南瓜多糖提取方法
南瓜多糖的提取加工技术
，
４ 南瓜含有淀粉 、 ． 多种氨基酸 、 维生素、 纤维素、 经浸提出南瓜多糖后的南瓜残 用最广 ， 南瓜作为“ 消渴药” 在祖国医药典籍 中早有记 蛋 白质和微量元素等 ， 载。据称健康 的人及 Ⅱ型糖尿病患者食用南瓜粉后 ， 渣 ， 仍然营养丰富， 有较高的综合利用价值 ， 也可直接 ７ ％～ ０ ０ ９ ％的人血糖降低 。中医认为南瓜味甘性温 ， 主治脾 胃虚弱 、 哮喘、 肺痈疮肿等病。 南 瓜多糖 ，系 由南瓜 中提 取 的一类 混合 多糖 ， 已 做为优质饲料使用 ， 属既有经济价值 ， 又无环境污染
技 术 与 市 场
遴 孺 参 谎
雨 磊
技 市
它具有分离效能高 、 常温操作 、 设备简单等特点 ， 南瓜为葫芦科植物南瓜的果实 ，南瓜别名北瓜 、 番瓜 、 窝瓜 、 饭瓜、 金瓜、 金冬瓜等 ， 南瓜多糖是从南瓜 特别适合于天然生物成分的提取与纯化 ， 是一种先进 中浸提出来的活性物质 。南瓜不仅 营养丰富， 而且能 的无污染 的绿 色技术 。
个三通管， 在三通管下各接一个引风机 ， 在引风机下 高档、 豪华轿车都配备了座椅加热装置 ， 如德国奔驰 、 各接一个软管直通汽车座椅下方并与气垫相连（ 气垫 宝马、 奥迪 、 大众 、 保时捷 等 ， 虽然加热椅和按摩椅已 内用软簧支撑 ， 外用真皮包裹）如需冷气或暖气时只 普遍应用于汽车产品， 。 但冷热兼备的汽车座椅在汽车 须打开空调或暖气 ， 气垫就会 自动鼓起 ， 不需要时则 和普通座椅一样。
葡萄糖 醛酸 、 鼠李糖 等组成 。文 献报 道南 瓜 多糖 平 均 分子量 为 １００ ６０ ，另 有文 献报 道平 均 分子 量 为 １１ ． ６×
ｌ ０。
提 取 加 工 技 术
南瓜多糖提取方案
1.南瓜粗多糖的提取：准确称取100g 新鲜南瓜，加入200ml蒸馏水，在榨汁机中搅拌5min，置于烧杯，放入70℃恒温水浴中加热2h，搅拌提取多糖，然后抽虑，滤液80℃真空浓缩至固形物含量约30%，在浓缩液中加入5倍体积95%酒精搅拌均匀，冰箱放置过夜，离心得沉淀物。
沉淀物以水溶解重复醇析1次，然后将沉淀物用无水酒精、丙酮、乙醚洗涤，冷冻干燥得南瓜粗多糖。
2.Sevag法除蛋白质取粗多糖的样品，用蒸馏水溶解，按多糖水溶液体积的1/3-1/4加入氯仿：正丁醇（4：1）混合液剧烈震荡，离心分离30min，除蛋白质，反复操作5次，直至紫外光谱分析在蛋白质280nm和核酸260nm处无特征吸收峰，说明含氮物质已除去。
3. 南瓜多糖降糖组分的分离、纯化（三氯乙酸）将南瓜多糖粗品饱和溶解至0.1 mol/L 氯化钠溶液中,4 ℃放置24 小时,离心,弃去沉淀,滤液中加入40 %三氯乙酸使其终浓度达到10 % ,4 ℃冷藏24小时, 离心, 沉淀用0.1 mol/L NaCl 溶液溶解, 经Sepharose CL24B 柱层析,用0.1 mol/L 氯化钠溶液洗脱、分离,采用硫酸- 蒽酮法跟踪检测,收集含多糖的组分,再用0.1 mol/L NaOH 中和,将洗脱液适当浓缩,透析,用Sephadex A2200 柱层析分离、纯化, 用0.1 mol/L 氯化钠溶液洗脱(洗脱液流速: 0.55 mL/min) ,收集洗脱液,减压浓缩,冷冻干燥得白色粉末状南瓜多糖精品,测定其多糖含量。
4.南瓜多糖精品的纯度鉴定柱层析法将多糖精品溶解在0.05 mol/L磷酸缓冲液(PH=7.0 的PBS 2mol/l 的91.4ml磷酸一氢钠+8.6ml磷酸二氢钠为100mlPBS) 中, 质量浓度为0.3g/dL , 经用0.05 mol/L PBS 平衡后的Sephadex G2200 层析柱洗脱,体积流量为4.8 mL/h ,每管收集洗脱液2 mL ,硫酸- 苯酚法部分收集检测，分析多糖组分。
南瓜多糖中药提取物
南瓜多糖中药提取物南瓜多糖【提取来源】本品为葫芦科植物南瓜Cucurbita moschnta(Duch.ex Lam.) Poiret的果实提取的多糖类成分，总多糖含量≥60%。
【制法】南瓜切片水煮提取，沉淀，精滤，浓缩液加乙醇沉淀，粗多糖透析，脱蛋白，喷雾干燥，最后加入10%水提干粉混合而成。
【性状】本品为浅黄色至棕黄色粉末，可溶于热水。
【鉴别】取本品加热水制成46.0%的溶液作供试液。
取南瓜标准对照药材1.0g加热水40ml，80℃超声提取30分钟，滤液蒸干，残渣加40%甲醇1ml，热溶滤过作对照液。
取上述两液各10μl，分别点于同一硅胶G板，一次点三板。
(1)乙酸乙酯-甲醇-水(8：1：1)展开，喷5%三氯化铝乙醇溶液，紫外灯365nm下检视。
(2)乙酸乙酯-异丙醇(7：13)展开，喷茴香醛硫酸试液，热风吹显。
(3)正丁醇-乙醇-水(5：3：2)展开，喷茴香醛硫酸试液，热风吹显。
以上三板荧光斑点和可见光斑点对应率≥80%。
取本品与南瓜多糖对照品各20mg，分别加入2 mol/L硫酸2ml，110℃水解8小时，BaCO3中和至pH=6～7，离心，上清液浓缩至1ml，各取10μl，分别点于同一硅胶G板，以正丁醇-二甲基吡啶-水(6：3：1)展开，喷茴香醛硫酸试液，热风吹显，斑点对应率≥80%。
【检查】水分：不得过5. 0%(附录Ⅸ H)灰分：不得过3.0%(附录Ⅸ K)重金属：不得过10ppm(附录Ⅸ E)砷盐：不得过2ppm(附录Ⅸ F)糊精：不得过0.5%(附录Ⅳ)【含量测定】照多糖含量测定法(附录Ⅲ)测定。
【功能】降血糖，降血脂，抗肿瘤。
【贮藏】阴凉，干燥，避光。
3种南瓜的多糖提取及旋光检测
the polysaccharide average extraction percentage of the dry pumpkin（2.14%）was higher than the wet one（1.07%）. The dry
队（KYTD2013001）
作者简介：陈
萍，女，教授，研究方向为生物科学。E-mail: jxmqiang@
通信作者：贾晓梅，女，副教授，主要从事植物生理和次生代谢的研究。E-mail: bdxiaomeij@
·8·
Copyright©博看网 . All Rights Reserved.
of pumpkin，we carried out the experimental research on the polysaccharide extraction and the polarimetric determination in
three types of common pumpkin. The polysaccharide was extracted from the dry and the wet pumpkin respectively by ultra⁃
Key words: Pumpkin; Polysacharide；Extraction；Polarimetric determination
南瓜，属葫芦科草本植物，性温味甘，具有润
[1]
条 件 和 旋 光 法 测 定 条 件 的 研 究 ，以 期 建 立 快 速
南瓜多糖提取分离条件的优化
食品科学农村经济与科技2020年第31卷第1期（总第477期）南瓜多糖提取分离条件的优化王志高，罗红宇（浙江海洋大学，浙江 舟山 316022）[摘要] 试验选用锦州当地南瓜为原料，对其中的南瓜多糖进行提取。
以投料比、提取温度、提取时间、碱液的浓度为因素进行正交试验，确定提取纯化南瓜多糖的最佳工艺参数，试验结果表明，提取温度为80℃，提取时间为2h，液料比为5：1，碱液浓度在0.4mol/L时为最佳。
纯化时采用糖液与乙醇比例为1：3的的沉淀条件，温度62℃，加热32min，活性炭添加量为3%的脱色条件，10%三氯乙酸除蛋白方法和2～3天的透析时间为最佳。
[关键词]南瓜多糖；提取；纯化[中图分类号]R284.2 [文献标识码]A南瓜葫芦科南瓜属中一年生蔓性草本植物。
南瓜多糖主要在两大方面有应用，一是医药方面，二是普通食品及保健品方面。
此外，多糖特殊的食品加工性能，例如增稠性、稳定性。
同时将其添加到肉制品中能提高肉制品的保水力，使肉具有较高的嫩度。
同时，保健品的研发也是层出不穷，好比以枸杞、银耳等为多糖原料开发的功能饮料已出现在市场上。
南瓜多糖不仅可防治糖尿病并发症，而且还具有较好的抗动脉粥样硬化的作用。
南瓜多糖有协助清除体内氧化自由基的作用，减少脂类物质过氧化反应，预防心血管疾病的发生。
此外它还具有减缓与抑制肿瘤生长的作用。
目前南瓜多糖的主要提取方法有水提醇沉法、微波辅助提取法、复合酶提取法、碱液提取法、超声波提取法等方法。
本课题研究的目的是把在原有的基础上改进提取工艺，确定南瓜多糖提取纯化的最佳工艺参数，找到一条快速、性价比高、得率和纯度高的工艺流程，以便获得更多的南瓜多糖并以此提高南瓜利用率，降低南瓜在工业化生产中的损失。
1 实验材料与方法1.1 实验材料、试剂及设备南瓜（购买自锦州石桥子早市）乙醇，丙酮，石油醚，氢氧化钠，苯酚，乙醚，浓硫酸，葡萄糖，浓盐酸，三氯乙酸，酒石酸钾钠，乙酸锌，硫酸铜，亚铁氰化钾，活性炭，（均为分析纯）。
南瓜多糖的提取
1.3试验方法1.3.1 南瓜多糖的制备南瓜切片后置于80 ℃烘箱中烘24 h，粉碎，过100目筛即得南瓜粉。
取一定量的南瓜粉置于250 mL烧瓶中，加水适当的蒸馏水，在适当的温度下恒温加热一定的时间，然后3000 r/min离心15 min，取上清液，上清液用饱和乙酸铅除去蛋白质、色素，再次离心取上清液，去除上清液中剩余铅，过滤，得南瓜多糖提取液，最后蒸发浓缩即得南瓜多糖。
1.3.2 单因子试验1.3.2.1 浸提取时间的影响在温度为80℃，瓜液比或加水量为1:20的条件下，分别在不同的 5 个时间（60 min、90 min、120 min、150 min、180 min）下进行提取，考察浸提时间对多糖提取的影响，以确定最佳浸提时间。
1.3.2.2 浸提取温度的影响选取60℃，70℃，80℃，90℃，100℃，5个温度水平，在上步中最佳浸提时间的基础上加水量为1:20的条件下进行提取，考察温度对多糖得率的影响，以确定最佳浸提取温度。
1.3.2.3 料液比（加水量）的影响选用l：10、l：15、l：20、l：25、l：30，5个料液比水平，在上两步的最佳浸提时间和最佳浸提温度的条件下进行提取，考察料液比对多糖得率的影响。
1.4多糖的测定蒽酮-硫酸法[15]据文献报道检测南瓜多糖主要是蒽酮-硫酸法，即酸性糖在蒽酮及浓硫酸的作用下显色，于620nm处检测，得到其多糖的含量。
1.4.1 标准曲线的绘制葡萄糖标准液的配制：精确称取干燥的葡萄糖100mg置于100 mL容量瓶中用蒸馏水定容，得浓度为1 mg/mL葡萄糖标准溶液。
蒽酮溶液的配制[17]：取0.2 g蒽酮溶解到80% 硫酸中，以80% 硫酸定容到100 mL现用现配。
取葡萄糖标准液1 mL、2mL、3mL、4mL、5mL、6 mL，于100 mL容量瓶，以蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
分别取1 mL上述溶液于具塞的试管中，各自加入4 mL蒽酮试剂，定容至10mL，以1 mL蒸馏水作空白对照，立即摇匀，置沸水浴中加热8 min，迅速冷却至室温，于620 nm 处测定吸光度值，以吸光度对葡萄糖浓度作回归处理，得到葡萄糖浓度(C)与吸光度(A)的曲线列出直线回归方程。
南瓜多糖提取方法研究
食品辅料
食品工业
南瓜多糖
提取方法研究
徐雅琴 1 ;崔崇士 1 ;王洪伟 2 ;
1. 东北农业大学 (哈尔滨 150030) 2. 西南农业大学 (重庆 400716)
摘 要 通过正交试验确定南瓜多糖热水浸提法 最佳提取工艺 ,然后以提取液中多糖含量为指标 , 对热水浸提法 、超声波法和复合酶法提取南瓜多 糖进行了比较研究 。结果表明 , 三种方法中复合 酶法不仅提取率最高 ,工艺最简易 ,而且制得的粗 多糖中蛋白质含量低 ,不需要进行脱蛋白工艺 ,是 较佳的南瓜多糖提取方法 。 关键词 南瓜多糖 提取方法
黄原胶
0. 005 % 六偏磷酸钠
0. 02 %
不分层 , 状态均一
开始出现 轻微分层
分层明显 有部分 沉淀
,
分层明显 , 较多沉淀
由表 2 可以看出 ,通过多次试验 ,发现羧甲基纤维
素钠 01005 % + 六偏磷酸钠 0102 %的稳定剂组合对低 乳糖牛奶的组织状态 ,起到了较好的保护作用 ,产品在
稳定剂组成 5天
10天
15天
20天
藻酸丙二醇酯
0. 005 %
不分层 ,
六偏磷酸钠 状态均一
0. 02 %
碱法提取南瓜多糖的研究
实验 2 温度 4 时间 号 （’ ） （" ）
0 液固比 !?(*!@ #?)*!@ (?6*!@ ( ! # # ( ! !)$:( !5$&5 !5$:! )$55 :$&( :$#& !$((
3 ;<=> 浓度 多糖百分 （+,- . /） 比 （9） !?&$(@ #?&$)@ (?&$6@ ! # ( ! # ( !:$!) !8$:) !8$6( 6$(5 6$55 6$5) &$6& )$58 :$:! :$:& :$)6 6$)8 :$:6 )$5# 6$66 )$#%
$%$
材料与仪器
南瓜 从广州市场购得， 挑选刚成熟、 无霉变、 均为分析纯。
葡萄糖、 苯酚、 肉质较硬的南瓜； *， $) 二硝基水杨酸、 硫酸、 氢氧化钠等
关键词 ： 南瓜多糖， 提取， 正交法
!"#$%&’$(!"#$%&’ $()*+,--.,/&01 .,+ 211’ 134/,-410 5&4. +(0&"# 6.*0/(3&01 #14.(07 8.1 1)1-4/(’&#&-/(+-($1 +.(5+ 4.,4 +4/"-4"/1 (9 9/1+. $"#$%&’ -1)) 4&++"1 .,+ 211’ )((+1’10 2* +(0&"# .*0/(3&01 4/1,4#1’47 8.1 41-.’()(:&-,) $,/,#141/ (9 4.1 134/,-4&(’ 5,+ 0141/#&’10 2* (/4.(:(’,) 41+4 ,’0 4.1 /1+")4+ /1;1,)10 4.,4 ,4 <=>? @ .("/ 4/1,4#1’4? /,4&(’ (9 +()&0 4( )&A"(/ ,4 B ,’0 -(’-1’4/,4&(’ (9 C,DE ,4 =7F#() G H ,/1 ($4&#"# 41-.’()(:&-,) -(’0&4&(’+7 )*+ ,-%.#($"#$%&’ $()*+,--.,/&01I ,)%,)&’1 134/,-4&(’I (/4.(:(’,) 41+4
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
南瓜多糖提取方法
摘要：本文介绍了南瓜多糖的提取方法,如水提醇沉法、碱液提取法、超声波提取法、微波辅助提取法、酶提取法等等。
关键词：南瓜；多糖；多糖提取
南瓜又称番瓜、倭瓜、金瓜等，系葫芦科南瓜属一年生蔓性草本植物，是重要药食两用植物之一。
南瓜营养丰富，不仅含有甘露醇，多种氨基酸，维生素C、E 及微量元素Fe、Se、Zn、Mn 等，还含有大量生物碱、南瓜子碱、果胶等活性成分。
南瓜多糖呈棕色粉末，是南瓜活性成分中最重要、最具潜力功能因子之一。
不仅具有复杂、多方面生物活性，作为广谱免疫促进剂，且具有免疫调节，抗感染、抗放射、抗凝血、降血糖、降血脂、促进核酸与蛋白质生物合成，控制细胞分裂、分化，调节细胞生长、衰老等作用。
因此，对南瓜多糖分离提取，日益引起人们重视。
1 提取方法的研究现状
1.1 水提醇沉法
水提醇沉法是通过在天然产物的浓缩的水提取液中加入数倍量高浓度乙醇，利用南瓜多糖溶于水而不溶于高浓度的乙醇的性质，使其生成沉淀而与其他水溶性的杂质分离的方法。
水提醇沉法提取南瓜多糖的工艺，工艺流程如下：市购南瓜洗净、去皮切丁并配水榨汁→加热浸提→过滤→提取液→浓缩→乙醇沉淀→南瓜粗多糖。
通过四因素三水平正交试验法优选，研究发现南瓜多糖提取的最优条件为：南瓜丁的质量与水的体积比为1(g):5(ml)，90℃条件下浸提2h，浓缩水浸提液与乙醇的体积比为1:4，南瓜粗多糖提取率为1.5%左右，纯度可达到21.02%。
1.2 碱液提取法
由于D- 葡萄糖醛酸的存在，南瓜多糖为酸性多糖，故可采用稀碱液如氢氧化钠、氢氧化钾等来提取。
由于稀碱液有助于解除植物细胞壁分子间的化学和物理作用，故可增加南瓜多糖的提取率。
利用氢氧化钠溶液提取南瓜多糖的工艺，实验表明：随着碱液浓度的升高，多糖的提取率增加，当达到0.3mol/L 之后，碱液浓度的升高对提取率无显著影
响，而且由于碱性条件下，其中的还原糖会分解成分子量更小的色素分子，从而使的产品的色泽加深。
经过正交实验，确定了碱提法的最佳生产工艺：80℃的条件下提取，提取时间为2h，综合考虑时间对提取率的影响和生产周期因素，可以缩短为1h，液固比为5:1，氢氧化钠的浓度为0.4mol/L。
1.3 超声波提取法
超声波是频率大于20KHz 以上的声波，具有频率高、波长短、功率大、穿透力强等特点。
它在液体介质中传播时，能产生空化作用及一系列特殊效应具有搅拌、分散成雾、凝聚、冲击破碎和加热等作用。
超声波提取是利用超声波具有的空化效应、机械效应及热效应，通过增大介质分子的运动速度，增强介质的穿透力以提取天然产物有效成分的方法。
利用超声波提取南瓜多糖的方法。
赵二劳等[10]使用KQ-100DB 型数控超声波清洗器（超声波频率为40kHz），研究了预浸时间、超声功率、提取温度、时间以及占空比对南瓜多糖提取率的影响水平：以水为提取溶剂，经过10min 预浸后,在60℃的提取温度下，用功率为80W、占空比为1 的超声波作用20min,样品中南瓜多糖的提取率最高可达4.26%。
1.4 微波辅助提取法
微波辅助提取指在天然产物有效成分提取过程中加入微波场，利用微波场的特点来强化有效成分浸出的新型提取技术。
微波可导致天然产物细胞内的极性物质尤其是水分子吸收微波能产生大量的热量，胞内温度迅速上升，从而使细胞内部的压力超过细胞壁膨胀所能承受的能力，结果细胞破裂，有效成分自由流出并溶解于提取介质中，通过进一步的过滤和分离，即可获得所需的提取物。
1.5 复合酶提取法
酶提取法的原理是利用酶反应的高度专一性，将天然产物细胞壁及细胞间质中的纤维素、半纤维素等大分子物质水解或降解，破坏细胞壁，加快有效成分溶出细胞的速度，从而提高有效成分的提取率。
采用酶法提取天然产物有效成分，反应条件温和，是一种较为先进有效的提取方法。
使用纤维素酶（1%）、果胶酶（1.5%）和木瓜蛋白酶（1%）组成的复合酶，在pH 为5.5、温度为40℃的条件下提取30min，南瓜多糖的粗产率可高达28.8%左右。
利用微波协同酶法来提取南瓜多糖，先利用1.0%纤维素酶和1.5%果胶酶组成的复合酶，在磷酸氢二钠- 柠檬酸组成的pH=5.5 的缓冲溶液中，于40℃水浴中
振荡30min，然后将酶解后的多糖提取液用功率为500W 的微波，在料液比为1g:30 mL、温度为60℃条件下微波加热3min，可达到11.9%的粗提取率。
2.展望
我国南瓜资源丰富，价廉易得，从南瓜中提取具有降糖等生物活性的南瓜多糖具有广阔的应用前景。
就提取工艺来说，水提醇沉法耗时长，且提取率偏低，碱提法虽然在一定程度上提高了提取率，但使得产品质量下降，超声波法和微波辅助法耗时短、提取率亦得到了大幅度的提高，但是由于条件限制，很难用于工业生产。
复合酶提取法由于其高度专一性、条件温和、提取时间短、提取率高等已引起关注，必将成为南瓜多糖开发的一个重要手段，具有较大的应用潜力。
总的来说，目前最基础的工作便是要改进提取工艺，找到一条简单、价廉、提取率和纯度高的工艺流程。
参考文献：
[1]中国农业百科全书编辑部. 中国农业百科全书（蔬菜卷）[M].北京：农业出版社，1990. 713.
[2]江璐，何计国，范慧红. 南瓜多糖的研究进展[J]. 食品与药品，2007，9（8）：51― 53.
[3]邹宇晓，肖更生. 南瓜的功能性成分及保健食品开发与研究[J].果菜与健康，2004，（4）：47― 48.
[4]赵二劳，李满秀，梁兴红. 超声提取南瓜多糖的研究[J]. 声学技术，2008，27（1）：58― 60.
[5]李军生，何仁，伍时华，等. 超声波处理对提高南瓜多糖提取率的影响[J]. 农业科技通迅，2003，（9）：33.
[6]张拥军，徐晓晖，李昌敏，等. 活性南瓜多糖的提取与分析[J].食品工业科技，2002，23（11）：19― 21.
[7]吕炜锋，王兆富，陈捷，等. 南瓜多糖的提取纯化及其复方口服液的降血糖作用研究[J]. 药学进展，2004，28（1）：515―518.
[8]孙俊，邓红，仇学农. 南瓜多糖超声提取工艺的优化[J]. 西北农业学报，2007，16（2）：192― 202.
[9]王洪伟,徐雅琴.南瓜功能成分研究进展［J］.食品与机械,2004(4):55-57.
[10]孔庆胜,蒋滢.南瓜多糖的组成及摩尔比测定［J］.中国现代应用药学杂志,2000,17(2):138-140.。