植物组织培养重点

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植物组织培养重点

植物组织培养重点

器官培养:即离体器官的培养。

植株培养:对完整植株材料的培养。

组织或愈伤组织培养:是对植物体的各部分组织进行培养或对由植物器官培养产生的愈伤组织进行培养,二者均通过再分化诱导形成植株.细胞培养:是对由愈伤组织等进行液体振荡培养所得到的能保持较好分散性的离体单细胞或花粉单细胞或很小的细胞团的培养.原生质体培养:是用酶及物理方法除去细胞壁的原生质体的培养。

初代培养:芽、茎段、叶片、花器等外植体在离体培养条件下诱导愈伤组织、侧芽或不定芽、胚状体过程植物组织培养:是指通过无菌操作分离植物体的一部分(外植体),接种到培养基上,在人工控制的条件下(包括营养、激素、温度、光照、湿度)进行培养,使其产生完整植株的过程。

愈伤组织:原指植物在受伤之后于伤口表面形成的一团薄壁细胞,在组培中则指在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞,多在植物体切面上产生。

外植体:从植物体上分离下来的用于离体培养的材料。

植物细胞全能型:任何具有完成细胞核的植物细胞,能拥有形成一个完整植株所必须的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。

脱分化:已分化好的细胞在人工诱导条件下,恢复分生能力,回复到分生组织状态的过程。

再分化:脱分化后具有分生能力的细胞再经过与原来相同的分化过程,重新形成各类组织和器官的过程。

胚状体:在离体过程中产生一种形似胚(具有明显的根端和芽端),功能与胚相同的结构。

褐变现象:指在接种后,其表面开始褐变,有事甚至会使整个培养基褐变的现象。

继代培养材料的玻璃化:当植物材料不断的进行离体繁殖时,有些培养物的嫩芽,叶片往往会呈半透明水迹状,这种现象通常成为玻璃化。

人工种子:通过植物组织培养的方法获得的具有正常发育能力的材料,外被有特定的物质,在适宜的条件下可以发芽成苗的植株幼体。

植板密度:形成的细胞团数/植板的细胞总数×100%对称融合:双方原生质体均带有核基因组和细胞质基因组的全部遗传信息。

非对称融合:指一方亲本的全部原生质与另一方亲本的部分核物质及细胞质物质重组产生不对称杂种。

植物组织培养复习重点

植物组织培养复习重点

组培复习材料一、名词解释1、培养基:是离体植物(外植体)赖以生长、分化的基础,是根据植物的需求,人工配制的含有各种营养成分的营养液。

2、液体培养:把细胞或生物体的一部分,置于液体培养基中使其发育,并不断振荡,使之均匀地在悬浊液中进行培养的一种方法。

3、种子培养:是成熟种子和发育不全的未成熟种子的无菌培养。

4、叶培养:从母体植株上将叶组织(包括叶原基在内)切下,放在无菌的人工条件下使其生长发育形成植株的技术。

5、热处理脱毒:在一定范围内,用高温处理可部分或完全钝化植物组织中的某些病毒而不伤害或很少伤害植物本身的脱毒方法。

6、花药培养:是把花粉发育到一定阶段的花药接种到培养基上,来改变花粉的发育程序,使其分裂形成细胞团,进而分化成杯状体,然后再生植株,或形成愈伤组织,由愈伤组织再分化成植株。

7、连续培养:是利用特别的培养容器进行大规模细胞培养的一种培养方式。

(培养过程中,不断注入新鲜培养基,排掉等体积用过的培养基,或者抽取悬浮培养物,使培养物的营养物质得到不断补充,从而保持其恒定体积的培养。

——8、分批培养:指把细胞分散在一定容积的培养基中进行培养,建立单细胞培养物的培养方式。

(细胞生长在固定体积的培养基中,当主要营养物质耗尽时,细胞的分裂和生长即停止。

)二、简答题1、MS培养基特点。

答:MS培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的,其特点是无机盐和离子浓度较高,是较稳定的离子平衡溶液,具有高含量的氮、钾,尤其是硝酸盐用量大,还有一定数量的铵盐,其养分的数量和比例合适,不需要添加更多的有机附加物,就能满足植物组织对矿质营养的要求,加速愈伤组织和培养物的生长,当培养物就不转移时仍可维持其生存。

目前应用最广泛。

2、植物组培生产特点。

答:①和传统的生产方式相比,具有不占耕地、生产不受季节限制而且能够整年连续进行、不受灾害性天气和病虫害影响的特点;②具有人为可控性,可采用更适合于植物生长的“培养基”代替土壤提供养分和生长调节物质;③具有很高的生产效率。

高中生物选修一植物组织培养知识点总结

高中生物选修一植物组织培养知识点总结

中学生物选修一植物组织培育学问点总结生物是高考考试中重要的科目之一,尤其是植物组织培育这个学问点,是高考考试中必考学问点。

下面是为大家整理的中学生物学问点,希望对大家有所帮助!中学生物选修一学问点课题一菊花的组织培育植物组织培育的基本过程细胞分化:在生物个体发育过程中,细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。

离体的植物组织或细胞,在培育了一段时间以后,会通过细胞分裂,形成愈伤组织,愈伤组织的细胞排列疏松而无规则,是一种高度液泡化的呈无定形态态的薄壁细胞。

由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程,称为植物细胞的脱分化,或者叫做去分化。

脱分化产生的愈伤组织接着进行培育,又可以重新分化成根或芽等器官,这个过程叫做再分化。

再分化形成的试管苗,移栽到地里,可以发育成完整的植物体。

植物细胞工程具有某种生物全套遗传信息的任何一个活细胞,都具有发育成完整个体的实力,即每个生物细胞都具有全能性。

但在生物体的生长发育过程中并不表现出来,这是因为在特定的时间和空间条件下,通过基因的选择性表达,构成不同组织和器官。

植物组织培育技术的应用有:实现优良品种的快速繁殖;培育脱毒作物;制作人工种子;培育作物新品种以及细胞产物的工厂化生产等。

细胞分化是一种长久性的变更,它有什么生理意义?使多细胞生物体中细胞结构和功能趋向特地化,有利于提高各种生理功能的效率。

比较根尖分生组织和愈伤组织的异同影响植物组织培育的条件材料:不同的植物组织,培育的难易程度差别很大。

植物材料的选择干脆关系到试验的成败。

植物的种类、材料的年龄和保存时间的长短等都会影响试验结果。

菊花组织培育一般选择未开花植物的茎上部新萌生的侧枝作材料。

一般来说,简单进行无性繁殖的植物简单进行组织培育。

选取生长旺盛嫩枝进行组培的是嫩枝生理状态好,简单诱导脱分化和再分化。

养分:离体的植物组织和细胞,对养分、环境等条件的要求相对特别,须要配制相宜的培育基。

常用的培育基是MS培育基,其中含有的大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg,微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I、Co,有机物有甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。

高中生物植物的组织培养技术知识点总结

高中生物植物的组织培养技术知识点总结

高中生物植物的组织培养技术知识点总结导读:我根据大家的需要整理了一份关于《高中生物植物的组织培养技术知识点总结》的内容,具体内容:植物组织培养技术是高中生物的一个重要组成部分,学生需要掌握相关知识点,下面是我给大家带来的高中生物植物的组织培养技术知识点,希望对你有帮助。

高中生物植物的组织培养技术基础知识点...植物组织培养技术是高中生物的一个重要组成部分,学生需要掌握相关知识点,下面是我给大家带来的高中生物植物的组织培养技术知识点,希望对你有帮助。

高中生物植物的组织培养技术基础知识点1、植物组织培养过程:(1)原理:植物细胞具有全能性。

(2)过程:2、用途:(1)微型繁殖微型繁殖就是用于快速繁殖优良品神的植物组织培养技术,也叫快速繁殖技术。

繁殖过程中的分裂方式是有丝分裂,亲、子代细胞内DNA不变,所以能够保证亲、子代遗传特性不变。

(2)作物脱毒作物脱毒是利用茎尖、根尖等无毒组织,进行微型繁殖,所获幼苗是无毒的。

(3)人工种子:通过组织培养技术,可把植物组织的细胞培养成在形态及生理上与天然种子胚相似的胚状体,也叫作体细胞胚。

这种体细胞胚有于叶、根、茎分生组织的结构。

科学家把体细胞胚包埋在胶囊内形成球状结构,使其具备种子机能。

所以,人工种子是一种人工制造的代替天然种子的颗粒体,可以直接播种于田间。

①制作方法:人工种子是利用植物组织培养获得胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等,然后包上人丁种皮就形成了人工种子,如图:②优点:可使在自然条件下不结实或种子昂贵的植物得以繁殖;保持亲本的优良性状,因该过程为无性繁殖;节约粮食,减少种子的使用;可以控制添加一些物质,如除草剂、农药、促进生长的激素、有益菌等。

周期短,易储存和运输,不受气候和地域的限制。

(4)细胞产物的工厂化生产:从人工培养的愈伤组织细胞中提取某种成分,如紫草素、香料等。

高中生物植物的组织培养技术重要知识点1、植物细胞的全能性(1)概念:具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞,都具有发育成完整生物体的潜能。

植物组织培养教案

植物组织培养教案

植物组织培养教案一、教学目标:1.了解植物组织培养的基本概念和意义;2.掌握植物组织培养的基本原理、方法和步骤;3.能够根据实验要求进行植物组织培养的实验操作。

二、教学重点:1.植物组织培养的基本原理和方法;2.植物组织培养的实验操作。

三、教学难点:1.植物组织培养的实验操作技巧;2.植物组织培养的常见问题及解决方法。

四、教学内容及教学步骤:1.植物组织培养的基本概念和意义(10分钟)讲解植物组织培养的概念、特点和意义,引导学生认识植物组织培养在农业、园艺和生物科学领域的重要作用。

2.植物组织培养的基本原理(15分钟)介绍植物细胞和组织的培养原理,包括细胞分裂、组织分化和激素调控等方面的基本知识。

3.植物组织培养的基本方法和步骤(30分钟)3.1材料准备解释所需要的实验器具、培养基成分和化学试剂等材料的选择和准备。

3.2植物组织的获取与处理讲解植物组织的获取方法,包括茎尖、叶片和种子等不同组织的处理方法。

3.3组织培养基的制备介绍培养基的成分和配方,讲解培养基的调配方法和无菌操作技巧。

3.4组织培养的操作步骤详细演示组织培养的具体操作步骤,包括无菌操作、组织切割、接种和培养条件设置等。

4.实验操作(60分钟)将学生分成小组,提供植物组织培养实验所需的材料和器具,指导学生进行组织培养的实验操作。

注:实验前需提前准备无菌操作室和培养箱等设备。

五、教学评价体系:1.实验操作的规范程度;2.实验结果的准确性和可靠性;3.对植物组织培养中常见问题的解决能力。

六、教学过程设计:本教案主要以理论授课和实验操作相结合的方式进行。

首先通过理论讲解,让学生了解植物组织培养的基本概念、意义和原理,掌握植物组织培养的基本方法和步骤。

然后,将学生分组进行实验操作,指导学生完成组织培养实验,同时进行实时指导和纠正,帮助学生掌握实验技巧和解决实验中的常见问题。

七、教学反思:植物组织培养是植物生物技术领域的重要研究内容,对于培育新品种、研究植物生长发育机制等具有重要意义。

植物组织培养重点

植物组织培养重点

植物组织培养绪论1.组培根据材料个分为哪几个类型根据外植体来源和培养对象的不同,植物组织培养的研究类型可以分组织培养(tissue culture)、器官培养(organ culture)、胚胎培养(embryo culture)、细胞培养(cell culture)、原生质体培养(protoplast culture)2.组培发展的3个阶段①植物组织培养的早期实践细胞学说,1838-1839年,该学说的基本内容是:一切生物都是由细胞构成的,细胞是生物体的基本功能单位,细胞只能由细胞分裂而来。

1902年,德国植物学家Haberlandt提出了植物细胞全能性学说。

植物的器官和组织可以不断分割,直至分到单个细胞而不影响细胞增殖的观点。

并设想离体细胞具有再生完整植株的潜力。

②植物组织培养的奠基1934年美国的White,利用番茄根建立了第一个活跃生长的无性繁殖系,发现B族维生素对培养的离体根生长具有重要作用。

创立了White培养基。

1943年美国的White发表了《植物组织培养手册》的专著,使植物组织培养开始成为一门新兴的学科。

1948 年,Skoog和崔徵通过对烟草茎切段和髓培养组织的研究,确定了腺嘌呤/生长素的比例是控制芽和根形成的主要条件之一。

1956年Miller等发现了激动素。

控制器官分化的激素模式变为激动素/生长素的比例关系。

促进组培发展。

在这一阶段植物组织培养建立了2个与培养技术有关的重要模式:培养基模式、激素调控模式。

③植物组织培养的建立Reinert和Steward(1958)对胡萝卜悬浮培养细胞和愈伤组织形成体细胞胚作了报道,用实验科学地论证了植物细胞全能性,标志着植物生物技术快速发展的开始。

1960年,Cocking 等用真菌纤维素酶分离植物原生质体获得成功。

这是植物组织培养的第二次突破。

1960年G.Morel采用兰花的茎尖培养,实现了去病毒和快速繁殖两个目的。

这是经过茎尖—原球茎—小植株的方式而再生的。

植物组织培养概论

植物组织培养概论

广义概念
人工培养植物体一 部分(即外植体 ) 生成完整植株。
愈伤组织:在离体培养过程中在人工培养基 上从外植体上长出来的,改变了它们原有的特性, 具有分生能力的能迅速增殖的无特定结构和功能 的细胞团。多在植物体切面上产生。
外植体:是指从植物体上分离下来的用于植 物组织培养的接种材料,它包括植物体的各种器 官、组织、细胞和原生质体等。
思考题:
1.什么是组织培养?组织培养的原理是什么?
2.组织培养分哪几种类型? 3.组织培养有哪些特点?
四、植物组织培养的理论基础
细胞全能性理论
植物每一个具有 完整细胞核的体细胞, 都含有植物体的全部 遗传信息,在适当条 件下,具有发育成完 整植株的潜在能力。
植物细胞全能性的表达
分裂 细胞 分化 再 分 化 器官 分裂
组织
脱分化
已分化组织细胞
分裂 植株
植物细胞全能性的实现
• 植物的生活史:
受 精 卵 早期胚 胎发育 合 分化 子 胚 组 织 形成 器 构成 植 物 体
茎段培养成苗示意图
茎段培养成苗示意图
组织培养:为狭义的植物组织培养,是对植物体的 各部分组织进行培养,如茎尖分生组织、形成层、• 木质部、韧皮部、表皮组织、胚乳组织和薄壁组织 等等;或对由植物器官培养产生的愈伤组织进行培 养。二者均通过再分化诱导形成植株。
组织培养
愈伤组织培养 分生组织培养 薄壁组织培养 输导组织培养
团按照一定密度在液体培养基中进行培养增殖的技术。
平板培养:是指将一定密度的悬浮细胞接种到一薄
层固体培养基中进行培养的技术。
看护培养:是指利用生长的愈伤组织所产生的物质
来培养单细胞或者异种愈伤组织等的方法。
微室培养:是指人工制造一个微室,将单细胞培养

植物组织培养知识点总结

植物组织培养知识点总结

堂清日结31、原生质是细胞内生命物质的总称。

原生质层指的是细胞膜和液泡膜以及两层膜之间的细胞质。

去掉细胞壁的植物细胞就是原生质体,所以一个动物细胞就相当于一个原生质团。

2、原生质层的融合过程体现了细胞膜的流动性。

3、植物体细胞融合的实质:原生质体的融合,植物体细胞融合完成的标志:细胞壁的再生。

新细胞壁的产生与细胞内高尔基体相关。

4、植物组织培养中愈伤组织的形成是细胞分裂的结果。

5、植物细胞工程通常所采用的技术手段:植物组织培养技术和植物体细胞杂交技术。

6、植物体细胞杂交的过程:1)酶解法去除细胞壁,获得原生质体2)利用物理或者化学法诱导原生质体的融合3)再生细胞壁,获得杂种细胞。

4)利用植物组织培养技术,通过脱分化和再分化获得杂种植物。

7、微型繁殖技术:也叫快速繁殖技术即快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。

该技术与传统繁殖技术相比,具有:①繁殖速度快;②“高保真”(因为是无性繁殖);③不受自然生长季节的限制(因为在具有一定人工设施的室内生产)等特点。

堂清日结41、作物脱毒材料:分生区细胞作物脱毒方法:进行植物组织培养作物脱毒结果:获得脱毒苗脱毒苗的特点:不会或极少感染病毒。

2、人工种子的组成:胚状体(或不定芽或顶芽或腋芽)+人工薄膜;要获得人工种子,需将离体的器官、组织或细胞培养至再分化阶段。

3、人工种皮中应具有的有效成分:适量的养分、无机盐、有机碳源、农药、抗生素、有益菌等,为了促进胚状体的生长发育,还可以向人工种皮中加入植物生长调节剂。

4、单倍体育种原理:染色体变异方法:花药离体培养采用的技术:植物组织培养技术优点:后代无性状分离、明显缩短育种年限突变体的利用育种原理:突变(基因突变、染色体变异)优点:能够产生新性状植物体细胞杂交育种原理:染色体变异优点:克服远缘杂交不亲和的障碍5、植物组织培养中易获得突变体的原因:培养的细胞一直处于分生的状态,易受培养条件和外界压力(如射线、化学物质等)的影响。

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名词解释1.外植体:由活植物体上切取下来的可以用于组织培养的组织或器官。

2.愈伤组织:在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞(细胞排列疏松、无规则)。

3. 植物细胞的脱分化:由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程,又称去分化。

4. 植物细胞的再分化:脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等器官的过程。

5. 试管苗的玻璃化植物组培玻璃化苗的1、叶和嫩梢呈水晶透明或半透明水渍状;2、整株矮化肿胀、失绿;3、叶片皱缩成纵向卷曲,脆弱易碎;4、叶表缺少角质层蜡质,没有功能性气孔,不具栅栏组织,仅有海绵组织。

玻璃化现象的预防措施:1、适当控制培养基中无机盐浓度2、适当控制培养基中蔗糖和琼脂浓度3、适当降低细胞分裂素和赤霉素浓度4、增加自然光照,控制光照时间5、改善培养皿的气体交换状况6、控制好温度7、在培养基中添加其他物质6.胚性感受态:体胚发生的相对容易程度。

7.人工种子又称合成种子或体细胞种子。

任何一种繁殖体,无论是在涂膜胶囊中包裹的、裸露的或经过干燥的,只要能够发育成完整的植株,均可称人工种子。

8.微室培养法:即将细胞培养在很少量的培养基中。

9.看护培养法:指用一块活跃生长的愈伤组织来看护单个细胞,并使其生长和增殖的方法。

10.植板效率:已形成细胞团的百分数,即每100个铺在平板上的细胞中有多少个长出细胞团。

11.试管外生根:将生根诱导与驯化培养结合在一起.试管内生根:茎芽生根诱导有2条途径,其中一途径为试管内生根,在试管内诱导枝条生根叫试管内生根12.植物离体保存:将离体培养的植物细胞、组织、器官或试管苗,保存于人工环境下,一般需要在低温或超低温条件下进行,以抑制其生长,达到长期保存的目的。

13.超低温保存:低温从4℃往下推,-80℃(干冰温度),-196℃以下的低温称为超低温。

问答题1. 母液:为了避免每次配制培养基都要对几十种化学药品进行称量,将培养基中的各种成分按质量的特定倍数称量配制成的浓缩液。

2.植物激素⑴生长素类生长素主要促进细胞分裂的生长,促进细胞脱分化,有利于诱导愈伤组织的产生,生长素与细胞分裂素同时使用有协调作用,在离体培养分化调节中,生长素促进根的形成抑制芽的形成,液体培养中利于体细胞胚胎发生。

常用IAA、IBA、NAA、2,4-D。

⑵细胞分裂素类:促进细胞分裂和扩大,调解器官分化,延缓组织衰老,增强蛋白质合成,能改善其它激素作用,离体培养中,促进不定芽的发生,与生长素协调作用可有效控制培养物的生长与分化。

常用6-BA、ZT、KT、2iP。

⑶赤霉素类:促进细胞伸长生长、诱导花芽形成、打破种子休眠以及诱导单性结实等生理功能。

有20多种,目前主要是赤霉酸GA3。

离体培养下,还与生长素协调作用对形成层分化有影响,刺激体细胞胚进一步发育成植株。

(4)脱落酸:对某些植物体细胞胚发生的特异基因表达起调控作用,激活相关基因的表达,大量合成贮藏蛋白、晚期胚胎丰富蛋白和少量胚胎发生特异性蛋白。

通常低浓度促进体细胞胚发生,高浓度抑制体细胞胚的发生。

3.芽的增殖途径(一)通过愈伤组织利用植物细胞在培养中无限增殖的可能性以及它们的全能性,可以对若干种植物类型进行快速繁殖。

由这些植物的器官或组织诱导形成的愈伤组织,通过器官发生或体细胞胚胎发生都可以分化出植株。

(二)不定芽形成:产生不定芽的器官:根(福禄考属植物、苹果的某些无性系、悬钩子属植物)、鳞茎(风信子—基部受伤以后)、叶(秋海棠、天竺葵等)。

通过培养基中适当配比激素的影响,就是那些在正常情况下不能进行营养繁殖的植物,如芸苔属植物、除虫菊、亚麻以及番茄等,也能由叶段和茎段上长出不定芽来。

(三)增强腋芽生枝能力(四)单节段扦插:在某些植物中,通过调节培养基中的激素组成还不能使腋芽由顶端优势下解放出来,原来存在于外植体上的芽只能长成一个不分枝的茎。

在这种情况下,则须将待繁殖的枝条剪成单节茎段,接种在培养基上,过一定时间成苗后,再将它剪成单节茎段,经继代培养后又可成苗。

(五)原球茎:1960年,Morel提出了一个离体无性繁殖兰花的方法,繁殖系数极高。

当把兰花离体茎尖进行培养时,它们不是长成带叶的枝条,而是形成一个扁球状体,基部着生假根。

在茎尖培养中,这种原球茎起源于叶片的表皮或下表皮细胞。

某些原球茎还能进行增殖,形成原球茎丛,其中最多可包含十几个原球茎。

4.原生质体融合方法:1、自发融合2、诱发融合(物理和化学方法):1、NaNO3法:NaNO3的作用:中和质膜的负电荷,使原生质体不再相互排斥,而紧密结合在一起。

不足:诱导频率不高。

2、高pH-高Ca离子法:优点:杂种产量高。

不足:高pH值对细胞有毒害作用。

3、PEG法:PEG是一种带负电性的高分子化合物,在原生质体融合中起到一种桥梁作用,可以使原生质体凝聚。

在洗脱过程中,PEG将被洗掉,导致质膜表面电荷重排。

粘连的质膜大面积紧密相连,电荷的重排导致一个原生质体的负性电荷部位与另一原生质体的正性电荷部位相连而导致融合。

①融合频率高②可重复性强③诱发融合无特异性④毒性较低4、电融合法原理:①交流电场使原生质体表面电荷偶极化,沿着电极排列,形成串珠。

②施加直流电场后,形成串珠的原生质体在质膜接触处发生穿孔,开始遗传物质的交流。

5. 褐变是指外植体在培养过程中体内的多酚氧化酶被激后活,使细胞内的酚类物质氧化成棕褐色醌类物质,这种致死性的褐化物不但向外扩散致使培养基逐渐变成褐色,而且还会抑制其他酶的活性,严重影响外植体的脱分化和器官分化,最后变褐而死亡的现象。

褐变的产生:1.植物种类:一般木本植物,单宁、色素含量高的植物易发生褐变2.外植体的生理状态:一般幼龄材料,幼嫩器官和组织,春季取外植体,褐变发生较轻3.培养基的成分:培养基中的细胞分裂素类如6-BA或KT促进褐变发生,而生长素类如IAA可减轻褐变发生。

4.材料转移时间5.基因型褐变的防止措施:1、选择适宜的外植体及最佳培养基:适当降低培养基无机盐浓度,降低PH值,降低细胞分裂素水平等,可显著减轻培养物褐变2、连续转移3、加抗氧化剂:如硫代硫酸钠、抗坏血酸4、加多胺类物质:如精胺、亚精胺5、加活性碳6.为什么要进行试管苗的驯化移栽?1、试管苗移栽是组织培养过程的重要环节,这个工作环节做不好,就会造成前功尽弃。

为了做好试管苗的移栽,应该选择合适的基质,并配合以相应的管理措施。

2、必须通过炼苗,例如通过控水、减肥、增光、降温等措施,使她们逐渐地适应外界环境,从而使生理、形态、组织上发生相应的变化,使之更适合于自然环境,保证试管苗移栽成功。

3、从叶片上看,试管苗的角质层不发达,叶片通常没有表皮毛,或较少表皮毛,甚至叶片上出现了大量的水孔,气孔的数量大小也超过普通苗。

所以,试管苗更适合于高湿的环境生长,当将它们移栽到试管外环境时,试管苗失水率会很高,容易死亡。

因此,为了改善情况,要经过与外界相适应的驯化处理,通常采取的措施有:对外界要增加湿度、减弱光照;对试管内要通透气体、增施二氧化碳肥料、逐步降低空气湿度等。

4、对栽培驯化基质要进行灭菌是因为试管苗在无菌的环境中生长,对外界细菌、真菌的抵御能力极差。

为了提高其成活率,在培养基质中可掺入75%的百菌清可湿性粉剂200-500倍液,以进行灭菌处理。

7.外植体的选择:原则:1.易于离体培养的种类、品种、类型;2.生产上或研究上意义比较大的种类、品种、类型考虑因素:1.外植体的类型:(茎尖)生长速度快,遗传稳定,无病毒分布,但材料有限.为此茎段也是重要来源.(叶片)采用幼嫩的叶片较好.(花蕾)在花诱导之前细胞的脱分化容易发生,故外植体常取发育早期阶段的花即花蕾.(胚)大多数花卉都可用胚培养的方式进行快繁.2.年龄和着生部位:植株的生理年龄越小,外植体的再生能力越强,培养成功的可能性越大.同一植株上接近基部的枝条,生理年龄越小3.取材季节和时间:对培养材料的启动和培养至关重要.一般在生长季夏季4.大小(大:不易灭菌小:不易成活):一般0.5-1厘米脱毒培养0.2-0.5厘米污染原因:1.病原菌污染(细菌,真菌)2.外植体、培养基、培养器皿带菌3.操作人员未遵守操作规程。

污染预防措施:1.防止材料带菌2.防止用具带菌3.操作室要处于无菌状态4.操作人员要按照操作程序进行8.影响花药诱导频率的因素①花粉发育时期是影响培养效果的重要因素。

对多数植物来说,单核中期或晚期的花粉最容易形成花粉胚或花粉愈伤组织。

②花药供体植株的生长条件、年龄、基因型对花药培养反应的影响是很大的。

不同季节、栽培环境、不同部位的花蕾,其花粉的生理状态不同。

多数情况下幼年植株优于老年植株。

③培养基是花药培养中影响花粉启动和再分化的重要条件。

1)基本培养基:关于水稻、小麦的花药培养基,在N6培养基上,水稻花粉的出愈率大幅度提高。

C17和W14培养基,它们可以大幅度提高小麦的花药出愈率。

2)培养基中的植物生长物质的种类会影响花粉发育的途径3)培养基中糖的种类对花粉胚的诱导和分化重要影响。

4)氮源和硝酸银5)其他成分和pH值6)活性炭④逆境处理对小孢子胚胎发生的诱导作用(低温、热激、γ射线处理、秋水仙素处理、营养饥饿、重金属胁迫)。

低温预处理可以提高花粉胚的诱导频率,培养温度是影响花药反应的一个重要因素。

较高的温度虽能诱导较高频率的花粉愈伤组织,但愈伤组织分化白化苗的频率也高。

控制培养温度仍是减少白化苗的一个有效措施。

附加题1.植物组织培养在农业上的应用:(育种?举例)快繁:人工种子、茎尖培养脱毒:微芽嫁接、茎尖培养克服杂交不亲和:花药培养、细胞融合种质资源保存和交换:愈伤组织培养、茎尖培养3.植物组织培养的发展简史:1.Haberlandt(德国):观点: 高等植物的组织和器官可以分割成单个细胞贡献:提出细胞全能性&首次进行离体细胞培养2.怀特white培养基3.1948年:Skoog和崔真培养烟草茎段时,发现腺嘌呤或腺苷可解除生长素对芽生长的/生长素高,生芽;低,生根;相等,不分化。

4. 1960年:Cocking酶解法分离原生质体获得成功。

使植物细胞可以象动物细胞一样进5. 1952年:Morel和Martin首次报道茎尖分生组织的离体培养,获得无病毒大丽花植6.Guha&Maheshwari南洋金华花药培养发育成胚。

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