2013血液检验复习指导：优球蛋白溶解时间
实验十三：止凝血(三)
[原理] [试剂]
1、109mmol/L枸橼酸钠 2、25mmol/LCaCl2溶液
VIII
PL
ⅫIa
ⅫI 3
[操作]
制备PRP
0.1mlPRP
37℃ >1min
记录血浆出现 Fb丝的时间 重复2次，取均值。 并作正常对照。
0.1ml氯化钙
混合并立即启动秒表
[参考值]
2.2～3.8min
4
复钙交叉试验
尖底离心管中，混匀→继续置冰水浴中10min
使优球蛋白充分析出。
3、以2264×g离心5min，倾去残存的液体。
25
4、加硼酸盐缓冲液0.5mL于沉淀中，
用玻棒轻轻搅拌使之完全溶解。
5、置37℃水浴中加氯化钙溶液0.5mL(加钙法) 或凝血酶溶液(加酶法) 启动秒表，记录凝固时间，再观察凝块完全溶解 所需要的时间。
(cross recalcification test)
P212
［原理］
血浆复Ca时间延长，可能是凝血因子缺乏或血中存在抗物质所致。 如能被1/10量的正常血浆所纠正，表示受检血浆凝血因子缺乏， 如不能被等量的正常血浆纠正，则表示血浆中有抗凝物质。
5
[操作]
1、制备PRP 2、按下列比例准备五份待测血浆 试管号 待测血浆(ml) 正常人血浆(ml) 1 － 0.1 2 3 4 0.09 0.01 5 0.10 －
[参考值] 16～18 S
受检TT值延长超过正常对照3s为延长
9
[注意事项]
1、血浆在室温下放置不要超过3h。
2、EDTA和肝素不宜作本试验的抗凝血。
[临床意义]
延长，见于： 1、低(无)Fg血症和异常 Fg血症
内科学 血液系统 习题 选择题 带答案
内科学血液系统习题选择题带答案
1.嗜酸性粒细胞增多不见于急性感染。
2.除了慢性粒细胞白血病早期，下列疾病均可使血小板减少。
3.优球蛋白溶解时间延长不是DIC的检查结果之一。
4.白血病细胞中有Auer小体不支持急性淋巴细胞性白血
病的诊断。
5.急性原发性血小板减少紫癜以幼稚型巨核细胞为主是错
误的。
6.女性成人的红细胞计数为4.0～5.5×10/L。
7.缺铁性贫血是血红蛋白减少大于红细胞减少的原因之一。
8.重度贫血的血红蛋白含量为Hb＜___。
9.嗜多色性红细胞增多见于溶血性贫血。
10.缺铁性贫血时红细胞形态会改变，其中红细胞中心染
色过浅。
11.RBC 3.2×10／L，Hb 80g／L的患者最可能是缺铁性贫血。
12.成人的白细胞计数正常值为4.0～10.0×10／L。
13.淋巴细胞增多见于多种疾病。
血清清蛋白与血浆γ-球蛋白的分离定量纯化和鉴定
血清清蛋白与血浆γ-球蛋白的分离定量纯化和鉴定实验设计班级：11级口腔本科2班姓名：段康博学号：201150166陈晓红201150167章瑞雪201150163郭昌再201150145高原201150143【实验目的】1.了解并基本掌握蛋白质分离提纯的过程2.从血清中分离并纯化血清清蛋白和γ-球蛋白。
3.进行血清清蛋白和γ-球蛋白的定量和鉴定4. 4.掌握电泳的原理方法及应用【实验原理】血浆蛋白是血浆中最主要的固体成分，血浆蛋白质种类繁多，功能各异。
用不同的分离方法可将血浆蛋白质分为不同的种类。
在生物化学研究中，由于它们所带电荷不同、相对分子质量不同，在高浓度盐溶液中的溶解度不同，因此可利用它们在中性盐溶液中溶解度的差异而进行沉淀分离，用盐析法将血浆蛋白分为白蛋白（即清蛋白）、球蛋白与纤维蛋白原三大类。
用盐析法分离而得的蛋白质含有大量的硫酸铵，会妨碍蛋白质的进一步纯化，因此必须去除，常用的有透析法、凝胶过滤法等。
本实验采用凝胶过滤法。
脱盐后的蛋白质溶液再经DEAE纤维素层析柱进一步纯化。
DEAE纤维素为阴离子交换剂，在pH 6.5的条件下带有正电荷，能吸附带负电荷的α-球蛋白和β-球蛋白（pl分别为4.9、5.06和5.12），而γ-球蛋白（pl7.3）在此条件下带正电荷，不被吸附故直接从层析柱流出，此时收集的流出液即为纯化的γ-球蛋白。
提高醋酸铵溶液的浓度到0.06 mol/L，DEAE纤维素层析柱上的ß-球蛋白及部分a-球蛋白可被洗脱下来。
将醋酸铵溶液的浓度提高至0.3mol/L，则清蛋白被洗脱下来，此时收集的流出液即为较纯的清蛋白。
经DEAE纤维素阴离子交换柱纯化的清蛋白、γ－球蛋白液往往体积较大，样品质量分数较低。
为便于鉴定，常需浓缩。
浓缩的方法很多，本实验选用聚乙二醇透析浓缩的方法。
血清清蛋白、γ-球蛋白分离纯化后，选用醋酸纤维薄膜电泳法鉴定其纯度。
然后，用醋酸纤维素薄膜电泳可分为五个区带，γ-球蛋白的等电点为7.3，在pH8.6的巴比妥缓冲液中，带的负电荷最少，因此在电场中比其它蛋白质移动速度慢。
《诊断学》 第五节 纤溶活性检测
第五节纤溶活性检测纤维蛋白溶酶（纤溶酶）可将已形成的血凝块加以溶解，产生纤维蛋白（原）的降解产物，从而反映纤溶活性。
纤溶活性增强可致出血，纤溶活性减低可致血栓。
一、筛检试验（一）优球蛋白溶解时间【原理】血浆优球蛋白（euglobulin）组分中含有纤维蛋白原（Fg）、纤溶酶原（PLG）和组织型纤溶酶原激活剂（t-PA）等，但不含纤溶酶抑制物（plasmin inhibitor）。
受检血浆置于醋酸溶液中，使优球蛋白沉淀，经离心除去纤溶抑制物，将沉淀的优球蛋白溶于缓冲液中，再加入适量钙溶液（加钙法）或凝血酶（加酶法），使Fg转变为纤维蛋白凝块，观察凝块完全溶解所需时间。
【参考值】加钙法：（129．8±41．1）min；加酶法：（157.0±59．1）min。
一般认为<70rain为异常。
【临床意义】本试验敏感性低，特异性高。
1．纤维蛋白凝块在70 min内完全溶解表明纤溶活性增强，见于原发性和继发性纤溶亢进，后者常见手术、应激状态、创伤、休克、变态反应、前置胎盘、胎盘早期剥离、羊水栓塞、恶性肿瘤广泛转移、急性白血病、晚期肝硬化、DIC 和应用溶血栓药（rt-PA、UK）。
2．纤维蛋白凝块在超过120 min还不溶解表明纤溶活性减低，见于血栓前状态、栓性疾病和应用抗纤溶药等。
（二）D-二聚体定性试验【原理】D-二聚体（D-dirner，D-D）是交联纤维蛋白降解产物之一，为继发性纤溶特有的代谢物。
抗D-D单克隆抗体包被于胶乳颗粒上，受体血浆中如果存在D-二聚体，将产生抗原-抗体反应，胶乳颗粒发生聚集现象。
【参考值】胶乳颗粒比阴性对照明显粗大者为阳性，正常人为阴性。
【临床意义】D-D阴性是排除深静脉血栓（DVT）和肺血栓栓塞（PE）的重要试验，阳性也是诊断DIC和观察溶血栓治疗的有用试验。
凡有血块形成的出血，本试验均可阳性，故其特异性低，敏感度高；但在陈旧性血块时，本试验又呈阴性。
血清清蛋白及γ-球蛋白的分离
血清清蛋白及γ-球蛋白的分离、纯化与鉴定目的要求1．1．熟悉蛋白质分离纯化的总体思路。
2．2．掌握盐析、离心、层析、浓缩、电泳等技术在蛋白质分离纯化中的综合作用。
3．3．学会设计和制定分离纯化蛋白质的方法。
实验原理血清中蛋白质按电泳法一般可分为五类：清蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白和γ-球蛋白，其中γ-球蛋白含量约占16％，100ml血清中约含1.2g左右。
首先利用清蛋白和球蛋白在高浓度硫酸铵溶液溶解度的差异而进行沉淀分离，此为盐析法。
半饱和硫酸铵溶液可使球蛋白沉淀析出，清蛋白则仍溶解在溶液中，经离心分离,沉淀部分即为含有γ-球蛋白的粗制品。
用盐析法分离而得的蛋白质中含有大量的中性盐，会妨碍蛋白质进一步纯化，因此首先必须去除。
常用的方法有透析法、凝胶层析法等。
本实验采用凝胶层析法，其目的是利用蛋白质与无机盐类之间分子量的差异。
当溶液通过SephadexG--25凝胶柱时，溶液中分子直径大的蛋白质不能进入凝胶颗粒的网孔，而分子直径小的无机盐能进入凝胶颗粒的网孔之中．因此在洗脱过程中，小分子的盐会被阻滞而后洗脱出来，从而可达到去盐的目的。
脱盐后的蛋白质溶液尚含有各种球蛋白，利用它们等电点的不同可进行分离。
清蛋白、α－球蛋白、β-球蛋白的PI<6.0；γ－球蛋白的PI为7.2左右。
因此在PH6.3的缓冲溶液中，各类球蛋白所带电荷不同。
经DEAE(二乙基氨基乙基)纤维素阴离子交换层析柱进行层析时，带负电荷的α－球蛋白和β-球蛋白能与DEAE纤维素进行阴离子交换而被结合；带正电荷的γ－球蛋白则不能与DEAE纤维素进行交换结合而直接从层析柱流出。
因此随洗脱液流出的只有γ－球蛋白，从而使γ－球蛋白粗制品被纯化。
其反应式如下：用上述方法分离得到γ－球蛋白是否纯净，单一。
可将纯化前后的γ－球蛋白进行电泳比较而鉴定之。
提高醋酸铵溶液的浓度到0.06 mol/L，DEAE纤维素层析柱上的ß-球蛋白及部分a-球蛋白可被洗脱下来。
球蛋白正常值参考范围-概述说明以及解释
球蛋白正常值参考范围-概述说明以及解释1.引言1.1 概述球蛋白是一种重要的血液蛋白质，在维持人体健康和免疫功能方面起着至关重要的作用。
正常的球蛋白水平对于人体的正常功能和免疫系统的正常运行非常关键。
由于个体的生理状态和环境因素的不同，每个人的球蛋白水平也会有所差异。
因此，为了评估一个人的球蛋白水平是否正常，需要参考一定的范围。
球蛋白正常值参考范围是指在健康人群中对球蛋白水平进行统计，得出的平均值加上或减去一个标准差的范围。
这个范围可以帮助医生判断一个人的球蛋白水平是否处于正常范围内。
球蛋白正常值的参考范围通常会根据不同的检测方法、实验室和人群特征而有所差异。
正常的球蛋白水平可以提供许多重要的信息，包括人体的营养状况、肝脏功能和免疫系统的健康状况。
如果球蛋白水平高于正常范围，可能表明体内存在炎症、感染、肿瘤或免疫异常等情况。
反之，球蛋白水平低于正常范围可能提示肝脏疾病、肾病、免疫功能缺陷或营养不足等问题。
因此，了解球蛋白正常值的参考范围对于维护个体健康非常重要。
任何偏离正常范围的球蛋白水平都应该引起关注，并及时进行进一步的检查和诊断。
通过准确评估球蛋白正常值参考范围，我们可以更好地了解人体健康状态，并采取相应的措施来预防和治疗潜在的健康问题。
1.2文章结构文章结构部分的内容可以写成这样：1.2 文章结构本文将按照以下结构进行阐述球蛋白正常值参考范围的相关内容：首先，在引言部分（章节1），将对球蛋白的概述进行介绍，包括球蛋白的定义、组成和分布等基础知识。
接着，将明确文章的目的，即探讨球蛋白正常值的参考范围，并且解释为什么这一范围的确定对于健康评估和疾病诊断非常重要。
在正文部分（章节2），我们将深入探讨球蛋白的功能，介绍它在人体中的重要作用，包括免疫防御、运输功能和调节作用等方面。
然后，我们将着重讨论球蛋白的正常值参考范围，包括不同类型球蛋白的正常范围以及其在不同年龄和性别群体中的差异。
最后，在结论部分（章节3），我们将强调球蛋白正常值的重要性，说明了其对健康状态的评估和疾病的诊断有着重要意义。
临床医学检验技术初级(师)临床血液学-试卷1
临床医学检验技术初级（师）临床血液学-试卷1(总分：70.00，做题时间：90分钟)一、 A3型题(总题数：1，分数：6.00)某患者，男，11岁，近1个月以来双腿膝关节经常出现不明原因的红、肿、疼痛，无皮肤淤点和牙龈出血现象。
两天前，因剧烈活动后，右膝关节疼痛加剧、肿胀明显、行走困难就诊。
x线检查：右膝关节腔内有纤维组织增生和大量积液；穿刺示血性液体。
患者外祖母为血友病A患者。
（分数：6.00）(1).下列哪项试验为该患者首选的筛检试验（分数：2.00）A.PTB.TTC.BTD.APTT √E.CRT解析：解析：APTT为血友病患者首选的筛检试验。
(2).该患者拟诊为血友病A，下列哪组纠正试验可以确诊（分数：2.00）A.正常血清能纠正，硫酸钡吸附血浆不能纠正B.正常血清和正常新鲜血浆都能纠正C.正常新鲜血浆不能纠正D.硫酸钡吸附血浆能纠正，正常血清不能纠正√E.正常血清和硫酸钡吸附血浆都能纠正解析：解析：血友病纠正试验：于患者血浆中加入1／4的正常新鲜血浆、硫酸钡吸附血浆或正常血清，再做APTF，如果正常新鲜血浆和硫酸钡吸附血浆能纠正延长的结果而血清不能纠正，则为因子Ⅷ缺乏，即可诊断为血友病。
(3).该患者疾病与血管性血友病进行鉴别诊断时，下列哪项试验是最重要的（分数：2.00）A.PTB.CTC.复钙交叉试验D.BTE.vWF抗原或结构检测√解析：解析：血友病A患者vWF抗原正常，但多数血管性血友病患者vWF抗原降低，少数因vWF结构或功能异常而致病者可正常。
二、 B1型题(总题数：2，分数：12.00)A 毛细血管脆性试验B 出血时间C 血小板计数D 血块收缩时间E 凝血时间测定（分数：4.00）(1).与出血和血栓性疾病相关的常用筛检试验中唯一的体内试验是（分数：2.00）A. √B.C.D.E.解析：(2).反映血管壁和血小板在止血和血栓形成中的作用的实验是（分数：2.00）A.B. √C.D.E.解析：解析：与出血和血栓性疾病相关的常用筛检试验中唯一的体内试验是毛细血管脆性试验。
实验诊断学题
实验诊断学概论一、填空题：1、实验诊断的内容包括临床血液学检验,排泄物、分泌物及体液的检验,临床免疫学检验,临床病原体检验,临床生化检验。
2、临床常用的抗凝剂有草酸钠,草酸钾,枸缘酸钠,肝素,乙二胺四乙酸二钠。
3、血气分析时常在__股动脉穿刺_采血，也可用_肱动脉_或_桡动脉_。
四、选择题：A型题：1、有关血液标本的采集，下列叙述错误的是：EA、毛细血管采血成人在指端B、静脉采血婴幼儿常在颈外静脉C、血气分析时多在股动脉穿刺采血D、急诊采血不受时间限制E、必要时可以从静脉输液管中采取血液标本。
五．问答题：实验诊断的应用范围包括哪些？1、直接为临床医疗工作服务2、为开展预防工作提供依据3、进行社会普查4、开展健康咨询5、为开展计划生育，优生优育提供实验基础血液一般检查二、选择题A型题6、红细胞的主要功能是：（ D ）A 提供营养B 维持体温C 运输激素D 运输O2和CO2E 提供铁7、红细胞的平均寿命是：（ E ）A 90天B 30天C 100天D 50天E 120天8、贫血是外周血单位体积中：（ D ）A 红细胞数低于正常B 红细胞压积低于正常C 红细胞、血红蛋白量低于正常D 红细胞数、血红蛋白量和红细胞压积低于正常E 循环血量较正常减少9、按贫血病因机制下列哪项组合是错误的：（A ）A 红细胞破坏过多——慢性感染性贫血B 红细胞生成减少——再障C 红细胞慢性丢失过多——缺铁性贫血D 骨髓红细胞生成被干扰——伴随白血病的贫血E 造血原粒缺贫——巨幼细胞性贫血10、缺铁性贫血时红细胞呈现：（ A）A 小细胞低色素性贫血B 正常细胞正常色素性贫血C 大细胞性红细胞D 镰形RBCE 缗钱状11、以下说法错误的是：（ C）A 粒细胞生成过程中，人为可划分为干细胞池、生长成熟池和功能池B 从晚幼粒细胞起至成熟粒细胞不具有分裂功能C 外周血中粒细胞增随血液循环运行D 粒细胞的半衰期为6～7小时E 剧烈运动可使中性粒细胞暂时性升高12、粒细胞减少症是指：（ C）A 白细胞总数<4×109/LB 中性粒细胞数<0.5×109/LC 中性粒细胞数<1.5×109/LD 中性粒细胞数<2×109/LE 中性粒细胞数<1×109/L13、以下可使ESR增快的是：（ A ）A 纤维蛋白原B 白蛋白C 卵磷脂D 镰形RBC14、急性溶血时：（ A ）A 网织红细胞计数升高B 中性粒细胞核右移C 脾脏显著增大D 白细胞计数不变E 外周血不会出现有核红细胞15、30岁女性，头昏乏力2月，发热3天入院，体查：贫血貌，颈部可扪及黄豆大小淋巴结，胸骨压痛，肝脾肋下未扪及。
诊断学第五节纤溶活性检测
第五节纤溶活性检测纤维蛋白溶酶（纤溶酶）可将已形成的血凝块加以溶解，产生纤维蛋白（原）的降解产物，从而反映纤溶活性。
纤溶活性增强可致出血，纤溶活性减低可致血栓。
一、筛检试验（一）优球蛋白溶解时间【原理】血浆优球蛋白（euglobulin）组分中含有纤维蛋白原（Fg）、纤溶酶原（PLG）和组织型纤溶酶原激活剂（t-PA）等，但不含纤溶酶抑制物（plasmin inhibitor）。
受检血浆置于醋酸溶液中，使优球蛋白沉淀，经离心除去纤溶抑制物，将沉淀的优球蛋白溶于缓冲液中，再加入适量钙溶液（加钙法）或凝血酶（加酶法），使Fg转变为纤维蛋白凝块，观察凝块完全溶解所需时间。
【参考值】加钙法：（129．8±41．1）min；加酶法：（157.0±59．1）min。
一般认为<70rain为异常。
【临床意义】本试验敏感性低，特异性高。
1．纤维蛋白凝块在70 min内完全溶解表明纤溶活性增强，见于原发性和继发性纤溶亢进，后者常见手术、应激状态、创伤、休克、变态反应、前置胎盘、胎盘早期剥离、羊水栓塞、恶性肿瘤广泛转移、急性白血病、晚期肝硬化、DIC 和应用溶血栓药（rt-PA、UK）。
2．纤维蛋白凝块在超过120 min还不溶解表明纤溶活性减低，见于血栓前状态、栓性疾病和应用抗纤溶药等。
（二）D-二聚体定性试验【原理】D-二聚体（D-dirner，D-D）是交联纤维蛋白降解产物之一，为继发性纤溶特有的代谢物。
抗D-D单克隆抗体包被于胶乳颗粒上，受体血浆中如果存在D-二聚体，将产生抗原-抗体反应，胶乳颗粒发生聚集现象。
【参考值】胶乳颗粒比阴性对照明显粗大者为阳性，正常人为阴性。
【临床意义】D-D阴性是排除深静脉血栓（DVT）和肺血栓栓塞（PE）的重要试验，阳性也是诊断DIC和观察溶血栓治疗的有用试验。
凡有血块形成的出血，本试验均可阳性，故其特异性低，敏感度高；但在陈旧性血块时，本试验又呈阴性。
临床检验正常值
临床检验正常值临床检验参考值一。
血液检验（一）血液一般检验血红蛋白（Hbg）男性120-160g/L女性110—150g/L新生儿170—200g/l红细胞（RBC）男性(4。
0-5.5）×1012/L女性(3.5-5。
0）×1012/L新生儿（6.0—7。
0）×1012/L白细胞(WBC）成人(4.0—10.0）×109/L新生儿（15。
0-20.0) ×109/L6个月至2岁(11。
0—12。
0) ×109/L白细胞分类计数百分率中性杆状核粒细胞0.01-0.05（1%-5%)中性分叶核粒细胞0。
50—0。
70（50%-70%)嗜酸性粒细胞0。
005-0。
05(0。
5％—5%)嗜碱性粒细胞0—0。
01（0％—1％)淋巴细胞0.20-0。
40(20％-40%）单核细胞0.03-0。
08(3％-8％)绝对值中性杆状核粒细胞(0。
04-0.5）×109/L中性分叶核粒细胞(2。
0-7。
0) ×109/L嗜酸性粒细胞(0。
02-0.5）×109/L嗜碱性粒细胞（0-0。
1) ×109/L淋巴细胞（0.8-4。
0）×109/L单核细胞(0.12-0。
8）×109/L点彩红细胞百分率<0.0001(0。
01％）绝对值<300/106红细胞嗜多色性红细胞<0.01(1%）（二)红细胞的其他检验网织红细胞（Rtc）成人百分数0。
005—0。
015(0.5％—1.5%) 绝对值（24-84) ×109/L新生儿百分数0.02-0.06(2%—6%）网织红细胞生成指数（RPI）2红细胞沉降率(ESR) Westergren法男性0-15mm/l小时末女性0-20mm/l 小时末红细胞平均直径6—9µm（平均7。
2µm)红细胞厚度边缘部2µm，中央部1µm血细胞比容(Hct）微量法男性0。