05-05-18邻苯三酚改进
三种色素和甲基睾丸酮对锦鲫的生长形体、体色和抗氧化能力的影响

4 3
C NGQ NG F S E Y HO I IH R
注 : ( )A. 1 虾青 素 ,L 叶黄素 ,A 一 E B胡萝 卜 ,MT 甲基 睾 丸酮 ,下 同。 ( )MY肩 注不 含相 同 素 一 2 d 小写字 母者 ,差 异显 著 ( < .5 尸 D0 );肩注 含 相 同小写字 母者 差异 不显 著 ( > .5 P D0 );下 同 。
g ;Wt为试验结束时鱼体尾均重 ,g ;Wn 色杯 中,在 4 0 m 波长处测定吸光值 ,每 2n 为 内脏重 ,g ;d 为试验周期 ,d ;L 为鱼 体长 ,c m;T 为鱼体高 ,c m;W 为鱼体
重 ,g 。
隔 3s 0 读数一次 , 测定 4 n内每分钟吸光 mi
值 的变化 。要求 自氧化速率控制在每分钟
下:
×1 0 0 0×g
;
每 m 反应液 中,每 m n抑制邻苯三 l i
式 中 x 为总色素含量 ,m / 0g 酚 自氧化速率达 5 %的酶量为 1 gl ;A O 0 个酶活单
为在 4 8n 处测定的吸光度值 ;Y 为所 4 m 用提取液 的量 ,mL;A%l m 为胡萝 卜 c 素 位( m1 U/ ) 。
化 的量用脱脂米糠 调平 )。
的影 响, 旨在确 定对锦 鲫体色增色效果最 好 的增色剂及其适宜添加量 ,为锦鲫增色 剂 的开发利用提供理论依据 。
将 分组后 的锦鲫分别对应放入 已编 号
的室 内水族箱 中 ( 05 05 1 m ̄ .m ̄ .m),养 殖 正 式 试 验 为期 6 。每 天 投 喂 3 次 0d ( 8: 0 3: 0和 1 0 ),投饲率 0 o ,1 o 8: 0
酶 活 性 = (O0 . A4 0 m/ n) . 7 2 n mi
葎草水提液多酚的含量测定与抗氧化性研究

采用酒石酸铁法测定荐 草中多酚, 利用改进的水杨酸法和邻苯三酚 自氧化法对j 丰草各部位的 多酚提取液进行抗氧化性测定。[ 结果]0月份 采 l 集 的鲜 叶 中 多酚含 量 最 高 , 达到 031 0 06m / 。提 取 的 多酚 抑 制超 氧 阴 离子 自由 基 能 力 最 高达 到 6 . 0 , . ± .0 gg 7 97 % 清除 羟 自 由基 能 力 最 高 达 6 . 5 5 70 。 [ 9% 结论 ] 草 地上 部 各部 位 多酚 提 取液 都 具 有一 定 的抗 氧 化作 用 , 中 以叶含 量 最 高 , 茌 其 茎含 量最 低 。 关键 词 萑 草 ; 多酚 ; 氧化 性 抗
Mer n t a t xdn bly v r n rvd h cet cbssfrr sl beepott n aduizt no r.a di ni ia t it aO ad poietesini ai e ou l xli i n tiai fH.,al// rsu s o a i i f o a a ao l o  ̄ / es e0 2 a / vle to T e au .I hdl h Me
中 图分类 号 ¥6 .1 572 9 文 献标 识 码 A 文章 编 号 ∞l —6 l(O9O —0 18 3 7 6 l2O )9 4 I —0
Su ym h B t1ee l ai 0 oyom e n W ae xr csfo 月_拢I ¥al/ td teCo )tm i l n  ̄ fP ll h li trE ta t rm 阳 cl l ( u )Met.趣一 I t xda tAeii a  ̄ Lo r l t Ani i n l t s o vy
浅析空气中氧气含量测定实验

浅析空气中氧气含量测定实验“空气中氧气含量测定实验”位于人教版九年级上册第二章,是初中化学的第一个定量实验。
教材本实验是利用红磷燃烧消耗烧杯内氧气,装置如图1所示,通过水倒吸的体积,粗略测定密闭装置内氧气的体积,集气瓶内水平面上升约1/5,说明空气中的氧气被消耗了,消耗的氧气约占空气体积的1/5,从而测出空气中氧气的含量。
通过对该实验的探究,揭示了空气的组成,开启了具体物质的学习。
但是,该实验方案存在一定的缺陷,产生一定误差,难以得出氧气约占空气体积的1/5的结论,实验误差原因如下:(1)药品选择不合理红磷的着火点为240℃,如果在集气瓶外用酒精灯进行点燃,生成物五氧化二磷白烟会大量逸散到空气中,这样造成环境污染;除此之外,红磷燃烧无法彻底消耗氧气,磷在集气瓶内燃烧结束后,瓶内仍有7%以上的氧气剩余。
(2)装置系统误差在外点燃红磷后再伸入集气瓶,使装置无法始终完全密闭,该过程导致瓶内的空气发生膨胀,一部分逸出,装置的气密性很难达到标准;红磷燃烧过程中放热,会使瓶内气体受热膨胀,有可能使塞子弹出,造成实验的偶然误差;装置中的导管原来是有空气的,这部分体积并不小且不易估计,后来导管里充满了水,这部分水没有进入集气瓶中,导致测量误差; 用于测量气体体积所标示的刻度线不够精确等。
图1 测定空气中氧气的含量1 实验改进药品的选用1.1 白磷白磷,着火点比红磷更低,约为40 ℃,易燃烧。
一些化学老师使用水浴加热、通电后铜丝发热、吹风机加热、激光笔等方式引燃密闭装置内的白磷,生成的白烟始终在装置里,不会造成空气污染,对环境友好;同时与外界没有物质交换,避免了装置系统误差。
俞红星老师利用放大镜会聚太阳光(图2)和热水浴法(图3)使白磷燃烧,放大镜聚焦法只有光源充足情况下实验才有可能成功,出于课堂场地、安全与课时等方面考量,无法组织学生在课外进行该实验;热水浴法则需不断给水加热,同时要避免集气瓶过热导致爆裂,该方法比较耗时且存在安全隐患,不适合演示实验。
响应面法优化桑叶黄酮提取工艺及其抗氧化活性研究

响应面法优化桑叶黄酮提取工艺及其抗氧化活性研究李 恒,谭金燕,周鲜娇*(岭南师范学院,广东湛江 524048)摘要:为了优化桑叶黄酮提取工艺,探讨其抗氧化活性,以微波功率、微波时间、乙醇浓度、液料比和提取次数为影响因素,以桑叶黄酮提取率为考察指标,采用单因素和Box-Behnken 法优化提取工艺,并通过测定桑叶黄酮提取物对DPPH ·、·OH 和O 2-·自由基的清除能力,探讨其体外抗氧化活性。
结果显示,桑叶黄酮的最佳提取条件为微波功率175 W 、微波时间4.5 min 、乙醇浓度48.5%、液料比30 mL/g ,在此条件下,桑叶黄酮的提取率可达到11.393±0.049 mg/g 。
桑叶黄酮提取液对DPPH ·、·OH 和O 2-·的清除作用明显,清除能力与黄酮提取液浓度呈正相关关系。
综上,应用微波提取技术可有效提取桑叶黄酮,提取的黄酮具有良好的抗氧化活性。
关键词:响应面分析法;桑叶;黄酮;抗氧化性中图分类号:R284.2文献标志码:AOptimization of Extraction Process by Response Sur ‐face Methodology and Analysis of Antioxidant Ac ‐tivity of Flavonoid from Mulberry LeavesLI Heng, TAN Jinyan, ZHOU Xianjiao *(Lingnan Normal University, Zhanjiang, Guangdong 524048, China)Abstract: The objective of this study was to optimize the extraction process of flavonoids from mulberry leaves and explore its antioxidant activity. The experiment selected microwave power, mi ‐crowave time, ethanol concentration, solid-liquid ratio and extraction time as variables, the yield of flavonoids as the evaluation index. Single factor tests and Box-Behnken method were used to opti ‐mize the extraction process. The scavenging ability on 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH·), hy ‐基金项目:湛江市科技计划项目(2021A05048);岭南师范学院人才项目(ZL2021014)。
不同剂型生脉散对氧自由基清除作用的比较

及对邻苯三酚 自 氧化速度 的抑制作用 . 反应温度为 2 5℃ . 试剂浓度 p H值为 83 .4的磷酸缓冲液 5 m l 0m o / L 邻苯 三酚 03m o L 加 药 03m ( 照 管不 加 药 )用蒸 馏 水 补充 体 积至 9m . , . ml , / . E 对 , L 反应 启 动后 , 隔 3 每 0s 读取 1 A 次 值, 各加药管以加药不加邻苯三酚管作参 比. 清除率及邻苯三酚 自氧化速度计算公式为 :
第2 8卷
加 )最 终浓 度邻 二氮 菲 07 m l ,e0 .5m o L H0 .1 . 后 3 . .5m o LFS 4 7 m l , 22 0 % 然 / 0 / 0 7℃保 温 6 i, 0mn测各 管 A3, 6
各加药管以加药不加 H 管作参 比.O 22 o ・H清除率计算公式为 :O ・H清除率( = A 药一 损 ) ( 未 %) ( 加 A 伤 ÷ A 损一
113 .. 仪器 72 型光栅分光光度计 、 2 型紫外光栅分光光度计均系上海第三分析仪器厂生产 . 2一 7 一 5 1 2实验方 法 . 12 1・ H生 成及 清除率 测定 用邻 二 氮菲 一 .. O 氧 化法 测定 H0 /e 产 生 的 ・ H5. 22F 体 系产 22F2 O [ H 0/e ] 生的 ・H将邻二氮菲 一 e 氧化为邻二氮菲 一F¨, O F2 e 使邻二氮菲 一F 对 56nl e 3 l波长的最大吸收减弱, T A 明显 降低 . 当反应 体 系 中存 在 ・H 除剂 时 , O清 此氧 化过 程受 抑制 , 则 降低 不 明 显 , 可通 过 A 值 比 A 并
连苯三酚-邻苯三酚SOD 超氧自由基清除-过氧自由基清除-过氧阴离子自由基清除-超氧阴离子自由基清除

改进的连苯三酚法:一种适用于所有抗氧化剂超氧自由基(•O2-)清除试验(适用于SOD)【名词辨析】•O2-:该微粒既含有一个成单的电子,所以,可以属于自由基,又带一个单位负电荷,也属于阴离子。
所以,可以称为“超氧自由基”、“过氧自由基”、“过氧阴离子自由基”、“过氧阴离子”、“超氧阴离子自由基”、“超氧阴离子”。
SOD:过氧化物歧化酶,使过氧自由基发生岐化反应,而清除之。
连苯三酚:有些文献也称为“邻苯三酚”。
但邻苯三酚是不准确的名称。
因为分子含有三个取代基,应当称为“连”。
【操作示意图】操作示意图[1]操作示意图的说明:最初的连苯三酚(1,2,3-三羟基苯)法是专门为超氧化物歧化酶开发的,现在广泛用于测量其他抗氧化剂的超氧化物清除。
然而,强烈的pH影响被忽略了。
在本研究中,首次系统地研究了影响因素,大量实验证明pH值至关重要。
由于主要抗氧化剂含有羧酸、酯或内酯基团,pH 8.2应改为生理pH 7.4。
改进的程序如下。
将连苯三酚溶液(在1 M HCl中)与pH 7.4的Tris-HCl溶液充分混合;在37°C下每隔30秒测量一次A325nm值,持续5分钟。
由于ΔA325nm,控制值反映基质•O2-的初始浓度−, 应妥善控制,以保证方法的准确性。
改进的连苯三酚法是一种可靠且廉价的超氧自由基清除试验,适用于所有类型的抗氧化剂。
用石英比色皿,不能用玻璃比色皿,因为玻璃比色皿在325nm处有吸收。
【详细介绍】[1]有几种方法可以测定食品的超氧阴离子交换活性,包括细胞色素还原、硝基四氮唑蓝(NBT)、电子自旋共振(ESR)、化学发光、荧光和高效液相色谱。
所有这些方法都需要特殊且昂贵的仪器或生物试剂。
连苯三酚(1,2,3-三羟基苯)自氧化法相对便宜。
它最初由Marklund 专门为超氧化物歧化酶(SOD)而设计,而不是为其他抗氧化剂而设计。
近几十年来,由于其方便性,它还被用于测定其他抗氧化剂,如多酚、酚酸、单宁、黄酮、花青素、蒽醌、多糖,甚至各种营养添加剂和提取物。
SOD应用方面存在的问题

SOD应用方面存在的问题尽管我国SOD应用研究有了很大的发展,但由于刚刚起步,管理方面还存在某些问题,如生产一哄而上出现盲目性,活性检测存在混乱,质量不统一以及相应的理论研究不深入等。
1、SOD生产的盲目性由于SOD在日化剂食品工业中的应用逐步发展,国内生产SOD的单位越来越多。
据不完全统计至少有30余家。
SOD作为药品或保健品,对质量的要求是十分严格。
但不少单位连起码的卫生条件都不具备,便开始生产。
有的单位对SOD活性如何检测还没掌握,这样的劣质产品混杂于市场,对人民的健康极其有害。
估计1993年国内市场需求600多亿单位,可全国SOD生产量已远远超出此数量,建议今后要认真做好市场调查,切勿草率上马。
2、活性检测的混乱SOD活性检测方法很多,由于方法不一,测得结果也不一致。
即使是同一测定方法,条件稍有改变,其测试结果也有差异。
因此所测结果很难比较,这是造成我国SOD质量混乱的主要原因。
汕头会议重点讨论了测活方法的统一途径。
经代表讨论,提出了在SOD活性测定中采用参照物的意见。
会议委托华东理工大学提供参照物,并由中科院上海生物化学研究所、军事医学科学家、汕头大学等10多个单位进行验证,最后由华东理工大学汇总测试结果,总结出我国SOD各种测活方法的相互换算结果。
所选用得测活方法有:黄嘌呤氧化酶-细胞色素C法、经典邻苯三酚法、微量邻苯三酚法、化学发光法、基谱氧化电极法、邻苯三酚测定改进法、标准曲线法和黄嘌呤氧化酶-NBT 法等。
SOD的测活方法虽有很多种,但只要根据相应文献资料严格控制实验条件,各种测定结果在一定范围内还是可以换算的。
现以黄嘌呤氧化酶-细胞色素C测定为基准,测定其他测定方法相应的换算值如表2所示。
表二 SOD不同测活方法的活型换算SOD的测定采用参照物,不但可以搞清各种测方法之间的相互关系,而且可以将一种新检测方法测得的活性单位换算为常用方法的活性单位。
举例来说,用某种新的SOD测定方法测得参照品和某种样品的SOD活性分别为A0和A1,已知参照品用SOD常用方法测得的活性为B,测被测样品以常用方法表示得活性应为A1/A0*B。
动物急性毒性实验报告

生物工程综合实验动物急性毒性实验实验报告集班级生工1411学号姓名苏州科技大学化学生物与材料工程学院2017年实验室学生守则一、严格遵守实验室各项规章制度和管理措施,服从教师及实验技术人员的指导。
二、严格按照实验要求,做好实验预习,实验之前5分钟进入实验室,及时、准确地完成实验任务,实事求是地完成实验报告,杜绝弄虚作假。
三、严格执行操作规定,爱护仪器设备及工具。
凡不按教师的指导擅自操作引起仪器、设备损坏者,应予赔偿。
四、爱护实验室公共财物,节约水电、材料和试剂。
未经允许不得随便挪动非实验需用的其他仪器,不得随便拆装仪器或将仪器、工具带至室外。
五、持实验室的严肃安静,不得大声喧哗、嘻闹,严禁在实验室内抽烟和吃东西。
六、严防事故,确保实验室安全,发现异常情况,应及时向有关教师和管理人员报告。
七、每次实验结束后,主动整理好仪器设备,归还所借器材,关闭电源、水源,按指导老师的要求做好实验结束工作及室内外的清洁卫生工作,经指导老师许可后,方可离开。
预习报告实验报告动物急性毒性实验一、实验目的:使学生了解毒理学研究中动物实验的常规操作方法和技术;了解和掌握为了测定一种未知的环境化学物对有机体是否是安全的,必须进行哪些试验,获得哪些必要的数据;这些试验的基本步骤是什么,试验数据应该如何处理。
二、实验原理滤纸接触法毒性实验简单易行,实验时间短,实验成本较低,可对受试物毒性进行初筛。
将蚯蚓与湿润的滤纸上的受试物接触,可测定土壤中受试物对蚯蚓的潜在影响。
动物机体中有一套有效的抗氧化防御系统(Antioxidant defense),包括过氧化物歧化酶(Superoxide dismutase, SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase, GPx)、过氧化氢酶(Catalase, CAT)等,它们可分解进入生物体有伤害作用的异源氧化物。
由于能反映多种污染物的毒性,而且其变化可定量检测,因此抗氧化酶常被用作指示环境污染的早期预警,是分子生态毒理学生物标志物的研究热点之一。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
邻苯三酚法测定超氧阴离子自由基的清除作用
1. 邻苯三酚自氧化改进:
1.1 试剂的配制
1. pH8.2 50mM Tris-HCl(含EDTA)缓冲液 500mL:
称取 3.028g Tris固体溶于250mL蒸馏水中,溶解后加入0.9542mL浓盐酸,加入0.1gEDTA后定溶到500mL,装入棕色瓶备用。
2. HCl配0.1mM 邻苯三酚:
称取62.22mg邻苯三酚(即焦性没食子酸),溶于5mL10mM HCl(吸取0.0833mL浓盐酸稀释到100mL),吸出100μL溶于10mL同样的HCl中,装入棕色瓶备用(室温一般保存3天)。
1.2 试验方法
按下表取50mM Tris-HCl缓冲液、蒸馏水、多糖,混匀后在25℃水浴保温20分钟,取出后立即加入25℃预热过0.1mM 邻苯三酚(用10mM HCl配),迅速摇匀后倒入比色杯(1cm),325nm下测OD,30秒记录一次数据。
实验重复三次。
抑制率AI(%)=(A对照-A样品)×100%/A对照。
举例:
反应体系Tris-HCl
(ml)
蒸馏水或者
10mMHCl(ml) 多糖(ml)
邻苯三酚
(ml)
空白 2 1 0 0
对照 2 0.6 0 0.4
处理组1 2 0.5 0.1 0.4
处理组2 2 0.4 0.2 0.4
处理组3 2 0.3 0.3 0.4
处理组4 2 0.2 0.4 0.4
处理组5 2 0.1 0.5 0.4
注意事项:
1.多糖母液浓度最好选在1~2mg/ml
2.邻苯三酚一般现用现配,放置一般放3天,
3.A325nm/分的读数一般为0.7~1之间,实验系统才比较准确,
4.用蒸馏水代替HCl配制邻苯三酚是可以的,只是放置时间不能太长
2. 试验结果
2.1 虎乃菇水提多糖对超氧阴离子自由基的清除作用
从图21和表26实验结果看,虎乃菇水提多糖对超氧阴离子自由基有清除作用,且清除作用的大小随多糖浓度增加而增加,表现出一定的线性关系。
分别加入100μL、200μL、300μL、400μL、500μL多糖后,对超氧阴离子的清除率分别为14.167%、34.286%、54.762%、70.592%、85.714%。
从方差分析可知,虎乃菇水提多糖的清除作用的影响则十分显著。
图21 虎乃菇水提多糖对超氧阴离子自由基的清除作用表26 虎乃菇水提多糖对超氧阴离子自由基的清除作用
实验数实验中多糖的
量(μL)
多糖浓度
(mg/mL)
平均OD值(已去底色)
平均清除率(%)
A0 A5
空白对照0 0 0.05 0.47 0
实验组1 100 0.047 0.163 0.524 14.167±2.943 实验组2 200 0.093 0.158 0.434 34.286±0.558 实验组3 300 0.14 0.147 0.337 54.762±2.75 实验组4 400 0.187 0.152 0.274 70.592±0.069 实验组5 500 0.233 0.164 0.224 85.714±1.225 表27 虎乃菇水提多糖对超氧阴离子自由基的清除作用方差分析
变异来源Source 平方和
SS
自由度
df
均方和
MS
统计量
F
P值
Sig F 0.05 F 0.01
组间9746.517 4 2436.629 675.602 4.07E-12 3.478 5.994 组内36.066 10 3.606
总计9782.583 14
2.2 虎乃菇碱提多糖对超氧阴离子自由基的清除作用
从图21和表26实验结果看,虎乃菇水提多糖对超氧阴离子自由基有清除作用,且清除作用的大小随多糖浓度增加而增加,表现出一定的线性关系。
分别加入100μL、200μL、300μL、400μL、500μL多糖后,对超氧阴离子的清除率分别为12.353%、30.321%、47.846%、73.251%、84.094%。
从方差分析可知,虎乃菇水提多糖的清除作用的影响则十分显著。
图21 虎乃菇碱提多糖对超氧阴离子自由基的清除作用
表26 虎乃菇碱提多糖对超氧阴离子自由基的清除作用
实验数实验中多糖的
量(μL)
多糖浓度
( mg/mL)
平均OD值(已去底色)
平均清除率(%)
A0 A5
空白对照0 0 0.075 0.418 0
实验组1 50 0.074 0.199 0.498 12.353±3.238 实验组2 100 0.149 0.180 0.417 30.321±0.073 实验组3 150 0.223 0.209 0.386 47.846±3.122 实验组4 200 0.298 0.203 0.295 73.251±3.914 实验组5 250 0.372 0.204 0.258 84.094±0.945
表27 虎乃菇碱提多糖对超氧阴离子自由基的清除作用方差分析
变异来源Source 平方和
SS
自由度
df
均方和
MS
统计量
F
P值
Sig F 0.05 F 0.01
组间10533.9 4 2633.474 361.333 9.14E-11 3.478 5.994 组内72.882 10 7.288
总计10606.78 14
3. 结果分析
对比虎乃菇水提和碱提多糖对超氧阴离子自由基的清除作用结果,发现在相同浓度下虎乃菇水提多糖对超氧阴离子自由基的清除作用比虎乃菇碱提多糖对超氧阴离子自由基的清除作用有更好的清除作用,,虎乃菇碱提多糖在终浓度为0.223mg/mL时的清除率有47.846%,而虎乃菇水提多糖在终浓度为0.233mg/mL时的清除率有85.714%。
碱提多糖终浓度( mg/mL)抑制率
(%)
水提多糖终浓度
( mg/mL)
抑制率
(%)
0.074 12.353 0.047 14.167 0.149 30.321 0.093 34.286 0.223 47.846 0.14 54.762 0.298 73.251 0.187 70.952 0.372 84.094 0.233 85.714。