壳寡糖阿胶制剂的毒理学研究_周晓琳
壳寡糖在制备缓解酒精性神经损伤的功能性食品中的应用[发明专利]
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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202011363967.8(22)申请日 2020.11.27(71)申请人 江南大学地址 214122 江苏省无锡市蠡湖大道1800号(72)发明人 王斌 陈逸伦 夏文水 姜启兴 许艳顺 于沛沛 高沛 余达威 (74)专利代理机构 苏州市中南伟业知识产权代理事务所(普通合伙) 32257代理人 王玉仙(51)Int.Cl.A23L 33/125(2016.01)A61K 31/722(2006.01)A61P 25/32(2006.01)(54)发明名称壳寡糖在制备缓解酒精性神经损伤的功能性食品中的应用(57)摘要本发明公开了一种壳寡糖在制备缓解酒精性神经损伤的功能性食品中的应用。
本发明中采用的壳寡糖剂量更为接近人体推荐摄入量，利用相对分子量为1299的壳寡糖，每日剂量45mg/kg/d，可以缓解酒精性神经损伤。
由于本发明中所采用的壳寡糖分子量分布较为集中，其抑制神经细胞损伤的机制研究更为明确，通过提高脑神经营养因子、改善脑组织病理学，降低超氧化物歧化酶、提高总抗氧化能力，影响神经细胞的凋亡进程，进而影响认知能力与学习记忆的改善。
权利要求书1页 说明书4页 附图3页CN 112471515 A 2021.03.12C N 112471515A1.一种壳寡糖在制备缓解酒精性神经损伤的功能性食品中的应用，其特征在于，所述壳寡糖的相对分子量为1200‑1300。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的壳寡糖的聚合度为6‑7。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的壳寡糖的脱乙酰度为80‑90％。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的壳寡糖的用量为0.04‑0.045g/kg。
5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的缓解酒精性神经损伤的功能性食品为提高脑神经营养因子、改善脑组织病理学的功能性食品。
治疗用壳聚糖制剂
治疗用壳聚糖制剂
王晓燕;孙淑英
【期刊名称】《辽宁医药》
【年(卷),期】2001(016)003
【总页数】1页(P30)
【作者】王晓燕;孙淑英
【作者单位】无
【正文语种】中文
【中图分类】R944
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壳寡糖双胍衍生物在制备抑制肝损伤药物中的应用[发明专利]
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专利名称：壳寡糖双胍衍生物在制备抑制肝损伤药物中的应用专利类型：发明专利
发明人：刘晓非,赵励彦,郑淇方,邹雅露,王园园,刘宇星
申请号：CN201910774902.3
申请日：20190821
公开号：CN112402444A
公开日：
20210226
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开壳寡糖双胍衍生物在制备抑制肝损伤药物中的应用，将壳寡糖与盐酸在微波装置中搅拌反应，之后加入双氰胺水溶液，使用盐酸调节溶液pH，在微波装置中搅拌反应，得到壳寡糖双胍衍生物。
本发明在体外实验中验证了衍生物对DPPH自由基的清除作用，证明了它具有抗氧化性；同时，建立2型糖尿病大鼠模型，壳寡糖双胍衍生物以灌胃的方式给药，经过衍生物治疗后，有效抑制了糖尿病大鼠肝脏的氧化应激损伤。
申请人：天津大学
地址：300072 天津市南开区卫津路92号
国籍：CN
代理机构：天津创智天诚知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：王秀奎
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药物分析学 药物分析学 药物分析学 微生物与生化药学 微生物与生化药学 药理学 药理学 药理学 药理学 药理学 药理学 药理学 生物医学工程 生物医学工程 生物医学工程 生物医学工程 生物医学工程 生物医学工程 生物医学工程 生物医学工程 生物医学工程 生物医学工程 生物医学工程 生物医学工程 生物医学工程 生物医学工程
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蜂胶壳寡糖胶囊毒理学安全性评价
试验数据用 SPSS 软件进行方差分析。
3 结果
3.1 急性毒性试验
小鼠经空腹灌胃蜂胶壳寡糖胶囊，并 观察随后 7 天的生命体征，显示小鼠均未 见中毒症状，无死亡情况出现。可认为蜂 胶壳寡糖胶囊最大耐受剂量（MTD）>10.0 g/kg•BW，根据急性毒性分级标准，可判 定无毒性。
3.2 Ames 试验
病防治研究的现状和挑战 [J]. 转化医 学研究 ( 电子版 ),2012(03):1-24. [2] 李 娜 , 胡 正 芳 , 江 振 洲 等 . 中 药 抗 糖 尿 病 研 究 进 展 [J]. 药 学 与 临 床 究 ,2011(04):343-347. [3] 陈艳 . 人参水提物降血糖作用的研究 [D]. 长春：东北师范大学 ,2010. [4] 玄红专 . 蜂胶对糖尿病的作用及其机 理的研究 [D]. 杭州：浙江大学 ,2003. [5] 中华人民共和国卫生部 . 保健食品检 验与评价技术规范 [S]. 北京 : 卫生部 法制与监督司编印 ,2003. [6] 田好亮 , 李立 , 王勇等 . 天麻微粉的 毒理学安全性评价 [J]. 中国卫生检验 杂志 ,2014(15):2161-2164. [7] 付玉生 , 李永利 , 张焱等 . 纳豆激酶 胶囊毒理学安全性评价 [J]. 实用预防 医学 ,2012(11):1714-1716. [8] 李立 , 王亚东 , 张焱等 . 大豆异黄酮 复合胶囊毒理学安全性评价 [J]. 河南 预防医学杂志 ,2010(01):38-41+50. [9] 李小运 . 试论保健食品的安全性 [J]. 中国食物与营养 ,2009(10):10-12.
基础研究
蜂胶壳寡糖胶囊毒理学安全性评价
刘世磊 崔爱姣 王玉芳 洛阳新春都生物制药有限公司 河南省洛阳市 471000
壳寡糖市场分析报告
壳寡糖市场分析报告1.引言1.1 概述概述:壳寡糖是一种具有广泛应用前景的生物多糖，具有天然、无毒、无副作用等优点，被广泛应用于医药、保健品、食品和化妆品等领域。
随着人们对健康和环境的关注不断增加，壳寡糖市场潜力巨大。
本报告旨在对壳寡糖市场进行深入分析，为相关行业提供市场情报和发展方向，以促进壳寡糖产业的健康发展。
1.2 文章结构文章结构本报告主要分为引言、正文和结论三个部分。
在引言部分，将会概述本报告的目的和结构安排。
在正文部分，将会详细分析壳寡糖市场的现状、壳寡糖的特性以及壳寡糖的应用领域。
在结论部分，将会对壳寡糖市场的发展趋势、竞争格局和前景展望进行深入探讨。
通过对这三部分内容的分析，读者将能够全面了解壳寡糖市场的情况和未来发展趋势。
1.3 目的：本报告的目的是通过对壳寡糖市场进行深入分析，探讨壳寡糖在当前市场中的地位和发展潜力。
通过对市场现状、壳寡糖特性和应用领域的分析，以及对市场发展趋势、竞争格局和前景展望的探讨，旨在为相关行业的决策者、投资者和从业者提供全面的市场信息和发展趋势，为他们做出科学合理的决策提供参考。
同时也希望通过本报告的撰写，进一步宣传壳寡糖的应用领域和市场前景，为壳寡糖的发展做出贡献。
1.4 总结:通过对壳寡糖市场的分析和研究，我们发现壳寡糖在当前市场上具有广阔的发展前景和应用潜力。
壳寡糖在医药、食品、化妆品等领域都有着重要的应用，且在生物技术和保健品领域也有着不可替代的作用。
随着人们对健康意识的提高，壳寡糖市场未来的发展趋势将会更加明显，并有望成为一个新的增长点。
然而，随着市场的发展，竞争也将逐渐加剧，企业需要加强技术创新和产品差异化，以在激烈的竞争中立于不败之地。
总体来说，壳寡糖市场有着巨大的发展潜力，但也需要企业和行业主管部门共同努力，促进壳寡糖市场的规范和健康发展。
2.正文2.1 市场现状市场现状：壳寡糖是一种具有广泛应用前景的天然生物聚糖，具有良好的生物相容性和生物降解性，因此在医药、食品、化妆品等领域具有巨大的市场需求。
壳寡糖通过改善氧化应激损伤在保护卵巢功能中的作用及机制研究
壳寡糖通过改善氧化应激损伤在保护卵巢功能中的作用及机制研究壳寡糖通过改善氧化应激损伤在保护卵巢功能中的作用及机制研究摘要：氧化应激是很多疾病的重要病因，也是导致卵巢功能减退的原因之一。
壳寡糖是从海洋藻类中提取的多糖，具有很多保健功能。
本文重点探讨壳寡糖对卵巢功能的保护作用及其机制。
实验先后选用小鼠卵巢体外培养、小鼠卵巢缺氧再灌注模型和人卵巢肿瘤细胞株COV434等模型，发现壳寡糖能显著减轻卵巢细胞氧化应激反应，并提高卵巢细胞的自噬和凋亡率，同时增强卵泡生长，提高卵巢激素水平和生育能力。
机制研究表明，壳寡糖能通过活化Nrf2通路减轻氧化应激反应，同时提高AMPK/mTOR自噬通路的激活，增强卵巢细胞的自噬作用。
此外，壳寡糖还能增加SIRT1蛋白的表达水平，提高卵巢细胞的抗氧化能力，降低细胞的凋亡率。
总之，壳寡糖在保护卵巢功能方面具有巨大潜力，为治疗卵巢疾病提供新思路。
关键词：壳寡糖、氧化应激、自噬、抗氧化、卵巢功。
简介卵巢是女性生殖系统中的重要器官，对生育和身体健康有着至关重要的作用。
氧化应激是卵巢功能衰退及许多疾病的重要因素之一。
因此，寻找一种能够缓解氧化应激反应，保护卵巢功能的新药物或保健品具有深远的意义。
壳寡糖是从海洋藻类中提取的一种多糖，具有许多生理活性。
目前研究显示，壳寡糖不仅具有很好的抗氧化和抗菌作用，还可以调节免疫功能和代谢。
但是，其对卵巢功能的影响及机制尚不完全清楚。
本文旨在探讨壳寡糖在保护卵巢功能中的作用及其机制，为治疗卵巢疾病提供新思路和研究基础。
壳寡糖的保护作用实验结果表明，壳寡糖能够显著减轻缺氧再灌注模型小鼠卵巢组织中的氧化应激反应，同时提高卵巢细胞的自噬和凋亡率，并增强卵泡生长，提高卵巢激素水平和生育能力。
在卵巢组织中，氧化应激可以导致蛋白质氧化、DNA损伤等反应，从而破坏卵巢细胞的正常结构和功能。
而壳寡糖能通过活化Nrf2通路减轻氧化应激反应，从而起到保护作用。
此外，壳寡糖还可以提高AMPK/mTOR自噬通路的激活，增强卵巢细胞的自噬作用。
壳寡糖_综述
壳寡糖1. 壳寡糖的基本概念壳寡糖，又称寡聚氨基葡糖、甲壳低聚糖，是指2-10个氨基葡萄糖以β-1，4-糖苷键连接而成的低聚壳聚糖，是由壳聚糖解聚而制成的。
以普通虾蟹壳为原料，经脱钙、脱蛋白、脱色、及脱乙酰基反应后，运用酶生物技术和先进分离技术制备而成的氨基寡聚糖类产品。
是天然糖中唯一大量存在的碱性氨基多糖，壳寡糖是甲壳素、壳聚糖系列产品的高级产品，具备水溶性好、生物活性高、功能作用大、应用领域广、易被人体吸收等突出特点，在国外素有人体第六大生命要素、软黄金之美誉，在医药、功能性食品、日化、农业等领域应用广泛。
壳寡糖作为新世纪前瞻性生物技术产品，具备广泛的应用前景。
图1 壳寡糖的生产工艺工程2.壳寡糖的生物活性2.1 壳寡糖的免疫调节作用壳聚糖具有激活机体系统、介导机体系统的系列生物学效应,提高吞噬细胞的系统功能。
巨噬细胞表面存在着细菌多糖的受体，而壳聚糖作为细菌多糖的类似物，能刺激巨噬细胞活化，产生如下反应：促进其吞噬功能，增强它在其它免疫应答中的协同效应，从而实现机体对T细胞、NK细胞和B细胞的调节，介导机体的细胞免疫应答和体液免疫应答。
因此，壳聚糖具有对机体的免疫调节作用。
2.2 控制胆固醇人类健康的最大问题之一是胆固醇，它导致许多严重的疾病。
壳聚糖有两个机制降低胆固醇。
一个是阻止脂肪的吸收，另一个是将人体血液内的胆固醇排泄掉。
首先，壳聚糖抑制那些助于脂肪吸收的脂肪酶的活性。
脂肪酶分解脂肪使人体进行吸收。
另外一个是排泄胆酸。
一旦胆酸排泄，则血液中的胆固醇被用于制造胆酸。
这两种机制使得壳聚糖成为强胆固醇清除剂。
壳聚糖是一种天然材料，具有强大的阴离子吸附力，适用于降低胆固醇而没有任何副作用。
2.3 抑制细菌活性+）。
这些壳聚糖在弱酸溶剂中易于溶解，这种溶液特别含有氨基（NH2氨基通过结合负电子来抑制细菌。
壳聚糖的抑制细菌活性，使其在医药、纺织和食品等领域有着广泛的应用。
2.4 预防和控制高血压对高血压最有影响力的因素之一就是氯离子（Cl-）。
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壳寡糖阿胶制剂的毒理学研究周晓琳1，卢连华2，郭婕2，谢玮2，颜燕2，程东2，杨非2，姚文环2（1山东省精神卫生中心，济南250014；2山东省疾病预防控制中心）摘要：目的研究壳寡糖阿胶制剂的毒性。
方法采用小鼠急性毒性试验检验壳寡糖阿胶制剂的急性毒性，采用鼠伤寒沙门菌/哺乳动物微粒体酶试验（Ames 试验）、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验检测壳寡糖阿胶制剂的遗传毒性，采用大鼠30d 喂养试验检测壳寡糖阿胶制剂的亚急性毒性。
结果急性毒性试验结果显示，壳寡糖阿胶制剂属无毒级物质。
Ames 试验、微核试验和精子畸形试验结果均为阴性，说明壳寡糖阿胶制剂无遗传毒性。
大鼠30d 喂养试验结果显示，该样品30d 喂养未见大鼠亚急性毒性作用。
结论壳寡糖阿胶制剂为无毒物质，无急性毒性、遗传毒性和亚急性毒性。
关键词：壳寡糖；阿胶；急性毒性试验；遗传毒性试验；亚急性毒性试验；大鼠doi ：10．3969/j．issn．1002-266X．2016．26．007中图分类号：Ｒ114文献标志码：A文章编号：1002-266X （2016）26-0024-04第一作者简介：周晓琳（1972-），女，副主任技师，硕士，主要研究方向为预防医学。
E-mail ：1014376287@qq．com 通信作者简介：卢连华（1972-），男，副主任技师，硕士，主要研究方向为毒理和药理学。
E-mail ：sdcdc01@126．com Toxicological studies on preparations of chito-oligosaccharide and E jiaoZHOU Xiaolin 1，LU Lianhua ，GUO Jie ，XIE Wei ，YAN Yan ，CHENG Dong ，YANG Fei ，YAO Wenhuan （1Shandong Mental Health Center ，Jinan 250014，China ）Abstract ：ObjectiveTo study the toxicity of chito-oligosaccharide and E jiao preparations．MethodsThe acutetoxicity test of mice was used to detect the acute toxicity of chito-oligosaccharide and E jiao preparations ；Ames test ，bone marrow cell micronucleus test and sperm shape abnormality test of mice were performed for the genetic toxicity ；and the 30-day feeding test of mice was used to detect the subacute toxicity．ＲesultsThe acute toxicity test of Chito-oligosaccharideand E jiao preparations showed they were non-toxic．The results of genetic toxicity test were all negative ，including Ames test ，micronucleus test and sperm shape abnormality test．The results of 30-day feeding test had no toxic effect on the ob-served indexes of rats．ConclusionChito-oligosaccharide and E jiao preparations are non-toxic substances and have noacute toxicity ，genetic toxicity and subacute toxicity．Key words ：chito-oligosaccharide ；E jiao ；acute toxicity test ；genetic toxicity test ；subacute toxicity test ；rats壳寡糖（又称寡聚氨基葡糖）由甲壳素脱乙酰的产物壳聚糖降解获得，是由2 10个氨基葡萄糖通过β-1，4-糖苷键连接而成的低聚糖。
壳寡糖有广泛的生物学活性，可提高机体免疫力、抗菌抑菌、促进钙及其他矿物质的吸收、促进双歧杆菌等有益菌增殖［1 3］，有辅助降血糖、降血脂、抗氧化、促神经元生长、抑制肿瘤及延缓运动疲劳作用［4 7］。
阿胶是由驴皮去毛后熬制而成，有补血止血、滋阴润肺之功。
主治血虚证、虚劳咯血、吐血、尿血、便血、血痢、妊娠下血、崩漏、阴虚心烦失眠、肺虚燥咳、虚风内动之痉厥抽搐。
卫生部2002年公布的51号文认定，阿胶既属于食品又属于药品。
但有关壳寡糖阿胶制剂的毒理学研究未见报道。
为确保其食用安全性，根据2003年版《保健食品检验与评价技术规范》［8］，2013年5 6月，我们对某壳寡糖阿胶制剂进行了急性毒性、遗传毒性和亚急性毒性试验。
现报告如下。
1材料与方法1．1材料壳寡糖阿胶制剂由某企业提供。
SPF级ICＲ小鼠（小鼠急性毒性试验用）由北京华阜康生物科技股份有限公司提供，生产许可证号：SCXK （鲁）2009-0004；SPF 级ICＲ小鼠（骨髓微核试验和精子畸形试验用）和SPF 级SD 大鼠（大鼠30d 喂养试验用）由北京华阜康生物科技股份有限公司提供，生产许可证号：SCXK （京）2009-0004；饲养环境为屏障级，使用许可证号：SYXK （鲁）2013-0008，室温20 22ħ，相对湿度45% 65%。
实验动物标准饲料为北京华阜康生物科技股份有限公司提供，生产许可证号：SCXK（京）2009-0008号。
Ames试验标准菌株购于中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所。
S-9制剂由本实验室自制。
敌克松购于Ｒiedel-Haen公司，批号：45482；2-氨基芴购于美国Fluka Chemie AG公司，批号：252361689；1，8-二羟基蒽醌购于Merck Schuchardt公司，批号：7238243；二甲基亚砜购于上海试剂总厂，批号：20040101。
1．2壳寡糖阿胶制剂急性毒性观察采用急性毒性试验，按照最大耐受量（MTD）法进行。
选择雌雄各10只SPF级ICＲ小鼠，体质量18．4 21．1g。
实验前动物空腹16h（不限制饮水）。
称取10．0g受试物，以蒸馏水配至20mL，终浓度为0．50g/mL，分两次灌胃，间隔4h，每次灌胃量为0．2mL/10g，累计染毒剂量为20．0g/kg。
连续观察14d，记录动物的中毒表现及死亡情况。
1．3壳寡糖阿胶制剂遗传毒性观察1．3．1鼠伤寒沙门菌/哺乳动物微粒体酶试验（A-mes试验）试验菌株为经鉴定符合要求的鼠伤寒沙门菌组氨酸缺陷型TA97、TA98、TA100、TA102，体外活化系统为多氯联苯诱导的大鼠肝匀浆制备的S-9混合液。
取受试物，分别以蒸馏水、二甲基亚砜（DMSO溶解）、95%乙醇、丙酮作溶剂，经过比较，该受试物在蒸馏水中溶解效果最好，故试验中选取蒸馏水作溶剂。
根据毒性测定结果，设8、40、200、1000、5000μg/皿5个剂量，同时设立自发回变组、溶剂对照组和阳性对照组。
称取受试物5．00g，置于容量瓶中，以蒸馏水作溶剂，定容至100mL，用蒸汽消毒器于0．068Mpa压力下处理20min，冷却后取出放置4ħ保存，浓度为50000μg/mL。
取蒸馏水依次进行1ʒ4稀释，终浓度分别为10000、2000、400、80μg/mL。
每皿加入0．1mL，受试物浓度分别相当于5000、1000、200、40、8μg/皿。
试验按照平板掺入法在加S-9与不加S-9混合液的条件下进行，每个组别设3个平皿。
TA97不加S-9、TA98不加S-9所用阳性对照物为敌克松50μg/皿，TA97加S-9、TA98加S-9、TA100加S-9所用阳性对照物为2-氨基芴10μg/皿，TA100不加S-9、TA102不加S-9所用阳性对照物为甲基磺酸甲酯0．5μg/皿，TA102加S-9所用阳性对照物为1，8-二羟基蒽醌50μg/皿。
所用溶剂均为二甲基亚砜溶液。
若受试物的回变菌落数为自发回变菌落数的2倍以上，并具有剂量—效应关系则判定为阳性。
整套试验在相同条件下重复做2次，取均值。
1．3．2小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验选择体质量25 30g的SPF级ICＲ小鼠50只，雌雄各半，随机分为5组，每组10只。
3个试验组染毒剂量分别为2．5、5．0、10．0g/kg，另设蒸馏水阴性对照组和环磷酰胺阳性对照组（40mg/kg）。
分别称取2．5、5．0、10．0g受试物，以蒸馏水配至20mL，终浓度分别为0．125、0．250、0．500g/mL，灌胃给予低、中、高剂量组实验动物，灌胃量为0．2mL/10g。
各组动物灌胃共2次，间隔24h，末次给予受试物后6h处死动物，常规制片。
每只动物镜检1000个嗜多染红细胞（PCE），记录微核细胞数，计算微核率（即微核细胞数/嗜多染红细胞数，以千分率表示）。
1．3．3小鼠精子畸形试验选择体质量27 29g 的雄性SPF级ICＲ小鼠25只，随机分为5组，每组5只。
3个试验组染毒剂量分别为2．5、5．0、10．0g/ kg，另设蒸馏水阴性对照组和环磷酰胺阳性对照组（40mg/kg）。
分别称取2．5、5．0、10．0g受试物，以蒸馏水配至20mL，终浓度分别为0．125、0．250、0．500g/mL，灌胃给予低、中、高剂量组实验动物，灌胃量为0．20mL/10g，1次/d，连续5d。
首次灌胃后第35天处死动物，常规制片。
每只动物计数1000个结构完整的精子，记录畸变类型和数量，计算精子畸形率（以百分率表示）。
1．4壳寡糖阿胶制剂亚急性毒性观察采用大鼠30d喂养试验。
选用体质量70 90g的断乳大鼠80只，随机分为4组，每组20只，雌雄各半。
根据人体推荐量及最高受试物添加原则设低、中、高剂量3个实验组，受试物剂量分别为1．17、2．33、4．67g/ kg体质量（分别相当于人体推荐量的25、50、100倍）。
将受试物按照动物体质量的10%计算食物摄入量掺入饲料中，即1．17%、2．33%、4．67%（质量分数）喂饲实验动物。
对照组给予基础饲料。
单笼喂养，自由饮食，连续观察30d。