植物组织培养知识点归纳教学提纲
植物组培知识点总结
植物组培知识点总结一、植物组织培养的基本原理1. 植物细胞的再生能力植物细胞具有再生能力，通过植物组织培养技术，可以利用这种再生能力实现植物无性繁殖和遗传改良。
2. 植物生长调节物质的作用通过植物生长调节物质的添加，可以调控植物细胞、组织和器官的生长和分化，实现植物组织培养的目的。
3. 培养基的配制培养基是植物组织培养的基础，其成分的配制对于植物的生长和再生有着重要的作用。
二、植物组织培养的应用1. 植物无性繁殖利用植物组织培养技术，可以实现植物无性繁殖，包括离体茎段培养、愈伤组织培养、悬浮细胞培养等方法。
2. 植物遗传改良通过植物组织培养技术，可以实现植物的遗传改良，包括突变选育、重组DNA技术等方法。
3. 植物真种繁殖利用植物组织培养技术，可以实现植物的真种繁殖，包括种子培养、乳母细胞培养等方法。
4. 植物无菌播种通过植物组织培养技术，可以实现植物的无菌播种，可以提高播种的成活率和生长速度。
5. 植物快速繁殖通过植物组织培养技术，可以实现植物的快速繁殖，可以节省时间和成本，提高繁殖效率。
三、植物组织培养的培养技术1. 植物组织的获取植物组织培养的第一步是获得植物组织，可以通过切取植物茎、叶、根等组织，或者通过离体芽、离体胚等方式获得植物组织。
2. 培养基的配制培养基是植物组织培养的基础，其成分的配制对于植物的生长和再生有着重要的作用，可以根据不同的需要调整培养基的成分。
3. 植物组织的培养条件植物组织培养需要一定的培养条件，包括光照、温度、湿度、氧气等条件，不同植物对培养条件的要求有所不同，需要根据具体情况进行调控。
4. 植物组织的再生在适当的培养条件下，植物组织可以实现再生，包括愈伤组织的形成、植物器官的再生等过程，需要注意再生过程中的微生物污染和植物器官的发育。
5. 植物组织的分化植物组织培养过程中，需要注意植物组织的分化，包括根、茎、叶等植物器官的分化，可以根据需要调控植物组织的分化方向。
植物组织培养复习提纲有答案
植物组织培养复习提纲（仅供参考，关键在于全面复习掌握！）一、主要专业术语细胞全能性：在多细胞生物中每个体细胞的细胞核具有个体发育的全部基因，只要条件许可，都可发育成完整的个体。
脱分化：已经分化的植物器官、组织或细胞，当受到创伤或进行离体（也受到创伤）培养时，已停止分裂的细胞，又重新恢复分裂，细胞改变原有的分化状态，失去原有结构和功能，成为具有未分化特性的细胞。
愈伤组织：指切取植物体的一部分，置于含有生长素和细胞分裂素的培养液中培养，诱导产生的无定形的组织团块。
人工种子：指植物离体培养中产生的胚状体（包括体细胞胚和性细胞胚），包裹在含有养分和具有保护功能的物质中，并在适宜条件下能够发芽出苗的颗粒体。
植物快速繁殖：采取培养基配制，材料灭菌，无菌培养，幼苗转移到苗床，成苗转至大田栽种五步走的繁殖培养方式。
单倍体：体细胞中含有本物种配子染色体数(1n)的个体二倍体：体细胞中含有两个染色体组的生物个体胚乳培养：将胚乳从母体上分离出来，放在无菌的人工环境条件下使其进一步生长发育形成幼苗的技术。
连续培养：连续培养又叫开放培养，是相对分批培养或密闭培养而言的。
是采用有效的措施让微生物在某特定的环境中保持旺盛生长状态的培养方法。
胚状体：离体培养条件下，没有经过受精过程，但是经过了胚胎发育过程所形成的胚状类似物看护培养：将亲本愈伤组织或高密度的悬浮细胞同低密度细胞一起培养，以促进低密度细胞生长、分裂的培养方法。
植物种质保存：在适宜环境条件下贮存种质基因载体,使蔬菜种质保持生命力和遗传性的技术。
二、主要知识点1、植物组织培养成功的关键是什么？1.无毒无菌的环境2.生长素或生长素类似物3.通常用固体培养基(琼脂)4.先进行植物组织或器官的脱分化5.长出根来后要保证根呼吸所需氧气2、植物外植体的表面消毒剂种类1、漂白粉（1%~10%的滤液）2、次氯酸钠溶液（0.5%~10%）3、氯化汞（0.1%~1%）4、酒精（70%~75%）5、过氧化氢（3%~10%）6、新洁尔灭等。
植物组织培养复习重点
组培复习材料一、名词解释1、培养基：是离体植物（外植体）赖以生长、分化的基础，是根据植物的需求，人工配制的含有各种营养成分的营养液。
2、液体培养：把细胞或生物体的一部分，置于液体培养基中使其发育，并不断振荡，使之均匀地在悬浊液中进行培养的一种方法。
3、种子培养：是成熟种子和发育不全的未成熟种子的无菌培养。
4、叶培养：从母体植株上将叶组织（包括叶原基在内）切下，放在无菌的人工条件下使其生长发育形成植株的技术。
5、热处理脱毒：在一定范围内，用高温处理可部分或完全钝化植物组织中的某些病毒而不伤害或很少伤害植物本身的脱毒方法。
6、花药培养：是把花粉发育到一定阶段的花药接种到培养基上，来改变花粉的发育程序，使其分裂形成细胞团，进而分化成杯状体，然后再生植株，或形成愈伤组织，由愈伤组织再分化成植株。
7、连续培养：是利用特别的培养容器进行大规模细胞培养的一种培养方式。
（培养过程中，不断注入新鲜培养基，排掉等体积用过的培养基，或者抽取悬浮培养物，使培养物的营养物质得到不断补充，从而保持其恒定体积的培养。
——8、分批培养：指把细胞分散在一定容积的培养基中进行培养，建立单细胞培养物的培养方式。
（细胞生长在固定体积的培养基中，当主要营养物质耗尽时，细胞的分裂和生长即停止。
）二、简答题1、MS培养基特点。
答：MS培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的，其特点是无机盐和离子浓度较高，是较稳定的离子平衡溶液，具有高含量的氮、钾，尤其是硝酸盐用量大，还有一定数量的铵盐，其养分的数量和比例合适，不需要添加更多的有机附加物，就能满足植物组织对矿质营养的要求，加速愈伤组织和培养物的生长，当培养物就不转移时仍可维持其生存。
目前应用最广泛。
2、植物组培生产特点。
答：①和传统的生产方式相比，具有不占耕地、生产不受季节限制而且能够整年连续进行、不受灾害性天气和病虫害影响的特点；②具有人为可控性，可采用更适合于植物生长的“培养基”代替土壤提供养分和生长调节物质；③具有很高的生产效率。
植物组织培养知识点归纳教学提纲
植物组织培养知识点归纳教学提纲第⼀章1、植物组织培养：是指在离体条件下，利⽤⼈⼯培养基对植物的器官、组织、细胞、原⽣质体等进⾏培养，使其长成完整植株2、外植体：在植物组织培养中，由活体（in vivo）植物上提取下来的、接种在培养基上的⽆菌细胞、组织、器官等均称为外植体。
3、愈伤组织：指在⼈⼯培养基上由外植体长出来的⼀团⽆序⽣长的薄壁细胞。
4、应⽤⼀、农业上的应⽤1. 种苗快速繁殖(rapid propagation)2.⽆病毒苗(virus free)的培养3.在育种上的应⽤(breeding)（1）倍性育种，缩短育种年限，杂种优势明显；（2）克服远缘杂交的不亲合性和不孕性（胚培养）；（3）保存种质（4）创造变异⼆、在遗传学、分⼦⽣物学、细胞⽣物学、组织学、胚胎学、基因⼯程、⽣物⼯程等⽅⾯的应⽤。
⽤于基因⼯程技术创造植物新种质。
⽤于植物⽣长发育理论研究，包括⽣理学、病理学、胚胎学和细胞与分⼦⽣物学等。
三、利⽤组织培养材料作为植物⽣物反应器第⼆章1、细胞全能性（Totipotency）：指任何具有完整的细胞核的植物细胞都拥有形成⼀个完整植株所必须的全部遗传信息和发育成完整植株的能⼒。
2、细胞分化（cell differentiation）：指导致细胞形成不同结构，引起功能或潜在的发育⽅式改变的过程。
3、脱分化（Dedifferentiation）：指离体条件下⽣长的细胞、组织或器官逐渐失去原来的结构和功能⽽恢复分⽣状态，形成⽆组织结构细胞团或愈伤组织的过程。
4、再分化（Redifferentiation）：指脱分化的细胞重新恢复分化能⼒，形成具有特定结构和功能的细胞、组织、器官甚⾄植株的过程。
5、植物组织培养中常遇到的问题以及解决措施⼀、污染及防治：1、真菌污染后，如果已形成孢⼦，则必须经⾼压灭菌后扔掉。
但若是细菌污染，只要及时发现，将材料上部未感菌的部分剪下转接，材料仍可使⽤。
2、⽤抗⽣素等杀菌药剂的处理，会影响植物材料正常⽣长。
植物组织培养复习笔记【最新】
植物组织培养复习资料第一章绪论一、概念：植物组织培养：在无菌条件下，将离体的植物器官.组织，细胞以及原生质体. 培养在人1:培养基上和人工控制的环境中，使其生长，分化，增殖，甚至长出新的植株的过程和技术。
外植体：在无菌条件下，离体培养于人工培养基上的，用于达到某种培养目的的原始植物材料C培养基：根据植物营养原理和植物组织离体培养的要求而人匚配制的营养基质即为培养基。
细胞全能性：植物体每一个细胞都含有该植物全部的遗传信息，在合适的条件下，具有形成完整植株的能力。
脱分化：一个成熟细胞恢复到分生状态或胚性细胞状态的现象。
再分化：是脱分化细胞重新恢复细胞分化能力，沿若正常的发育途径，形成具有特定结构和功能的细胞C二、组织培养的类型，不同分类依据（根据培养材料不同）可分为植株培养，胚胎培养，器官培养，组织或愈伤组织培养.细胞或原生质休培养5类：（根据培养目的）可分为试管嫁接，试管受精，试管加倍，试管育种等：（根据培养方法）可分为平板培养，微室培养，悬浮培养，单细胞培养等：（根据培养过程）可分为初代培养和继代培养：（根据培养基类型）可分为固体培养和液体培养。
三、三个发展阶段的关键人物1,haberlandt-一于1902年提出植物细胞全能性理论，被称为“组织培养之父”。
2,white—于1943年出版《植物组织培养手册》。
3,murashine和skoog -- 在1962年筛选出MS培养基。
四、植物全能性表达的过程培养一►脱分彳~再分化一培养五、组织培养的特点：1、植物基础学科研究的良好系统。
2、生物技术的基础。
3、经济高效.管理方便，利于自动化。
4、技术含量高，实验误差小，人工控制能力强。
5、生长周期短，生长速度快，实验重复性好。
6、实验材料经济，来源单一。
六、缺点：需要设备负复柴，投入资金多，电能消耗大：对人员技术水平要求高，对实验场所要求也高，不能代替田间试验。
第二章植物组织培养设备与培养条件一、实验室的组成及主要仪器和设备准备室：干燥箱，高压灭菌锅，电子天平，酸度计，水浴锅，冰箱。
植物组织培养知识点总结
堂清日结31、原生质是细胞内生命物质的总称。
原生质层指的是细胞膜和液泡膜以及两层膜之间的细胞质。
去掉细胞壁的植物细胞就是原生质体，所以一个动物细胞就相当于一个原生质团。
2、原生质层的融合过程体现了细胞膜的流动性。
3、植物体细胞融合的实质：原生质体的融合，植物体细胞融合完成的标志：细胞壁的再生。
新细胞壁的产生与细胞内高尔基体相关。
4、植物组织培养中愈伤组织的形成是细胞分裂的结果。
5、植物细胞工程通常所采用的技术手段：植物组织培养技术和植物体细胞杂交技术。
6、植物体细胞杂交的过程：1）酶解法去除细胞壁，获得原生质体2）利用物理或者化学法诱导原生质体的融合3）再生细胞壁，获得杂种细胞。
4）利用植物组织培养技术，通过脱分化和再分化获得杂种植物。
7、微型繁殖技术：也叫快速繁殖技术即快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。
该技术与传统繁殖技术相比，具有：①繁殖速度快；②“高保真”（因为是无性繁殖）；③不受自然生长季节的限制（因为在具有一定人工设施的室内生产）等特点。
堂清日结41、作物脱毒材料：分生区细胞作物脱毒方法：进行植物组织培养作物脱毒结果：获得脱毒苗脱毒苗的特点：不会或极少感染病毒。
2、人工种子的组成：胚状体（或不定芽或顶芽或腋芽）+人工薄膜；要获得人工种子，需将离体的器官、组织或细胞培养至再分化阶段。
3、人工种皮中应具有的有效成分：适量的养分、无机盐、有机碳源、农药、抗生素、有益菌等，为了促进胚状体的生长发育，还可以向人工种皮中加入植物生长调节剂。
4、单倍体育种原理：染色体变异方法：花药离体培养采用的技术：植物组织培养技术优点：后代无性状分离、明显缩短育种年限突变体的利用育种原理：突变（基因突变、染色体变异）优点：能够产生新性状植物体细胞杂交育种原理：染色体变异优点：克服远缘杂交不亲和的障碍5、植物组织培养中易获得突变体的原因：培养的细胞一直处于分生的状态，易受培养条件和外界压力（如射线、化学物质等）的影响。
植物组织培养复习提纲
植物组织培养是通过无菌操作，把植物的离体器官，组织或细胞在人工制备的培养基上进行无菌培养并使其发育成完整植株的科学技术。
植物组织培养根据所培养的植物材料的不同，把组织培养分为五种类型：愈伤组织培养，悬浮细胞培养，器官培养，茎尖分生组织培养和原生质体培养。
组织或愈伤组织培养：即狭义的组织培养，是对植物体的各部分组织进行培养，在通过分化诱导形成植株。
愈伤组织：植物受伤之后，在伤口表面形成的一团薄壁细胞。
外植体：用于进行组织培养的组织，器官和细胞。
植物组织培养的理论依据：细胞全能性。
分化：细胞在形态结构和功能上发生永久性适度变化的过程。
脱分化：由失去分裂能力的细胞回复到分生性状态并进行分裂，形成无分化的细胞团即愈伤组织的现象。
再分化：由无分化的愈伤组织的细胞再转变成为具有一定结构，执行一定生理功能的细胞团和组织，构成一个完整的植物体或植物器官的现象。
植物细胞全能性的实现途径：必须完成两个条件——要使这些细胞处于离体条件下，解除植物体其余部分对这些细胞的抑制性影响;要给予他们适当的刺激，就是给于它们一定的营养物质和激素的作用。
植物培养的特点：培养条件可以人为控制；生长周期短繁殖率高；管理方便，利于工厂化生产和自动化控制。
植物组织培养的发展史：1.1902年，哈布兰特在细胞学说的基础上，提出细胞全能性概念。
2.1934年，美国植物生理学家White人工培养番茄根，建立了第一个活跃生长的无性繁殖系。
3.1943年，White提出了植物细胞全能性学说培养基：供微生物，植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料。
母液：将所用培养基配方的化学成分按一定比例配成的浓缩液。
称取量=扩大倍数*母液体积吸取量=配制体积/放大倍数=配制体积*培养基浓度培养基PH值过大会变硬生长素的作用具有两面性：一般低浓度促进生长，中浓度抑制生长，高浓度则杀死植物常用生长素名称：IAA 吲哚乙酸天然存在的生长素NAA 萘乙酸应用比较普遍IBA 吲哚丁酸促进发根能力较强2.4-D适用范围狭窄常用生长素作用强弱依次递减：2.4-D NAA IBA IAA常用细胞分裂素名称：6-BA（最常用）KT 激动素ZT 玉米素（效果最好但最昂贵）TAA ZT GA采用过滤灭菌花药培养的最适时期：单核靠边期GA 赤霉素常用培养基：MS培养基无机盐和离子浓度较高，为较为稳定的平衡溶液。
植物组织培养知识点总结
植物组织培养知识点总结第一、二章1 植物组织培养概念、分类、应用、创始人、奠基人2 实验室各分室名称、主要设备、主要功能3 无菌操作技术流程4 表面消毒剂种类及作用效果5 培养基成分及各成分的作用6 植物组织培养三大难题7 那些成分要抽滤灭菌第三、四章8 植物细胞全能性原理9 名词解释：愈伤组织、脱分化、体细胞胚、人工种子10 体细胞胚的特点11 愈伤组织形成发育的三个时期，两种类型，良好愈伤组织的特点12 植物离体微繁，一般过程，各阶段注意事项13 褐变，影响褐变的因素，克服褐变的措施；玻璃化，无糖培养技术第五、六、七章14 植物脱毒方法、原理15 脱毒率包括两种方面含义16人工诱导单倍体的三种途径17花药培养得到的再生植株倍性如何，为什么18 花药培养的应用，花药培养力，一般培养过程。
19 离体幼胚培养，胚发育有几种类型？各有何特点？20 离体授粉离体受精21 简述胚乳培养的意义第八、九章22 原生质体概念，两种分离方法，纯化方法。
23 酶法分离植物原生质体的酶液组成及作用24 简述植物原生质体培养基的特点25 原生质体融合，融合的主要方法26 体细胞杂交过程27 融合产物的种类及特点28 植物细胞无性系变异，特点29 提高植物细胞无性系变异频率的方法30 细胞突变体的类型及对应的筛选方法植物组织培养知识点总结第一、二章1 植物组织培养概念、分类、应用、创始人、奠基人概念：是一种将植物的器官、组织或细胞在适当的培养基上进行无菌培养，并重新再生细胞或植株的技术。
分类：（1）按外植体来源和特性分：植株培养胚胎培养器官培养组织或愈伤组织培养细胞或原生质体培养；（2）按培养方法分：固体培养液体培养固体液体两相培养应用：（1）克服远缘杂交中杂种不育性，种子无活力或配发育不全的植物获得后代，一年多代育种（2）培育三倍体（3）单倍体育种（4）提高突变频率，筛选变异类型（5）经过细胞融合得到体细胞杂种（6）种质资源保存2 实验室各分室名称、主要设备、主要功能化学实验室（准备室）无菌操作室（接种室）培养室高压灭菌室细胞学实验室3 无菌操作技术流程4 表面消毒剂种类及作用效果漂白粉饱和溶液 10-30m 效果很好氯化汞 0.1-0.2% 3-12m 效果最好酒精 70-75% 10-30s 效果好5 培养基成分及各成分的作用水提供水分，营造环境无机盐大量微量提供细胞生长所需元素有机化合物碳源：提供能源、维持渗透压；维生素参与代谢；氨基酸，促进芽根胚状体生长和分化植物生长调节物质调节细胞生长天然复合物其他成分活性炭吸附；抗生素防止内生菌污染6 植物组织培养三大难题污染褐变玻璃化7 那些成分要抽滤灭菌热不稳定成分如：IAA ABA ZT GA3第三、四章8 植物细胞全能性原理植物的每一个细胞都具有该植物的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。
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第一章1、植物组织培养：是指在离体条件下，利用人工培养基对植物的器官、组织、细胞、原生质体等进行培养，使其长成完整植株2、外植体：在植物组织培养中，由活体（in vivo）植物上提取下来的、接种在培养基上的无菌细胞、组织、器官等均称为外植体。
3、愈伤组织：指在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。
4、应用一、农业上的应用1. 种苗快速繁殖(rapid propagation)2.无病毒苗(virus free)的培养3.在育种上的应用(breeding)（1）倍性育种，缩短育种年限，杂种优势明显；（2）克服远缘杂交的不亲合性和不孕性（胚培养）；（3）保存种质（4）创造变异二、在遗传学、分子生物学、细胞生物学、组织学、胚胎学、基因工程、生物工程等方面的应用。
用于基因工程技术创造植物新种质。
用于植物生长发育理论研究，包括生理学、病理学、胚胎学和细胞与分子生物学等。
三、利用组织培养材料作为植物生物反应器第二章1、细胞全能性（Totipotency）：指任何具有完整的细胞核的植物细胞都拥有形成一个完整植株所必须的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。
2、细胞分化（cell differentiation）：指导致细胞形成不同结构，引起功能或潜在的发育方式改变的过程。
3、脱分化（Dedifferentiation）：指离体条件下生长的细胞、组织或器官逐渐失去原来的结构和功能而恢复分生状态，形成无组织结构细胞团或愈伤组织的过程。
4、再分化（Redifferentiation）：指脱分化的细胞重新恢复分化能力，形成具有特定结构和功能的细胞、组织、器官甚至植株的过程。
5、植物组织培养中常遇到的问题以及解决措施一、污染及防治：1、真菌污染后，如果已形成孢子，则必须经高压灭菌后扔掉。
但若是细菌污染，只要及时发现，将材料上部未感菌的部分剪下转接，材料仍可使用。
2、用抗生素等杀菌药剂的处理，会影响植物材料正常生长。
二、褐变及防止（1）选择合适的外植体（2）合适的培养条件（3）使用抗氧化剂（4）连续转移三、玻璃化问题及其防止（1）增加培养基溶质水平，降低培养基水势；（2）减少培养基含氮化合物用量；（3）增加光照；（4）增加容器通风，进行CO2施肥，对减轻试管苗玻璃化现象有明显作用；（5）降低培养温度，进行变温培养，有助于减轻试管苗玻璃化现象发生；（6）降低培养基细胞分裂素含量，加入适量脱落酸。
四、其他问题和解决措施（一）初始培养阶段：1、培养物水浸状、变色、坏死、茎断面干枯改进措施：调换其他杀菌剂或降低浓度，缩短消毒时间；试用其他部位，生长初期取材。
2、长期培养培养物几乎无反应改进措施：更换基本培养基或调整培养基成分，尤其是调整盐离子浓度，增加生长素用量，试用2,4-D，调整培养温度。
3、愈伤组织生长过旺、疏松，后期水浸状改进措施：减少激素用量，适当降低培养温度，调整无机盐（尤其是铵盐）含量，适当提高琼脂用量增加培养基硬度。
4、愈伤组织太紧密、平滑或突起，粗厚，生长缓慢改进措施：减少细胞分裂素用量，调整细胞分裂素与生长素比例，降低糖浓度。
5、侧芽不萌发，皮层过于膨大，皮孔长出愈伤组织改进措施：减少激素用量，采用较老化枝条。
（二）继代培养阶段1、苗分化量少、速度慢、分枝少、个别苗细高改进措施：增加细胞分裂素，降低温度，改善光照，改单芽继代为团块（丛芽）继代。
2、苗分化过多，生长慢，畸形，节间极短，苗丛密集，微型化改进措施：减少或停用细胞分裂素一段时间，调节温度。
3、分化率低，畸形，培养时间长时苗再次愈伤组织化改进措施：减少生长素用量，适当降温。
4、叶粗厚变脆改进措施：减少激素用量，避免叶片接触培养基。
5、再生苗的叶缘、叶面等处偶有不定芽分化出来改进措施：适当减少细胞分裂素，或分阶段地利用这一再生方式。
6、丛生苗过于细弱，不适于生根或移栽改进措施：减少细胞分裂素，免用赤霉素，延长光照时间，增强光照，及时转接，降低接种密度。
7、幼苗淡绿，部分失绿改进措施：针对营养元素亏缺情况调整培养基，调好PH值，调控温度、光照。
8、幼苗生长无力、发黄落叶、有黄叶、死苗夹于丛生苗中改进措施：及时转接、降低密度，调整激素配比和营养元素浓度，改善瓶内气体状况，控制温度。
（三）生根阶段1、久不生根，基部切口无适宜愈伤组织改进措施：选用适宜的生长素或增加生长素用量，适当降低无机盐浓度。
2、愈伤组织生长过快、过大，根茎部肿胀或畸形，几条根并联或愈合。
改进措施：调换生长素种类或几种生长素配合使用，降低浓度，附加VB2或PG 等减少愈伤等。
6、操作技术 一、洗涤技术2、塑料用品洗涤3、金属用品洗涤二、灭菌技术 1、灭菌（1）培养基灭菌：高温高压湿热灭菌法（2）玻璃器皿灭菌：蒸汽高压消毒灭菌干热消毒灭菌。
（3）塑料器皿灭菌：多采用高压蒸汽消毒灭菌；（4）金属用具灭菌：灼烧灭菌；浸入95%酒精，后置于酒精火焰上灼烧，冷却后使用。
（5）接种室灭菌接种室→紫外灯照射→空气消毒灭菌超净工作台→紫外灯照射、70%—75%的酒精擦洗→培养材料的接种 （6）外植体灭菌流水冲洗10—20min 或更长时间→70%—75%酒精中浸泡30s →0.1%—0.2%氯化汞液中浸泡10min 左右、在10%的次氯酸钠、饱和漂白粉浸泡30min 左右→蒸馏水冲洗4—5次→备用第三章新的塑料器皿打开即用 已用过的塑料器皿2%NaOH 浸泡12h清水冲洗 2%—5%盐酸浸泡30min清水冲洗蒸馏水冲洗晾干备用热洗衣粉水洗净冲洗 擦干1、植物营养器官：植物器官培养（Organ culture）是指对植物某一器官的全部或部分或器官原基进行离体培养的技术。
2、组织培养：组织培养（Tissue culture）是指对植物愈伤组织等进行离体培养的技术。
3、植物器官和组织培养的基本程序一、无菌外植体的获得二、初代培养物的建立三、形态发生和植株再生四、培养产物的观察记载五、诱导生根和再生植株移栽4、形态建成方式⑴不定芽途径⑵腋芽增殖（侧芽增殖）途径⑶原球茎途径⑷胚状体途径5、根、茎、叶培养的意义1、根培养意义◆研究根系生理代谢的最优良试验体系。
◆研究器官分化、形态建成的良好体系。
◆建立快速生长的根无性系，对药物生产有重要意义。
◆对根细胞培养物进行诱变处理，可筛选突变体，用于育种实践。
2、茎培养意义✓无性系快速繁殖；✓培养无病毒苗，品种改良；✓理论基础研究。
3、叶培养意义研究叶形态发生以及光合作用、叶绿素形成、遗传转化研究。
第四章1、植物胚培养（Embryo Culture）：指对植物的胚、胚乳、子房和胚珠进行离体培养，使其发育成完整植物的技术。
2、胚培养的发育途径➢按正常胚胎发育途径形成植株➢脱分化形成愈伤组织➢胚“早熟萌发”3、胚培养的意义1、克服远缘杂交不亲和性利用“胚胎拯救（Embryo rescue）”技术获得远缘杂种；2、打破种子休眠，缩短育种周期；3、提高种子萌发率；特别是对于一些长期营养繁殖植物的种子4、胚乳培养的意义➢胚乳培养再生植株证明了全能性理论；➢研究胚和胚乳的关系及胚乳组织的功能；➢获得三倍体植株，用于育种利用。
三倍体植株具有营养体大，无籽等特点。
如无籽西瓜、葡萄、香蕉。
➢胚乳培养也会产生较多的混倍体，影响育种利用。
但可用于染色体工程研究。
➢胚乳细胞是研究淀粉、蛋白质和脂类天然产物代谢途径的理想系统。
5、胚“早熟萌发”：幼胚在培养基不能长出成熟胚的各种结构，越过正常胚胎发生若干阶段，直接长成幼苗。
6、离体授粉（pollination in vitro）：指将未授粉的胚珠或子房从母体上分离下来，进行无菌培养，并以一定的方式授以无菌花粉，使之在试管内实现受精的技术。
7、离体授粉的意义可以克服远缘杂交中的不亲和性，特别是离体子房授粉和离体胚珠授粉，能消除柱头和花柱所造成的受精前障碍。
8、花粉培养：是将花粉从花药中分离出来进行离体培养的过程。
9、花药培养：把发育到一定阶段的花药，通过无菌操作技术，接种在人工培养基上，以改变花药内花粉粒的发育程序，诱导其分化成完整植株的过程。
10、花药培养过程1. 取材：多数植物以单核靠边期为宜2. 灭菌及预处理未开放花蕾，常规灭菌后直接取出花药在4~5℃条件下冷处理2~4d，易产生胚状体。
3. 接种尽量不损伤花药并去除花丝，排除二倍体组织对单倍体植株再生的影响。
4. 培养常用MS、B5、Nitsch、White等培养基，3~8周后形成胚状体或愈伤。
先暗培养，再转至2000lx/14h光照下促分化。
11、花粉花药培养的应用1、诱导形成单倍体，快速获得纯系，缩短育种周期；常规育种需4-6年获得纯系，而小孢子培养仅需一年。
2、有利于筛选隐性突变体，提高选择效率;3、有利于隐性基因控制性状的选择；4、快速获得自交系的超雄株。
第五章1、单细胞培养方法1、看护培养法2、微室培养法3、平板培养法2、细胞悬浮培养的意义：3、细胞培养的应用1、植物次生代谢产物的生产2、突变体选择3、诱导多变体4、原生质体培养意义1、原生质体无细胞壁，有利于细胞融合、体细胞杂交。
2、原生质体容易摄取外来遗传物质，可作为理想的受体系统。
5、原生质体培养方法以及融合方法原生质体培养方法：1、液体浅层培养2、固体双层培养3、固体平板培养4、琼脂糖珠培养5、双层滤纸植板培养融合法：（1）无机盐诱导融合（2）高pH—高钙离子融合（3）聚乙二醇融合法（4）电融合技术6、单倍体植物：细胞中仅含配子染色体的植物。
7、细胞培养：指从体内取出组织，分离细胞，或使用细胞系，在体外模拟体内生理环境，在无菌、适当温度和一定的营养条件下，使之生存和生长，并维持其结构和功能特性。
8、超低温保存：将细胞等置于液氮中保存，解冻后仍能存活的技术。
9、种质保存：指在天然或人工创造的适宜环境条件下，贮存植物种质，使其保持生命力与遗传性的技术。
10、植物离体繁殖：指利用植物组织培养技术对外植体进行离体培养，使其在短期内获得遗传性一致的大量再生植株的方法。
11、原生质体：指脱去细胞壁的、裸露的、有生活力的原生质团。
12、原生质体融合：指不同种类的原生质体，不经过有性阶段在人工控制条件下，相互融合成一体，形成杂种细胞，并进一步发育成杂种植株的技术。
第六章1、植物离体繁殖与传统营养繁殖的优缺点◆繁殖效率高，生长速度快；◆培养条件可控制性强；◆占用空间小；◆管理方便，利于自动化控制；◆便于种质交换和保存。
2、快繁器官再生类型◆短枝发生型◆丛生芽发生型◆不定芽发生型◆胚状体发生型◆原球茎发生型3、快繁程序以及影响因素程序：a)无菌（或初代）培养的建立b)繁殖体增殖c)芽苗生根d)小植株的移栽驯化影响因素：◆外植体◆培养基◆培养条件◆继代培养◆移栽4、商业化生产应注意的问题○1污染污染来源：培养基及器具、器皿污染；外植体灭菌不彻底；操作原因；环境原因等污染控制：灭菌彻底；操作正确；保持操作区环境清洁无菌。