人基质金属蛋白酶2(MMP-2)ELISA试剂盒说明书
MMP-2及其抑制剂在上皮性卵巢癌中的表达及意义
表达 水平 的检 测有 助于判 断 卵巢癌 的预后 。在将来
的研 究 中 尚需更 大样 本 ， 前 瞻 性研 究 阐 明其 精 细机
制 和作用 。
参 考文 献 ：
［ １ ］ Ｎ ｉ ｌ ｓ ｓ ｏ ｎ Ｕ Ｗ， Ｄ ａ ｂ ｒ ｏ ｓ ｉ ｎ Ｃ ． Ｅ ｓ ｔ ｒ ａ ｄ ｉ ｏ ｌ ａ ｎ ｄ ｔ ａ ｍ ｏ ｘ ｉ ｆ ｅ ｎ ｒ ｅ ｇ ｕ —
６ ６ （ ９ ） ： ４ ７ ８ ９ － ４ ７ ９ ４ ．
表 ２ 预 后 独 立 因 素 分 析
［ ２ ］
Ｄ ｏ Ｔ Ｖ， Ｓ ｙ ｍ ｏ ｗ ｉ ｃ Ｊ Ｃ ， Ｂ ｅ ｒ ｍａ ｎ Ｄ Ｍ， ｅ ｔ ａ １ ． Ｌ ｙ ｓ ｏ ｐ ｈ ｏ ｓ —
ａ ｎ ｃ ａ ｎ ｃ ｅ ｒ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ［ Ｊ ］ ． Ｍｏ ｌ Ｃ ａ ｎ ｃ ｅ ｒ Ｒ ｅ ｓ ， ２ ０ ０ ７ ， ５ （ ２ ） ： １ ２ １ —
１ ３１．
３ 讨
论
［ ３ ］
Ｐ ｌ ａ ｎ ａ ｇ ｕ ｍａ Ｊ ， Ｌ ｉ ｌ ｊ ｅ ｓ ｔ ｍｍ Ｍ， Ａ ｌ ａ ｍｅ ｄ ａ Ｆ， ｅ ｔ ａ １ ． Ｍａ ｔ ｉ ｒ ｘ
巢肿 瘤组织 中阳性率 为 ２ ５ ． Ｏ ％， 差 异 有 统计 学 意 义
（ ｘ ：１ ０ ． ４ ２ ， Ｐ＝ ０ ． ０ ０ ５ ） 。
电话和定期复诊进行。术后诊断按 １ ９ ８ ８ 年 国际妇产
科联盟 手术病理分期标 准（ Ｆ Ｉ Ｇ Ｏ） ， ６ ４例 患者 中Ｉ 期１ ４ 例， Ⅱ 期 ７例 ， Ⅲ期 ３ ５例 ， Ⅳ期 ８例 。病 理类型 ： 浆液性
联科生物 Human MMP-2 ELISA Kit 说明书
Catalog Number EK1M02-48EK1M02-96定量检测血清、血浆和细胞培养上清中的人基质金属蛋白酶2(MMP-2)浓度。
本产品仅用于科学研究，非诊断试剂，不能用于临床诊断。
1.背景介绍基质金属蛋白酶2(MMP-2)，又名72kDa 的IV 型胶原酶和明胶酶A ，在人类中由MMP2基因编码。
激活MMP-2需要蛋白水解加工。
MMP-2在子宫内膜破裂、调节血管形成和炎症应答中起作用。
MMP-2参与许多事件，如癌症进程、癌细胞浸润、细胞信号转导、新血管形成和淋巴管生成。
MMP2基因突变与Torg-Winchester 综合征、多发性骨溶解、关节炎综合征有关，可能与瘢痕疙瘩有关。
非囊性纤维化支气管扩张中，相比于呼吸道感染铜绿假单胞菌的患者，感染流感嗜血杆菌患者的MMP-2浓度是升高的。
2.检测原理本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。
特异性抗人MMP-2抗体预包被在高亲和力的酶标板上。
酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体，经过孵育，样本中存在的MMP-2与固相抗体和检测抗体结合。
洗涤去除未结合的物质后，加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(Streptavidin-HRP)。
洗涤后，加入显色底物TMB ，避光显色。
颜色反应的深浅与样本中MMP-2的浓度成正比。
加入终止液终止反应，在450nm 波长(参考波长570-630nm)测定吸光度值。
3.试剂盒检测的局限1)请在本试剂盒标示的有效期内使用。
2)试剂盒的试剂不能与其他批号的试剂或其他来源的试剂混合使用。
3)任何标准品稀释、操作人员、移液技术、洗涤技术、孵育温度、试剂盒保存时间的改变，都将影响结合反应。
4)本试剂盒在设计上去除或降低了生物学样本中的一些内源性干扰因素，并非所有可能的影响因素都已经去除。
Human MMP-2ELISA Kit 检测试剂盒（酶联免疫吸附法）EK1M02-01二、基本信息1.2.未提供的材料设备1)能够检测450nm吸光度的酶标仪，参考波长570nm或630nm2)移液器及枪头、加样槽3)准备试剂用的试管、离心管、量筒等4)蒸馏水或去离子水5)涡旋振荡器、微孔板振荡器3.贮存试剂盒保存于2-8℃，有效期标注于标签上。
胶原蛋白酶2,9检测试剂盒使用说明
胶原蛋白酶2,9检测试剂盒使用说明货号:M1030规格：50assays产品内容：1.2×SDS-PAGE non-reducing buffer1.5ml,−20ºC；2.10×Substrate G,50ml,−20ºC；3.10×Buffer A,50ml,4ºC,使用时用蒸馏水稀释；4.10×Buffer B,50ml,4ºC,使用时用蒸馏水稀释；5.SDS-PAGE凝胶蛋白质考马斯亮蓝染色液，4ºC。
产品说明：基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)以无活性的酶原形式分泌，活化后能够降解细胞外基质的胶原蛋白，又称胶原酶。
通过影响细胞外基质，胶原酶参与胚胎发育、形态发生、组织重塑等过程，并参与炎症、肿瘤、心血管、神经等许多疾病过程。
血浆与组织中的MMP-2、MMP-9参与各种生理与病理过程，其在临床诊断和治疗中的意义日益受到重视。
本试剂盒采用酶谱法(zymography)检测MMP-2、MMP-9活性。
Zymography是一种广为使用的、基于SDS-PAGE电泳和反相凝胶染色的蛋白酶检测方法，其灵敏度可达1nM，高于ELISA方法2，其基本原理和程序是：制备加有胶原酶底物的SDS-PAGE凝胶，含蛋白酶的样品在此凝胶中进行电泳，电泳结束后取出凝胶与酶反应Buffer孵育，凝胶染色与脱色。
凝胶中由于含底物蛋白而被深染，形成深色背景，但在有蛋白酶条带的位置，蛋白酶将降解凝胶中的底物蛋白，因而不被染色而形成透亮区域，从而能同时指示MMP-2、MMP-9的大小位置(酶谱)及活性。
本试剂盒提供MMP-2、MMP-9特异蛋白底物及酶学反应缓冲液，可检测少至0.1~0.5μl血液中的MMP-2、MMP-9酶谱及活性，检测灵敏度~1nM。
试剂盒可进行50次标准小胶检测，如果小胶加样孔为10~15个，则总计可检测500~750个样品。
MMP-2在乳腺癌中表达临床意义
MMP-2在乳腺癌中的表达及临床意义【摘要】目的:探讨mmp-2的表达与乳腺癌侵袭和转移的关系。
方法:应用流式细胞免疫法定量检测mmp-2在22例乳腺良性组织和58例乳腺癌中的表达。
结果mmp-2在乳腺癌中的表达明显高于乳腺良性组织（p<0.05），且与乳腺癌临床分期及有无淋巴转移密切相关（p<0.05）。
结论:乳腺癌组织中 mmp-2的高表达促进了其侵袭和转移，提示mmp-2可作为乳腺癌诊断和判断预后的指标。
【关键词】乳腺癌; mmp-2;基因表达;侵袭和转移;流式细胞术the expressions of mmp-2 gene proteion in breast cancer and its clinical significancezhu hui-fang shi zhichun zuo xuejun【abstract】 aim to probe into the relationship between mmp-2 expression andinvasion、mestastasis of breast cancer. methods the expressions of mmp-2 gene protein in 80 cases with breast cancer was detected quantitatively by flow cytometry （fcm）. results expression of mmp-2 gene protein found in breast cancers is significantly more than that in benign breast diseases（p<0.05）.it can be stated that expression of mmp-2 was correlated with lymphnode metastasis and clinical stage （p<0.05）. conclusion the high level of mmp-2 may be linked with breast cancer’s invasion and mestastasis.the expressions of mmp-2 may be a indication of invasion and metastasis and a strong predictor of poor survival.【中图分类号】r737.8【文献标识码】b【文章编号】1008-6455（2011）08-0392-02肿瘤的侵袭和转移是影响乳腺癌患者预后的重要因素之一。
高密度脂蛋白(HDL)ELISA试剂盒说明书
高密度脂蛋白(HDL)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本：体液高密度脂蛋白(HDL)ELISA试剂盒试验原理：BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。
人碱性成纤维细胞生长因子ELISA 检测试剂盒洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。
高密度脂蛋白(HDL)ELISA试剂盒自备材料1．蒸馏水。
2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3．振荡器及磁力搅拌器等。
安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项1．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3．不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。
避免用手接触，有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9．按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。
使用不含热原和内毒素的试管。
收集血液后，1000×g 离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
非小细胞肺癌中基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达与淋巴结转移的关系
研 究 ＭＭＰ 一２在 非 小 细 胞 肺 癌 中 的表 达 及 其 临 床 意 义 。 方 法 应 用免 疫 组 化 方
【 要 】 目的 摘
法 检 测 ８ 非 小细 胞 肺 癌 中 ＭＭＰ ７例 一２的表 达 。结 果 ＭＭＰ ２的表 达在 非 小 细 胞肺 表 达 的 明 显 高 于 一 癌 旁 组 织 （ ＜ ０ ０ ） ＭＭＰ Ｐ ．５ ； 一２的表 达 随 病 理 分 级 恶 性 程 度 升 高 呈 增 加 趋 势 。 淋 巴转 移 组 ＭＭＰ ２ 一
的表达 高于无淋 巴转移组 （ Ｐ＜ ０ ０ ） 结论 ．５。
理 特 征 和转 移 、 预后 有 关 பைடு நூலகம்
ＭＭＰ 一２在非小细胞肺癌 中表达与非 小细胞肺癌 临床病
【 关键 词】 非 小 细 胞 肺 癌 基 质 金 属 蛋 白酶 ２ 免 疫组 化
Ｅｘ ｒ 鼹ｉｎ ｏ ａ ｒｘ Ｍ ｅａ ｌ ｐ ｏ ｅｎ ｓ － ２ ｉ ｕ ｇ Ｃ ｒ ｉ ｏ ｐ ｅ ０ ｆＭ ｔ ｉ ｔ ｌ ｒ ｔ ｉ ａ ｅ ｎ Ｌ ｎ ａ ｃ ｎ ｍａ ｏ Ｌ儿，Ｘｕ— ｚ ｉ ， ａ ． ｈ １ （ ｒ ｉ ｅ ｉ Ｈａ ｂ ｎ Ｍ ｄ —
达 与 肿 瘤 细 胞 侵 润 、 移 、 发 密 切 相 关 。 在 细 胞 外 基 质 转 复 （Ｃ Ｅ Ｍ）代 谢 平 衡 调 解 中基 质 金 属 蛋 白 酶 属 一 组 金 属 锌 离 子
维普资讯
Ｊ ｕｒ ａ ｆＱｉｉａ ｅ ｉａ ｌ ｇ ， ０ ８， １２ Ｎｏ ｏ ｎ ｌｏ ｑｈ ｒＭ ｄｅ ｌＣｏｌ ｅ ２ ０ Ｖｏ． ９。 ．９ ｅ
非小 细胞 肺 癌 中基 质 金 属 蛋 白酶 ２ ＭＭＰ一２ 表 达 与 （ ）
人 BMP-2 ELISA试剂盒说明书
人BMP-2ELISA试剂盒Human BMP-2ELISA kitCat#：EHC172尊敬的客户，感谢您选用本公司QuantiCyto®ELISA系列产品。
本产品选用世界著名生产厂家的原料，采用专业体外诊断试剂生产技术制造，仅供科研使用。
本产品可检测血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等多种类型样本中天然和重组人BMP-2浓度，具体适用样本请咨询。
使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分。
如有疑问，请联系欣博盛生物科技有限公司。
Email:**********************，全国服务热线: 4006800892。
QuantiCyto ®EHC172Human BMP-22试剂盒组成：名称48T 96T 抗体预包被酶标板8×68×12冻干标准品5ng /支×2支5ng /支×3支标准品&标本通用稀释液12ml×1瓶20ml×1瓶浓缩生物素化抗体1支（规格见标签）1支（规格见标签）生物素化抗体稀释液10ml×1瓶16ml×1瓶浓缩酶结合物1支（规格见标签）1支（规格见标签）酶结合物稀释液10ml×1瓶16ml×1瓶浓缩洗涤液20×25ml×1瓶50ml×1瓶显色底物（TMB ）6ml×1瓶12ml×1瓶反应终止液具腐蚀性6ml×1瓶12ml×1瓶封板胶纸3张6张产品说明书1份1份储存条件：未开封完整试剂盒4℃保存，请在保质期内使用。
已开封试剂盒抗体包被板条未用完的板条放回带拉链铝箔袋，封好口。
4℃条件下可储存1个月左右。
标准品冻干粉-20℃可储存6个月左右。
稀释后的标准品使用后请丢弃。
浓缩生物素化抗体浓缩液4℃可储存1个月左右，稀释后即用即弃。
浓缩酶结合物（避光）标准品&标本通用稀释液4℃条件下，可储存1个月左右。
基质金属蛋白酶-2及Bax在人脑胶质瘤中的表达及意义
基质金属蛋白酶-2及Bax在人脑胶质瘤中的表达及意义杨立军【摘要】目的：观察人脑组织中基质金属蛋白酶‐2（MMP‐2）和Bax的表达，并探讨二者的临床应用价值。
方法收集该院人脑胶质瘤患者脑组织标本50例及脑创伤内减压术中切除的脑组织标本20例，采用Western blot和免疫组织化学染色法测定脑组织中MMP‐2和Bax的表达，并探讨二者在胶质瘤中的相关性。
结果MMP‐2在胶质瘤脑组织中的表达高于正常脑组织（P＜0．05），在胶质瘤Ⅰ～Ⅱ，Ⅲ～Ⅳ级中的阳性表达率分别为26．92％，70．83％（P＜0．05）；Bax在脑胶质瘤中的表达量低于正常脑组织，但差异无统计学意义（P＞0．05），在胶质瘤Ⅰ～Ⅱ，Ⅲ～Ⅳ级中的阳性表达率分别为76．95％、25．0％（ P＜0．05）。
且人脑胶质瘤中M M P‐2和Bax的表达呈负相关（ r＝－0．587，P＜0．01）。
结论 Bax蛋白表达在脑胶质瘤发生发展中起着抑制作用，且与MMP‐2蛋白呈负相关，二者联合检测可为胶质瘤的诊断提供判断指标。
【期刊名称】《重庆医学》【年(卷),期】2016(045)008【总页数】4页(P1074-1077)【关键词】人脑胶质瘤;基质金属蛋白酶;Bax【作者】杨立军【作者单位】承德医学院附属医院神经外科，河北承德067000【正文语种】中文【中图分类】R739.4胶质瘤(glioma)是人颅内最常见的恶性肿瘤，占据颅脑肿瘤的35%～60%左右，呈侵袭性生长，其手术切除复发率高，预后差[1-2]。
尽管随着神经外科手术治疗、基因治疗、免疫治疗及各种化疗放疗技术的发展，胶质瘤仍不能被完全治愈，其预后生存期不到1年[3]。
胶质瘤细胞无限制的恶性增殖是导致机体恶病质的主要原因，而迁移、侵袭则是胶质瘤细胞发生远处转移的基础，是引起病情恶化的主要因素，因此探讨针对胶质瘤侵袭性生长相关蛋白在胶质瘤中的表达具有重要意义[4]。
Bax是目前公认的参与细胞凋亡调控作用的最常见抑癌蛋白，是线粒体膜上的一种促凋亡蛋白，在多种肿瘤中低表达，且与多种肿瘤的发生发展密切相关，而与胶质瘤的关系报道较少[5]。
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人基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)
酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书
厦门慧嘉生物科技有限公司
本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!
预期应用
ELISA法定量测定人血清、血浆或其它相关生物液体中MMP-2含量。
实验原理
用纯化的MMP-2抗体包被微孔板，制成固相载体，往微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的MMP-2抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物(TMB)显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的MMP-2呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制
1、酶标板：一块（96孔）
2、标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。
每瓶以样品稀释液稀释至1ml，盖
好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为20 ng/ml，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成20 ng/ml，10 ng/ml，
5 ng/ml，2.5 ng/ml，1.25 ng/ml，0.625 ng/ml，0.312 ng/ml，样品稀释液直接作为
空白孔 0 ng/ml。
如配制10 ng/ml标准品：取0.5ml （不要少于0.5ml ）20 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、样品稀释液：1×20ml。
4、检测稀释液A：1×10ml。
5、检测稀释液B：1×10ml。
6、检测溶液A：1×120/瓶（1:100）。
临用前以检测稀释液A 1:100稀释（如：10 检
测溶液A / 990检测稀释液A），充分混匀，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（100/孔），实际配制时应多配制 0.1-0.2ml。
7、检测溶液B：1×120/瓶（1:100）。
临用前以检测稀释液B 1:100稀释。
稀释方法同检
测溶液A。
8、底物溶液：1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液：1×10ml/瓶（2 mol/L H2SO4）。
11、覆膜：5张
12、使用说明书：1份
自备物品
1、酶标仪（建议仪器使用前提前预热）
2、微量加液器及吸头，EP管
3、蒸馏水或去离子水，滤纸
标本的采集及保存
1、血清：全血标本请于室温放置2小时或4过夜后于1000g离心20分钟，取上清即可
检测，或将上清置于-20或-80保存，但应避免反复冻融。
2、血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于 1000g离心15分钟，取
上清即可检测，或将上清置于-20或-80保存，但应避免反复冻融。
3、其它生物标本：请1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20或-80保
存，但应避免反复冻融。
4、样本处理：血清或血浆标本推荐稀释100倍，如：稀释100倍，取10uL血清或血浆加
入990uL样品稀释液。
标本使用0.1 M 的PBS稀释（PH=7.0-7.2）。
注：以上标本均应密封保存，4保存应小于1周，-20不应超过1个月，-80不应超过2
个月；标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
操作步骤
实验开始前，各试剂均应平衡至室温，试剂不能直接在37溶解；试剂或样品配制时，均需充分混匀，混匀时尽量避免起泡。
实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。
1、加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。
空白孔加样品稀释液 100 ，余孔分别加
标准品或待测样品100，注意不要有气泡，加样时将样品加于酶标板底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37温育2小时。
为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2、弃去液体，甩干，不用洗涤。
每孔加检测溶液A工作液 100（临用前配制），酶标板加
上覆膜，37温育1小时。
3、弃去孔内液体，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分钟，大约400/每孔，甩干（也可轻
拍将孔内液体拍干）。
4、每孔加检测溶液B工作液（临用前配制）100，加上覆膜，37温育1小时。
5、弃去孔内液体，甩干，洗板5次，方法同步骤3。
6、每孔加底物溶液90，酶标板加上覆膜37避光显色（反应时间控制在15-30分钟，当
标准孔的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显时，即可终止）。
7、每孔加终止溶液50，终止反应，此时蓝色立转黄色。
终止液的加入顺序应尽量与底物
液的加入顺序相同。
8、立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度（值）。
注：
1、试剂准备：所有试剂在使用前应平衡至室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。
实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。
2、加样：加样或加试剂时，第一个孔与最后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不
同的“预温育”时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。
一次加样时间（包括标准品及所有样品）最好控制在10分钟内。
推荐设置复孔进行实验。
3、温育：为防止样品蒸发，实验时将加上盖或覆膜的酶标板置于湿盒内，以避免液体蒸发；
洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态；同时应严格遵守给
定的温育时间和温度。
4、洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中
吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响最后的酶标仪读数。
5、试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁
或瓶盖的液体沉积到管底。
标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配制使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。
请精确配制标准品及工作液，尽量不要微量配制（如吸取检测溶液A时，一次不要小于10），以避免由于不准确稀释而造成浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液。
6、反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化（比如，每隔10分钟），如
颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7、底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。
洗板方法
1、手工洗板方法：将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内，浸泡1-2分钟，吸去（不可
触及板壁）或甩掉酶标板内的液体，在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；根据需要，重复此过程数次。
2、自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
特异性
本试剂盒可同时检测重组或天然的人MMP-2，且与其它相关蛋白无交叉反应。
计算
各标准品及样本值扣除空白孔值后作图（七点图），如设置复孔，则应取其平
均值计算。
以标准品的浓度为纵坐标（对数坐标），值为横坐标（对数坐标），在对数坐标纸上绘出标准曲线。
推荐使用专业制作曲线软件进行分析，如 curve expert 1.3，根据样品值，由标准曲线查出相应的浓度，乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与值计算出标准
曲线的回归方程式，将样品的值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为
样品的实际浓度。
检测范围：0.312 ng/ml - 20 ng/ml，绘制标准曲线请取用以下浓度值：20 ng/ml，10 ng/ml，5 ng/ml，2.5 ng/ml，1.25 ng/ml，0.625 ng/ml，0.312 ng/ml。
最低检测限：0.078 ng/ml
说明
1、由于现有条件及科学技术水平尚不能对所有供货商提供的所有原料进行全面的鉴定与分析，
本产品可能存在一定的质量技术风险。
2、最终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及当时的实验环境密切相关，请务必
准备充足的标本备份。
3、只有全部使用本盒试剂才能保证检测效果，因为所有试剂都是有关联的，不能混用其他制造
商的产品。
只有严格遵守本盒试剂的实验说明才会得到最佳的检测结果。
如果由于实验者的操作失误或试剂盒保存不当导致结果不佳，不属产品质量问题。
4、在储存及温育过程中避免将试剂暴露在强光中。
所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和微生物的
污染，因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
5、试剂盒保存：请收到试剂盒后尽快将标准品、检测溶液A和检测溶液B保存于-20，其余试
剂短期保存请置于4，长期保存则置于-20。
开封后的酶标板要密封加干燥剂后保存于
-20，避免潮湿。
6、浓洗涤液会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
7、刚开启的酶联板孔中可能会有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
8、有效期：6个月。
9、本操作说明适用于48T试剂盒，但48T试剂盒所有试剂减半。