无菌检验
Why to conduct a sterility test ? 为什么要进行无菌检验？ 为什么要进行无菌检验？
European Pharmacopoeia (EP 5.3) 欧洲药典 US Pharmacopoeia (USP29-NF24) 美国药典 Japanese Pharmacopoeia (JP) 日本药典 ICH (International Committee of Harmonization) 国际协调会议 Regulatory Guidelines/Guidance from several organizations
1. Hardware & Accessories 主机和配件
o o o Steritest Pumps Foot Pedal Timer (included in the Equinox)
2.
Sterility Testing Devices 无菌检验耗材
o Different Steritest Units with different adapters and membranes
Membrane Filtration (Open-) Funnel 开放式薄膜过滤法
Transfer, Filter and Rinse 转移，过滤，冲洗
Risk of False Positives !!!
Cut the filter 剪开膜片
假阳性的风险！ 假阳性的风险！
Transfer half of the filter in the media Incubate for 14 days 将膜片加入培养基培养 14天
从80年代早期开始：第一台隔离器（ La Calhène ）用于无菌检验
1983: specific membrane (Durapore, Millipore) for Antibiotics
1983：特殊材质的膜片(Durapore,Millipore)用于抗生素检测
1997: Incubation time for the test increased from 7 to 14 days
Membrane Filtration:SteriSecure Closed concept system
薄膜过滤法： 薄膜过滤法：SteriSecure封闭式无菌检验系统 封闭式无菌检验系统 SteriSecure
Leader in this field (40 years of experience in sterility testing)
Follows requirements described in the Standard Pharmacopeias
按照药典标准规定的操作流程 1 – FILTRATION 过滤样品
SAMPLE
2 – RINSING 冲洗
RINSING FLUID
S
RR
3 – MEDIA ADDING 加培养基
孔径不得大于0.45 µm
o Membrane diameter approximately: 50 mm
膜片直径约为50 mm
o Flow rate of water per minute / per cm², at a pressure of 13,5 PSI (70 cm de HG): 55 – 75 ml
“For each batch of drug product purporting to be sterile and/or pyrogen free, there shall be appropriate lab testing to determine conformance to such requirements” 21CFR211.167 (a)
1977: Closed concept system Steritest (Millipore)
1977：发明了封闭式无菌检验体系Steritest（Millipore）
Since the early 80s: first isolators (La Calhène) for sterility testing
美国和欧洲药典提到：薄膜过滤法是无菌检验可选的一种方法
Required conditions and specifications for a membrane filter destinated for sterility:
无菌检验对于过滤薄膜的要求：
o Pore size diameter (nominal) 0.45 µm maximum
Programs in Pharmaceutical Microbiology 制药行业微生物涉及的领域
Sterility Testing 无菌检验 Final Product 终产品
Microbiology Laboratory In-Process
制造过程
微生物实验室
Raw Materials 原材料
3.
Media & Rinse Fluids 培养基和冲洗液
o Recommended from regulatory agencies
Steritest Hardware 主机
Steritest Equinox for Laminar Flow Hood & Isolators 用于层流台和隔离器的Equinox 用于层流台和隔离器的
1997：检验的培养时间由7天增加到14天
Why to conduct a sterility test ? 为什么要进行无菌检验？ 为什么要进行无菌检验？
Regulations and global quality approach 法规和全球质量要求 cGMP requirements
cGMP的要求
流速(在压力为13.5PSI时)：55-75ml/min/cm²
Sterility Testing Methods / Membrane filtration 无菌检验方法： 无菌检验方法：薄膜过滤法
(Open-) Funnel method 开放式方法
Closed concept system: Steritest 封闭式检测系统：Steritest
Sterility Testing Methods， Direct Inoculation – Considerations ，
无菌检验方法： 无菌检验方法：直接接种法
Advantages 优点 o Direct immersion of medical devices 医疗设备直接浸泡 o Non-filterable products may be tested 可以检验不可过滤产品 o Less manipulations than open funnel method 与开放过滤法相比操作简单 Limitations 局限性 o Antimicrobial product activity may inhibit growth 抗生素残留会抑制微生物 o Intrinsic product turbidity 产品本身可能会引起浑浊 o Aseptic technique training and validation required 需要无菌技术培训和验证 o No volumes larger than 100 ml 检验量小于100ml o High risk of false positives 假阳性的风险高
“对于每一批生成无菌和/或无热源的药品，都应有适宜的实验室检验确保其符合这些要求” 21CFR211.167 (a)
Example: EP
例如：欧洲药典
The test is applied to substances, preparations or articles which, according to the Pharmacopoeia, are required to be sterile (EP 5.3)
该领域的领导者（40多年的无菌检验产品经验）
Method accepted from all Pharmacopoeias
所有药典都接受的方法
Fast filtration through pressure, not vacuum
通过加压而非抽真空进行快速过滤
Closed system
封闭系统
Pre-sterilised, ready-to-use Nhomakorabeanits
其他一些国际组织的法规规定/指导 o TGA Australia o FDA: Food and Drug Administration o EMEA: European Agency for the Evaluation of Medicinal Products o PDA: Parenteral Drug Administration o AAMI: Association for the Advancement of Medical Instrumentation o ISO: International Organization for Standardization o WHO: World Health Organization
预灭菌的即用型产品
Allows to control the sample in the same way as at the time of his(her,its) use...
有很好的重现性和可重复性
How does SteriSecure work ? 如何操作SteriSecure 如何操作
1957：膜过滤方法用于检测有抑菌性的产品（FDA）
1966: membrane filtration method improvement with filtration manifold (FDA). Usage of rinsing fluids
无菌检验的名词解释
无菌检验的名词解释无菌检验是一种用于判断物体是否无菌的检测方法。
所谓无菌，指的是物体中完全没有细菌、真菌、病毒和其他微生物的存在。
无菌检验通常应用于医疗、食品、制药等领域，确保产品的安全和质量。
一、无菌检验的原理与方法无菌检验的原理是通过将待检物体接触无菌培养基，培养一定时间，观察无菌培养基是否有微生物生长，以判断待检物体是否无菌。
常用的无菌检验方法有以下几种：1. 膜过滤法：将待检物体经由过滤膜滤过，将过滤膜放置在富含营养物质的培养基上，培养一定时间后观察是否有微生物生长。
2. 分装法：将待检物体分装到无菌培养基中，培养一定时间后观察培养基是否有微生物生长。
3. 表面刮取法：用无菌棉签或刮刀刮取待检物体的表面，将刮取物涂抹在培养基上，培养一定时间后观察是否有微生物生长。
4. 压榨法：将待检物体放入含有无菌溶液的压榨器中，施加压力，使其中的微生物被释放到无菌溶液中，然后将无菌溶液培养于培养基上，培养一定时间后观察是否有微生物生长。
二、无菌检验的重要性无菌检验在医疗、食品、制药等领域中具有重要意义。
1. 医疗领域：在手术、注射、输血等医疗过程中，无菌检验可以保证医疗设备和器械的无菌状态，减少交叉感染的风险。
2. 食品领域：无菌检验可以判断食品是否受到微生物污染，保证食品的安全和品质。
常见的食品无菌检验包括奶制品、肉制品、果蔬制品等。
3. 制药领域：药品的生产过程中，无菌检验是确保药品无菌性的重要环节。
药品生产过程中的患者用药、灌装、注射等环节都需要严格进行无菌检验。
4. 生物实验室：无菌检验是生物实验室中常见的操作，为保护实验样品的纯净性和独立性，无菌检验在实验室操作中起到关键作用。
三、无菌检验的应用领域无菌检验广泛应用于医疗、食品、制药和实验室等领域。
1. 医疗领域：手术室、ICU、产房、输血室等医疗场所都需要进行无菌检验，确保医疗设备和手术器械的无菌状态。
2. 食品领域：乳制品、肉类制品、果蔬制品等在生产过程中需要进行无菌检验，确保产品的卫生安全。
无菌检验方法验证
YOUR SITE HERE
LOGO
无菌检验阳性结果调查
实验室调查：一个合适的调查程序和记录是必要的
YOUR SITE HERE
LOGO
无菌检验阳性结果调查
若产品不合格，必须通过该批生产过程回顾找出污染 原因和污染源 –人 – 物料 – 环境 – 设备 – 方法和工艺
YOUR SITE HERE
LOGO
方法二：用实验确定是否具有抑菌性的方法 在规定量的供试液中加入实验用微生物10~100个，
如微生物生长良好，即说明供试品对该种微生物无抑 菌活性。如已用药典规定的各试验菌试验，结果均能 生长良好，说明供试品无抑菌性，可用常规方法检验 之。将这些试验记录在案——就是证明该供试品无抑 菌性的验证试验部分；如加入的微生物不生长或生长 缓慢，说明供试品有抑菌性，将这些试验记录在案— —就是证明该供试品有抑菌性的验证试验部分；如加 入的微生物中有某一种菌最不能生长或生长最缓慢， 这一种菌就是该样品的敏感菌。
LOGO
验证试验和对验证结果技术评价的判断为：如平行3 次的试验中，各管微生物均生长良好，说明供试品 已消除了抑菌活性。可以确定按该方法进行该品种 的无菌检查；如有供试品管的微生物生长微弱、缓 慢或不生长，说明供试品仍有抑菌活性，应考虑进 一步增加冲洗量或中和剂的用量以消除抑菌活性， 并重新验证，直至验证证明已充分消除或有效降低 抑菌活性。
条件 无菌检查应在环境洁净度10000级下的局部洁净 度100级的单向流空气区域内或隔离系统中进行， 其全过程应严格遵守无菌操作，防止微生物污 染，防止污染的措施不得影响供试品中微生物 的检出。
无菌检验技术—无菌检查原理
• (3)冲洗剂，即用于冲洗开放性伤口或腔体的冲洗剂。
• (4)眼用制剂。
• (5)用于烧伤、创伤或溃疡的制剂。包括：用于烧伤或严重创伤的局部用 散剂、凝胶剂、软膏剂、乳膏剂；用于烧伤、创伤或溃疡的气雾剂和喷 雾剂等。
• (6)用于手术、耳部伤口或耳膜穿孔的滴耳剂或洗耳剂。 • (7)用于手术或创伤的鼻用制剂。 • (8)用于止血并可被组织吸收的制剂。如明胶发泡剂、凝血酶等，用于止
• 1.2无菌检查的一般方法 • 无菌检查需用最严格的无菌操作法将被检查的药品或材料的样本分别接 种于适合各种微生物生长的不同培养基中，于不同的适宜温度下培养一定 的时间，逐日观察微生物的生长情况，并结合阳性和阴性对照试验的结果 ，判断供试品是否被微生物污染，从而判断供试品是否合格。
• 无菌检査法一般包括薄膜过滤法和直接接种法。前者适用于有抗菌作用 或大容量的供试品如抗生素青霉素钠注射液和5%葡萄糖注射液(500ml)， 后者适用于小容量非抗菌作用的供试品如维生素B12注射液(1ml)。
• 无菌检查应在环境洁净度B级和局部洁净度A级的单向流空气区域內或隔 离系统中进行，其全过程应严格遵守无菌操作，防止微生物污染。单向 流空气区、工作台面及环境应定期按现行国家标准进行洁净度验证。
• 1.5无菌检查一般步骤 • (1)玻璃仪器的洗涤、干燥、包扎、灭菌。 • (2)培养基的制备及适应性检查 • (3)无菌检查环境的测定。 • (4)菌悬液的制备。 • (5)检查方法验证。 • (6)样品的无菌检查。 • (7)报告检查结果。
• 1.3无菌检查的范围 • 凡进入人体无菌部位(人体的血液循环系统、肌肉、皮下组织)或接触创
伤、溃疡面等部位而发生作用的制品或要求无菌的材料、无菌器具均应 进行无菌检查。对于规定灭菌的药物，包括注射剂及用于体腔、严重烧 伤、溃疡及眼科用药等，必须严格无菌，即在规定检验量的供检品中不 得检出活微生物。
无菌检验标准操作规程(最全)
无菌检验标准操作规程一、目的无菌检验是指检查经灭菌方法处理后的医疗器械(具)、植入物品、敷料等是否达到无菌标准的一种方法。
临床部门不应常规进行无菌检验，如有需要，可联系当地疾病预防控制中心派专人来采样检测。
二、试验前准备1．无菌检验应在洁净度为100级以上的洁净实验室内实施，并证实该实验室各项指标符合GB50073—2001《洁净厂房设计规范》、GB／T16292～16294—1996《医药工业洁净室(区)悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》等相关要求，且在有效期范围之内。
2．按卫生部《消毒技术规范》(2002年版)制备无菌检验用洗脱液、需氧一厌氧培养基与真菌培养基(见附)。
3．在无菌检验前三日，分别在需氧一厌氧培养基与真菌培养基内各接种1ml洗脱液，分别置30～35℃与20～25℃：培养72h，应无菌生长。
4．阳性对照管菌液制备：(1)在检验前一天取金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]的普通琼脂斜面新鲜培养物，接种一环至需氧一厌氧培养基内，在30～35℃培养16～18h 后，用0．9％无菌氯化钠溶液稀释至10～100cfu／ml(可通过比浊法或稀释后用1m1接种平板来确认)。
(2)取生孢梭菌[CMCC(B)64941]的需氧菌、厌氧菌培养基新鲜培养物一接种环种于相同培养基内，于30～35℃培养18～24h后，用0.85％无菌氯化钠溶液稀释至10～100cfu／ml。
(3)取白念珠菌[CMCC(F)98001]真菌琼脂培养基斜面新鲜培养物一接种环种于相同培养基内，于20～25℃培养24h后，用0．85％无菌氯化钠溶液稀释至10～100cfu／ml。
三、样本制备根据检样的类型与大小，以及带孔(腔)与否，可以按照以下不同的方法进行制备。
1．敷料类等非管道类样品：取2个包装内的样本，剪成约10mm×30mm 大小的样片21片，接种需氧一厌氧菌培养管5管与真菌培养管2管。
每培养管含培养基40m1，各接种3片样片。
无菌检查法及其验证
※其中硫乙醇酸盐及改良马丁培养基都有 1支不接种作为空白 ※接种量 ＜100cfu（不能多）
无菌检查法及其验证
第14页
培养基适用性检验
⑤结果判断 空白对照应无菌生长, 若加菌培养基管均
生长良好, 判该培养基灵敏度检验符合要 求。 试验同时应做空白对照
无菌检查法及其验证
第15页
培养基说明
无菌检验培养基所能支持生长微生物是有 限。
无菌检验法概念
• 无菌检验是经过目检微生物在培养基中 生长来判断结果。
• 无菌检验只能给出该批产品受污染程度。 • 无菌检验合格只能说明被测样品无菌，
不能证实整批样品无菌。
无菌检查法及其验证
第1页
无菌检验设施、环境、人员
• 检验环境应在洁净度10000级下局部洁 净度100级单项流空气区域内或隔离系 统中进行, 其全过程必须严格恪守无菌操 作。
无菌检查法及其验证
第8页
培养基储存
• 制备好培养基应该保留在2-25℃、避光环 境, 若保留于非密闭容器中, 普通在3周内使 用；若保留于密闭容器中, 普通可在1年内 使用。
• ※应结合实际情况进行验证, 以确定培养基 使用期。
无菌检查法及其验证
第9页
培养基适用性检验
本检验可在供试品无菌检验前或与供试品 无菌检验同时进行。
液冲洗滤膜, 冲洗次数不得少于三次。 冲洗后, 如用封闭式薄膜过滤器, 分别将100ml硫
乙醇酸盐流体培养基及改良马丁培养基加入对应 滤筒内。 假如采取普通薄膜过滤器, 取出滤膜, 将其剪成3等 份, 分别置于含50ml硫乙醇酸盐流体培养基及改 良马丁培养基容器中, 其中一份做阳性对照用。
无菌检查法及其验证
• 隔离系统按相关要求进行验证, 其内部环 境洁净度须符合无菌检验要求。
无菌检验操作规程
无菌检验操作规程无菌检验操作规程一、目的和适用范围为了保证实验室无菌检验的准确性和可靠性，规范无菌检验操作，并确保实验室工作人员的安全和健康，特制定本操作规程。
本操作规程适用于实验室进行无菌检验的所有工作，包括培养基制备、无菌器具处理、样品采集和处理、培养方法等方面。
二、基本要求1. 实验室应具备无菌检验所必需的设施和设备，并保持良好的清洁卫生环境。
2. 实验室工作人员应严格按照操作规程进行操作，并保持良好的个人卫生习惯。
3. 实验室应保证培养基的质量，确保无菌性和适用性。
4. 实验室应建立必要的记录和档案，对无菌检验的结果进行及时记录和分析。
三、无菌器具处理1. 确保无菌器具的质量，每批次器具在使用前应进行质量检验。
2. 器具的清洗和消毒应在专门的消毒台上进行，使用无菌的工具和材料。
3. 清洗器具时应使用无菌特效洗涤剂，并充分冲洗干净。
消毒时应使用适当浓度的消毒剂，消毒时间应符合标准要求。
4. 清洗后的器具应存放在无菌柜或密封的袋子中，以防再次污染。
四、样品采集和处理1. 采集样品前，要对采样器具进行清洁和消毒处理，并使用无菌容器保存样品。
2. 采样时要保持无菌采样器具的封闭性，避免外界环境的污染。
3. 对于液体样品，应在无菌操作台上进行，严禁倒杯操作。
对于固体样品，应在无菌条件下处理。
4. 样品采集完成后，应及时将采样器具和容器送到实验室，并妥善保存，以防止再次污染。
五、培养基制备1. 制备培养基的操作应在无菌操作台上进行，工作台面应经过清洁和消毒处理。
2. 使用的培养基应经过质量检验，确保无菌性和适用性。
3. 制备培养基时，要注意保持操作的无菌性，避免污染。
4. 制备完成的培养基应标明名称、批号和有效期，并妥善保存，避免污染和变质。
六、培养方法1. 培养前要将培养基及所需器具放置在无菌操作台上，以使其达到与环境相同的温度。
2. 培养时要保持培养器具的密封性，避免外界空气和微生物的污染。
3. 培养容器的开启和关闭要快速，并尽量避免与空气接触时间过长。
医疗器械无菌检验
医疗器械无菌检验无菌检验是医疗器械质量检验中的重要环节，旨在保证医疗器械在使用过程中没有细菌或其他微生物污染，以降低感染的风险。
本文将从无菌检验的定义、检验方法和检验标准等方面介绍医疗器械无菌检验的相关知识。
一、无菌检验的定义无菌检验是通过一系列实验方法和对医疗器械进行质量评定的过程，用以确认器械能否达到一定的无菌状态。
无菌状态是指器械在使用过程中没有细菌、真菌、病毒或其他寄生虫等微生物的污染。
二、无菌检验的方法常见的无菌检验方法包括菌落总数检验、微生物限度试验和生物指示物检验。
1. 菌落总数检验菌落总数检验是通过在含营养物质的培养基上培养菌落，并计算菌落的数量来评估医疗器械的无菌状态。
常用的培养基有营养琼脂培养基和加入抑菌剂的营养琼脂培养基。
菌落总数的限度标准根据具体的器械和使用环境的要求而不同。
2. 微生物限度试验微生物限度试验旨在评估医疗器械中特定微生物的污染情况。
根据器械的特点和使用要求，可以选择进行不同的微生物限度试验，例如大肠菌群、金黄色葡萄球菌等。
试验方法一般采用培养方法和定量方法。
3. 生物指示物检验生物指示物检验是通过使用已知数量的高度耐热的生物指示物，如枯草杆菌孢子，来评估医疗器械的无菌状态。
将生物指示物置于器械的内部或表面，经一定条件处理后，通过监测生物指示物生长情况来判断是否满足无菌标准。
三、无菌检验的标准医疗器械无菌检验的标准一般由国家卫生与计划生育委员会和相关行业标准制定机构制定。
对于不同的医疗器械，一般会根据其使用环境、材料特性和功能等因素制定不同的无菌检验标准。
常见的无菌检验标准包括国家标准、行业标准以及国际标准，如GB19082-2009《医用防护服的无菌要求》和ISO 11137《辐射灭菌》等。
四、无菌检验的重要性无菌检验在医疗器械质量控制中起到至关重要的作用。
医疗器械在手术、检验和治疗等过程中接触人体的内腔和外表面，如存在细菌等微生物的污染，将会增加感染的风险，导致患者健康受损甚至致命。
产品无菌检验操作规程
产品无菌检验操作规程一、引言无菌检验是产品质量控制中一项重要的程序。
本操作规程旨在规范无菌检验的操作步骤，确保产品达到无菌检验标准，保证产品质量和安全性。
二、检验前准备1. 检验员应按照要求穿戴无菌工作服，并佩戴口罩、手套和帽子等相关防护装备。
2. 准备好检验所需的器械和试剂，包括培养基、试管、针头、培养皿等。
3. 确保工作区域的清洁和无菌，使用消毒剂对操作台面进行消毒。
4. 检验前应对培养基和试剂进行严格的质量控制，确保其无菌性。
三、样品准备1. 根据产品特性和规定要求，选择合适的样品量，并在符合无菌操作条件下进行取样。
2. 将样品转移到无菌试管或培养皿中，避免污染。
3. 特殊产品的样品准备应根据产品特性和相应的要求进行试验。
四、培养基接种1. 使用无菌针头，将样品均匀接种于含有培养基的培养皿中。
2. 对于液体产品，将样品转移到含有培养基的试管中，并确保样品和培养基充分混合。
3. 确保培养基接种过程中无空气污染，避免培养皿或试管周围的细菌进入培养基。
五、培养条件控制1. 根据产品特性和试验要求，选择适宜的培养温度和时间，并进行相应的标注。
2. 确保培养过程中温度的稳定性和恒定性，避免对微生物生长产生影响。
3. 需要进行气体环境控制的试验，应在无菌条件下进行，并根据要求调节相应的气体浓度和流速。
4. 在培养过程中需注意观察培养皿或试管的状态，及时记录培养结果。
六、检验结果判读1. 在规定的培养时间后，检查培养皿或试管中是否有细菌菌落的形成。
2. 对于有细菌菌落形成的培养皿或试管，使用显微镜进行观察，确定是否有可疑细菌。
3. 对于液体产品，进行相关的物理化学指标测定，确定是否符合质量标准。
4. 根据样品的培养结果和其他相关数据，判断产品是否符合无菌要求。
七、记录和报告1. 检验员应及时记录无菌检验的操作步骤和检验结果，确保数据的准确性和可追溯性。
2. 写明样品的标识、培养温度和时间等相关信息。
3. 对于不合格的样品，应及时通知相关部门，并进行相应的处理。
医疗器械产品无菌检验操作规程
医疗器械产品无菌检验操作规程随着医疗技术的不断发展，医疗器械在诊疗中的作用越来越重要。
在医疗器械的生产过程中，无菌是一个非常重要的环节。
本文将介绍医疗器械产品无菌检验的操作规程，以确保医疗器械的安全和可靠性。
一、无菌检验的重要性医疗器械在使用过程中与人体直接接触，如不具备无菌性，会引起严重的感染问题。
因此，无菌检验是确保医疗器械产品质量的重要环节。
只有通过无菌检验，才能保证医疗器械的无菌性，从而有效地减少感染的风险。
二、无菌检验操作规程（一）准备工作1. 确保检验环境的洁净度：无菌检验需要在无菌条件下进行，因此应确保检验环境的洁净度。
工作区域应进行深度清洁，并使用有效的空气过滤系统和洁净工作台。
2. 准备必要的无菌材料：无菌检验操作所需的材料包括无菌培养基、培养皿、观察镜等。
这些材料应该在使用前进行无菌处理，并且要保持密封。
3. 检查设备和工具的完好性：确保所使用的设备和工具没有损坏或者污染。
损坏或污染的设备和工具可能影响无菌检验的准确性和有效性。
（二）无菌检验操作步骤1. 样品采集：根据具体要求，采集待检样品。
样品采集应在无菌条件下进行，以避免外界污染。
2. 样品处理：将样品置于无菌室内进行处理。
首先，应对样品外表进行目测观察，排除明显可见的外部污染。
然后，将样品放入无菌培养皿中，采用湿敷法、浸润法等方法进行培养基的接种。
3. 培养：将培养皿放入恒温培养箱中，设置适当的温度和培养时间。
在培养过程中，需要定期观察培养皿内的情况。
4. 结果判断：根据培养结果，判断样品是否具备无菌性。
常见的无菌检验结果包括阳性、阴性和疑似阳性。
阳性结果表示样品中存在微生物生长，即不符合无菌要求；阴性结果表示样品无细菌生长，满足无菌要求；疑似阳性结果需要进行进一步的确认和处理。
5. 结果记录和报告：将检验结果进行详细记录，并根据需要制作无菌检验报告。
报告中应包括样品标识、检验结果、检验日期等信息，以便后续跟踪和管理。
4无菌检验方法验证
YOUR SITE HERE
LOGO
无菌检验方法验证
1.ONE
开展验证的思路和程序
首先了解供试品是否具有抑菌性，抑什么菌
2.TWO
考虑和选择出适当的方法已消除或减低供试品的抑菌性
3.three 4.four
用实验证明你所用的方法已消除抑菌性——能使人工加 入的各种菌生长良好。
将所作实验记录在案——即为确认该供试品在该检验量
条件 无菌检查应在环境洁净度10000级下的局部洁净 度100级的单向流空气区域内或隔离系统中进行， 其全过程应严格遵守无菌操作，防止微生物污 染，防止污染的措施不得影响供试品中微生物 的检出。
YOUR SITE HERE
LOGO
无菌检验方法验证
方法验证试验 当建立产品的无菌检查方法时，应进行
六、验证结论。
七、【检查】项下【无菌】或【微生物限度】具体方法确定。
八、实验员签名、验证报告批准人签名。
YOUR SITE HERE
LOGO
无菌检验阳性结果调查
无菌检查试验所用的设备及环境的微生物监控结果 不符合无菌检查法要求
回顾无菌测试过程，发现有可能引起微生物污染的 因素
阴性对照有菌生长
稀释：—— 验证降低供试品相对抑菌浓度的有效稀释 倍数。
离心：—— 验证所用转速、时间和微生物的分YO布UR情SIT况E H。ERE
LOGO
3、确定供试品是否有抑菌性、抑什么菌 方法一： 可通过查阅临床药物实验手册、文献资料 （特别是杂志“Drug”，每一种新药上市，都有专 门的综述）、申报资料中的药效学资料，关注其对不 同细菌的MIC情况、参考已经验证过的品种、抗菌 药物可根据抗菌谱确定其敏感菌、中成药如果抗菌谱 不清楚，至少需选择一株细菌和一株真菌来试验等方 法。也可直接通过验证实验确定之。