植物组织培养重点
植物组织培养要点
近几 年各 地都 实施 了新 课 改 ， 浙江 省 也增 设
化， 在加 热过程 中 ， 还原 糖 的生 成量 随温度 的提高
逐渐增 大 ， 使还原 糖 的生 成量 高于原来 的量 ， 而 从
导致 实 验 失 败 。 ５ 加 强 探 究 式 实 验 教 学
了选 修一 《 命 科 学 与 实 践》 １ 生 共 ３个 学 生 实 验 。
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Ｅ ｕ ａ ｉｎ ｌＥ ｕ ｐ ｎ ｄ Ｅ ｐ ｒ ｎ １２ ｄ ｃ ｔ ａ ｑ ｉ ｍｅ ｔ ｏ Ａｎ ｘ ｅ ｉ ｍｅ ｔ Ｖｏ ６， Ｎｏ． ４，２ ０ ０１
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至 ５８ ． 。若 ｐ Ｈ过 偏低 ， 培养基 不凝 固 ； ｐ 则 若 Ｈ偏
高 ， 培养 基硬 度过 大 ， 则 不利 于植 物生 长 。 由于培
摘 要
０４０ ６４０
从 培 养 基 配 制 、 种操 作 、 菌 苗培 养 、 栽 ４个方 面总 结 了植 物 纽 培 的 实验要 点 。 接 无 移
关 键 词 培 养 基 配 制 接 种 操 作 组 配 苗培 养 炼 苗 移栽
菊花组 培 实验 是 生 物 新 课 程 选 修 １中 的 内 容， 实验 主要 分 四步进 行 ： 养基配 制 ， 培 接种 操作 ， 无 菌苗 培养 ， 栽 。根 据植 物组培实 验经验 ， 移 和川 布兰公 司技术专 家 的指导 ， 将 每一 步 骤 中应 该 现
植物组织培养复习重点
组培复习材料一、名词解释1、培养基：是离体植物（外植体）赖以生长、分化的基础，是根据植物的需求，人工配制的含有各种营养成分的营养液。
2、液体培养：把细胞或生物体的一部分，置于液体培养基中使其发育，并不断振荡，使之均匀地在悬浊液中进行培养的一种方法。
3、种子培养：是成熟种子和发育不全的未成熟种子的无菌培养。
4、叶培养：从母体植株上将叶组织（包括叶原基在内）切下，放在无菌的人工条件下使其生长发育形成植株的技术。
5、热处理脱毒：在一定范围内，用高温处理可部分或完全钝化植物组织中的某些病毒而不伤害或很少伤害植物本身的脱毒方法。
6、花药培养：是把花粉发育到一定阶段的花药接种到培养基上，来改变花粉的发育程序，使其分裂形成细胞团，进而分化成杯状体，然后再生植株，或形成愈伤组织，由愈伤组织再分化成植株。
7、连续培养：是利用特别的培养容器进行大规模细胞培养的一种培养方式。
（培养过程中，不断注入新鲜培养基，排掉等体积用过的培养基，或者抽取悬浮培养物，使培养物的营养物质得到不断补充，从而保持其恒定体积的培养。
——8、分批培养：指把细胞分散在一定容积的培养基中进行培养，建立单细胞培养物的培养方式。
（细胞生长在固定体积的培养基中，当主要营养物质耗尽时，细胞的分裂和生长即停止。
）二、简答题1、MS培养基特点。
答：MS培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的，其特点是无机盐和离子浓度较高，是较稳定的离子平衡溶液，具有高含量的氮、钾，尤其是硝酸盐用量大，还有一定数量的铵盐，其养分的数量和比例合适，不需要添加更多的有机附加物，就能满足植物组织对矿质营养的要求，加速愈伤组织和培养物的生长，当培养物就不转移时仍可维持其生存。
目前应用最广泛。
2、植物组培生产特点。
答：①和传统的生产方式相比，具有不占耕地、生产不受季节限制而且能够整年连续进行、不受灾害性天气和病虫害影响的特点；②具有人为可控性，可采用更适合于植物生长的“培养基”代替土壤提供养分和生长调节物质；③具有很高的生产效率。
高中生物选修一植物组织培养知识点总结
中学生物选修一植物组织培育学问点总结生物是高考考试中重要的科目之一，尤其是植物组织培育这个学问点，是高考考试中必考学问点。
下面是为大家整理的中学生物学问点，希望对大家有所帮助!中学生物选修一学问点课题一菊花的组织培育植物组织培育的基本过程细胞分化：在生物个体发育过程中，细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。
离体的植物组织或细胞，在培育了一段时间以后，会通过细胞分裂，形成愈伤组织，愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形态态的薄壁细胞。
由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化，或者叫做去分化。
脱分化产生的愈伤组织接着进行培育，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。
再分化形成的试管苗，移栽到地里，可以发育成完整的植物体。
植物细胞工程具有某种生物全套遗传信息的任何一个活细胞，都具有发育成完整个体的实力，即每个生物细胞都具有全能性。
但在生物体的生长发育过程中并不表现出来，这是因为在特定的时间和空间条件下，通过基因的选择性表达，构成不同组织和器官。
植物组织培育技术的应用有：实现优良品种的快速繁殖;培育脱毒作物;制作人工种子;培育作物新品种以及细胞产物的工厂化生产等。
细胞分化是一种长久性的变更，它有什么生理意义?使多细胞生物体中细胞结构和功能趋向特地化，有利于提高各种生理功能的效率。
比较根尖分生组织和愈伤组织的异同影响植物组织培育的条件材料：不同的植物组织，培育的难易程度差别很大。
植物材料的选择干脆关系到试验的成败。
植物的种类、材料的年龄和保存时间的长短等都会影响试验结果。
菊花组织培育一般选择未开花植物的茎上部新萌生的侧枝作材料。
一般来说，简单进行无性繁殖的植物简单进行组织培育。
选取生长旺盛嫩枝进行组培的是嫩枝生理状态好，简单诱导脱分化和再分化。
养分：离体的植物组织和细胞，对养分、环境等条件的要求相对特别，须要配制相宜的培育基。
常用的培育基是MS培育基，其中含有的大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg，微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I、Co，有机物有甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。
植物组织培养复习资料
植物组织培养复习资料一、名词解释。
（每个3分，共24分）１、植物组织培养：在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或发育成完整植株的技术。
又称植物离体培养。
２、细胞的全能性：指植物体的任何一个有完整细胞核的活细胞都具有该植物的全套遗传基因和产生完整植株的潜在能力。
3、脱分化：离体培养条件下生长的器官、组织、细胞，经过细胞分裂或不分裂而恢复分生状态，形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞过程。
4、外植体：从活体植物上切取下来，用以进行离体培养的那部分组织或器官。
5、单细胞培养：对分离的到的单个细胞进行培养，诱导其分裂增殖，形成细胞团，再通过细胞分化形成芽、根等器官或胚状体，直至长成完整植株的技术。
6、胚状体：亦称体细胞胚。
指在组培过程中，由植物体细胞所形成的类似于合子胚的结构。
它具有根、茎结构，能够一次性形成再生植株。
7、平板培养：是将悬浮培养的细胞接种到未固化的薄层培养基中，使其与培养基充分配合，再倒入培养皿中进行培养的方法。
8、人工种子：指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽，被包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中，从而形成能发芽出苗的颗粒状。
9、次生代谢产物：指植物生长发育正常运行的非必需的小分子有机化合物，其产生和分布通常有种属、器官、组织以及生长发育时期的特异性。
10、再分化：细胞经过脱分化形成的愈伤组织再次分化，进行器官形成，产丛生芽或胚状体，形成完整植株的过程。
11、无病毒苗:指不含该种植物主要危害病毒的苗木。
二、不定项选择1、培养室里的湿度一般保持在____C_____.A 30~40%；B 50~60%；C 70~80%；D 80~90%2. 下列不属于生长素类的植物激素是____A D____。
A Kt；B IAA；C NAA；D ZT3. 影响培养基凝固程度因素有_______A B C D__.A 琼脂的质量好坏；B 高压灭菌的时间；C 高压灭菌的温度；D 培养基的PH4. 活性炭在组织培养中的作用有_______ABC_。
植物组织培养教案
植物组织培养教案一、教学目标：1.了解植物组织培养的基本概念和意义；2.掌握植物组织培养的基本原理、方法和步骤；3.能够根据实验要求进行植物组织培养的实验操作。
二、教学重点：1.植物组织培养的基本原理和方法；2.植物组织培养的实验操作。
三、教学难点：1.植物组织培养的实验操作技巧；2.植物组织培养的常见问题及解决方法。
四、教学内容及教学步骤：1.植物组织培养的基本概念和意义（10分钟）讲解植物组织培养的概念、特点和意义，引导学生认识植物组织培养在农业、园艺和生物科学领域的重要作用。
2.植物组织培养的基本原理（15分钟）介绍植物细胞和组织的培养原理，包括细胞分裂、组织分化和激素调控等方面的基本知识。
3.植物组织培养的基本方法和步骤（30分钟）3.1材料准备解释所需要的实验器具、培养基成分和化学试剂等材料的选择和准备。
3.2植物组织的获取与处理讲解植物组织的获取方法，包括茎尖、叶片和种子等不同组织的处理方法。
3.3组织培养基的制备介绍培养基的成分和配方，讲解培养基的调配方法和无菌操作技巧。
3.4组织培养的操作步骤详细演示组织培养的具体操作步骤，包括无菌操作、组织切割、接种和培养条件设置等。
4.实验操作（60分钟）将学生分成小组，提供植物组织培养实验所需的材料和器具，指导学生进行组织培养的实验操作。
注：实验前需提前准备无菌操作室和培养箱等设备。
五、教学评价体系：1.实验操作的规范程度；2.实验结果的准确性和可靠性；3.对植物组织培养中常见问题的解决能力。
六、教学过程设计：本教案主要以理论授课和实验操作相结合的方式进行。
首先通过理论讲解，让学生了解植物组织培养的基本概念、意义和原理，掌握植物组织培养的基本方法和步骤。
然后，将学生分组进行实验操作，指导学生完成组织培养实验，同时进行实时指导和纠正，帮助学生掌握实验技巧和解决实验中的常见问题。
七、教学反思：植物组织培养是植物生物技术领域的重要研究内容，对于培育新品种、研究植物生长发育机制等具有重要意义。
植物组织培养概论
广义概念
人工培养植物体一 部分(即外植体 ) 生成完整植株。
愈伤组织：在离体培养过程中在人工培养基 上从外植体上长出来的，改变了它们原有的特性， 具有分生能力的能迅速增殖的无特定结构和功能 的细胞团。多在植物体切面上产生。
外植体：是指从植物体上分离下来的用于植 物组织培养的接种材料，它包括植物体的各种器 官、组织、细胞和原生质体等。
思考题：
1.什么是组织培养？组织培养的原理是什么？
2.组织培养分哪几种类型？ 3.组织培养有哪些特点？
四、植物组织培养的理论基础
细胞全能性理论
植物每一个具有 完整细胞核的体细胞， 都含有植物体的全部 遗传信息，在适当条 件下，具有发育成完 整植株的潜在能力。
植物细胞全能性的表达
分裂 细胞 分化 再 分 化 器官 分裂
组织
脱分化
已分化组织细胞
分裂 植株
植物细胞全能性的实现
• 植物的生活史：
受 精 卵 早期胚 胎发育 合 分化 子 胚 组 织 形成 器 构成 植 物 体
茎段培养成苗示意图
茎段培养成苗示意图
组织培养：为狭义的植物组织培养，是对植物体的 各部分组织进行培养，如茎尖分生组织、形成层、• 木质部、韧皮部、表皮组织、胚乳组织和薄壁组织 等等；或对由植物器官培养产生的愈伤组织进行培 养。二者均通过再分化诱导形成植株。
组织培养
愈伤组织培养 分生组织培养 薄壁组织培养 输导组织培养
团按照一定密度在液体培养基中进行培养增殖的技术。
平板培养：是指将一定密度的悬浮细胞接种到一薄
层固体培养基中进行培养的技术。
看护培养：是指利用生长的愈伤组织所产生的物质
来培养单细胞或者异种愈伤组织等的方法。
微室培养：是指人工制造一个微室，将单细胞培养
植物组织培养知识点总结
堂清日结31、原生质是细胞内生命物质的总称。
原生质层指的是细胞膜和液泡膜以及两层膜之间的细胞质。
去掉细胞壁的植物细胞就是原生质体，所以一个动物细胞就相当于一个原生质团。
2、原生质层的融合过程体现了细胞膜的流动性。
3、植物体细胞融合的实质：原生质体的融合，植物体细胞融合完成的标志：细胞壁的再生。
新细胞壁的产生与细胞内高尔基体相关。
4、植物组织培养中愈伤组织的形成是细胞分裂的结果。
5、植物细胞工程通常所采用的技术手段：植物组织培养技术和植物体细胞杂交技术。
6、植物体细胞杂交的过程：1）酶解法去除细胞壁，获得原生质体2）利用物理或者化学法诱导原生质体的融合3）再生细胞壁，获得杂种细胞。
4）利用植物组织培养技术，通过脱分化和再分化获得杂种植物。
7、微型繁殖技术：也叫快速繁殖技术即快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。
该技术与传统繁殖技术相比，具有：①繁殖速度快；②“高保真”（因为是无性繁殖）；③不受自然生长季节的限制（因为在具有一定人工设施的室内生产）等特点。
堂清日结41、作物脱毒材料：分生区细胞作物脱毒方法：进行植物组织培养作物脱毒结果：获得脱毒苗脱毒苗的特点：不会或极少感染病毒。
2、人工种子的组成：胚状体（或不定芽或顶芽或腋芽）+人工薄膜；要获得人工种子，需将离体的器官、组织或细胞培养至再分化阶段。
3、人工种皮中应具有的有效成分：适量的养分、无机盐、有机碳源、农药、抗生素、有益菌等，为了促进胚状体的生长发育，还可以向人工种皮中加入植物生长调节剂。
4、单倍体育种原理：染色体变异方法：花药离体培养采用的技术：植物组织培养技术优点：后代无性状分离、明显缩短育种年限突变体的利用育种原理：突变（基因突变、染色体变异）优点：能够产生新性状植物体细胞杂交育种原理：染色体变异优点：克服远缘杂交不亲和的障碍5、植物组织培养中易获得突变体的原因：培养的细胞一直处于分生的状态，易受培养条件和外界压力（如射线、化学物质等）的影响。
植物组织培养与细胞培养知识重点
第一个发明的培养基为White 培养基培养基中的铁盐采用Fe-EDTA 形态IAA/CTK比例高时，促进生根培养，比例低时，促进芽的分化植物组织培养：（广义）人工控制条件下培养形成再生植株（狭义）对植物组织器官产生愈伤组织进行培养直至生成完整植株。
外植体：从植物体上分离下来的用于离体培养的材料愈伤组织：在离体培养的条件下切口处形成的一团具有分生能力的不规则的细胞团分化：细胞在分裂过程中发生结构和功能上的改变形成各类组织和器官的过程脱分化：已分化好的细胞在人工诱导条件下恢复分生能力恢复到分生组织状态的过程再分化：由脱分化的细胞重新形成各类组织和器官的过程初代培养：诱导愈伤组织、侧芽或不定芽、胚状体（形似胚，具有配的功能）过程继代培养：更换新鲜培养基繁殖同一类型材料生根培养：将芽苗转移到生根培养基上培养形成完整植株驯化培养：将组培苗经人工炼苗驯化使其能够在苗床上生长器官培养：是指对植物体各种器官的离体培养离体胚培养：指从植物种子中分离出胚组织进行离体培养的技术细胞悬浮培养：将植物的细胞或细胞小聚体悬浮在液体培养基上进行培养，使之在体外繁殖、生长、发育，并在培养过程中能保持很好的分散性的技术原生质体培养：指从细胞中分离出来的原生质体经过离体培养使其分裂、增殖进而分化成完整植株的技术。
器官发生：又名器官形成，是指植物根茎叶花果实等器官的分化与形成灭菌：用物理或化学方法，杀死物体表面或空隙间的微生物消毒：杀死，消除或抑制部分微生物，使之不发生作用褐化：接种后外植体表面产生酚、醌类棕褐色物质，细胞停止代谢生长玻璃化：离体植物嫩茎或叶呈半透明水状，生理失调不能进行光合作用指示植物：能够对病毒汁液产生迅速和特有的反应的某类转株寄主植物细胞的全能性：每个植物细胞都具有母体的全部遗传特性；每一个细胞都可以在特定条件下发育成与母体一样的植株灭菌方法：物理法：灼烧、常压蒸煮，紫外线，超声波，微波，过滤清洗。
化学法：升汞，过氧化氢，甲醛，酒精，高锰酸钾，漂白粉，次氯酸钠，抗菌素四大母液：大量元素母液，微量元素母液、铁盐母液、有机物质母液、激素母液实验室安排：贮藏室、药品室、洗涤间、消毒室、接种室，准备室、暗室、分析室、培养室离体培养基本设备：天平、酸度计、移液管、容量瓶、三角瓶添加活性炭的目的：活性炭具有吸附作用，可吸附非极性物质和色素大分子物质，茎尖初代培养使可防止褐化，促进生根，防止玻璃化苗几种维生素：VB1：有利于植株生根，促进愈伤组织产生VB6：促进根的生长VC：防止褐化VB5：影响植物代谢和胚的发育VE、VB12各培养基的特点：White：无机盐浓度低，适宜于生根培养；MS：无机盐浓度高，为比较稳定的离子平衡溶液，其养分的数量和比例比较合适，可满足植物的营养和生理需要，硝酸盐含量相对较高，广泛应用于植物器官，花药，细胞和原生质体培养，效果良好；B5：含较低的铵对不少培养物的生长有抑制作用。
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器官培养：即离体器官的培养。
植株培养：对完整植株材料的培养。
组织或愈伤组织培养:是对植物体的各部分组织进行培养或对由植物器官培养产生的愈伤组织进行培养，二者均通过再分化诱导形成植株.细胞培养:是对由愈伤组织等进行液体振荡培养所得到的能保持较好分散性的离体单细胞或花粉单细胞或很小的细胞团的培养.原生质体培养:是用酶及物理方法除去细胞壁的原生质体的培养。
初代培养：芽、茎段、叶片、花器等外植体在离体培养条件下诱导愈伤组织、侧芽或不定芽、胚状体过程植物组织培养：是指通过无菌操作分离植物体的一部分（外植体），接种到培养基上，在人工控制的条件下（包括营养、激素、温度、光照、湿度）进行培养，使其产生完整植株的过程。
愈伤组织：原指植物在受伤之后于伤口表面形成的一团薄壁细胞，在组培中则指在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞，多在植物体切面上产生。
外植体：从植物体上分离下来的用于离体培养的材料。
植物细胞全能型：任何具有完成细胞核的植物细胞，能拥有形成一个完整植株所必须的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。
脱分化:已分化好的细胞在人工诱导条件下，恢复分生能力，回复到分生组织状态的过程。
再分化:脱分化后具有分生能力的细胞再经过与原来相同的分化过程，重新形成各类组织和器官的过程。
胚状体：在离体过程中产生一种形似胚（具有明显的根端和芽端），功能与胚相同的结构。
褐变现象：指在接种后，其表面开始褐变，有事甚至会使整个培养基褐变的现象。
继代培养材料的玻璃化：当植物材料不断的进行离体繁殖时，有些培养物的嫩芽，叶片往往会呈半透明水迹状，这种现象通常成为玻璃化。
人工种子：通过植物组织培养的方法获得的具有正常发育能力的材料，外被有特定的物质，在适宜的条件下可以发芽成苗的植株幼体。
植板密度：形成的细胞团数/植板的细胞总数×100%对称融合：双方原生质体均带有核基因组和细胞质基因组的全部遗传信息。
非对称融合：指一方亲本的全部原生质与另一方亲本的部分核物质及细胞质物质重组产生不对称杂种。
继代培养：是初代培养之后的连续数代的扩繁培养过程。
目的：繁殖出相当数量的无菌苗，最后达到边繁殖边生根的目的。
细胞悬浮培养：将游离的植物细胞按一定的细胞密度悬浮在液体培养基中进行培养的方法。
根据培养基的类型分为: 固体培养（琼脂、卡拉胶等固化），半液半固体培养(固液双层)，液体培养（震荡、旋转或静置培养）。
液体培养的优点：不使用凝固剂，节约生产成本，营养吸收充分；操作过程简化。
组织培养按培养对象可分为：植株培养，器官培养，组织培养，细胞培养，原生质体培养。
植物组织培养一般过程:初代培养，继代培养，生根培养，驯化移栽。
植物组织培养的特点：培养条件可以人为控制，生长周期短，繁殖率高，管理方便，利于工厂化生产和自动化控制。
组织培养技术在农业生产上的应用主要体现于以下几个方面：快速繁殖优良苗木；获得脱毒苗；育种上应用；工厂化育苗。
1902年，德国著名的植物生理学家和植物学家哈伯兰特提出了高等植物细胞全能性。
1958年，美国植物学家斯图尔德等人，用胡萝卜根韧皮部的细胞进行培养，得到了完整植株，证明了细胞全能性。
怀特于1943年发表了《植物组织培养手册》专著，使植物组织培养开始成为一门新兴的学科。
腺嘌呤与生长素的比例是控制芽和根形成的主要条件之一，这一比例高时，产生芽，这一比例低时，则形成根，相等则不分化。
标准的组培实验室包括：1、洗涤室，器具的洗涤，干燥和消毒，2、配置室，进行药品的保存，配置，消毒，分装等，3、灭菌室，培养基及使用器具的消毒与灭菌，4、接种室，进行材料的接种，内置超净工作台或接种箱，外设缓冲间，放置拖鞋，工作服，工作帽，5、培养室，将接种的材料进行无菌培养生长的场所，6、细胞学观察实验室、进行培养材料的组织学，细胞学的观察照相等。
高压灭菌锅的使用方法：1、加热，灭菌前检查灭菌锅内水量是否充足，然后将培养基放于灭菌锅内，盖好盖，关闭放气阀，打开电源，加热开温，2、排气，当温度开至0.5kg/cm2 时，打开放气阀彻底排出锅内空气，然后关闭放气阀，促使压力继续上升，3、温度控制，当锅内压力升至1.1kg/cm2 时，计时15-20分钟，计时结束后，关闭电源，4、出锅，当灭菌锅自然冷却后，取出培养基，放置于接种室备用。
MS培养基特点：1、无机盐离子浓度高，硝酸盐含量较高，2、用于植物的器官，花药，细胞和原生质体培养（大多数双子叶植物）。
B5培养基特点：1、含有较低的铵，可能对不少培养物的生长有抑制作用，2、双子叶植物尤其是木本植物组培可选择。
White培养基特点：1、无机盐数量较低，2、适于生根培养。
N6培养基特点：1、成分较简单，KNO3和（NH4）2SO4含量高，3、适合花药培养。
KM-8P培养基特点：1、有机成分较复杂，它包括了所有的单糖和维生素，2、广泛用于原生质体培养，包括融合的培养。
培养基成分：水，无机盐（大量元素，微量元素），有机物（碳水化合物，维生素，氨基酸，肌醇，天然复合物），植物生长调节物质（植物激素，植物生长调节剂），培养材料的支持物（琼脂），其他辅助型物质（抗生物质，抗氧化物，活性炭）。
培养基的制备：1、选择合适的培养物，2、母液的配置，3、量取母液，4、称量蔗糖，琼脂放入600ml蒸馏水的锅内，加热使其溶化，5、加入母液，混合均匀，6、定容，7、调PH，8、分装入瓶，9、封口，10、灭菌备用。
灭菌种类：物理方法：干热（烘烧和灼烧），湿热（常压或高压蒸馏煮），射线处理（紫外线，超声波，微波），过滤，清洗和大量无菌水冲洗等。
化学方法：使用升汞，甲醛，过氧化氢，高锰酸钾，漂白粉，次氯酸钠，酒精化学药品处理。
褐变现象产生原因：1、植物品种，由于多酚氧化酶活性上的差异，不同品种间的褐变现象不同，2、生理状态，由于外植体的生理状态不同，在接种后褐变程度也有所不同，一般来说，幼嫩的组织在接种后褐变程度不明显，而老熟的组织在接种后褐变程度较为严重，3、培养基成分，浓度过高的无机盐会使某些观赏性植物的褐变程度增加，此外，细胞分裂素的水平过高也会刺激某些外植体的多酚氧化酶的活性，从而使褐变现象加深，4、培养条件不当，如果光照过强，温度过高，培养时间过长等，均可使多酚氧化酶的活性提高，从而加速被培养的外植体的褐变程度。
防止，减轻褐变现象发生的措施：1、选择合适的外植体，一般来说，最好选择生长处于旺盛的外植体，这样可以使褐变现象明显减轻，2、合适的培养条件，无机盐成分，植物生长物质水平，适宜温度及时继代培养均可以减轻材料的褐变现象。
玻璃化产生原因：1、不同种类品种间试管苗的玻璃化程度有差异，2、当培养基细胞分裂素水平较高时易出现玻璃化现象，3、培养容器中空气湿度过高，透气性较差时易出现玻璃化现象。
解决方法：1、减少培养基中的溶质水平，以降低培养基的水势，2、减少培养基中含氮化合物的用量，3、增加光照，4、增加容器通风，进行CO2施肥，5、降低培养温度，进行变温培养，6、降低培养基中的细胞分裂素含量，可以考虑加入适量脱落酸或少量聚乙烯醇。
胚乳培养的主要目的：获得无子结实的三倍体植株。
体细胞胚胎同步化的方法：1、化学抑制法，2、低温抑制法，3、渗透压选择法，4、机械过筛选择法（过滤），5、应用植物胚性细胞分级仪。
保证训化移栽存活率的方法：1、培育壮苗，2、选择合适的移栽介质，3、注意移栽方式，4、加强栽后的环境调控。
胚培养的意义：1、用于胚的挽救，2、打破种子休眠，3、克服珠心胚的干扰，4、诱导胚状体及胚性愈伤组织，5、种子生活力的快速测定。
重要的脱毒方法及基本原理：1、热处理脱毒，原理，当植物组织处于高于正常温度的环境中时，组织内部的病毒受热后部分或全部钝化，不能生成或生成的病毒很少，以致病毒含量不断降低，从而达到脱毒的目的，2、微茎尖培养脱毒，原理：感染病毒植株的体内病毒的分布不均匀，病毒的数量随植株部位及年龄而异，越靠近茎顶端区域的病毒的感染程度越低，生长点则几乎不含或含病毒很少，3、热处理结合茎尖培养脱毒，4、微体嫁接脱毒，5、抗病毒药剂脱毒。
以脱毒为目的微茎尖培养的材料要求：消毒，剥离幼叶和叶原基，切取0.1-0.2mm大小，仅留一两个叶原基的茎尖分生组织。
脱毒苗的检测方法：1、指示植物法，利用病毒在其他植物（指示植物）上产生特定症状（枯斑和空斑）作为鉴别病毒存在与否和种类的方法。
2、抗血清鉴定法：植物病毒是由蛋白质和核酸组成的核蛋白，是一种较好的抗原，给动物注射后会产生抗体，这种抗原和抗体所引起的凝集成沉淀反应就叫做血清反应。
3、电子显微镜检查法，4、酶联免疫测定法。
花粉、花药培养的异同：1、培养目的相同，均获得小孢子植株，2、花药培养属于器官培养，花粉培养属于细胞培养，3、花药培养没有药壁组织干扰，可计数小孢子产生率，可观察雄核发育的全过程，单倍体产量高，但技术复杂。
离体授粉的方法：1、胚珠试管受精2、子宫离体授粉3、雌蕊离体授粉花粉花药培养的作用：1、在植物育种中使后代迅速结。
2、提高目标基因型选择效率。
3、排除杂种优势对后代选择的干扰。
4、遗传研究的良好实验材料体系。
5、突变体的筛选。
6、消除至死基因。
7、选育新型自交系。
8、遗传转化的受体材料。
离体条件下的小孢子发育：1、营养细胞发育途径：营养细胞重复分裂形成单倍体。
2、生殖细胞发育途径：由生殖细胞重复分裂形成单倍体。
3、营养细胞与生殖细胞并进发育途径：由营养细胞和生殖细胞各自独立分裂，共同形成单倍体。
4、花粉均等分裂途径：营养细胞和生殖细胞通过核融合，形成多倍体植株。
小孢子正常发育途径：小孢子母细胞经减数分裂形成四分孢子，然后经单核早期、单核靠边期、双核期，最后达到三核期而成为成熟花粉。
花粉花药预处理方法：①高低温处理。
②化学物质处理。
③其他：包括γ射线、离心、磁场等。
低温处理最常用。
单细胞的分离途径：①由植物细胞分离单细胞。
②由愈伤组织分离单细胞单细胞的分离方法：①机械法②酶解法单细胞培养的方法：①平板培养②看护培养③微室培养④条件培养基培养法影响单细胞培养的因素：①培养基成分②细胞植板密度细胞悬浮培养的方法：①分批培养②连续培养③半连续培养细胞培养的应用：①筛选突变体②生产次级代谢物③诱导多倍体④生产人工种子分离原生质体所用的酶类：①纤维素酶②果胶酶③半纤维素酶原生质体培养的过程：原生质→细胞再生→细胞分裂→细胞团芽和根原生质体培养的方法：①细胞植板法②半固体培养基法③琼脂糖法④多用液体培养基法原生质体活性试验：①以胞质环流作为代谢活跃进行的指标②以氧的摄入量作指标，可通过指示呼吸代谢强度的氧电极进行测定。
③以光合活性做指标④以完整的质膜排斥伊月蓝的能力做指标。
⑤以二乙酸荧光素的染色能力为指标：荧光素双醋酸酯（FDA）染色法原生质体融合方法：1、自发融合2、诱发融合①化学融合a、NaNO3融合。