植物染色体结构变异的诱导及鉴定

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2020-2021新教材生物2教师用书:第5章 第2节染色体变异含解析

2020-2021新教材生物2教师用书:第5章 第2节染色体变异含解析

2020-2021学年新教材人教版生物必修2教师用书:第5章第2节染色体变异含解析第2节染色体变异课标内容要求核心素养对接举例说明染色体结构和数目的变异都可能导致生物性状的改变甚至死亡.1。

生命观念:根据结构和功能观说出染色体结构变异种类及影响。

2.科学思维:通过比较、归纳与概括掌握染色体组、二倍体、多倍体、单倍体的区别,提升归纳总结的能力.通过分类与比较,明确单倍体育种和多倍体育种的流程。

3.科学探究:通过“低温诱导植物染色体数目的变化"实验,提高实验操作能力。

一、染色体数目的变异1.染色体变异的概念生物体的体细胞或生殖细胞内染色体数目或结构的变化。

2.变异类型和实例类型实例个别染色体的增加或减少21三体综合征以染色体组形式成倍增减三倍体无子西瓜(1)组成写出上图雄果蝇体细胞中一个染色体组所含的染色体:Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、X或Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Y.(2)组成特点:细胞中的一组非同源染色体,在形态和功能上各不相同。

4.二倍体和多倍体(1)二倍体(2)多倍体①概念错误!②特点:茎秆粗壮,叶片、果实和种子都比较大,糖类和蛋白质等营养物质的含量都有所增加。

③人工诱导(多倍体育种)方法用秋水仙素处理或用低温处理处理对象萌发的种子或幼苗原理能够抑制纺锤体的形成,导致染色体不能移向细胞的两极,从而使染色体数目加倍(1)概念:体细胞中的染色体数目与本物种配子染色体数目相同的个体。

(2)特点错误!(3)应用:单倍体育种.①方法:错误!错误!错误!错误!错误!②优点:明显缩短育种年限。

二、低温诱导植物细胞染色体数目的变化1.实验原理2.实验流程及结论根尖的培,养及诱导错误!↓错误!错误!↓错误!错误!错误!↓观察:先用低倍镜观察,找到变异细胞,再换用高倍镜观察↓结论:低温能诱导植物细胞染色体数目加倍三、染色体结构的变异1.染色体结构变异的类型[连线]2.染色体结构变异的结果(1)染色体上基因的数目或排列顺序发生改变,而导致性状的变异。

实验:低温诱导植物染色体数目的变化

实验:低温诱导植物染色体数目的变化
基因重组 植物组织培养
染色体数目加倍
4、优点: 缩短了育种年限 5、缺点: 技术复杂,需要与杂交育种配合
举例:
三、杂交育种
1、原理: 基因重组
自交 选优 自交
2、方法: 杂交
3、优点: 将不同个体的优良性状集中到一个个体上 4、缺点: 育种时间长 5、举例:
举例:
杂交育种 P 高杆抗病×矮杆感病
DDTT

ddtt
第 年
单倍体育种 P 高杆抗病 × 矮杆感病
DDTT

ddtt
第 年
1
1
高杆抗病 DdTt ↓× F2 D_T_ D_tt ddT_ ddtt 矮抗
F1
第 年
F1
配子
花药离体培养→ 秋水仙素→
高杆抗病 DdTt
第 年
2 3~6

↓ ↓
DT DT
Dt
dT
dt
↓ ↓
×
Dt
↓ ↓
dT
↓ ↓
第 年
2
dt
ddTT
↑ 需要的矮抗品种
纯合体 DDTT DDtt ddTT ddtt
↑ 需要的矮抗品种
四、诱变育种
1、原理:
2、方法:
①物理方法:紫外线、X或γ射线、激光等处理后再筛选 ②化学方法:亚硝酸、硫酸二乙酯等处理后再筛选
基因突变
3、优点:能提高突变率,产生新基因;
加速育种进程。
4、缺点:盲目性大,有利变异少,工作量大,秋水仙素处理来自自然长成二倍体西 瓜幼苗
杂交
四倍体西 瓜植株 第一年 第二年 三倍体西瓜
联会 紊乱


授粉
二倍体西 瓜植株

高中物理第5章 第2节 探究实践 低温诱导植物细胞染色体数目的变化

高中物理第5章 第2节 探究实践 低温诱导植物细胞染色体数目的变化

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A.应该选用洋葱根尖成熟区细胞作为实验材料 B.该实验应设置室温下、-4 ℃的冰箱中、2%的秋水仙素溶 液中3组实验
探究实践 低温诱导植物细胞染色体数目的变化
C.在显微镜下观察和比较经过不同处理的根尖细胞内染色体 数目
D.若低温处理结果大部分细胞染色体数目不变,则低温不能 诱导细胞染色体数目加倍
探究实践 低温诱导植物细胞染色体数目的变化
探究实践 低温诱导植物细胞染色体数目的变化
3.实验操作的提醒及目的
实验操作提醒
操作目的
①解离前冲洗:洗去卡诺氏液,同时为解离做准
解离前后都 需要清洗
备,用体积分数为95%的酒精(解离液的组分之一) 冲洗两次。 ②解离后漂洗:洗去解离液防止解离过度,用清水
进行漂洗
探究实践 低温诱导植物细胞染色体数目的变化
探究实践 低温诱导植物细胞染色体数目的变化
(2)染色体染色 染色体容易被碱性染料染成深色,用质量浓度为 0.01 g/mL 的 甲紫 (旧称龙胆紫)溶液染色。
探究实践 低温诱导植物细胞染色体数目的变化
2.实验步骤
探究实践 低温诱导植物细胞染色体数目的变化
3.实验现象:视野中既有正常的二倍体细胞,也有染色体数目 发生改变 的细胞。
室温→都是正常二倍体细胞 低 有染温色→体既加有倍二细倍胞体细胞,也―对 分―照 析→低 体温 数使 目染 加色 倍
探究实践 低温诱导植物细胞染色体数目的变化2.变量分析自变量及其控 Nhomakorabea 因变量
无关变量(不同实验组 中等同原则)
培养条件
自然条件下培养
低温处理
细胞中染色体数目
举例:
①不定根的长度
②适宜的pH

植物多倍体的诱发和鉴定

植物多倍体的诱发和鉴定

植物多倍体的诱发和鉴定一、实验目的通过实验,进一步了解人工诱导多倍体的原理,并初步掌握用秋水仙素诱发多倍体的一般方法及细胞学鉴定。

二、实验原理染色体是遗传物质的主要载体。

每一个物种都具有特定的形态特征。

各个物种细胞内染色体的数目都是相对恒定的,这是一个重要的生物学特征。

染色体数目和结构的改变,将会导致生物性状的改变。

遗传学中把二倍体生物配子中所具有的染色体成为一个染色体组,通常用n来表示。

而一个染色体组中包含的染色体数目成为染色体基数,用x表示。

同一个染色体组的各个染色体的形态、结构和连锁基因群都彼此不同,但它们构成一个完整而协调的体系。

细胞中染色体数目的变异类型有两类:整倍体变异和非整倍体变异。

整倍体变异指体细胞中染色体数目按染色体组的基数(x)成倍数增加或减少的现象。

具有两套染色体组的生物体成为二倍体,体细胞中含有三个或三个以上染色体组的整倍体为多倍体。

多倍体按其来源可以分为:同源多倍体和异源多倍体,同源多倍体是指具有三个或三个以上相同染色体组的细胞或个体:异源多倍体是体细胞中含有两个以上不同类型染色体组的多倍体。

自然界中的多倍体主要存在于植物中,动物中的多倍体很少。

多倍体可以在自然条件卞产生,也可以人工诱导形成。

人工诱导多倍体通常采用物理方法和化学方法。

物理方法有高温、低温、超声波、嫁接和切断等,化学方法是使用秋水仙素、异生长素、蔡骈乙烷来诱导多倍体。

在诱导多倍体的方法中,以应用化学药剂更为有效,其中以秋水仙素效果最好,使用广泛。

秋水仙素阻碍有丝分裂中细胞纺锤体的形成,这样细胞不能分离,产生染色体加倍的核。

本实验用适当浓度的秋水仙素处理洋葱或大蒜根尖,待根尖膨人后制片观察,可诱发多倍体。

三、实验材料大蒜根尖四、实验方法与步骤(一)根尖多倍体的诱发将人蒜去掉老根,置于盛水的培养皿上,25°C条件卞培养发根,待不定根长出1cm时取出洗净,把水晾干后移到0.1%秋水仙素溶液中,根尖朝下,使根部浸没在药液中,于10°C 培养箱中低温培养,直到根尖膨大为止。

人教版生物必修二讲义:第5章 第2节 染色体变异含答案

人教版生物必修二讲义:第5章 第2节 染色体变异含答案

第2节染色体变异一、染色体结构的变异1.染色体结构变异的类型[连线]2.染色体结构变异的结果(1)染色体上基因的数目或排列顺序发生改变,而导致性状的变异。

(2)大多数对生物体是不利的,有的甚至会导致生物体死亡。

二、染色体数目变异1.变异类型和实例(1)组成写出上图雄果蝇体细胞中一个染色体组所含的染色体:Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、X或Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Y 。

(2)组成特点4.多倍体(1)概念⎩⎨⎧起点:受精卵染色体组数:三个或三个以上染色体组实例:三倍体香蕉、四倍体马铃薯(2)特点:茎秆粗壮,叶片、果实和种子都比较大,糖类和蛋白质等营养物质的含量都有所增加。

(3)人工诱导(多倍体育种)(1)概念:体细胞中含有本物种配子染色体数目的个体。

(2)特点⎩⎨⎧植株长得弱小高度不育(3)应用:单倍体育种。

①方法:花药――→离体培养单倍体幼苗――→人工诱导用秋水仙素处理染色体数目加倍得到正常纯合子②优点:明显缩短育种年限。

三、低温诱导植物染色体的数目变化 1.实验原理2.实验流程及结论根尖的培养及诱导⎩⎪⎪⎨⎪⎪⎧①培养方法:将洋葱放在装满清水的广口瓶上,让洋葱的底部接触水面②诱导时机:待洋葱长出 1 cm 左右的不定根时③诱导措施:将整个装置放入冰箱的低温室内(4 ℃),诱导培养36 h↓取材及固定⎩⎨⎧①取材:剪取诱导处理的根尖 0.5~1 cm②固定:放入卡诺氏液中浸泡0.5~1 h , 以固定细胞的形态③冲洗:用体积分数为95%的酒精冲洗2次↓制作装片⎩⎨⎧⎭⎬⎫①解离②漂洗③染色:使用改良苯酚品红染液④制片同“观察植物细胞的有丝分裂”↓观察:先用低倍镜观察,找到变异细胞,再换用高倍镜观察↓结论:低温能诱导植物染色体数目加倍判断对错(正确的打“√”,错误的打“×”)1.猫叫综合征是人的第5号染色体部分缺失引起的。

() 2.基因突变、基因重组、染色体变异在光学显微镜下都可以观察到。

() 3.染色体片段的缺失和重复必然导致基因种类的变化。

植物染色体结构变异的诱导及鉴定

植物染色体结构变异的诱导及鉴定

植物染色体结构变异的诱导及鉴定摘要用物理因素(X射线,γ射线和快中子等)和化学药剂等处理植物材料,染色体的断裂频率会大大增加。

在染色体移向两极时无着丝粒染色体由于没有着色粒而不受纺锤丝的牵引而随机地停留在细胞的各个部位,称为染色体断片。

细胞分裂末期或二分体时期或四分体时期,染色体断片形成核状的结构,称为微核或拟核。

关键词物理因素、化学因素、染色体、微核引言本文利用植物根尖作为材料,用不同的诱导剂经行处理,利用细胞生物学方法观察其微、核率来表示动植物受遗传损伤程度的一种方法.微核的形成是细胞受诱变剂作用后的一种遗传学终点。

此实验可以应用于寻找最佳诱变剂,和环境敏感型植物,最终用来指导实际生活中的环保工作,其中包括预测实际环境可能引起污染的因素,进行环境监测的科学方法,可用于环境监测的敏感型植物.从而让科学研究真正服务于人类事业.1材料及方法1.1验材料及器具1.1.1验材料洋葱和大蒜根尖1.1.2验器具恒温培养箱、显微镜、计数器、镊子、载玻片、盖玻片、烧杯、白瓷盘、紫外灯(长为365nm 10W) 、吸水纸1.1.3验试剂CuSO4浓度(0、0.1、0.2、0.5、1.0、5.0和10.0 mg/L) ;实验室常用XX 牌子的洗手液,分别稀释25,50,75,100,200倍,并用稀盐酸调节酸碱度,使pH为7-8;卡诺固定液(95%酒精:冰醋酸3:l), 70%乙醇, 1mol/LHCl,95%酒精和浓盐酸,卡宝品红染色液1.2 步骤1.2.1发根:选取大小均匀,无病害的大蒜鳞茎,洋葱鳞茎,置于铺好含充分的纱布的培养皿中,并将培养皿放进25℃的恒温箱中2~3d。

在此过程中要不断加水,保证植物生根所需水分。

在根长至2cm时,即根细胞分裂高峰期取出。

1.2.2诱变处理重金属处理:取出若干个处理组大蒜,每组至少需要15个植株,分别用硫酸铜溶液浓度(0、0.1、0.2、0.5、1.0、5.0和10.0 mg/L),每个浓度梯度下分别处理其根尖24小时。

植物多倍体的诱导及细胞学鉴定

植物多倍体的诱导及细胞学鉴定实验时间:4月6日摘要一个物种细胞中染色体形态结构和数目的恒定性是这个种的重要特征。

我们把二倍体个体中能维持配子或配体正常功能的、最低数目的一套染色体称为染色体组或基因组。

当生物体内细胞染色体组数达到3组或3组以上者,称为多倍体。

多倍体在植物进化中有很重要的意义。

本实验利用大蒜作为试验材料,利用秋水仙素诱导,使生长出多倍体根尖。

然后通过制作大蒜根尖压片,观察染色体的数目,以鉴定大蒜根尖细胞是否为多陪细胞。

(本实验报告主要从多倍体的鉴定方面展开,而多倍体培育方面,将在下次报告中给出。

)1.引言生物体的细胞核中都有相对稳定的染色体数目,这是物种的基本特征之一。

遗传学中,将二倍体生物一个配子的染色体总和称为染色体组,也叫基因组,用n表示。

以下是几种常见模式生物的染色体组数目:玉米,2n=20;拟南芥,2n=10;果蝇,2n=8;小鼠,2n=40;水稻,2n=24。

又如,小麦染色体组可表示为2n=6x=42。

其中x表示每一个染色体组的染色体数,称为染色体基数,它是物种演化过程中的染色体倍数性的关系。

多倍体是指细胞中具有3个或3个以上染色体组的细胞或个体,而多倍体可以分为:同源多倍体(具有3个以上相同染色体组的细胞或个体,且染色体组来源于同一物种(AAA,AAAA))、异源多倍体(具有3个以上染色体组且染色体组来源于不同物种,通常由不相同的种杂交的杂种再经过染色体加倍而来(AABB,AABBDD))。

在自然界中许多植物都是多倍体,大约有30%~35%的被子植物,其中70%的禾本科植物属于多倍体,它们在植物进化中起了重要的作用,也是植物发生变异的重要途径之一。

多倍体植物,一般被认为是适应恶劣自然环境的结果,如我国西南部地区,温度变化激烈,紫外线辐射强,许多植物产生了多倍体类型。

在自然界中,大多是因为温度骤变,导致细胞分裂时染色体不分离,从而形成了多倍体。

植物多倍体有许多特性,其中一些特性也为农业经济发展提供了帮助。

植物多倍体诱发和鉴定

实验十三 植物多倍体 诱发和鉴定
2021/4/9
1
一、实验目的
• 了解人工诱导多倍体的原理,学习用秋 水仙碱诱发多倍体植物的方法,学习识 别多倍体植物的形态特征及其细胞学特 点。
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2
二、实验原理
• 秋水仙碱是细胞有丝分裂的抑制剂,它的主要 作用是抑制纺锤丝微管的形成,因而抑制了染 色体移向两极的运动,使细胞停滞在中期状态 而不能分裂成二个新的子细胞,而秋水仙碱对 染色体结构并无明显的影响,对细胞也不产生 严重毒害,细胞解除秋水仙碱环境后仍可正常 生长分裂,因而出现细胞含有多个染色体组的 情况,亦即构成了多倍体细胞。如果用秋水仙 素处理植物的根尖,则在根尖分生区内可检测 到大量染色体加倍的细胞,若处理植物幼苗的 芽,则可以得到染色体加倍的植株。
• 2.药品试剂:秋水仙碱、改良品红染色液、 无水酒精、冰醋酸、1N盐酸。
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五、实验步骤
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1.多倍体的诱发
• 可处理萌动种子,幼苗或植株生长点, 浓度以0.01~0.4%为宜;在以实验室观 察为目的的情况下,可以处理根尖。
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2.植株形态特征的观察
• 整个植株、或组织、 器官、细胞都可以看 到增大,其中气孔, 保卫细胞表现尤为明 显。
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3.细胞学观察
• 用根尖压片法制成染色体玻片标本,在 显微镜下认真观察和染色体计数,与对 照进行对比。
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• 洋葱根尖细胞染色体 (染色体加倍)
• 洋葱根尖细胞染色体 (正常二倍体细胞)
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பைடு நூலகம் 三、实验材料

第三章_染色体工程与植物育种


以小偃6号1D单体(含14+15)作为受体与含有5+10优质亚 基的品种杂交,进行优质亚基聚合的染色体工程法。
2D单体小麦与遗4212杂交F1出现的单价体
箭头示双单体
4D缺体小麦PMC 减数分裂MI 2n=20Ⅱ
八倍体小堰麦 PMC减数分裂 MI 2n=28Ⅱ
杂种F1根尖染色 体 2n=48
簇毛麦6VS端体:a,T240-6-1(2n=41+t); b, T240-6-1(2n=41+2t)
单体、缺体在基因定位上的应用
在染色体工程上,常用单体植物系统和缺 体植物系统,它们是染色体工程和基因定 位的重要材料。 例如,已知某植物的某对性状是由A和a一 对基因控制的,而且已获得该植物的所有 单体或缺体,用单体法或缺体法确定A(a) 基因所在的染色体。 1、单体法 2、缺体法

1、单体法 (1)若测定的二体植株的基因是隐性纯合时, 则单体系列为显性。
①若待测基因在某单体染色体上时,则aa基因型双体(2n) 与A表现型的该染色体的单体(2n-1)杂交后,F1代表现型为: P a表现型二体(n-1)Ⅱ+Ⅱaa × A表现型单体(n-1)Ⅱ+ⅠA
G
(n-1)Ⅰ+Ⅰa
(n-1)Ⅰ

可自然加倍,但频率很低,一般需要人工加倍。 目前最常用的方法是用秋水仙素处理在细胞分裂 时期的分生组织,使其新生器官的染色体加倍。
4、单倍体在育种上的应用 (1)提高选择效率,加速育种进程,因为单 倍体的基因型核表现型是一致的,对于隐 性基因控制的性状特别有效,常规杂交育 种需要8~10年,而单倍体育种只须一个世 代即可得到纯合二倍体。 (2)加速纯系的获得,尤其对于玉米等异花 授粉作物杂种优势利用来说具有特别重要 意义。

染色体变异(课件)高一生物(人教版2019必修2)


无子西瓜的培育
课堂练习
1.染色体变异包括染色体数目的变异和结构的变异。判断下列相 关表述是否正确。
(1)只有生殖细胞中的染色体数目或结构的变化才属于染色体变
异。(X) (2)体细胞中含有2个染色体组的个体就是二倍体。(X) (3)用秋水仙素处理单倍体植株后得到的一定是二倍体(X)
2.秋水仙素能诱导多倍体形成的原因是( D )
从而引起细胞内染色体数目加倍。
无子西瓜的培育
图示利用二倍体西瓜获得三倍体无籽西瓜的培育过程
四 倍 体 ♀
第一年 第二年
二倍体
:杂交
三倍体 联会 紊乱
2、四倍体西瓜植株做母本产生的雌配子
中含有几个染色体组?获得的四倍体西瓜

倍 体
为何要与二倍体杂交?

雌配子中含有二个染色体组;
杂交可获得三倍体植株。多倍体产生的途径有:
四倍体的形成的原因: ①有2个含有两个染色体组的配子结合发育而来的个体; ②二倍体在胚或幼苗时期受某种因素影响,体细胞在进行有丝分裂时,染 色体只复制未分离,形成四倍体。
7、多倍体:体细胞中含有3个或3个以上染色体组的个体统称为多倍体。多倍体植株常 常是茎秆粗壮,叶片、果实和种子都比较大,糖类和蛋白质等营养物质的含量都有所 增加。
A. 促进细胞融合 B. 诱导染色体多次复制 C. 促进染色单体分开,形成染色体 D. 抑制细胞有丝分裂时纺锤体的形成
马 野生祖先种
24

薯 栽培品种
48
1、请根据所学的减数分裂的知识,试着 香 野生祖先种
22
完成该表格。
蕉 栽培品种
33
2、为什么我们平时吃的香蕉没有种子?
2
12
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植物染色体结构变异的诱导及鉴定
10农生一班第一组卢**
摘要用物理因素(X射线,γ射线和快中子等)和化学药剂等处理植物材料,染色体的断裂频率会大大增加。

在染色体移向两极时无着丝粒染色体由于没有着色粒而不受纺锤丝的牵引而随机地停留在细胞的各个部位,称为染色体断片。

细胞分裂末期或二分体时期或四分体时期,染色体断片形成核状的结构,称为微核或拟核。

关键词物理因素、化学因素、染色体、微核
引言本文利用植物根尖作为材料,用不同的诱导剂经行处理,利用细胞生物学方法观察其微、核率来表示动植物受遗传损伤程度的一种方法.微核的形成是细胞受诱变剂作用后的一种遗传学终点。

此实验可以应用于寻找最佳诱变剂,和环境敏感型植物,最终用来指导实际生活中的环保工作,其中包括预测实际环境可能引起污染的因素,进行环境监测的科学方法,可用于环境监测的敏感型植物.从而让科学研究真正服务于人类事业.
1材料及方法
1.1验材料及器具
1.1.1验材料洋葱和大蒜根尖
1.1.2验器具恒温培养箱、显微镜、计数器、镊子、载玻片、盖玻片、烧杯、白瓷盘、紫外灯(长为365nm 10W) 、吸水纸
1.1.3验试剂 CuSO4浓度(0、0.1、0.2、0.5、1.0、5.0和10.0 mg/L) ;实验室常用XX 牌子的洗手液,分别稀释25,50,75,100,200倍,并用稀盐酸调节酸碱度,使pH为7-8;卡诺固定液(95%酒精:冰醋酸3:l), 70%乙醇, 1mol/LHCl, 95%酒精和浓盐酸,卡宝品红染色液
1.2 步骤
1.2.1发根:
选取大小均匀,无病害的大蒜鳞茎,洋葱鳞茎,置于铺好含充分的纱布的培养皿中,并将培养皿放进25℃的恒温箱中2~3d。

在此过程中要不断加水,保证植物生根所需水分。

在根长至2cm时,即根细胞分裂高峰期取出。

1.2.2诱变处理
重金属处理:取出若干个处理组大蒜,每组至少需要15个植株,分别用硫酸铜溶液浓度(0、0.1、0.2、0.5、1.0、5.0和10.0 mg/L),每个浓度梯度下分别处理其根尖24小时。

诱变处理后,用清水冲洗根表面的溶液,用蒸馏水继续培养24h。

紫外线处理:取出6个处理组大蒜,洋葱,每组至少需要15个植株,在细胞分裂高峰期,用10 W紫外灯距离分别,26cm照射,分别照射0min,20 min,25 min,30 min,35 min。

并在照射后的3d分别取根尖制片观察微核数,处理时的水温,气温均为24。

C,空气相对湿度80%.
洗手液处理:将实验室常用威露士牌子的洗手液,分别稀释25,50,75,100,200倍,
并用稀盐酸调节酸碱度,使pH为7-8。

选取生长良好、根长一致的植物体随机分成6组,
每组至少需要15个植株,恒温恒湿培养箱(25℃)中分别处理24小时,用蒸馏水恢复培养24h。

设蒸馏水对照
1.3染色体制片(具体情况择优采用)
1.3.1 固定:取0.5一1厘米的根尖,投人卡诺固定液(95%酒精:冰醋酸3:l)中,4℃条件下
固定24h。

用70%乙醇冲洗2次后转入70%乙醇中置4℃冰箱中保存待用;
1.3.2 染色截取前端1一1.5毫米长的淡黄色部分(生长点),用另一块载玻片与前者交叉
成十字形压片,将材料压成薄层。

揭片后,两块载玻片的中间部分都粘有相似的一薄层材料,
将其中一块载玻片上的薄层材料用少量蒸馏水冲到另一块上,滴l一2卡宝品红染色剂,用镊
子将生长点捣碎,染色10min,将染液吸净后,再滴加蒸馏水,小心加上盖玻片,注意防止
大量气泡产生,然后再覆盖吸水纸,用大拇指轻压,或用铅笔的一头敲压,使染色区呈云雾状。

1.3.3镜检至少观察3-5个根尖,一般两根尖制一个片,具体应根据根尖生长点的大小而定,
每个根尖观察1000个左右细胞,观察并统计微核数。

2数据及结果
2.1数据记录
2.1.1、不同浓度CuSO4对大蒜根尖的诱变影响
表1 不同浓度CuSO4对大蒜根尖的诱变影响
重金属溶
0 0.1 0.2 0.5 1 5 10
液度
(mg/L)
总细胞数1601 1994 1788 1968 1679 1486 2174
微核细胞数 1 4 9 12 10 21 25
微核率‰0.625‰ 2.006‰7.830‰8.130‰10.125‰16.151‰13.799‰断片及断桥0 0 5 4 7 3 5
2.1.2、不同浓度的洗手液处理洋葱及大蒜根尖的诱变影响
表2 不同浓度洗手液对大蒜根尖的诱变影响
洗手液稀释
倍数
0倍25倍50倍75倍100倍200倍
微核细胞数 1 20 23 11 9 7
微核率‰0.625‰11.152‰16.790‰10.214‰8.025‰ 5.440‰断桥及断片0 1 2 0 4 0
表3 不同浓度洗手液对洋葱根尖的诱变影响
洗手液稀释
倍数
0倍25倍50倍75倍100倍200倍
总细胞数1306 1004195215871159
1477
微核细胞数 2 8 19 11 8 7
微核率‰ 1.531‰7.968‰11.27‰8.192‰8.628‰7.448‰断桥及断片0 0 3 2 2 4
2.1.3、不同时间的紫外线对大蒜及洋葱根尖的诱导影响
表4 不同时间的紫外线对大蒜的诱导影响
紫外线照射时间/min 0 20 25 30 40
总细胞数1601 2500 1800 800 1600
微核细胞数 1 24 23 6 9
微核率‰0.625‰9.60‰12.78‰7.50‰ 5.625‰
表5 不同时间的紫外线对洋葱的诱导影响
紫外线照射时间/min 0 20 25 30 40
总细胞数1306 1522 1174 791 1539
微核细胞数 2 3 7 11 13
微核率‰ 1.531‰7.227‰8.518‰20.228‰12.995‰
2.2数据分析
图1 不同浓度CuSO4对大蒜根尖的诱变影响
图2 不同浓度洗手液对大蒜及洋葱根尖的诱变影响
图3 不同时间紫外线对大蒜及洋葱根尖的诱变影响
2.3实验结果
图4 5mg/LCuSO4溶液处理大蒜根尖40倍下显微镜微核照片
图5 稀释50倍洗手液处理大蒜根尖40倍下显微镜微核照片
图6 紫外线25min处理大蒜根尖40倍下显微镜微核照片
图7 紫外线25min处理洋葱根尖40倍下显微镜断片照片
3 实验讨论
由处理与植物根尖细胞诱导率的关系曲线来看,该曲线呈单峰状,说明在一定限度下,随着处理剂量的增加,细胞的微核率也随着增加,当其达到峰值时,细胞的微核率反而下降.可能的原因是诱导因素的处理剂量过大时,已经对植物细胞造成损伤甚至致死,细胞不再分裂,自然也就无法形成微核.在CuSO4处理组中可以看出,当其浓度为5mg/L是对植物根尖的影响最大,其微核率达16.151‰;在洗手液处理组中,大蒜根尖较洋葱根尖反应更为敏感,但当洗手液稀释50倍时,微核率二者均达峰值;在紫外线处理组中,大蒜在紫外线照射25min 时诱变率最高,而洋葱则在30min时,达到峰值。

由于制片的问题,可能有气泡和杂质,会影响对微核等的判断,这也是实验误差的主要来源。

1、此实验不适宜在夏天进行,由于夏天天气湿热,微生物大量繁殖,材料容易发霉,须频繁换水,特别是小型豆类,如豌豆.
2、洋葱根尖细胞以上午6-9时左右为分裂高峰期。

大蒜根尖细胞分裂高峰期为中午11-13时,尤其是在11-12时之间。

参考文献
【1】普通遗传学综合性实验 /刘向东,李亚娟主编.中国农业出版社,2011.7,第二章【2】遗传学综合实验/主编李雅轩, 赵昕,北京:科学出版社,2006。

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