微生物的代谢及其调控

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第五章 微生物工程的代谢调节和代谢工程

第五章 微生物工程的代谢调节和代谢工程

二、酶活性的调节
代谢调节是指在代谢途径水平上酶活性 和酶合成的调节。 酶活性调节: 激活剂→酶激活作用; 抑制剂→酶抑制作用; 可以是外源物,也可是自身代谢物。
1、酶激活作用与抑制作用
微生物代谢中,普遍存在酶既有激活作 用又有抑制作用的现象。 如:天门冬氨酸转氨甲酰酶受ATP激活, 受CTP抑制(终产物)。 大肠杆菌糖代谢过程中,许多酶都有 激活剂和抑制剂(表5-1)。共同控制糖 代谢。
酶的共价修饰。
生产目的:高浓度地积累人们所期望的产物。 办法:①育种,得到根本改变代谢的基因突变株;
②控制微生物培养条件,影响其代谢过程。 代谢工程:利用基因工程技术,扩展和构建、连接,形 成新的代谢流。(也称途径工程)
一、微生物的代谢类型和自我调节
1.代谢类型:分解代谢和合成代谢。 相互关联,相互制约。 细胞优先合成异化可维持更快生长的化合物 的酶。利用完后,再合成下一个酶。 2.微生物自我调节部位: ①细胞膜的屏障作用(多数亲水分子)和通道; ②控制通量,调节酶量和改变酶分子活性; ③限制基质的有形接近,可存在于不同细胞 器各个代谢库中,其酶量差别大。
价连接物(腺苷酰基)。
五、能荷调节
细胞的能荷计算式:
[ATP]+1/2[ADP] 能荷=—————————— [ATP]+ [ADP]+[AMP]
能荷高时,ATP的酶合成系统受抑制, ATP消耗酶系统被活化。 呈抑制与活化的中间状态的能荷大约是 0.85,此时两种酶系统达到平衡。
六、代谢调控
根据代谢调节理论,通过改变发酵工艺条 件(温度、PH、风量、培养基组成)和菌 种遗传特性,达到改变菌体内的代谢平 衡,过量产生所需产物的目的。 1.发酵条件的控制 2.改变细胞透性 3.菌种遗传特性的改变

微生物的代谢可以通过什么方式调节

微生物的代谢可以通过什么方式调节

微生物的代谢可以通过什么方式调节引言:微生物是一类微小的生物体,包括细菌、真菌、病毒等。

微生物的代谢是指微生物体内化学过程的总和,包括营养物质的摄取、分解、合成和转化等。

微生物的代谢方式的调节对于微生物的生长、繁殖以及产生有用的代谢产物具有重要意义。

本文将介绍微生物代谢调节的几种方式。

概述:微生物的代谢调节可以通过包括基因表达调控、信号传导、环境响应、代谢产物反馈调控以及细胞内能量平衡等多种方式来实现。

这些调控方式可以使微生物根据外界环境的变化,调整代谢途径,以适应不同的生存条件。

正文:一、基因表达调控1. 转录调控:微生物的代谢调节最基本的方式是通过转录调控。

微生物通过启动子区域的结构特征和转录因子的结合来调控基因的转录,从而调节酶的合成。

例如,当微生物需要产生某种特定酶时,相关的转录因子被激活并与启动子结合,启动基因的转录。

2. 翻译调控:除了通过转录调控来调节基因的表达外,微生物还可以通过翻译调控来影响蛋白质的合成水平。

这可以通过调控转录后修饰、mRNA稳定性和翻译效率等途径实现。

二、信号传导1. 孤立态信号传导:微生物可以通过发送和接收特定的信号分子来进行细胞间的通信。

这些信号分子可以是激素、激活因子或抑制因子等,它们通过特定的信号传导通路传递信号,从而调节代谢途径的活性。

2. 确定信号:微生物还可以通过环境感知来进行代谢调节。

例如,当微生物感知到特定的环境因素,如温度、pH值、氧气浓度等发生变化时,它们可以通过转导途径来调整代谢途径以适应外界环境的改变。

三、环境响应1. 高温应激响应:高温是微生物生长和代谢的重要限制因素之一。

为了适应高温环境,微生物可以通过调节热休克蛋白表达、膜脂组分改变以及调节酶的热稳定性等途径来进行代谢调节。

2. 氧气响应:氧气是微生物代谢的重要底物和能量供应者。

微生物可以通过调节酶的氧气需求以及调整氧气通透性等途径来适应不同氧气浓度的环境。

四、代谢产物反馈调控1. 酶的反馈抑制:微生物的代谢途径中,常常存在着反馈抑制机制。

微生物的代谢途径和调控机制

微生物的代谢途径和调控机制

微生物的代谢途径和调控机制微生物是一种非常常见而又重要的生物,它们在生态系统中有着重要的作用。

微生物的代谢途径和调控机制是微生物研究中不可忽视的一部分。

本文将从微生物的代谢途径和调控机制两个方面展开论述。

微生物的代谢途径微生物的代谢途径是指微生物在自身体内进行能量代谢的一系列反应,包括有氧呼吸、厌氧呼吸和发酵等。

其中,有氧呼吸是指微生物利用氧气作为终端电子受体,将有机物完全氧化成为二氧化碳和水,并产生能量。

厌氧呼吸则是指微生物在氧气不足的条件下,利用其他物质作为电子受体,将有机物部分氧化,并产生能量。

而发酵则是指微生物在氧气缺乏时,将有机物在不需要外部电子受体的条件下,分解成酸、醇和气体等产物,并产生能量。

微生物的代谢途径对于微生物的生存和繁殖有着至关重要的作用。

不同的微生物对于不同种类物质的代谢能力不同,这也是微生物能够适应不同环境的原因之一。

例如,某些微生物能够代谢硫、铁等金属离子,从而在海洋底部形成硫化物流,而某些细菌则能够将氮气转化为氨,提供生态系统的必需氮源。

微生物的调控机制微生物的代谢途径需要受到调控才能保证生命过程的正常。

微生物的调控机制包括转录调控、翻译调控和代谢调控等。

其中,转录调控是指微生物可以通过正反馈和负反馈机制,调控基因的表达量。

翻译调控则是指微生物可以通过启动子和转录因子等控制RNA的合成和mRNA的稳定性,影响蛋白质的表达量。

而代谢调控则是指微生物通过代谢产物的反馈和前体物的调节,调控酶的活性和基因表达,从而控制代谢途径的进行。

微生物的调控机制不仅对维持其生命活动有着重要的作用,同时也对于人类的健康有着深远的影响。

以大肠杆菌为例,它是肠道中普遍存在的微生物,当体内钙浓度过低时,大肠杆菌就会通过感应系统调控Calcium Transporter (CaT)的表达量,从而增加体内钙的吸收,保证人体的健康。

总结微生物的代谢途径和调控机制是微生物研究中的重要内容。

通过对微生物的代谢途径和调控机制的研究,不仅可以更好地了解微生物对环境的适应性和生命活动的本质,同时也可以为生物技术和人类健康等方面提供有益的参考和支持。

生产菌种的选育培养—微生物的代谢及调控

生产菌种的选育培养—微生物的代谢及调控

• 次级代谢:
微生物在一定的生 长时期,以初级代谢产 物为前体,合成一些对 微生物的生命活动无明 显确切功能的物质的过 程(可有可无)。
• 次级代谢产物:
抗生素、生长刺激素、 生物碱、色素等
(一)初级代谢和初级代谢产物
分解代谢体系(蛋白质、糖等降解)
初级代谢
素材性生物合成体系 (合成小分子材料)
结构性生物合成体系(与分解代谢体系相反)
第一节 微生物的代谢调控
学习目的:
了解微生物的代谢及调控机理,理解代谢调控在菌种选育 中的重要性。
一、微生物的初级代谢与次级代谢
• 初级代谢: 微生物从外界吸收各
种营养物质,通过分解代 谢和合成代谢,生成维持 生命活动的物质和能量的 过程(必不可少)。
• 初级代谢产物: 包括所有与细胞合成
有关的物质如:氨基酸、 核苷酸、乙醇、有机酸、 酶。
●初级代谢是次级代谢的基础。 ●次级代谢可以避免初级代谢产物过量积累对细胞造成伤害。 ●即使次级代谢途径被阻断,也不会影响到菌体的生长繁殖。 ●两者均受到微生物的代谢调节
二、微生物代谢的调节和控制
微生物细胞有着一整套可塑性极强和极精确的代谢调节系统,以确保上千 种酶能准确无误、有条不紊和高度协调地进行极其复杂的新陈代谢反应。
初级代谢产物主要是在菌体生长期所产生的产物
(二)次级代谢和次级代谢产物
次级代谢是相对于初级代谢而提出的一个概念。 原料来源:初级代谢的产物为前体。 次级代谢产物大多为分子结构较为复杂的化合物。 质粒与次级代谢关系紧密。
次级代谢产物主要是在菌体生长后期或稳定期所产生的产物
(三) 初级代谢与次级代谢之间的关系
• 酶合成调节(酶数量)
激活 (变构、化学修饰) 抑制

微生物代谢的调节和机制

微生物代谢的调节和机制

微生物代谢的调节和机制微生物是生态系统中不可或缺的一部分,其代谢作用对生态系统的稳定和功能具有重要的影响。

微生物代谢的调节和机制是研究微生物生理生态的重要课题之一。

在本文中,我们将介绍微生物代谢的调节和机制的基本概念和最新研究进展。

一、微生物代谢的基本概念微生物代谢是生物化学过程中,利用有机或无机物质产生能量和产物的过程。

微生物代谢主要包括两个方面:有氧代谢和厌氧代谢。

有氧代谢是指微生物在氧气的存在下进行代谢,利用氧气作为电子受体,通过氧化还原反应分解有机物质,同时产生ATP(三磷酸腺苷)、二氧化碳和水。

常见的有氧代谢途径有三种:糖酵解、柠檬酸循环和呼吸链。

其中,糖酵解是最常见和最基本的有氧代谢途径,从葡萄糖开始,通过一系列反应,最终产生ATP和乳酸、酒精等产物。

厌氧代谢是指微生物在缺乏氧气条件下进行代谢,直接利用有机物质产生能量和产物。

厌氧代谢不需要氧气作为电子受体,经过不同的途径进行代谢,产生的产物也不同。

其中最常见的厌氧代谢途径包括乳酸发酵、酒精发酵、醋酸发酵等。

二、微生物代谢的调节微生物所处的环境是一个复杂的生态系统,微生物的代谢受到多种生物和非生物因素的调节和限制。

微生物代谢的调节主要包括以下几个方面:1. 底物促进或抑制微生物的代谢需要能量和底物,底物在一定程度上可以影响微生物的代谢速率和代谢产物。

底物的促进和抑制作用与微生物代谢路径的不同而异。

例如,乙酰辅酶A是柠檬酸循环的重要底物,而且可以在某些菌株中通过自我诱导提高柠檬酸循环的速率和产氢量。

另一方面,糖类和蛋白质的浓度过高时,会抑制糖酵解途径的进行。

2. pH 值的影响菌株所处环境的pH 值是微生物代谢的重要控制因素之一。

pH值对酶催化作用的影响可以影响代谢途径和代谢速率。

通常来讲,pH值在4-10范围内是适宜微生物生长的,但是不同的菌株对 pH值要求不同,例如有些产酸菌需要较低的pH值才能正常生长代谢。

3. 温度的影响微生物的代谢速率和代谢产物也受到环境温度的影响,不同的微生物对温度要求不同。

微生物代谢通路的分析与调控

微生物代谢通路的分析与调控

微生物代谢通路的分析与调控随着基因测序技术的不断提高和发展,对微生物代谢通路的分析和调控也变得越来越重要。

微生物代谢通路是生物合成和分解物质的关键过程,研究微生物代谢通路的分析和调控可以为制药、工业发酵等领域提供基础支撑。

本文将深入探讨微生物代谢通路的分析与调控问题。

1. 微生物代谢通路的分类微生物代谢通路按其反应类型可以分为两类:合成代谢通路和分解代谢通路。

合成代谢通路是合成生命所需的原始物质,例如蛋白质、核酸、脂肪等。

分解代谢通路是分解生物体内的有机物,例如糖类、蛋白质、脂肪等。

我们将以糖类代谢通路为例,介绍微生物代谢通路的分析和调控。

2. 糖类代谢通路的分析方法糖类代谢通路主要涉及到糖酵解和异糖酵解,两者都能将葡萄糖转化成能量。

一般来说,糖酵解是细胞内的主要源,异糖酵解则是一些微生物特定的代谢途径。

糖类代谢通路的分析可以采用生化分析、基因测序、代谢组学等方法。

其中,代谢组学是近年来逐渐兴起的一种方法,其通过定量分析代谢物、中间物、酶和蛋白质水平,揭示微生物生长过程中的变化。

3. 糖类代谢通路的调控方法在微生物代谢通路中,两个主要的调节机制是酶的调节和基因的调节。

酶的调节主要通过反馈抑制和激活酶来实现的,而基因调节则是通过启动子等元件控制基因表达。

在糖类代谢通路中,常见的调控方式有两种:Cra蛋白质和PTS系统。

Cra蛋白质是糖类代谢中的主要调控机制之一。

它是一种全局调控蛋白质,可以通过调节酶的合成和分解来控制代谢通路。

PTS系统是另一种常见的调控机制。

它由两个组分组成:磷转移酶和磷转移底物。

PTS系统参与糖类合成的代谢通路,可以直接调节代谢通路的酶活性,从而控制能源产品的产生。

4. 微生物代谢通路的应用微生物代谢通路的分析和调控在制药、工业发酵等领域具有重要的应用价值。

在制药领域,代谢途径的调控可以通过基因工程技术来实现,从而生产具有理想效果的药物。

在工业发酵中,代谢途径的调控可以有效提高产率,改善产品质量,从而为工业生产带来巨大的经济效益。

微生物代谢调节和代谢工程

微生物代谢调节和代谢工程

代谢工程的应用实例
总结词
代谢工程的应用实例包括生产抗生素、生物燃料、食 品添加剂等。例如,通过代谢工程手段提高酵母菌生 产乙醇的能力,提高青霉素的生产效率等。
详细描述
代谢工程在工业生产中有着广泛的应用,例如在制药 行业中,通过代谢工程可以生产抗生素、激素等生物 药物。在燃料行业,可以通过代谢工程手段改良微生 物,使其能够生产生物燃料,如乙醇、丁醇等。此外 ,在食品加工业中,代谢工程也用于生产食品添加剂 、香精、色素等。这些应用实例证明了代谢工程在提 高微生物代谢效率、优化生物产品产量和性质方面具 有巨大的潜力。
微生物发酵过程的挑战和机遇
发酵过程优化
针对微生物发酵过程进行优化,提高发酵效率和 产物产量。
新型发酵技术
开发新型的发酵技术,如无细胞发酵、光合发酵 等,实现更高效、环保的微生物发酵生产。
ABCD
基因组编辑技术
利用基因组编辑技术,对微生物进行精确的基因 修饰和改造,提高其发酵性能。
生物基产品的开发
利用代谢工程技术,开发具有广泛应用价值的生 物基产品,如生物燃料、生物塑料等。
要的地位,并广泛参与了地球生物地球 题和推动工业生产等方面都具有重要的
化学循环。
意义。
微生物基因组学的研究方法
基因组测序
通过全基因组测序技术,获取微生物 的基因组序列信息,是研究微生物基 因组学的基础。
基因组组装
将测序得到的序列数据进行组装,形 成完整的基因组序列,是基因组学研 究的重要步骤。
基因注释
微生物代谢调节在工业生物技术、生物医药、环境保护等领域具有广泛的应用价值,如提高微生物产物 的产量、降低生产成本、优化微生物处理污染物的能力等。
微生物代谢调节的机制

微生物代谢及调控

微生物代谢及调控

目录1.绪论 (2)1.1.微生物的代谢 (2)1.2.微生物代谢的调节 (2)2.微生物的初级代谢 (2)2.1.能量代谢 (2)2.1.1.能量代谢的载体ATP (2)2.1.2.ATP的代谢方式 (2)2.2.分解代谢 (3)2.2.1.糖的代谢 (3)2.2.2.脂肪和脂肪酸的代谢 (3)2.2.3.氨基酸的代谢 (4)2.2.4.核酸的代谢 (4)2.3.合成代谢 (4)2.3.1.糖类的合成 (4)2.3.2.脂类的合成 (5)2.3.3.氨基酸的合成 (5)2.3.4.蛋白质的合成 (6)2.3.5.核苷酸与核酸的合成 (7)3.微生物的次级代谢 (7)3.1.次级代谢概述 (7)3.2.次级代谢的意义 (8)3.3.次级代谢的生物合成 (8)3.4.次级代谢的特点 (8)4.微生物代谢的调节 (9)4.1.代谢调节的部位 (9)4.1.1.原核微生物细胞的代谢调节部位 (9)4.1.2.真核微生物细胞的代谢调节部位 (9)4.2.代谢调节的方式 (9)4.3.酶活性的调节 (9)4.3.1.酶活性调节的调节机制 (9)4.3.2.前馈与反馈 (10)4.3.3.反馈抑制 (10)4.4.酶合成的调节 (10)4.4.1.酶合成的诱导 (10)4.4.2.酶合成的阻遏 (10)4.4.3.酶合成诱导和阻遏的机制 (10)5.总结 (11)微生物代谢及其调节1.绪论1.1.微生物的代谢微生物代谢包括在微生物细胞中进行的所有生物化学反应的总和。

在代谢过程中,凡是能释放能量的物质分解过程称为分解代谢;吸收能量的物质合成过程称为合成代谢,因其导致新物质的生化合成也称为生物合成。

通过代谢,细胞吸收营养物质,并把它们转化为细胞成分,同时将废物排泄到体外。

无论是分解代谢还是合成代谢,代谢途径都是由一系列连续的酶促反应构成,其前一步反应的产物是后续反应的底物。

细胞通过各种方式有效的调节相关的酶促反应来保证整个代谢途径的协调性与完整性,从而使微生物细胞的生命活动的以正常进行。

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微生物的代谢及其调控1微生物的代谢微生物代谢包括微生物物质代谢和能量代谢。

1.1微生物物质代谢微生物物质代谢是指发生在微生物活细胞中的各种分解代谢与合成代谢的总和。

1.1.1分解代谢分解代谢是指细胞将大分子物质降解成小分子物质,并在这个过程中产生能量。

—般可将分解代谢分为TP。

三个阶段:第一阶段是将蛋白质、多糖及脂类等大分子营养物质降解成氨基酸、单糖及脂肪酸等小分子物质;第二阶段是将第一阶段产物进一步降解成更为简单的乙酰辅酶A、丙酮酸以及能进入三羧酸循环的某些中间产物,在这个阶段会产生一些ATP、NADH及FADH2;第三阶段是通过三羧酸循环将第二阶段产物完全降解生成CO2,并产生ATP、NADH 及FADH2。

第二和第三阶段产生的ATP、NADH及FADH2通过电子传递链被氧化,可产生大量的ATP。

1.1.1.1大分子有机物的分解(1)淀粉的分解淀粉是许多种微生物用作碳源的原料。

它是葡萄糖的多聚物,有直链淀粉和支链淀粉之分。

一般天然淀粉中,直链淀粉约占20%,支链淀粉约占80%。

直链淀粉为α一l、4糖苷键组成的直链分子;支链淀粉只是在支点处由α—1、6糖苷键连接而成。

微生物对淀粉的分解是由微生物分泌的淀粉酶催化进行的。

淀粉酶是一类水解淀粉糖苷键酶的总称。

它的种类很多,作用方式及产物也不尽相同,主要有液化型淀粉酶、糖化型淀粉酶(包括β—淀粉酶、糖化酶、异淀粉酶)。

以液化型淀粉酶为例,这种酶可以任意分解淀粉的。

α-l、4糖苷键,而不能分解α-1、6糖苷键。

淀粉经该酶作用以后,黏度很快下降,液化后变为糊精,最终产物为糊精、麦芽糖和少量葡萄糖。

由于这种酶能使淀粉表现为液化,淀粉黏度急速下降,故称液化淀粉酶;又由于生成的麦芽糖在光学上是α型,所以又称为“α—淀粉酶。

(2)纤维素的分解纤维素是葡萄糖由β—1,4糖苷键组成的大分子化合物。

它广泛存在于自然界,是植物细胞壁的主要组成成分。

人和大部分动物均不能消化纤维素。

但是很多微生物,如木霉、青霉、某些放线茵和细菌均能分解利用纤维素,原因是它们能产生纤维素酶。

纤维素酶是一类纤维素水解酶的总称。

它由C1酶、Cx 酶和β-葡萄糖苷酶组成。

纤维素在C1酶和Cx酶共同作用下,被水解成纤维二糖,再经过β—葡萄糖苷酶作用,最终变为葡萄糖。

(3)蛋白质的分解蛋白质是由氨基酸组成的分子巨大、结构复杂的化合物。

它们不能直接进入细胞。

微生物利用蛋白质,首先分泌蛋白酶至体外,将蛋白质分解为大小不等的多肽或氨基酸等小分子化合物,然后再进入细胞。

蛋白质的分类蛋白酶的种类很多,有100多种。

目前比较常用的蛋白酶分类方法有以下几种:①按照水解蛋白质的方式,可分为内肽酶和端肽酶两大类。

②按照蛋白酶的来源,可分为动物蛋白酶、植物蛋白酶和微生物蛋白酶。

③按照蛋白酶在生物体内所在的位置,可分为胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶等。

④按照蛋白酶作用的最适pH,可分为酸性蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶。

⑤根据蛋白酶的活性中心和最适作用pH,可分为丝氨酸蛋白酶、巯基蛋白酶、金属蛋白酶和酸性蛋白酶。

产生蛋白酶的菌种很多,细菌、放线菌、霉菌等均有。

不同的菌种可以生产不同的蛋白酶,如黑曲留主要生产酸性蛋白酶,短小芽孢杆菌生产碱性蛋白酶。

不同的菌种也可生产功能相同的蛋白酶,同一个菌种也可产生多种性质不同的蛋白酶。

(4)氨基酸的分解微生物对氨基酸的分解,主要是脱氨作用和脱羧基作用。

a.脱氨作用脱氨方式随微生物种类、氨基酸种类以及环境条件的不同而不同。

①氧化脱氨:这种脱氨方式须存有氧气参加的条件下进行,专性厌氧菌不能进行氧化脱氨。

微生物催化氧化脱氨的酶有两类:一类是氨基酸氧化酶,以FAD 或FMN为辅基;另一类是氨基酸脱氢酶,以NAD或NADP作为氢载体。

氧化脱氨生成的酮酸一般不积累,而被微生物继续转化成羟酸或醇,如丙氨酸氧化脱氨生成丙酮酸,丙酮酸可借TCA循环而继续氧化,化学反应式如下:②还原脱氨:还原脱氨在无氧条件下进行,生成饱和脂肪酸。

能进行还原脱氨的微生物是专性厌氧菌和兼性厌氧菌。

腐败的蛋白质中常分离到饱和脂肪酸便是由相应的氨基酸生成,如梭状芽抱杆菌可使丙氨酸还原脱氨成丙酸,化学反应式如下:③水解脱氨:不同氨基酸经水解脱氨生成不同的产物。

同种氨基酸水解之后也可形成不同的产物氨酸水解之后可形成乳酸,也可形成乙醇,化学反应式如下:④减饱和脱氨:氨基酸在脱氨的同时,其α、β键减饱和,结果生成不饱和酸,如天冬氨酸减饱和脱氨生成延胡素酸。

⑤脱水脱氨:含羟基的氨基酸在脱水过程中脱氨、如丝氨酸脱水后,经α-氨基丙烯酸、α-亚氨基丙酸,再水解脱氨成丙酮酸,化学反应如下:b.脱羧基作用氨基酸脱羧多见于腐败细菌和真菌中。

不同氨基酸在相应氨基酸脱羧酌的作用下,催化氨基酸脱按生成有机胶和二氧化碳。

1.1.1.2己糖的降解a.EMP途径糖的酵解是各种发酵的基础,发酵作用是酵解过程的发展。

EMP途径又称糖酵解,或双磷酸己糖降解途径。

这是氧化葡萄糖产生丙酮酸的过程,它通常是碳水化合物分解过程的第一阶段。

许多微生物能进行该途径的反应。

事实上,它存在于大多数活细胞中。

EMP途径包括10个独立的,但又是连续的反应,其顺序及所需的酶见图2。

糖酵解中的酶催化六碳葡萄糖裂解生成两个三碳糖,这些糖然后进一步被氧化释放能量,同时进行原子的重排而形成了两分子丙酮酸。

糖酵解期间NAD+被还原成NADH,并且通过底物水平磷酸化作用净产生两分子的ATP。

因此,葡萄糖经EMP途径降解成丙酮酸的总反应式为:C6H12O6+2NAD++2Pi+2ADP →2CH3COCOOH+2NADH+2H++2ATP+2H2O反应中所生成NADH必须重新氧化为NAD后才能继续不断地推动全部反应。

糖酵解过程不需要氧的参与,它能够在无氧或有氧的条件下发生。

在无氧的条件下,如以乙醛作为受氢体,即是酒精发酵;如以丙酮酸作为受氢体,即是乳酸发酵。

在有氧情况下,NADH经呼吸链氧化,同时丙酮酸进入三羧酸循环。

图1-1 EMP途径简图EMP途径10步反应详述如下:(1)葡萄糖形成葡糖-6-磷酸。

不同菌种通过不同方式实现这步反应。

在酵母茵、真菌和许多假单胞茁等好氧细菌中,通过需要Mg+和ATP的己糖激酶来实现(此反应在细胞内为不可逆反应);在大肠杆菌和链球菌等兼性厌氧茵中,可借磷酸烯醇式丙酮酸—磷酸转移酶系统在葡萄糖进入细胞之时即完成了磷酸化。

(2)葡糖-6-磷酸经磷酸己糖异构酶异构成果糖-6-磷酸。

(3)果糖-6-磷酸通过磷酸果糖激酶催化成果糖-1,6-二磷酸。

磷酸果糖激酶是EMP途径中的一个关键酶,故它的存在就意味着该微生物具有EMP途径。

与己糖激酶相似的是,磷酸果糖激酶也需要ATP和Mg2+,且在活细胞内催化的反应是不可逆的。

(4)果糖-1,6-二磷酸在果糖二磷酸醛缩酶的催化下,分裂成二羟丙酮磷酸和甘油醛-3-磷酸两个丙糖磷酸分子。

果糖二磷酸醛缩酶不但在葡萄糖降解中十分重要,而且对葡糖异生作用(g1uconeogenesis)即对由非碳水化合物前体逆向合成己糖的反应也很重要。

另外,二羟丙酮磷酸在糖代谢和脂类代谢中还是一个重要的连接点,因为它可被还原成甘油磷酸而用于脂类的合成中。

(5)二羟丙酮磷酸在丙糖磷酸异构酶的作用下转化成甘油醛-3-磷酸。

虽然在反应(4)中产生等分子的丙糖磷酸,但二羟丙酮磷酸只有转化为甘油醛-3-磷酸后才能进一步代谢下去。

因此,己糖分子至此实际上已生成了2分子甘油醛-3-磷酸。

此后的代谢反应在所有能代谢葡萄糖的微生物中都没有什么不同了。

(6)甘油醛-3-磷酸在甘油醛-3-磷酸脱氢酶的催化下产生1,3-二磷酸甘油酸。

此反应中的酶是一种依赖NAD+的含硫醇酶,它能把无机磷酸结合到反应产物上。

这一氧化反应由于产生一个高能磷酸化合物和一个NADH+H+,所以从产能和产还原力的角度来看都是十分重要的。

(7)l,3-二磷酸甘油酸在磷酸甘油酸激酶的催化下形成3-磷酸甘油酸。

此酶是一种依赖Mg2+的酶,它催化1,3-二磷酸甘油酸C-1位置上的高能磷酸基转移到ADP分子上,产生了本途径中的第一个ATP。

这是借底物水平磷酸化作用而产ATP的一个实例。

(8)3-磷酸甘油酸在磷酸甘油酸变位酶的作用下转变为2-磷酸甘油酸。

(9)2-磷酸甘油酸在烯醇酶作用下经脱水反应而产生含有一个高能磷酸键的磷酸烯醇式丙酮酸。

烯醇酶需要Mg2+、Mn2+或Zn2+等二价金属离子作为激活剂。

(10)磷酸烯醇式丙酮酸在丙酮酸激酶的催化下产生了丙酮酸,这时,磷酸烯醇式丙酮酸分子上的磷酸基团转移到ADP上,产生了本途径的第二个ATP,这是借底物水平磷酸化而产生ATP的又一个例子。

由上可知在无氧条件下,整个EMP途径的产能效率是很低的,即每一个葡萄糖分子仅净产2个ATP,但其中产生的多种中间代谢物不仅可为合成反应提供原材料,而且起着连接许多有关代谢途径的作用。

从微生物发酵生产的角度来看,EMP途径与乙醇、乳酸、甘油、丙酮、丁醇和丁二醇等大量重要发酵产物的生产有着密切的关系。

EMP途径是多种微生物所具有的代谢途径,其产能效率虽低,但生理功能极其重要:①供应ATP形式的能量和NADH形式的还原力,厌氧微生物是以此途径作为获得能量的唯一方式;②是连接其它几个重要代谢途径的桥梁,包括三羧酸循环(TCA)、HMP途径和ED途径等;③为生物合成提供多种中间代谢物;④通过逆向反应可进行多糖合成。

若从EMP途径与人类生产实践的关系来看,则它与乙醇、乳酸、甘油、丙酮和丁醇等的发酵生产关系密切。

b.PP途径除了通过EMP途径氧化葡萄糖外,大多数微生物还有一条彻底分解葡萄糖为CO2和水的途径,即是葡萄糖在转化成6-磷酸葡萄糖酸后就分解为CO2和5-磷酸核酮糖,也就是在单磷酸己糖的基础上开始降解,故称单磷酸己糖途径,简称PP途径,旧称HMP途径。

又因为所生成的磷酸戊糖可重新组成磷酸己糖,形成循环反应,所以又常称为磷酸戊糖途径,见图1-2。

图1-2 HMP途径简图PP途径比EMP途径复杂,可以获得很多产物,如C3、C5、C7等磷酸糖酯。

该途径主要特点是葡萄糖直接脱氢和脱羧,不必先经三碳糖的阶段;另一特点是只有NADP参与反应。

PP途径在微生物生命活动中意义重大:①供应5-磷酸核糖,以合成嘌呤和嘧啶核苷酸,最后合成核酸、辅酶等;②提供大量的还原力NADPH+H+,除了部分被转氢酶催化变为NADH+H+,再进入呼吸链氧化,可生成大量的ATP外,主要还是作为细胞合成脂肪酸、胆固醇、谷氨酸等需氢的一种重要来源;③途径中的4-磷酸赤藓糖是合成芳香族氨基酸的前体;④磷酸戊糖循环的功能对于光能和化能自养菌具有重要作用,这两类微生物细胞中的含碳成分都是由CO2和1,5-二磷酸核酮糖缩合而成,而后者是由5-磷酸核糖转变而来;⑤生成的6-磷酸果糖、3-磷酸甘油醛等可进入EMP途径,进而代谢为丙酮酸,这样PP途径与EMP途径相联系。

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