生活力的生化（四唑）测定原始记载表
检验员：日期：校核人：日期：审核人：日期：
11
教学项目三种子室内检验技术任务6 种子生活力测定考核方案种子生活力检验考核评价表
12
室内检测技术任务六：种子生活力四唑测定总考核评价
种子生活力四唑考核评价单
13。
实验七种子生活力的快速测定
子的百分数。但是，采用发芽实验测定种子的
生活力所需时间较长，有时在生产上或种子贸
易过程中，需要较快地知道种子的生活力，采
用萌发实验就无法满足这些要求。另外，处在
休眠状态下的种子虽然不能萌发，但仍然具有
生活力，显然，采用萌发实验是无法测定休眠
种子的生活力的。而采用以下的化学方法，可
2021以/4/24较快地测定种子的生活力。
种子冲洗l~2次，观察种胚被 染色的情况。凡种胚全部或 大部分被染成红色的即为具 有生活力的种子，种胚不被 染色的为死种子。如果种胚
（30℃~35℃）中保温
中非关键性部位（如子叶的
0.5~1h。另取100粒吸涨种 一部分）被染色，而胚根或
子，于沸水中煮5min后，
胚芽的尖端不染色，都属于
再加入0.5%TTC溶液染色。 不能正常发芽的种子。根据
贮藏。若已变为红色，则不 能继续使用。
2021/4/24
4
实验步骤
▪
浸种：将待测种子用温水 （30℃~35℃）浸泡2－6 h，
▪
使种子充分吸胀。
统计：染色结束后要立即进
行鉴定，因放置太久会褪色。 倒出TTC溶液，再用清水将
▪ 显色：随机取吸涨种子100 粒，小心剥去种皮或外壳， 务必不要伤害种胚。然后将 处理好的种子置于小白瓷碗 中，加入0.5% TTC溶液， 以浸没种子为度，于恒温箱
2
实验原理
▪ 有生活力的种子能够进行呼吸代谢，在呼吸代谢途 径中由脱氢酶催化所脱下来的氢可以将无色的2，3， 5 - 三苯基氯化四唑（2，3，5 - triphenyl tetrazolium chloride 简称为TTC）还原为红色、不溶 性的甲月替，而且种子的生活力越强，代谢活动越
大小麦种子生活力和发芽率快速测试方法
大小麦种子生活力和发芽率快速测试方法夏收期间，有些地区会遭受了梅雨、暴雨和特大暴雨袭击，这给夏熟大小麦选留种带来极大困难。
因此及时做好麦种速测，做到心中有数，尤为重要。
麦种发芽需经过一段休眠期，特别是大麦种子，休眠期长达三个月左右。
这主要是种子内脱落酸含量较高，只有当脱落酸含量降低时，麦种才能解除休眠。
一、红墨水快速测定法：
1、常用红墨水稀释1:500倍液，将需测定的大麦种子用刀片纵切，取带有种胚的一半漫于红墨水液中，浸泡半小时左右，用清水冲洗后逐粒检查，凡是有生活力的种胚处无红色反应，仍呈白色，其它部分都染成红色，而无生活力的种子无论胚或胚乳部分都被染红，依据种胚的着色与否判断麦种有无生活力。
2、在采用红墨水测定的过程中，将麦种预先用清水浸泡12小时，再纵切染色，可提高测定效果，浸泡染色时间仅需10分钟。
同时由于经过了预先浸泡，经红墨水染色测定后，该半粒种子可继续留下保湿培养，观察其发芽情况，3-4天后就可得出发芽率结果；而且这一方法测定发芽率还不易受霉菌污染。
二、赤霉素快速测定法：
用赤霉素打破种子休眠期，直接速测其发芽率。
将市售小包装赤霉素配成20ppm 的溶液(即20毫克赤霉素加水1000 毫升)，将备好的大小麦种子浸人药液内，并置于冰箱，在5°C条件下浸泡24小时后，取出按常规发芽方法，每个培养皿放麦种10粒并保湿，在25°C室温下经1-2天后胚根、胚芽萌动，3-4天内就能迅速确定麦种的发芽率。
实验3 种子生活力的测定
实验3 种子生活力的测定目的要求用化学试剂测定种子生活力，可以在短时间内评定种子质量。
特别是对于有些树种种子的休眠期长，难于进行发芽测定，采用此法测定种子的生活力就具有明显的优越性。
通过实验要求了解测定种子生活力的基本原理，并学会其操作程序。
一、 氯化三苯基四氮唑（TTC ）法【原理】凡有生活力的种子胚部在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，而无生活力的种胚则无此反应。
当TTC 溶液渗入种胚的活细胞内，并作为氢受体被脱氢辅酶（NADH 或NADPH ）还原时，可产生红色的三苯基甲 （TTF ），胚便染成红色。
当种胚生活力下降时，呼吸作用明显减弱，脱氢酶的活性亦大大下降，胚的颜色变化不明显，故可由染色的程度推知种子的生活力强弱。
TTC 还原反应如下：TTC（无色）TTF（红色）【仪器与用具】培养皿2套；镊子１把；单面刀片１片；垫板（切种子用）１块；烧杯１个；棕色试剂瓶；解剖针１把；搪瓷盘１个；pH 试纸。
【试剂】TTC 溶液的配制：取1g TTC 溶于１L 蒸馏水或冷开水中，配制成0.1％的TTC 溶液。
药液p Ｈ应在6.5～7.5，以pH 试纸试之（如不易溶解，可先加少量酒精，使其溶解后再加水）。
【方法】1.将玉米、小麦等作物的新种子、陈种子或死种子，用温水（30℃）浸泡2～6h ，使种子充分吸胀。
2.随机取种子2份，每份50粒，沿种胚中央准确切开，取每粒种子的一半备用。
3.把切好的种子分别放在培养皿中，加TTC 溶液，以浸没种子为度。
4.放入30～35℃的恒温箱内保温30min.也可在20℃左右的室温下放置40～60min.5.保温后，倾出药液，用自来水冲洗2～3次，立即观察种胚着色情况，判断种子有无生活力，把判断结果记入表32-1内。
表32-1 染色法测定种子生活力记载表+Cl+CN N NN +2HCN N NNHHCl【注意事项】1.TTC溶液最好现配现用，如需贮藏则应贮于棕色瓶中，放在阴凉黑暗处，如溶液变红则不可再用。
植物种子活力的检定
植物种子活力的检定
一实验原理
TTC法是利用有活力的种子呼吸时所产生的NADH2和NAPH2与渗入胚细胞内的TTC反应,将无色TTC还原成红色的TTF,从而使种胚着色,以鉴别种子活力的方法.凡生活细胞的原生质膜具有选择性吸收物质的能力,而死的种子胚细胞原生质膜丧失这种能力,于是染料便能进入死细胞而染色.用红墨水等染料染色时,如果是死种子,胚乳和种胚均被染成红色,而活种子仅有胚乳被染成红色,种胚依然为白色.植物种子的活力是指种子萌发出芽的潜能,它决定种子的品质和实用价值大小
二实验目的
掌握以上两种方法测定种子活力的原理和基本操作过程
三实验器材和试剂
恒温箱电炉
0.5％TTC溶液,5％红墨水
四 操作步骤
TTC法和红墨水法
1)浸种
2)切种
3)药水浸泡
4)计数。
种子生活力的测定
种子生活力的测定一、氯化三苯基四氮唑（TTC）法【原理】凡有生活力的种子胚部在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，而无生活力的种胚则无此反应。
当TTC溶液渗入种胚的活细胞内，并作为氢受体被脱氢辅酶（NADH或NADPH）还原时，可产生红色的三苯基甲（TTF），胚便染成红色。
当种胚生活力下降时，呼吸作用明显减弱，脱氢酶的活性亦大大下降，胚的颜色变化不明显，故可由染色的程度推知种子的生活力强弱。
TTC还原反应如下：TTC（无色） TTF（红色）【仪器与用具】培养皿2套；镊子１把；单面刀片１片；垫板（切种子用）１块；烧杯１个；棕色试剂瓶；解剖针１把；搪瓷盘１个；pH试纸。
【试剂】TTC溶液的配制：取1g TTC溶于１L蒸馏水或冷开水中，配制成0.1％的TTC溶液。
药液pＨ应在6.5～7.5，以pH试纸试之（如不易溶解，可先加少量酒精，使其溶解后再加水）。
【方法】1.将玉米、小麦等作物的新种子、陈种子或死种子，用温水（30℃）浸泡2～6h，使种子充分吸胀。
2.随机取种子2份，每份50粒，沿种胚中央准确切开，取每粒种子的一半备用。
3.把切好的种子分别放在培养皿中，加TTC溶液，以浸没种子为度。
4.放入30～35℃的恒温箱内保温30min.也可在20℃左右的室温下放置40～60min.5.保温后，倾出药液，用自来水冲洗2～3次，立即观察种胚着色情况，判断种子有无生活力，把判断结果记入表32-1内。
表32-1 染色法测定种子生活力记载表【注意事项】1.TTC溶液最好现配现用，如需贮藏则应贮于棕色瓶中，放在阴凉黑暗处，如溶液变红则不可再用。
2.染色温度一般以25～35℃为宜。
3.判断有生活力的种子应具备：胚发育良好、完整、整个胚染成鲜红色；子叶有小部分坏死，其部位不是胚中轴和子叶连接处；胚根尖虽有小部分坏死，但其它部位完好。
4.判断无生活力的种子应具备：胚全部或大部分不染色；胚根不染色部分不限于根尖；子叶不染色或丧失机能的组织超过1/2；胚染成很淡的紫红色或淡灰红色；子叶与胚中轴的连接处或在胚根上有坏死的部分；胚根受伤以及发育不良的未成熟的种子。
实验四_种子生活力测定
实验四种子生活力测定一、目的要求通过实验要求了解测定种子生活力的基本原理，并学会其操作程序。
二、材料与器具1．材料刺槐种子。
2．器具及药品种子检验板、烧杯、解剖刀、小镊子、手持放大镜、量筒、培养皿、解剖针、玻璃棒、胶匙、四唑等。
三、方法步骤1．靛兰染色法靛兰为兰色粉末，分子式为C16H8N2O2（SO3）2Na2，它能透过种子的死细胞组织染上蓝色，但不能透过活细胞组织，因此活细胞不染色。
所以染成蓝色的种胚是无生活力的种子；未染色的是有生活力的种子。
根据染色部位和比例大小即可判断种子的生活力。
（1）抽取测定样品所需样品从净度测定选出的纯净种子中提取，用四分法随机取出四组种子，每组100粒，此外还要抽取约100粒种子作为后备，以便代替取胚时弄坏的种子。
（2）浸种浸种时间因树种而异。
松属、雪松属的种子在室温下浸3～5天。
刺槐种子可加入沸水不断搅拌至水凉或用锐利的解剖针或小刀等仔细地从胚根后面弄破种皮，然后用室温水浸种24h，浸种过程中更换1～2次水。
（3）取胚以松属树种为例。
浸种后，分组取胚，沿种子的棱切开种皮和胚乳。
取出种胚，种胚取出后放在盛有清水的玻璃皿里，以免种胚干燥萎缩而丧失生活力。
取胚时随时记下空粒、腐烂粒、感染了病害虫害的种粒以及其它显然没有生活力的种子粒数分组记入记录表。
如取胚时由于人为技术而破坏种胚，可以从后备组中任取一粒取胚补上。
（4）溶液的配制及染色用蒸馏水配成浓度为0.05～0.1的溶液。
随配随用，不宜存放过久。
在20℃～30℃条件下约需浸2～3h。
试剂的用量应该能够完全浸没种胚。
将玻璃器皿中清水到出余下种胚，立即注入靛兰溶液，淹没种胚，如有种胚浮在表面，应将其拨沉，（5）观察记载当到达染色所规定的时间之后倒出靛兰溶液。
用清水冲洗种胚，立即将种胚放在垫有潮湿的白纸的培养皿中观察。
根据染色的部位和程度，把胚分为有生活力的和无生活力的两类，记入表5-1。
取胚时受到机械损伤的部分也会染上颜色，但不要把它作为没有生活力的种胚。
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种子生活力的测定红墨
水法教学设计
SANY标准化小组 #QS8QHH-HHGX8Q8-GNHHJ8-HHMHGN#
《林果生产技术》实验实训2“种子质量的简易测定”之五：
种子生活力的测定（红墨水法）教学设计
课题：种子生活力的测定（红墨水法） 课型：专业技能实训课
班级：2014级现代农艺班 时间：2015年10月9日
教学目标：
1、应知：种子生活力的概念，红墨水法测定生活力的原理、意义、步骤。
2、应会：掌握用红墨水染色法测定种子生活力的操作技能，熟悉种子质量鉴
定技术过程。
3、能力培养：学会自主学习、合作学习、探究学习，培养动手能力、观察能
力、合作意识和专业情感。
教学重点：
小麦种子生活力红墨水染色法测定的方法步骤。
教学难点：
1、切分种子。
2、有无生活力的判断。
教学方法：
1、紧抓生本课堂的五大元素“前置学习、合作学习、展示分享、质疑问难、
教师点拨”，让学生自主学习，先做后学，先学后教。
2、恰当运用信息化教学手段。
课前任务布置：
提前一天晚自习分发学案和适量材料样品（每小组分发经浸泡后充分吸胀了
的小麦种子50粒左右，单面刀片2片，镊子2把，放大镜1个），自学时间2课
时。学案附后。
材料器具准备：
经浸种吸胀后的小麦种子（每小组600粒左右）、直尺、烧杯、9cm培养皿
（每小组4套）、镊子（每人1把）、单面刀片（每人1片）、瓷盘、洗瓶、滤
纸、5%红墨水。
导入：
种子质量的好坏，直接关系到农业的丰歉。种子的纯度、净度、发芽率、生
活力、含水量等是种子分级、是否合格的重要指标。今天我们以小麦种子为例，通
过实训操作一起来学习种子生活力的测定方法。同学们课前已经做了预习，在操作
之前我们先来弄清楚几个问题，分小组回答：
问题一：种子生活力指的是什么（一组回答）
答案：种子生活力是指种子潜在的发芽能力。
问题二：既然种子生活力是指种子潜在的发芽能力，那么我们为什么不直接
测定种子的发芽率，而测定种子生活力 （二组回答）
答案：用标准发芽试验无法准确测出处于休眠状态的种子的发芽能力；发芽
试验测定发芽率，所需时间较长，如小麦需要8天，水稻需要14天，多数林木种
子则需要更长的时间，而生活力的测定可以在1—2天内测出其发芽的潜在能力。
故种子生活力测定可以作为发芽试验的补充，在种子贸易、调运等时间紧迫的情况
下应用。
问题三：红墨水染色法测定种子生活力的原理是什么（三组回答）
答案：种子胚部有生活力的细胞，其原生质膜具有选择性吸收的能力，种子
浸入染料后，染料大分子不能进入活细胞内，胚不被染色；而死种子细胞的原生质
膜丧失了这种能力，于是染料便进入死细胞而使胚着色。
问题四：通过预习，你认识小麦种子吗能否通过小麦种子剖面图讲解小麦种
子的简易结构（四组回答）
答案：（图片）①腹沟②胚乳③胚
问题五：通过前面的预习，你知道用红墨水法测定小麦种子生活力分为哪几
个步骤进行（五组回答）
答案：共分为6个步骤，分别是：（1）取样。（2）切分。（3）染色。
（4）冲洗。（5）观察鉴定。（6）计算生活力并填写实验报告单。
分小组讨论交流3分钟，然后下达操作指令：按步骤进行小麦种子生活力测
定的实训操作。每一个步骤分别请一个小组上前台，先讲述操作要领，再按所讲要
领动手操作，操作过程通过展示台实时投影到显示屏中，供全班同学分享。
步骤一：取样
从提供的待测样品—已经浸泡吸胀了的小麦种子中用四分法随机取种50
粒，共取4次重复。
四分法操作方法：将种子充分混合，平摊在瓷盘中央，摆成均匀的正方形，
用直尺通过中心划对角十字，将种子分为4块，取其中两个对角的种子再混合均
匀，再按同样的方法做四分，直至分得的每个1/4略多于50粒为止。然后从分得
的四个1/4中分别数取4个50粒。
要求：混合均匀，操作规范，随机取样具有代表性。
步骤二：切分
用单面刀片沿小麦种子的腹沟将种子纵切为两半，将其中的一半放入培养皿
中染色。
要求：被切分的两个半粒大小相等。
步骤三：染色
向盛有种子的培养皿，
前置学习：
教具
目的要求：
了解种子生活力的概念，红墨水法测定生活力的原理、意义、步骤。
掌握种子生活力的鉴定技能，熟悉种子质量鉴定技术过程。
要求安全操作、细心检测、认真记录、不浪费材料。实验结束后将实验报告
填写完整，实验用品归还原位，摆放整齐有序，实验场地清理干净。
知识的导入
种子放久了，它的生命力就会丧失。若把没有活力的种子误种，将会给生产
造成损失。而把有活力的种子误认为死种子遗弃掉，又造成浪费。一般来说我们可
从外观形态对种子加以辨别，如霉烂、干瘪、虫蛀等，但有些则难以从外观上来判
断种子的生活力，是死种子还是有活力的种子，有没有方法可以快速地测定出种子
的活力呢
我们今天就来解决这个问题。
预习指导
1、种子活力：
是决定种子或种子批在发芽和出苗期间的活性水平和行为的那些种子特性的
综合表现。种子表现良好的为高活力种子。
2、红墨水染色法原理：
凡是活细胞的原生质具有选择性吸收能力，而死种子胚细胞的原生质则丧失
了这种能力，于是染料（红墨水）便能进入死细胞染成红色。
3、材料：
课件、塘瓷盘、塑料桶、洗瓶、烧杯、滤纸、培养皿、镊子、单面刀片、红
墨水、小麦种子
4、小麦种子生活力测定的方法和步骤：
（1）取样：
将小烧杯中经过28℃~30℃温水中浸泡6小时~8 小时、充分吸胀的小麦种子
放入瓷盘中，随机数取20粒，多余的放回小烧杯中。
（2）切样：
左手用镊子夹住小麦种子，使胚部中线向上，右手拿刀片，沿胚部中线垂直
向下切为两半，并分开放置，将两份半粒种子取名样品1和样品2，再分别放入两个
培养皿等待测定。
（3）染色：
将放入培养皿中的样品1和样品2的半粒种子 ，加入5%的红墨水溶液，确保种
子全部浸没，后将培养皿盖上，染色5~10分钟。在种子染色过程中，绘制种子活力
的有关计算表。
（4）冲洗：
染色5~10分钟后，将培养皿里的溶液倒入大烧杯中，防种子随溶液倒出
。再用洗水瓶中的清水冲洗种子三次，洗去颜色。培养皿中的水倒净，最后用滤纸
吸干。
（5）观察鉴定：
观察冲洗后种子胚部着色情况，不着色或仅带有浅红色的，即为具有生
命力的种子。如果胚与胚乳着色均为鲜红色，即表明该小麦种子已经丧失了生命活
力，观察时将活种子和死种子分别整齐有序放入培养皿的两端，加以区分和计数。
(6)计算:
将样品1和样品2活种子、死种子的数目分别填入计算表格，依次计算
出样品1和样品2 种子活力，两份样品平均值、误差。
自我检测
认真学习上面的操作流程，细心地想想，自己做会出现哪些问题，怎样才能
做好。
当堂检测
用所提供的实验器材，依据正确的操作方法对种子生活力进行检测，并将实
验结果用表格的形式填写和计算出来。
样品1种子活力（%）=
%100种子总数1样品活种子数1样品
品2种子活力（%）=
%100种子总数2样品活种子数2样品
两分样品种子活力平均值（%）=
2
）%种子活力（2样品）%种子活力（1样品
误差（%）=
%100）%值（两份样品种子活力平均）%种子活力（2样品-）%种子活力（1样品
五、完成计算后将实验用品摆放整