植物组织培养知识点总结
植物组培知识点总结
植物组培知识点总结一、植物组织培养的基本原理1. 植物细胞的再生能力植物细胞具有再生能力，通过植物组织培养技术，可以利用这种再生能力实现植物无性繁殖和遗传改良。
2. 植物生长调节物质的作用通过植物生长调节物质的添加，可以调控植物细胞、组织和器官的生长和分化，实现植物组织培养的目的。
3. 培养基的配制培养基是植物组织培养的基础，其成分的配制对于植物的生长和再生有着重要的作用。
二、植物组织培养的应用1. 植物无性繁殖利用植物组织培养技术，可以实现植物无性繁殖，包括离体茎段培养、愈伤组织培养、悬浮细胞培养等方法。
2. 植物遗传改良通过植物组织培养技术，可以实现植物的遗传改良，包括突变选育、重组DNA技术等方法。
3. 植物真种繁殖利用植物组织培养技术，可以实现植物的真种繁殖，包括种子培养、乳母细胞培养等方法。
4. 植物无菌播种通过植物组织培养技术，可以实现植物的无菌播种，可以提高播种的成活率和生长速度。
5. 植物快速繁殖通过植物组织培养技术，可以实现植物的快速繁殖，可以节省时间和成本，提高繁殖效率。
三、植物组织培养的培养技术1. 植物组织的获取植物组织培养的第一步是获得植物组织，可以通过切取植物茎、叶、根等组织，或者通过离体芽、离体胚等方式获得植物组织。
2. 培养基的配制培养基是植物组织培养的基础，其成分的配制对于植物的生长和再生有着重要的作用，可以根据不同的需要调整培养基的成分。
3. 植物组织的培养条件植物组织培养需要一定的培养条件，包括光照、温度、湿度、氧气等条件，不同植物对培养条件的要求有所不同，需要根据具体情况进行调控。
4. 植物组织的再生在适当的培养条件下，植物组织可以实现再生，包括愈伤组织的形成、植物器官的再生等过程，需要注意再生过程中的微生物污染和植物器官的发育。
5. 植物组织的分化植物组织培养过程中，需要注意植物组织的分化，包括根、茎、叶等植物器官的分化，可以根据需要调控植物组织的分化方向。
植物组织培养复习资料
植物组织培养复习资料一、名词解释。
（每个3分，共24分）１、植物组织培养：在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或发育成完整植株的技术。
又称植物离体培养。
２、细胞的全能性：指植物体的任何一个有完整细胞核的活细胞都具有该植物的全套遗传基因和产生完整植株的潜在能力。
3、脱分化：离体培养条件下生长的器官、组织、细胞，经过细胞分裂或不分裂而恢复分生状态，形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞过程。
4、外植体：从活体植物上切取下来，用以进行离体培养的那部分组织或器官。
5、单细胞培养：对分离的到的单个细胞进行培养，诱导其分裂增殖，形成细胞团，再通过细胞分化形成芽、根等器官或胚状体，直至长成完整植株的技术。
6、胚状体：亦称体细胞胚。
指在组培过程中，由植物体细胞所形成的类似于合子胚的结构。
它具有根、茎结构，能够一次性形成再生植株。
7、平板培养：是将悬浮培养的细胞接种到未固化的薄层培养基中，使其与培养基充分配合，再倒入培养皿中进行培养的方法。
8、人工种子：指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽，被包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中，从而形成能发芽出苗的颗粒状。
9、次生代谢产物：指植物生长发育正常运行的非必需的小分子有机化合物，其产生和分布通常有种属、器官、组织以及生长发育时期的特异性。
10、再分化：细胞经过脱分化形成的愈伤组织再次分化，进行器官形成，产丛生芽或胚状体，形成完整植株的过程。
11、无病毒苗:指不含该种植物主要危害病毒的苗木。
二、不定项选择1、培养室里的湿度一般保持在____C_____.A 30~40%；B 50~60%；C 70~80%；D 80~90%2. 下列不属于生长素类的植物激素是____A D____。
A Kt；B IAA；C NAA；D ZT3. 影响培养基凝固程度因素有_______A B C D__.A 琼脂的质量好坏；B 高压灭菌的时间；C 高压灭菌的温度；D 培养基的PH4. 活性炭在组织培养中的作用有_______ABC_。
植物组织培养学复习总结
植物组织培养学复习总结一、名词解释：继代培养：根据培养过程，将从植物体上分离下来的部分进行第一次培养，称初代培养，以后将培养物转移到新的培养基上继续，则统称继代培养。
固体培养：根据培养基物理状态，把加入琼脂使培养基呈固体状态的培养，称固体培养。
液体培养：根据培养基物理状态，不加入琼脂而培养基呈流体状态的培养，称液体培养。
脱分化：由高度分化的植物组织或器官产生愈伤组织的过程，就称为植物细胞的脱分化。
再分化：从愈伤组织再生出小植株的过程被称为再分化。
驯化现象：植物组织经长期继代培养要加入生长调节物质，其后加入少量或不加入生长调节物质就可以生长，这种现象称为“驯化”现象。
衰退现象：除了驯化以外，长期继代培养德望材料也会逐渐衰退，丧失形态发生能力，具体表现在生长不良，再生能力和增殖率下降等。
花粉和花药的培养：是指花粉在培养基上改变其正常发育和机能，不经受精而发生细胞分裂，由单个花粉粒发育成完整植株的技术。
外植体：从植物体上分离下来的用于离体培养的材料。
看护培养法：把单个细胞置于一块活跃生长的愈伤组织（也称看护愈伤组织）上培养，在愈伤组织和培养的细胞之间，用一片滤纸相隔。
离体保存：将组织和细胞培养中的外植体或试管苗贮存在使其抑制生长、缓慢生长或无生长的条件下，达到长期保存的方法就是离体保存。
二、填空题和判断改错题：超净工作台：一般由鼓风机、滤板、操作台、紫外光灯和照明灯部分组成。
室内温度通常要求250C左右。
糖类的作用：在培养基中糖类除了作为碳源和能源外，还具有维持培养基一定渗透压作用。
MS培养基特点：无机盐的浓度高，有加速愈伤组织生长的作用，能满足植物组织对矿质营养的要求。
N6培养基是1974年由我国的朱至清等为水稻等禾谷类作物花药培养而设计。
1971年，Haccius提出胚状体的标准：（1）胚状体具有极性，（2）在组织学上，胚状体微管组织的分布“Y”字形。
生长素是体细胞胚胎发生起重要作用的培养基成分。
植物组织培养
植物组织培养一、名词解释1.植物组织培养：在无菌条件下利用人工培养对植物的器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使之再生成完整植株或其他具有经济价值的生物产品技术。
2.外植体：由植物体上切取下来，用于培养的那部分组织、器官等。
3.MS培养液：murashige和skoog于1962年为烟草细胞培养设计的，其特点是无机盐和离子浓度较高，是比较稳定离子平衡溶液，它的硝酸盐含量较高，其养分的数量和比例合适，能满足植物细胞的营养和生理需要，因而适用范围较广多数植物组织培养、快速繁殖用它作为培养的基本培养基。
4.器官发生：离体培养的组织，细胞在诱导条件下经分裂和增殖，再分化形成根和芽等器官的过程。
5.体细胞胚胎发生：单个细胞经反复细胞分裂形成一个细胞团，经历球形期、心形期、鱼雷型期的发育过程之后，最终由细胞胚长成小植株。
6.花粉培养：把花粉从花药中分离出来，以单个花粉粒作为外植体进行离体培养的技术。
7.人工种子：通过植物组织培养技术获得胚芽、胚根、胚轴等结构的植物胚状体，将其包埋在含有营养物质和保护功能的人工薄膜中所得的种子。
8.雄核发育：小孢子沿孢子体途径发育成花粉植株的过程。
9.胚的早熟萌发：在胚培养或发育过程中未经正常的胚胎发育过程而形成的幼苗的现象。
10.细胞悬浮培养：将游离的细胞或细胞团按照一定的细胞密度悬浮在液体培养基中进行培养的方法。
11.条件培养基：曾经培养过一段时间植物组织的培养基。
12.离体授粉的4种方式：1）离体胚珠授粉：将花粉授予离体的胚珠上而结实的方法。
2）离体柱头培养：将花粉授予离体的柱头上进而实现受精作用的方法。
3）离体胎座授粉：将花粉授予连在胎座的胚珠上进而实现受精作用的方法。
4）离体子房授粉：将花粉送入离体子房中进而实现受精作用的方法。
13.细胞密实体积（pcv）每毫升培养液中细胞总体积的毫升数。
14.继代培养：愈伤组织在培养基上生长一段时间后，由于营养物质枯竭，水分散失以及新陈代谢产物积累，必须转移到新鲜培养基上培养的过程。
植物组织培养概论
广义概念
人工培养植物体一 部分(即外植体 ) 生成完整植株。
愈伤组织：在离体培养过程中在人工培养基 上从外植体上长出来的，改变了它们原有的特性， 具有分生能力的能迅速增殖的无特定结构和功能 的细胞团。多在植物体切面上产生。
外植体：是指从植物体上分离下来的用于植 物组织培养的接种材料，它包括植物体的各种器 官、组织、细胞和原生质体等。
思考题：
1.什么是组织培养？组织培养的原理是什么？
2.组织培养分哪几种类型？ 3.组织培养有哪些特点？
四、植物组织培养的理论基础
细胞全能性理论
植物每一个具有 完整细胞核的体细胞， 都含有植物体的全部 遗传信息，在适当条 件下，具有发育成完 整植株的潜在能力。
植物细胞全能性的表达
分裂 细胞 分化 再 分 化 器官 分裂
组织
脱分化
已分化组织细胞
分裂 植株
植物细胞全能性的实现
• 植物的生活史：
受 精 卵 早期胚 胎发育 合 分化 子 胚 组 织 形成 器 构成 植 物 体
茎段培养成苗示意图
茎段培养成苗示意图
组织培养：为狭义的植物组织培养，是对植物体的 各部分组织进行培养，如茎尖分生组织、形成层、• 木质部、韧皮部、表皮组织、胚乳组织和薄壁组织 等等；或对由植物器官培养产生的愈伤组织进行培 养。二者均通过再分化诱导形成植株。
组织培养
愈伤组织培养 分生组织培养 薄壁组织培养 输导组织培养
团按照一定密度在液体培养基中进行培养增殖的技术。
平板培养：是指将一定密度的悬浮细胞接种到一薄
层固体培养基中进行培养的技术。
看护培养：是指利用生长的愈伤组织所产生的物质
来培养单细胞或者异种愈伤组织等的方法。
微室培养：是指人工制造一个微室，将单细胞培养
植物组织培养知识点总结
堂清日结31、原生质是细胞内生命物质的总称。
原生质层指的是细胞膜和液泡膜以及两层膜之间的细胞质。
去掉细胞壁的植物细胞就是原生质体，所以一个动物细胞就相当于一个原生质团。
2、原生质层的融合过程体现了细胞膜的流动性。
3、植物体细胞融合的实质：原生质体的融合，植物体细胞融合完成的标志：细胞壁的再生。
新细胞壁的产生与细胞内高尔基体相关。
4、植物组织培养中愈伤组织的形成是细胞分裂的结果。
5、植物细胞工程通常所采用的技术手段：植物组织培养技术和植物体细胞杂交技术。
6、植物体细胞杂交的过程：1）酶解法去除细胞壁，获得原生质体2）利用物理或者化学法诱导原生质体的融合3）再生细胞壁，获得杂种细胞。
4）利用植物组织培养技术，通过脱分化和再分化获得杂种植物。
7、微型繁殖技术：也叫快速繁殖技术即快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。
该技术与传统繁殖技术相比，具有：①繁殖速度快；②“高保真”（因为是无性繁殖）；③不受自然生长季节的限制（因为在具有一定人工设施的室内生产）等特点。
堂清日结41、作物脱毒材料：分生区细胞作物脱毒方法：进行植物组织培养作物脱毒结果：获得脱毒苗脱毒苗的特点：不会或极少感染病毒。
2、人工种子的组成：胚状体（或不定芽或顶芽或腋芽）+人工薄膜；要获得人工种子，需将离体的器官、组织或细胞培养至再分化阶段。
3、人工种皮中应具有的有效成分：适量的养分、无机盐、有机碳源、农药、抗生素、有益菌等，为了促进胚状体的生长发育，还可以向人工种皮中加入植物生长调节剂。
4、单倍体育种原理：染色体变异方法：花药离体培养采用的技术：植物组织培养技术优点：后代无性状分离、明显缩短育种年限突变体的利用育种原理：突变（基因突变、染色体变异）优点：能够产生新性状植物体细胞杂交育种原理：染色体变异优点：克服远缘杂交不亲和的障碍5、植物组织培养中易获得突变体的原因：培养的细胞一直处于分生的状态，易受培养条件和外界压力（如射线、化学物质等）的影响。
植物组培知识
植物组培知识一、组培研究历史1902年德国植物学家Haberlandt提出了细胞全能性概念。
1939年White报道了烟草组培成功。
并提出植物细胞全能性学说。
同年，Gautheret与Nobecourt 培养胡萝卜成功。
此三人被誉为植物组织培养奠基人。
40年代末50年代初Skoog等人进行烟草髓培养诱导根、芽器官，获得成功。
1957年Skoog和Miller提出了有关植物激素控制器官形成的概念。
1958年美国Steward 等和德国Reinert等分别由培养的胡萝卜根细胞诱导形成了胚状体，形成新植株。
有力地证明了细胞的全能性。
二、植物细胞的再生性问题在植物中很多是靠种子生长来产生完整的植株，但也有不少可通过根、茎、叶等器官再生而成为完整的植株，这种特性叫细胞的再生性。
从植株分离出根、茎、叶的一部分器官，其切口处组织是受到了损伤，但这些受伤的部位往往会产生新的器官，长出不定芽和不定根，人们利用这一特点来进行营养繁殖。
新器官产生的原因是由于受伤的组织产生了创伤激素，促进了周围组织的生长而形成愈伤组织，凭借内源激素和储藏营养的作用，于是就产生了新的器官。
而为什么在自然条件下，一些植物的营养器官和细胞难以再生呢？这主要是由于内源激素调整缓慢或不完全，外界条件不易控制等因素所致。
在人工控制的条件下，通过对培养基的调整，特别是对激素成分的调整，就有可能顺利地再生。
三、培养基的成分用于植物组培的培养基的成分主要包括：无机营养（即无机盐类）、维生素类、氨基酸、有机附加物、植物生长调节物质、糖类和琼脂等。
（1）无机营养：无机营养又分为大量元素和微量元素（根据国际植物生理学会建议，植物所需元素的浓度大于0.5m mol/l(每升毫摩尔) 的称大量元素）。
（2）氨基酸：氨基酸是蛋白质的组成成分，也是一种有机氮化合物。
有机氮作为培养基中的唯一氮源时，离体组织生长不良，只有在含有无机氮的情况下，氨基酸类物质才有较好的效果。
植物组织培养
1、植物组织培养：植物的离体器官、组织或细胞在人工制备的培养基上进行无菌培养，并在人工控制的环境条件下，使其发育成完整植株的科学技术。
2、脱毒苗：是指不含该种植物的主要危害病毒，即经检测主要病毒在植物内的存在表现阴性反应的苗木。
3、看护培养：是指用一块活跃生长的愈伤组织来看护单个细胞，使其持续分裂和增殖的一种培养方法。
这块愈伤组织被称为看护组织。
4、外植体褐变：在组织培养过程中，外植体向培养基中释放褐色的物质（醌类）致使培养基逐渐变成褐色，培养材料也随之变成褐色而逐渐死亡的现象。
5、原生质体融合：指使分离下来的不同亲本的原生质体，在人工控制的条件下，像性细胞受精作用那样互相融合成一体，又称体细胞杂交。
6、基本培养基：包括大量元素和微量元素（无机盐类）、维生素和氨基酸，还有糖和水等。
7、玻璃化现象：指试管苗的一种生长失调症状，当植物材料进行离体繁殖时，有些培养物的嫩茎、叶片往往会出现半透明状和水渍状，这种现象称为玻璃化。
其苗称为玻璃化苗。
8、无病毒苗：指不含该种植物主要危害病毒的苗木。
9、人工种子：指通过组织培养技术，将植物的体细胞诱导在形态上和生理上均与合子胚相似的体细胞胚，然后将它包埋于有一定营养成分和保护功能的介质中，组成便于播种的类似种子的单位。
10、植物种质：物亲代通过生殖细胞或体细胞传递给后代的遗传物质，植物种质资源即为携带各种不同遗传物质的植物总称。
5、选择外植体时应选择选择优良的种质、外植体的增殖能力、外植体的年龄和着生部位和选取适宜的大小。
6、花药和发粉培养的共同特点是利用花粉 (小孢子)染色体数目的单倍性，培育出单倍体植株。
7、原生质体培养的方法为固体培养法、液体培养法与固液结合培养法。
8、根据外植体材料，植物组织培养分：植株培养、器官培养、细胞培养、原生质体培养等类型。
9、糖在植物组织培养中是不可缺少的，它不但作为离体组织赖以生长的碳源，而且还能维持培养基渗透压。
10、一般情况下，生长素/细胞分裂素的比值高，有利于根的形成和愈伤组织的形成；比值低，有利于芽的形成。
植物组织培养
植物组织培养植物组织培养：在无菌的条件下，将离体的植物材料包括器官，组织，细胞以及原生质体在人工培养基上进行培养，使其再生发育成完整植株的过程，又称植物离体培养。
细胞全能性：植物体的任何一个细胞都携带该物种的全部遗传信息，离体细胞在一定的条件下具有发育成完整植株的潜在能力。
外植体：植物组织培养中离体的植物材料，包括植物器官，胚胎、组织、细胞和原生质体。
细胞分化：导致细胞形成不同结构，引起功能改变或潜在发育方式改变的过程。
脱分化：已分化成熟的植物组织或器官回复到分生状态，细胞开始分裂形成无组织结构的细胞团或愈伤组织的过程。
再分化：是指在一定条件下，脱分化形成的愈伤组织转变成为具有一定结构、执行一定生理功能的细胞团和组织、并进一步形成完整植株的过程，即从愈伤组织再生形成完整植株的过程。
愈伤组织：植物体受伤后的伤口处或在植物组织培养中外植体切口处产生的一团不定型的薄壁组织。
离体无性繁殖：根据植物细胞全能性原理，在无菌条件先短时间内形成大量植株。
玻璃化苗：在植物组培中，茎叶形成透明矮小肿胀的形态，生根能力差。
问答题：1、无菌操作是贯穿于整个组织培养过程的一门关键技术，请根据自己的体会论述如何在植物组织培养过程中做到无菌？1〕取少菌的材料〔春夏，中午的幼芽〕 2〕严格灭菌3〕合理安排操作程序 4〕无菌保存 5〕操作标准2、组培在生产上的应用有哪些？学好植物组培的意义？1〕植物快速繁殖：增殖速度快，本钱低，易于批量生成和管理。
比方利用一小块叶片或一个茎尖，一年内可繁殖出1000-100000株幼苗2〕脱除病毒：植物在生长过程中几乎都要蒙受到病毒的危害，采用茎尖培养方法可以除去植物体内的病毒。
脱毒苗恢复了原有的优良种性，生长势明显增强，整齐一致。
3〕培养新品种：克服远缘杂交不亲合性；克服远缘杂交的不孕性；选择细胞突变体；单倍体育种；转基因育种。
4〕植物次生代谢产物生产：利用植物组织后细胞的大规模培养，可以生产一些天然有机化合物，这些次生代谢产物，往往具有一些特定的功能，对人类有重要的影响和作用。
植物组织培养复习
植物组织培养复习1、概念：组织培养：利⽤植物离体器官、组织或细胞(包括原⽣质体)，在适宜的⼈⼯培养基上和⽆菌条件下进⾏培养，使其⽣长、增殖、进⽽发育形成⼩植株的⽅法。
也称之为离体培养（In vitro culture）。
愈伤组织：原指植物在受伤后，于伤⼝表⾯形成的⼀团薄壁细胞。
在组织培养中，指在⼈⼯培养基上由外植体长出来的⼀团⽆序⽣长的薄壁细胞。
外植体：由活植物体上切取下来的可以⽤于组织培养的组织或器官2、为什么说愈伤组织是最为常见的培养⽅式？原因：⼤部分组织培养经历callus再⽣途径长出植株；callus可以⽤于悬浮培养和原⽣质体培养。
3、组织培养的类型有哪些？a按培养⽅法：固体培养、液体培养、看护培养、微室培养、包埋培养等b按培养过程：初代培养、继代培养4、组织培养在园艺业（农业）上的应⽤有哪些？a倍性育种：花药培养、胚乳培养b突变体筛选：愈伤组织培养c创造新种质：细胞融合d克服胚败育：胚培养e植物性药物和⽣物制品的⽣产5、在组织培养技术的发展中做出巨⼤贡献的⼈。
6、⼀个正规的组织培养实验室应具备哪些基本仪器？有何⽤途？烘箱，冰箱，灭菌锅，超净⼯作台，酸度计，摇床，显微镜，天平，培养箱。
玻璃器⽫，微孔过滤器，细胞计数器，接种⽤具。
7、⼀个正规的组织培养实验室应具备哪些房间？洗涤室（区），制备室（区），灭菌室（区），贮放室（区），操作室（区），培养室（区），观察室（区），药品室（区）8、详细叙述组织培养过程中的基本技术规程洗涤，灭菌，⽆菌操作~9、培养基的类型有哪些？a按性质分：基本培养基，完全培养基b按状态分：固体培养基，液体培养基10、培养基的主要成分有哪些？各有何作⽤？a⽆机营养成分：⼤量元素（氮，磷，钾，钙，镁，硫）微量元素（硼、锰、锌、钼、铜、钴、氯、铁）b有机营养成分：含氮有机物（维⽣素、氨基酸）碳源和能源，植物激素c其他成分：活性炭，琼脂，抗⽣素，缓化剂11、配制培养基的基本步骤及注意事项有哪些？选择，配置（取样，加成分，测PH）12、什么是⼈⼯种⼦？有哪些特点与优点？⼈⼯种⼦：(artificial seeds)亦称体细胞种⼦。
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植物组织培养知识点总结第一、二章1 植物组织培养概念、分类、应用、创始人、奠基人2 实验室各分室名称、主要设备、主要功能3 无菌操作技术流程4 表面消毒剂种类及作用效果5 培养基成分及各成分的作用6 植物组织培养三大难题7 那些成分要抽滤灭菌第三、四章8 植物细胞全能性原理9 名词解释：愈伤组织、脱分化、体细胞胚、人工种子10 体细胞胚的特点11 愈伤组织形成发育的三个时期，两种类型，良好愈伤组织的特点12 植物离体微繁，一般过程，各阶段注意事项13 褐变，影响褐变的因素，克服褐变的措施；玻璃化，无糖培养技术第五、六、七章14 植物脱毒方法、原理15 脱毒率包括两种方面含义16人工诱导单倍体的三种途径17花药培养得到的再生植株倍性如何，为什么18 花药培养的应用，花药培养力，一般培养过程。
19 离体幼胚培养，胚发育有几种类型？各有何特点？20 离体授粉离体受精21 简述胚乳培养的意义第八、九章22 原生质体概念，两种分离方法，纯化方法。
23 酶法分离植物原生质体的酶液组成及作用24 简述植物原生质体培养基的特点25 原生质体融合，融合的主要方法26 体细胞杂交过程27 融合产物的种类及特点28 植物细胞无性系变异，特点29 提高植物细胞无性系变异频率的方法30 细胞突变体的类型及对应的筛选方法植物组织培养知识点总结第一、二章1 植物组织培养概念、分类、应用、创始人、奠基人概念：是一种将植物的器官、组织或细胞在适当的培养基上进行无菌培养，并重新再生细胞或植株的技术。
分类：（1）按外植体来源和特性分：植株培养胚胎培养器官培养组织或愈伤组织培养细胞或原生质体培养；（2）按培养方法分：固体培养液体培养固体液体两相培养应用：（1）克服远缘杂交中杂种不育性，种子无活力或配发育不全的植物获得后代，一年多代育种（2）培育三倍体（3）单倍体育种（4）提高突变频率，筛选变异类型（5）经过细胞融合得到体细胞杂种（6）种质资源保存2 实验室各分室名称、主要设备、主要功能化学实验室（准备室）无菌操作室（接种室）培养室高压灭菌室细胞学实验室3 无菌操作技术流程4 表面消毒剂种类及作用效果漂白粉饱和溶液 10-30m 效果很好氯化汞 0.1-0.2% 3-12m 效果最好酒精 70-75% 10-30s 效果好5 培养基成分及各成分的作用水提供水分，营造环境无机盐大量微量提供细胞生长所需元素有机化合物碳源：提供能源、维持渗透压；维生素参与代谢；氨基酸，促进芽根胚状体生长和分化植物生长调节物质调节细胞生长天然复合物其他成分活性炭吸附；抗生素防止内生菌污染6 植物组织培养三大难题污染褐变玻璃化7 那些成分要抽滤灭菌热不稳定成分如：IAA ABA ZT GA3第三、四章8 植物细胞全能性原理植物的每一个细胞都具有该植物的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。
9 名词解释：愈伤组织、脱分化、体细胞胚、人工种子愈伤组织：原指植物体的局部受到创伤刺激后，在伤口表面新生的组织。
它由活的薄壁细胞组成，可起源于植物体任何器官内各种组织的活细胞。
脱分化：改变细胞原来的结构和功能，而回到无结构的分生组织状态即愈伤组织状态。
体细胞胚：在离体或活体条件下，由除合子外是孢子体细胞形成的胚，其经历的发育阶段与合子胚相似。
人工种子：所谓人工种子就是将组织培养产生的体细胞胚和性细胞胚包裹在能提供养分的胶囊里，再胶囊外包上一层具有保护功能和防止机械损伤的外模，形成一种类似于种子的结构。
10 体细胞胚的特点11 愈伤组织形成发育的三个时期，两种类型，良好愈伤组织的特点启动期，分裂期，形成期；胚性愈伤组织和非胚性愈伤组织良好愈伤组织的特点：1 高度的胚性或再分化能力；2 容易散碎；3 旺盛的自我增值能力；4 进过长期的继代培养不丧失胚性或再分化能力。
12 植物离体微繁，一般过程，各阶段注意事项1 无菌培养物的建立；选择木本植物和较大的草本植物的茎段；草本植物的叶片、叶柄、花瓣。
2 诱导外植体生长与分化；选择适宜的外植体—顶芽、侧芽或带有芽的茎切断；顶端优势较强的植物3 促进中间繁殖体的增值；不同激素水平对中间繁殖体增值有影响。
4 壮苗与生根；调节培养基矿质营养组成、激素种类浓度、渗透压和光照。
5 试管苗出瓶与苗期管理。
保持试管苗水分供需平衡；选择合适种植基质；防止菌类滋生；掌握温度和光照条件。
13 褐变，影响褐变的因素，克服褐变的措施；玻璃化，无糖培养技术褐变：由于组织中的多酚氧化酶被激活，使细胞的代谢发生变化，酚类物质被氧化后产生增褐色的醌类物质，它们会逐渐扩散到培养基中，抑制其他酶的活性，毒害培养的外植体材料。
营养因素：基因型；材料的生理状态和取材时间；培养基成分；外植体大小和培养时间。
克服褐变的措施：1选择分生能力强的外植体和培养时间：低温、液体、低盐、低PH、初代暗培养。
2抗氧化作用； 3连续转移、低温处理。
玻璃化：过度含水化，特有的一种整理失调和生理病变。
茎尖和茎切断培养物不定芽难恢复；难生根。
无糖培养技术：又称光自养微繁。
在一个相对大的培养空间，采用人工环境控制手段，用CO2替代糖作为碳源，提供植物生长适宜的光、温、水、气、营养条件，促进植物的光合作用，从何促进植物增值、生长和发育的技术。
第五、六、七章14 植物脱毒方法、原理1热处理原理：在高于正常温度下，病毒被部分或完全钝化，但是很少甚至不伤害寄住植物。
2 茎尖培养原理：病毒在植物体内分布是不均匀的，顶端分生组织一般无毒或病毒浓度很低。
没有维管系统不利于病毒移动；旺盛分裂的分生细胞代谢活性高，病毒无法复制；具高活性的病毒钝化系统；存在高水平的内源生长素抑制病毒增值。
15 脱毒率包括两种方面含义16人工诱导单倍体的三种途径1植物性器官或性细胞培养；2染色体消失法；3孤雌生殖。
17花药培养得到的再生植株倍性如何，为什么花药培养是通过诱导花药中的小孢子的雄核发育，产生单倍体，通过染色体加倍产生加倍单倍体的技术。
18 花药培养的应用，花药培养力，一般培养过程。
应用于：植物单倍体育种；构建HD群体；遗传工程的受体与基础材料；创建染色体工程的基本材料；转移异源染色体或基因。
花药培养力：愈伤组织诱导率和绿苗分化率。
培养一般过程：取材—表面消毒—接种和培养—花粉植植株的诱导—壮苗和移栽—单倍体植株二倍化19 离体幼胚培养，胚发育有几种类型？各有何特点？幼胚培养：子叶期以前具有胚结构的幼小胚胎类型1正常发育成成熟胚；适用于远缘杂交2不继续胚性生长，而是在培养基上迅速萌发，形成畸形幼苗；应用于一年多代育种3脱分化形成愈伤组织。
常用来建立细胞无性系20 离体授粉离体受精指未授粉的胚珠或子房从母体上分离下来进行无菌培养，并以一定的方式授以无菌花粉，使之在试管内实现受精的技术，又称离体受精。
21 简述胚乳培养的意义创造三倍体植物；为极幼龄胚生长提供营养；研究某些天然产物如淀粉、蛋白质和脂类等生物合成第八、九章22 原生质体概念，两种分离方法，纯化方法。
脱去细胞壁的细胞叫原生质体分离方法：机械法；酶法纯化方法：过滤离心法；漂浮法；23 酶法分离植物原生质体的酶液组成及作用酶液组成：酶---纤维素酶+果胶酶；纤维素酶+蜗牛酶渗透稳定剂---糖醇系统：甘露醇、山梨醇、葡萄糖和蔗糖；盐类系统：氯化钙、硫酸镁、氯化钾、PDS作用：促进酶解作用，保持原生质体的完整性24 简述植物原生质体培养基的特点含有高浓度甘露醇； Ca+、Mg+增加；大量元素浓度低；广泛使用2,4-D；碳源以葡萄糖较好，最可靠；氮源（谷氨酰胺），铵根离子不能过高，硝酸盐有毒害作用25 原生质体融合，融合的主要方法自然界具细胞结构的生物都具有相似的细胞结构，按照相似相容的原理，通过细胞膜的融合，就可以达到同一生物或不同种、属、生物、甚至遗传关系更远生物间的细胞融合，形成细胞杂种。
主要的融合方法：自发融合诱导融合：1离子诱导融合；2高Ca-高pH值法；3聚乙二醇PEG法26 体细胞杂交过程原生质体制备--原生质体融合--杂种细胞选择—杂种细胞培养--杂种细胞再生植株--杂种植株鉴定27 融合产物的种类及特点1亲和的细胞杂种；双亲的亲缘关系较近，杂交植株可育，具双亲的细胞核和细胞质2部分亲和的细胞杂种；杂种以一个亲本细核物质为主，只有少量的另一亲本核，胞质是双亲的。
3胞质杂种：含有一个亲本的核物质，细胞质是双亲的28 植物细胞无性系变异，特点是指植物的组织、细胞、原生质体在离体培养条件下所得的培养物及再生植株的变异。
特点：1是植物组织与细胞培养中一种广泛存在的现象；2变异设计的形状广泛，包括数量性状、质量性状、染色体数目、生理生化特性等方面3细胞无性系变系是可遗传的4无性系变异的频率高低与外植体的来源及培养的时间的长短有关5变异幅度大二畸变率低，单个或少数基因变异占较大比例，一般再生植株二代基本可以得到稳定，同时还具有隐性性状活化的特点29 提高植物细胞无性系变异频率的方法30 细胞突变体的类型及对应的筛选方法细胞突变体：指遗传物质在结构或数量上发生的一种相对稳定的可遗传的变化。
类型：1营养缺陷型细胞突变体-------负选择法毒害正常生长细胞2抗病细胞突变体-------------------绿岛法3抗氨基酸及其类似物细胞突变体-----正选择法4抗除草剂突变体-------------------绿岛法。