免疫学实验胶体金免疫层析技术 ()
免疫层析快速诊断技术简介(胶体金)
传染病（乙肝五项,HIV, SARS等） 标志物（AFP、肌钙蛋白、粪便血红蛋白等） 女性妊娠（hCG(早孕),LH,FSH)
毒品（吗啡,K粉,摇头丸,冰毒）
农 牧 畜牧兽医站, 商检系统, 传染病（禽流感,兽瘟疫等）
业 边检口岸,农牧类院系和
研究所
病毒（烟草花叶病毒、犬细小病毒等）
环境 环保监测部门,研究机构 有害物质超标
AJQ3000: 0.5-5mm 最小喷量
BJQ3000:10nl/drop
AJQ3000:1ul/cm 划线精密度 BJQ3000:±1% AJQ3000: ±2%
精选ppt
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切条机
仪器参数: 进料宽度：≤100 mm 进料长度：不限,可连续进料切割 切割宽度：≥1 mm, 宽度连续可调 切割宽度设定位数：0.01 mm 切割精度：±0.1 mm 切割速度：230次/分钟, 速度连续可调 切条计数：单次工作和总工作分别计数 刀片: 日本进口, 耐磨高碳钢材料 抗静电装置：建议选配 电源：220VAC 重量：20KG 尺寸：430(L)×330(W)×260(H) mm
稳定性好：金标试剂稳定，可长期保存。
检测标本种类多：在临床检测中，样品可能有尿、血液、 血清、唾液或其他体液。在非临床检测中，样本可能是由 土壤、粉尘、植物或者食品制备的微量溶液。
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应用领域
类别 应用领域
检测的物质
商检系统；边检口
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胶体金结果判读方法：
1.色卡法
将反应好的试纸条T线颜色与制作的色卡比较，看颜色属于那一 个档次，则在数据记录时候填写该档次标识。最后做灵敏度比较。 2.图形扫描法
将反应好的试纸条放在扫描仪器内，选择灰度扫描，获得灰度线 条图象。然后打开分析软件，将该灰度图象导入，自动分析出灵敏 度，本底情况。 3.读条仪法
胶体金免疫层析法原理
胶体金免疫层析法原理什么是胶体金免疫层析法？胶体金免疫层析法是一种常用于生物医学研究和临床诊断的分析技术。
它利用胶体金颗粒与特定抗原或抗体之间的特异性反应，通过观察胶体金颗粒的聚集或分散现象来判断样品中是否存在特定的抗原或抗体。
胶体金的特性在探讨胶体金免疫层析法的原理之前，我们先来了解一下胶体金的特性。
胶体金是一种粒径很小的金颗粒，通常在10到100纳米之间。
它具有很高的稳定性、表面活性、可溶性等特点。
这些特性使得胶体金在生物学研究中具有广泛的应用。
胶体金免疫层析法的原理胶体金免疫层析法的原理可以分为两个步骤：免疫反应和观察。
免疫反应在胶体金免疫层析法中，我们首先需要将胶体金颗粒与特定抗原或抗体进行结合。
这种结合是通过将抗原或抗体与胶体金颗粒表面的配体进行共价结合实现的。
这样，在胶体金颗粒表面就存在了特定的抗原或抗体。
当与这些抗原或抗体相匹配的检测样品加入时，免疫反应就会发生。
观察观察是判断免疫反应是否发生的关键步骤。
在胶体金免疫层析法中，当样品中存在与胶体金颗粒表面的抗原或抗体相匹配的分子时，胶体金颗粒会发生聚集现象，从而改变了光学性质。
这种聚集现象可以通过肉眼观察或光谱分析来判定。
胶体金免疫层析法的应用领域胶体金免疫层析法在生物医学研究和临床诊断中具有广泛的应用。
以下是一些常见的应用领域：1.免疫诊断：胶体金免疫层析法被广泛应用于各种疾病的诊断，如感染性疾病、肿瘤标志物的检测等。
它具有快速、简便、灵敏度高等优点。
2.生物学研究：胶体金免疫层析法在细胞学、分子生物学等领域的研究中起着重要作用。
它可以用于检测细胞表面分子的表达、分析蛋白质的相互作用等。
3.药物检测：胶体金免疫层析法可以用于检测药物的含量、分布和代谢过程，对药物的研究和开发具有重要意义。
胶体金免疫层析法的优点和局限性优点•快速：胶体金免疫层析法可以在短时间内得出结果，适用于快速诊断和分析。
•灵敏度高：胶体金颗粒的粒径小，表面积大，对抗原或抗体具有高度的灵敏度，可以检测低浓度的分子。
胶体金免疫层析技术实验
样品垫
连接垫 （胶体金垫）
质检线
吸收垫
背衬
测
定
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
测定时将试纸条下端浸入液体标 本中，下端吸水材料即吸取液体 向上端移动，流经C处时使干片 上的免疫金复合物复溶，并带动 其向膜条渗移。
测
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
定
若标本中有待测特异抗原，即可 与免疫金复合物中的抗体结合， 此抗原抗体复合物流至测试区即 被固相抗体捕获，在膜上显出红 色反应线条（T）。
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实验目的
掌握胶体金试纸条诊断技术的原理、使用方 法及结果的判定
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
简介
胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层析 技术研制而成，该技术是90年代初在免疫 渗滤技术的基础上建立的一种简易快速的 免疫学检测技术，最先用于人绒毛膜促性 腺激素（HCG）的测定和乙型肝炎病毒表 面抗原（HBsAg）等检测。
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
胶体金快速诊断技术的特点
简捷快速：操作简单，一般只要5-10min 就 会出结果，而其它方法如ELISA需要1-2h， PCR 需要时间更长。
结果易于判定：阴、阳性呈色很明显，肉眼 很容易判断。
特异性好：因为该技术大多用单克隆抗体标 记，这决定了它具有很好的特异性。
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
简介
胶体金（Colloidal gold）是氯金酸（HAuCl4） 的水溶胶，利用HAuCl4在还原剂（柠檬酸钠） 的作用下，聚合成特定大小的金颗粒，形成带 负电的疏水胶溶液，由于静电作用成为一种稳 定的胶体状态，故称胶体金。
简 介 资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
实验一 免疫层析快速诊断技术(医学免疫学)
人类医学 各 级 医 院 , 血 传染病（乙肝五项,HIV, SARS等）
站,CDC,防疫站,诊 标志物（AFP、肌钙蛋白、粪便血红蛋
断中心；家庭自检；白等）
商检系统；边检口 岸；公安系统.
女性妊娠
HCG(早孕)
毒品（吗啡,K粉,摇头丸,冰毒）
农牧业
畜牧兽医站, 商检 传染病（禽流感,链球菌等） 系统,边检口岸,农 病毒（烟草花叶病毒、犬细小病毒等） 牧类院系和研究所
阳性 阳性
阴性
临床意义：
1、孕妇妊娠1周后，尿中可出现较多HCG，均可 呈阳性（+）反应，达到妊娠早期诊断的目的
2、绒毛膜上皮癌、水泡状胎块和睾丸畸胎瘤患者 的尿中HCG可明显增高，故也可呈阳性（+）反应， 但结合临床可予以鉴别。
注意事项
1. 强阳性尿液中 HCG 含量较多 , 因此质控线可能不出现 或极浅淡 , 而仅在反应区显示淡紫色条带。 2. 应避免试纸条一端插入尿液过深或过浅 , 插入时间过长 或过短也会影响试验结果。
胶体金（Colloidal gold）是氯金酸（HAuCl4） 的水溶胶，氯金酸在还原剂的作用下，聚合
成特定大小的金颗粒，并由于静电作用成为
一种稳定的胶体状态。
胶体金标记的原理：胶体金在碱性条件下带 负电荷，与蛋白质分子的正电荷基团藉静电 吸引而形成牢固结合。
胶 体 金 标 记 技 术 （ Immunogold labeling technique） 是 以 胶 体 金 作 为 示 踪 标 记 物 应 用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。
实验一
胶体金试纸条检测技术
胶体金试纸条检测技术
【实验目的】
掌握双抗体夹心法测定尿 HCG 的原理、操作方法及结果判定方法。
免疫层析法 胶体金法
免疫层析法胶体金法免疫层析法（Immunoassays）是一种常用的生物化学分析方法，可以用来检测和测量样品中的特定分子。
它基于抗体和抗原之间的特异性相互作用，利用这种相互作用来检测和量化感兴趣的分子。
胶体金法（Colloidal Gold）是一种常用的免疫层析法的检测方法。
它利用胶体金颗粒的特殊性质，结合抗体和抗原的特异性相互作用，实现对目标物质的定性和定量分析。
免疫层析法的原理是利用抗体与抗原的特异性结合，从而实现对目标物质的检测。
在胶体金法中，胶体金颗粒被偶联上特异性的抗体，形成胶体金标记物。
当样品中存在目标物质时，胶体金标记物会与目标物质结合形成免疫复合物。
这个免疫复合物可以通过免疫层析膜迁移，最终形成可见的条纹或颜色变化。
胶体金法的优势在于其操作简便、结果直观、灵敏度高和特异性好。
它可以应用于多种领域，如临床医学、食品安全、环境监测等。
在临床医学中，胶体金法常用于检测生物标志物，如肿瘤标志物、感染性疾病的病原体等。
在食品安全领域，胶体金法可以用来检测食品中的有害物质，如农药残留、重金属等。
在环境监测中，胶体金法可以用于检测水体、土壤等环境样品中的污染物。
使用胶体金法进行免疫层析分析的步骤一般包括样品预处理、胶体金标记物的制备、样品与标记物的反应、免疫层析膜的制备以及结果的读取和分析等。
首先，需要对样品进行预处理，如提取、纯化或稀释等，以获得适合分析的样品。
然后，制备胶体金标记物，将特异性抗体与胶体金颗粒偶联。
接下来，将样品与标记物反应，使目标物质与胶体金标记物结合形成免疫复合物。
然后，将反应混合物加载到免疫层析膜上，免疫复合物会随着溶液的迁移在膜上形成条纹。
最后，通过肉眼或专用的读取设备对条纹进行观察和分析，根据条纹的颜色、强度和位置等来判断目标物质的存在与浓度。
虽然胶体金法在免疫层析分析中具有许多优点，但也存在一些局限性。
首先，胶体金颗粒的稳定性较差，容易聚集和沉积，影响结果的准确性和可重复性。
实验六 胶体金免疫层析技术[课资借鉴]
![实验六 胶体金免疫层析技术[课资借鉴]](https://img.taocdn.com/s3/m/91ec2a306bec0975f565e251.png)
行业倾力
14
行业倾力
H5亚型AIV尿 囊液阳性结果
阴性对照
H5ＡIV细胞 毒阳性结果 阴性对照
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课后思考
1. 瘦肉精试纸条检测的原理？ 2. 早孕试纸条检测的原理？
行业倾力
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胶体金试纸条诊断技术
肖书奇
动物医学院预防兽医学系
电话：18700928448
E-mail: shqxiao术的原理、使用方 法及结果的判定
行业倾力
2
简介
胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层析 技术研制而成，该技术是90年代初在免疫 渗滤技术的基础上建立的一种简易快速的 免疫学检测技术，最先用于人绒毛膜促性 腺激素（HCG）的测定和乙型肝炎病毒表 面抗原（HBsAg）等检测。
检测线
硝酸纤维素膜
行业倾力
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测定
测定时将试纸条下端浸入液体标 本中，下端吸水材料即吸取液体 向上端移动，流经C处时使干片 上的免疫金复合物复溶，并带动 其向膜条渗移。
行业倾力
9
测定
若标本中有待测特异抗原，即可 与免疫金复合物中的抗体结合， 此抗原抗体复合物流至测试区即 被固相抗体捕获，在膜上显出红 色反应线条（T）。
粒为球形，大小均一，无棱角。 ✓质量差的胶体金：溶液呈紫色，大小不一，
形状各异。
行业倾力
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简介
胶体金标记的原理：胶体金在碱性条件下带 负电荷，与蛋白质分子的正电荷基团藉静电 吸引而形成牢固结合。
胶 体 金 标 记 技 术 （ Immunogold labeling technique）是以胶体金作为示踪标记物应用 于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。
最常用的是双抗夹心法检测抗原检测线质检线吸收垫样品垫硝酸纤维素膜连接垫胶体金垫底板测定时将试纸条下端浸入液体标本中下端吸水材料即吸取液体向上端移动流经c处时使干片上的免疫金复合物复溶并带动若标本中有待测特异抗原即可与免疫金复合物中的抗体结合此抗原抗体复合物流至测试区即被固相抗体捕获在膜上显出红色反应线条t
新冠胶体金免疫层析法原理
新冠胶体金免疫层析法原理新冠病毒（COVID-19）是一种由严重急性呼吸综合症冠状病毒2型（SARS-CoV-2）引起的传染病。
为了迅速检测和诊断感染新冠病毒的个体，科学家们开发了各种检测方法，其中包括胶体金免疫层析法。
胶体金免疫层析法（Colloidal Gold Immunoassay）是一种基于免疫学原理的快速诊断方法，它利用纳米金颗粒的性质来检测特定抗原或抗体。
在这种方法中，纳米金颗粒被包裹在特定抗体上，并形成一种可见的复合物。
这种方法的原理是通过特定抗体的配对反应来检测患者体内是否存在新冠病毒相关的抗体。
在检测过程中，首先将待测试血样加入试剂盒中。
这些试剂盒通常包含有两种类型的试剂，一种是带有新冠病毒抗原的纳米金颗粒，另一种是检测特定抗体的试剂。
当血样中存在新冠病毒相关的抗体时，它们与试剂中的新冠病毒抗原结合，形成一种反应复合物。
这种反应复合物随后与试剂盒中的带有特定抗体的纳米金颗粒结合。
这样，纳米金颗粒就会聚集在一起，形成一个可见的颜色变化，通常是红色线条或斑点。
如果血样中不存在新冠病毒相关的抗体，则不会发生聚集，试剂盒上不会出现颜色变化。
这意味着测试结果为阴性。
胶体金免疫层析法的优点是快速、简单、可视化和便携。
这种方法不需要特殊的设备或技术，并且可以在短时间内提供结果。
因此，它被广泛应用于临床和流行病学调查中，特别是在资源有限的地区和快速筛查人群时。
然而，需要指出的是，胶体金免疫层析法并不是一个确定性的检测方法。
尽管它可以快速筛查出可能感染新冠病毒的个体，但其结果需要进一步经过实验室验证，以确认感染或否定感染。
因此，在使用此方法时应谨慎，并且应与其他检测方法相结合，以确保准确性和可靠性。
实验六 胶体金免疫层析技术[课资借鉴]
形状各异。
行业倾力
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简介
胶体金标记的原理：胶体金在碱性条件下带 负电荷，与蛋白质分子的正电荷基团藉静电 吸引而形成牢固结合。
胶 体 金 标 记 技 术 （ Immunogold labeling technique）是以胶体金作为示踪标记物应用 于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。
胶体金试纸条诊断技术
肖书奇
动物医学院预防兽医学系
电话：18700928448
E-mail: shqxiaojd@
行业倾力
1
实验目的
掌握胶体金试纸条诊断技术的原理、使用方 法及结果的判定
行业倾力
2
简介
胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层析 技术研制而成，该技术是90年代初在免疫 渗滤技术的基础上建立的一种简易快速的 免疫学检测技术，最先用于人绒毛膜促性 腺激素（HCG）的测定和乙型肝炎病毒表 面抗原（HBsAg）等检测。
行业倾力
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行业倾力
H5亚型AIV尿 囊液阳性结果
阴性对照
H5ＡIV细胞 毒阳性结果 阴性对照
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课后思考
1. 瘦肉精试纸条检测的原理？ 2. 早孕试纸条检测的原理？
行业倾力
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最常用的是双抗夹心法检测抗原检测线质检线吸收垫样品垫硝酸纤维素膜连接垫胶体金垫测定时将试纸条下端浸入液体标本中下端吸水材料即吸取液体向上端移动流经c处时使干片上的免疫金复合物复溶并带动其若标本中有待测特异抗原即可与免疫金复合物中的抗体结合此抗原抗体复合物流至测试区即被固相抗体捕获在膜上显出红色反应线条t
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胶体金试纸条诊断技术的原理