亲和色谱应用于天然活性成分筛选的研究进展
天然产物中活性成分遴选方法研究进展
天然产物中活性成分遴选方法研究进展易人行; 戚进【期刊名称】《《广州化工》》【年(卷),期】2019(047)017【总页数】4页(P24-26,39)【关键词】活性成分遴选; 研究进展; 天然产物【作者】易人行; 戚进【作者单位】中国药科大学中药学院江苏南京 211198【正文语种】中文【中图分类】O625.7天然产物中生物活性成分的检测与发现是发现先导化合物的途径之一，也是新药开发中关键的组成部分。
由于传统的遴选方法多耗时耗力，具有较为明显的额弊端，不再满足现代化发展的需求，因此，寻找新的遴选方法具有一定的价值。
为了解决这些的问题，近年来，许多新型的技术应用于天然产物中活性成分的检测与发现。
本文总结了近年来文献报道的已经用于天然产物中活性成分和在未来在该领域具有一定应用潜力新技术，并进行了综述。
希望为天然产物中活性成分的检测与发现提供一定的参考。
1 生物亲和色谱生物色谱是利用固定化技术将一定的生物活性物质(酶，载体蛋白等)或仿生材料(脂质体等)等固定在一定的载体(二氧化硅、硅胶等)上，作为色谱固定相使用，上样后进行洗脱和分离[1]。
生物色谱同时具备色谱分离和生物活性的双重特点，可以在筛选生物活性成分的同时实现生物活性成分的分离和识别。
这减少了复杂体系中非活性成分的干扰[2]。
根据所用的色谱固定相，生物色谱主要细分为分子生物色谱法，细胞(膜)色谱法，仿生生物膜色谱法。
1.1 分子膜色谱分子膜色谱的固定相通常由活性生物大分子，如酶，受体，抗体，传递蛋白和DNA组成[3]。
上样后，提取物中的不同的成分可以在固定相内以不同的结合强度相互作用，从而可以利用不同极性的流动相洗脱，进一步对这些与大分子特异性结合的化合物进行分离和遴选。
并且还可以确定活性化合物和靶标之间的结合变量(例如血浆蛋白结合率、配体-受体亲和力等)或者鉴定新的活性化合物及其靶标，并且更好理解靶标与化合物之间的作用机制[4]。
这项技术已经被广泛应用，如Su 等[5]使用二氧化硅键合特定的DNA片段，用其作为固定相来筛选黄连和掌叶大黄中药提取物中的与该段DNA相互作用的有效成分。
亲和色谱技术及其在药物研发中的应用
色谱分析结课综述亲和色谱技术及其在药物研发中的应用姓名：郭海耀班级: 2011级6班学号：2011110195亲和色谱技术及其在药物研发中的作用郭海耀内蒙古医学院 2011级6班摘要：亲和色谱法是利用化合物和药物作用靶之间的亲和活性，将目标化合物从大量无亲和活性的化合物中分离出来的一种方法，具有色谱分离和活性筛选可同时进行的特点，特别适合于研究复杂体系中的效应物质。
以生物和非生物来源物质为配基的各种亲和色谱在药物活性成分分析中得到了广泛应用，已逐渐成为一种重要的技术手段。
该文归纳了亲和色谱原理在药物研发中的几种应用形式，并对其应用概况和前景进行了讨论，以期更好地利用这一分析工具。
关键词：亲和色谱蛋白纯化分离筛选应用研究现代色谱法是药物研究中应用最为活跃的分离分析技术之一, 在药品质量控制、新药研发、生物医学分析等领域占据举足轻重的地位。
在种类繁多的现代色谱法分支中, 有一种利用生物分子间亲和力进行分离的液相色谱技术, 称之为亲和色谱法(affinity chromatography, AFC)[1]。
目前，新的提取分离技术尤其是各种色谱技术已广泛应用于天然药物的有效成分研究，但很多色谱分离、分析模式都是基于混合物间理化性质的差异，并未包含任何药理功能的信息。
AFC是根据生命现象中生物大分子间高亲和力与高专一性可逆结合而设计的一种独特的色谱分离方法。
在亲和色谱中，将能与潜在药物(配体)特异结合的物质(配基)，如靶蛋白等固定于色谱填料上制备色谱柱，再将待分离混合物与色谱柱固定相一起孵育后，以洗脱液洗脱或不经孵育，使混合物缓慢、连续地通过色谱柱，即可实现混合物间以亲和性为基础的分离[2]。
亲和色谱一般使用生物来源的配基，但随着其应用范围的扩大，一些非生物来源的配基也逐渐被采用。
亲和色谱是利用偶联了亲和配基的亲和吸附介质为固定相来亲和吸附目标产物, 使目标产物得到分离纯化的液相色谱法。
亲和色谱已经广泛应用于生物分子的分离和纯化, 如结合蛋白、酶、抑制剂、抗原、抗体、激素、激素受体、糖蛋白、核酸及多糖类等；也可以用于分离细胞、细胞器、病毒等。
新冠疫苗 亲和色谱 -回复
新冠疫苗亲和色谱-回复新冠疫苗是当今全球关注的焦点话题之一，而亲和色谱则是一种常用的分离和纯化技术。
本文将会详细介绍新冠疫苗的亲和色谱进展，以及亲和色谱在疫苗研发中的应用。
一、新冠疫苗简介新冠病毒是一种由SARS-CoV-2引起的呼吸道传染病，其传播速度极快，严重威胁着全球人民的健康和经济。
为了应对疫情，科学家们积极开展了新冠病毒疫苗的研发工作。
二、亲和色谱的基本原理亲和色谱是一种分离和纯化生物大分子的方法，通过利用生物分子之间相互作用的特异性，使目标分子选择性地与固定相结合。
常见的亲和色谱方法包括亲和层析和亲和吸附。
三、亲和色谱在新冠疫苗研发中的应用新冠疫苗的研发是一个复杂而漫长的过程，其中亲和色谱技术发挥了重要作用。
下面将介绍亲和色谱在新冠疫苗研发中的几个典型应用。
1. 抗原纯化亲和色谱可以用于抗原的纯化，以获得高纯度和高活性的抗原。
研发新冠疫苗时，科学家需要从新冠病毒中提取出目标抗原，并将其纯化，以便后续的疫苗研究和制备工作。
2. 抗体纯化研发新冠疫苗的关键是获得高效的抗体。
亲和色谱可用于抗体的纯化，以去除杂质和其他非特异性成分。
纯化后的抗体可用于体外研究、体内动物试验以及临床试验等。
3. 抗体结构研究亲和色谱还可以用于抗体结构的研究。
通过利用与特定抗体亲和的配体分离，科学家可以更好地了解抗体的结构和功能。
这对于了解抗体的作用机制以及优化疫苗设计具有重要意义。
4. 结合亲和素的载体构建研发新冠疫苗时，科学家还需要将目标抗原与亲和素结合，以获得更好的免疫原性和稳定性。
亲和色谱可以用于合成亲和素与目标抗原结合的载体，为疫苗研发提供有力支持。
四、新冠疫苗研发中的亲和色谱进展近年来，亲和色谱在新冠疫苗研发中得到了广泛应用，并取得了一些重要进展。
1. 抗原纯化的改进传统的亲和色谱方法在抗原纯化中存在一些问题，比如选择性不高、纯化效率低等。
研究人员通过改进亲和色谱的材料和工艺，提高了抗原纯化的效率和纯度。
亲和色谱法在天然药物活性成分筛选中的应用
亲和色谱法在天然药物活性成分筛选中的应用饶澄;黄显【摘要】亲和色谱法是利用化合物和药物作用靶之间的亲和活性,将目标化合物从大量无亲和活性的化合物中分离出来的一种方法,具有色谱分离和活性筛选可同时进行的特点,特别适合于研究复杂体系中的效应物质.以生物和非生物来源物质为配基的各种亲和色谱在天然药物活性成分分析中得到了广泛应用,已逐渐成为一种重要的技术手段.该文归纳了亲和色谱原理在天然药物活性成分分离、筛选中的几种应用形式,并对其应用概况和前景进行了讨论,以期更好地利用这一分析工具.【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2010(019)012【总页数】3页(P19-21)【关键词】亲和色谱;天然药物;分离;筛选【作者】饶澄;黄显【作者单位】福建医科大学协和临床医学院药学部,福建,福州,350001;福建医科大学附属协和医院药学部,福建,福州,350001【正文语种】中文【中图分类】R284;R917目前，新的提取分离技术尤其是各种色谱技术已广泛应用于天然药物的有效成分研究，但很多色谱分离、分析模式都是基于混合物间理化性质的差异，并未包含任何药理功能的信息。
亲和色谱法是根据生命现象中生物大分子间高亲和力与高专一性可逆结合而设计的一种独特的色谱分离方法[1]。
在亲和色谱中，将能与潜在药物(配体)特异结合的物质(配基)，如靶蛋白等固定于色谱填料上制备色谱柱，再将待分离混合物与色谱柱固定相一起孵育后，以洗脱液洗脱或不经孵育，使混合物缓慢、连续地通过色谱柱，即可实现混合物间以亲和性为基础的分离。
亲和色谱一般使用生物来源的配基，但随着其应用范围的扩大，一些非生物来源的配基也逐渐被采用[2]。
在此介绍在天然药物活性成分分离、纯化中常用的几种亲和色谱方法及其应用进展。
1 基于固定化靶蛋白的亲和色谱血浆蛋白与药物可逆的结合平衡，直接影响到药物能否透过血管达到作用位点。
汪海林等[3]将以人血清白蛋白为配基的色谱用于药用植物活性成分的粗筛选，方法是在流动相中加入顶替剂使强保留组分快速流出，以少含或不含有机溶剂的缓冲溶液作为流动相冲洗、筛选弱保留组分，结果当归的2个主要活性峰经鉴定为其最重要的两种有效成分阿魏酸和藁本内酯，而用梯度淋洗法分离出了蒙古黄芪的7个活性成分。
亲和超滤质谱技术在中药活性成分筛选中的研究进展
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亲和色谱技术在药物分析中的应用进展
亲和色谱技术在药物分析中的应用进展王嗣岑;贺晓双【摘要】亲和色谱是依靠键合在固定相上的配位体与生物活性目标分子间特异性的识别与可逆的亲和作用,实现生物分子选择性分离的一种液相色谱分析方法.该方法具有高选择性、高回收率等特点,可同时进行色谱分离及活性筛选,广泛应用于活性产物的筛选、分离和纯化.本文简述了生物特效亲和色谱、印迹分子亲和色谱、染料配基亲和色谱等几种常用亲和色谱技术,综述了近年来亲和色谱在手性药物拆分、天然药物中活性组分筛选、活性蛋白分离纯化及药物-蛋白相互作用研究中的应用,并对其应用前景进行了展望.%Affinity chromatography (AC)is a type of liquid chromatography that makes use of biological-like interactions for separation and specific analysis of bioactive components. It has been widely used as a high-throughput screening method for the separation,screening and purification of the target molecules from complex samples with advantages such as high selectivity and high recovery efficiency.This article summarizes the biological effects of affinity chromatography, molecular imprinting chromatography, and dye ligands affinity chromatography.The review also encompasses the application of AC in the separation of chiral drugs,screening of active components,purification of target protein,and mechanism of the drug-protein interaction.Moreover,the prospects of its applications are also discussed.【期刊名称】《西安交通大学学报（医学版）》【年(卷),期】2017(038)006【总页数】8页(P777-784)【关键词】亲和色谱;药物分析;手性药物拆分;活性成分筛选;药物蛋白相互作用;生物大分子【作者】王嗣岑;贺晓双【作者单位】西安交通大学药学院,陕西西安 710061;陕西省心血管药物工程技术研究中心,陕西西安 710061;西安交通大学药学院,陕西西安 710061;陕西省心血管药物工程技术研究中心,陕西西安 710061【正文语种】中文【中图分类】R917亲和色谱(affinity chromatography)是利用生物分子与亲和色谱固定相表面配位体之间的特异性亲和吸附作用，进行选择性分离生物分子的一类色谱方法[1]。
亲和色谱技术研究进展
第３２卷第４期２００７年４月上海化工ＳｈａｎｇｈａｉＣｈｅｍｉｃａｌＩｎｄｕｓｔｒｙ摘要亲和色谱具有高选择、高活性回收率和高纯度等特点，已成为生物工程中分离纯化最有效的技术之一，是生物化工研究的重要方向。
综述了亲和色谱技术及其发展趋势。
关键词亲和色谱研究进展生物化工中图分类号Ｑ８１４．１第一作者简介：刘望才男１９７８年生博士研究生研究方向为化工技术在生物工程中的应用２７・・上海化工第３２卷［１］［２］［３］［４］液ｐＨ为４．２、０．０２ｍｏｌ／Ｌ磷酸盐缓冲液（含０．５ｍｏｌ／ＬＮＨ４Ｃｌ），所得ＧＳＨ纯度可达４９．８％，平均提取率为６７．９％。
３拟生物亲和色谱近年来发展起来的以氨基酸（包括多肽）亲和色谱和染料亲和色谱为代表的仿生亲和小分子配基新技术。
对需要纯化的目标蛋白，在组合生物分子库和组合化学分子库中筛选其相应的亲和配基，然后将其固定到支持介质上，这种组合出来的亲和配基比天然生物分子性质更稳定，特异性及重复性更好［１１－１２］。
３．１染料配基亲和色谱染料配基能通过共价链牢固地结合到亲和载体上。
染料配基价格低廉，与蛋白质的结合容量大，并且不易为物理或化学物质所降解，因此是一种较为理想的基团特异性配基。
Ｓ．Ｃ．ＭｅＬｉｓｓｉｓ等［１３］研究了谷胱甘肽结构类似物亲和吸附剂。
所用的染料是二氯三嗪的模拟物，其中活性部分结构与谷胱甘肽类似。
用此种亲和吸附剂分别纯化三种作用于谷胱甘肽的酶ＮＡＤ＋、甲醛脱氢酶和谷胱甘肽－Ｓ－转移酶，效果良好。
３．２多肽亲和色谱与金属和染料相比，多肽具有较高的特异性，且通常是无毒的。
多肽具有与蛋白质相似的结构，因此它们的作用通常是温和的，因此在分离过程中采取温和的洗脱条件，可以避免蛋白质的变性。
Ｈ．Ａｒｏｓｔｏｖａ［１４］等用碘化的Ｌ－酯氨酸与琼脂糖交联制备亲和色谱柱纯化猪胃蛋白酶，效果良好。
Ｊｏｈｎ等［１５］合成的双环八肽类似物，对肠促胰酶肽有很好的特异性吸附。
然而，自然界中存在的与蛋白质等生物大分子有天然亲和性的多肽种类非常有限。
亲和色谱应用于天然活性成分筛选的研究进展
亲和色谱应用于天然活性成分筛选的研究进展[摘要]亲和色谱法（affinity chromatography）是一种利用固定相的结合特性来分离分子的色谱方法。
利用化合物和固定相表面之间的某种特异性亲和力，将目标化合物从大量无亲和活性的化合物中分离出来。
该方法可同时进行色谱分离和活性筛选，作为一种高通量筛选方法广泛应用于各种活性药物的筛选。
该文主要针对亲和色谱的发展历史、筛选技术类型及其在天然活性成分筛选中的应用进行了综述。
并就其应用前景进行讨论，以期更好地发挥亲和色谱在药物筛选中的应用。
[关键词]亲和色谱;筛选;天然药物;细胞膜色谱;脂筏色谱Progresses in screening active compounds from herbalmedicine by affinity chromatographyFENG Ying-shu<sup>/1</sup>，TONG Shan-shan<sup>/1</sup>，XUXi-ming<sup>/1</sup>，YU Jiang-nan1，2* （1. Department of Pharmaceutical Analysis，China Pharmaceutical University，Nanjing 210009，China;2. College of Pharmacy，Jiangsu University，Zhenjiang 212013，China）[Abstract]Affinity chromatography is a chromatographic method for separating molecules using the binding characteristics of the stationary phase with potential drug molecules. This method can be performed as a high throughput screening method and a chromatographic separation method to screen a variety of active drugs. This paper summarizes the history of affinity chromatography，screening technology of affinity chromatography，and application of affinity chromatography in screening bio-active compounds in herbal medicines，and then discusses its application prospects，in order to broaden applications of the affinity chromatography in drug screening.[Key words]affinity chromatography; screening; herbal medicines; cell membrane chromatography; lipid raft stationary phase chromatographydoi：10.4268/cjcmm20150609中药种类众多，配伍复杂，而有效成分是其发挥治疗作用的物质基础，从天然药物中寻找活性成分一直是中药研究的重要方向之一。
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亲和色谱应用于天然活性成分筛选的研究进展[摘要]亲和色谱法（affinity chromatography）是一种利用固定相的结合特性来分离分子的色谱方法。
利用化合物和固定相表面之间的某种特异性亲和力，将目标化合物从大量无亲和活性的化合物中分离出来。
该方法可同时进行色谱分离和活性筛选，作为一种高通量筛选方法广泛应用于各种活性药物的筛选。
该文主要针对亲和色谱的发展历史、筛选技术类型及其在天然活性成分筛选中的应用进行了综述。
并就其应用前景进行讨论，以期更好地发挥亲和色谱在药物筛选中的应用。
[关键词]亲和色谱;筛选;天然药物;细胞膜色谱;脂筏色谱Progresses in screening active compounds from herbalmedicine by affinity chromatographyFENG Ying-shu<sup>/1</sup>，TONG Shan-shan<sup>/1</sup>，XUXi-ming<sup>/1</sup>，YU Jiang-nan1，2* （1. Department of Pharmaceutical Analysis，China Pharmaceutical University，Nanjing 210009，China;2. College of Pharmacy，Jiangsu University，Zhenjiang 212013，China）[Abstract]Affinity chromatography is a chromatographic method for separating molecules using the binding characteristics of the stationary phase with potential drug molecules. This method can be performed as a high throughput screening method and a chromatographic separation method to screen a variety of active drugs. This paper summarizes the history of affinity chromatography，screening technology of affinity chromatography，and application of affinity chromatography in screening bio-active compounds in herbal medicines，and then discusses its application prospects，in order to broaden applications of the affinity chromatography in drug screening.[Key words]affinity chromatography; screening; herbal medicines; cell membrane chromatography; lipid raft stationary phase chromatographydoi：10.4268/cjcmm20150609中药种类众多，配伍复杂，而有效成分是其发挥治疗作用的物质基础，从天然药物中寻找活性成分一直是中药研究的重要方向之一。
然而，应用传统的天然药物分离提取方法，即先对其成分进行分离，再结合药理药效试验筛选其中特定的有效成分的方法筛选中药活性成分，周期长，且命中率相对较低。
将化合物分离鉴定手段与高通量药物筛选技术相结合，可以直接对天然药物的提取组分进行分离并在线活性检测，不仅可以节约成本，提高天然药物活性筛选速度，同时也在一定程度上阐述作用机制，以保证研究目标的准确性。
亲和色谱法（affinity chromatography）是一种利用固定相的结合特性来分离分子的色谱方法<sup>[1]</sup>。
在亲和色谱中，将能与潜在药物（配体）特异结合的物质（配基）固定于色谱填料上，制备色谱柱，混合物经过色谱柱时，能与固定相产生特异结合的物质将在色谱柱上发生保留行为，从而实现混合物间以亲和性为基础的分离。
中药提取物可不经过分离步骤，直接在相应的亲和色谱上完成筛选工作。
并且药物在亲和色谱模型上的的保留特性（保留时间或容量因子）与药物的活性显著相关。
本文主要针对亲和色谱的发展历史、筛选技术类型及其在天然活性成分筛选中的应用进行了综述。
1亲和色谱的发展历史亲和色谱的发展经历了上百年的历史<sup>[2]</sup>，现已成为一个较为成熟的技术，广泛应用于天然生物活性物质的分离和纯化，以及筛选和鉴定。
早在1910年，德国药理学家Starkenstein将蔗糖酶抗体吸附在高岭土上，研究了抗体和抗原的相互作用，为亲和色谱的萌芽。
1924年，俄罗斯学者Engelhardt提出了“固定化配体原理”，作为分离生物活性物质的方法，为亲和色谱分离方法的根本。
随后的60年间，人们相继使用亲和色谱技术，分离纯化淀粉酶、抗体等，在此期间，纤维素、葡聚糖凝胶、琼脂糖、苯乙烯树脂等基体材料以及各种配基的固定化方法的出现，亲和色谱技术飞速发展。
1968年，美国药理学家Cuatrecases和Wilchek扩展了亲和配位体的范围，包括酶、抗原、抗体、激素、维生素、外源凝集素、糖蛋白、膜蛋白、病毒、细胞等，确立生物特效亲和色谱方法。
1970年，Cuatrecases提出了“空间间隔臂”概念和方法，成功解决了配位体的立体可接受性问题。
1972年，德国学者Wulff提出分子印迹色谱方法，进一步扩展了亲和色谱的应用，使得亲和色谱开始用于药物筛选研究。
随后的30年间，共价色谱方法，染料配位色谱方法，电荷转移色谱方法，定位金属例子亲和色谱方法、包合配合物色谱方法相继提出。
1978年瑞典学者Ohlson提出以大孔微粒硅胶作为载体的高效液相亲和色谱方法，使得亲和色谱的发展跨入了一个新的时代。
上述关于亲和色谱技术的发展虽然并非直接用于天然药物的筛选，但是其对现代药物筛选技术的建立、发展和应用奠定了十分重要的理论基础与技术支撑。
经过几十年亲和色谱相关技术的发展，随着HPLC色谱柱制备技术以及各种在线联用技术的广泛应用，以及更多亲和配基的基础研究的深入，近十多年来逐步衍生出了众多基于不同配基的亲和色谱技术，并在天然药物的筛选领域发挥了越来越重要的作用。
根据配基的种类和筛选模型的不同，常用的亲和色谱筛选技术包括：以受体、酶、蛋白或DNA为配基的亲和色谱筛选技术、细胞膜色谱筛选技术、脂筏色谱筛选技术、分子印迹技术等。
各种亲和色谱技术在药物筛选、模式建立、分离机制等方面的特色不尽相同，其在天然药物发现和鉴定等领域的应用不断拓展，为天然活性成分的发现与临床药物开发提供了极具优势的筛选技术平台。
2亲和色谱法筛选技术亲和色谱法将能与潜在药物（配体）特异结合的物质（配基）固定于色谱填料上制备色谱柱，混合物根据色谱保留行为的不同而实现分离。
同时，亲和色谱与紫外，MS，NMR 等多种检测器联用，实现在线筛选并鉴定中药活性成分。
随着人们对亲和色谱认识的加深以及应用的推广，多种配基的亲和色谱以及不同类型的亲和色谱模型陆续被人们应用于中药活性成分的筛选。
2.1受体为亲和配基的色谱筛选近年来，随着药物作用靶点的逐步揭示，以受体为目标筛选中药中的活性成分为中药筛选的基本思路。
王序等<sup>[3]</sup>在20世纪80年代，以11个受体为指标，筛选了150种常用中药的400余种提取物，得到了5 000余种生物活性测定结果。
为了解中医用药的机制提供了一些实验依据。
然而，传统筛选方法仅根据混合物判断作用结果，无法确定具体作用物质，且工作量巨大，耗费人力物力可观。
将受体作为亲和色谱的固定相，建立亲和色谱筛选模型，天然药物提取物中能与受体发生特异结合的成分在色谱柱中发生保留，与无色谱保留行为的物质分离开来，从而实现活性筛选和色谱分离同时进行，快速、有效的发现天然药物中的活性物质。
目前用于天然药物筛选的受体为配基的亲和色谱模型有肾上腺素受体亲和色谱模型，烟碱受体亲和色谱模型等。
由于受体对配体选择性识别作用较强，以受体为配基的亲和色谱在天然药物活性成分筛选中具有较强的选择性且作用机制明确。
Wang等<sup>[4]</sup>将猪重组β2-肾上腺素受体（β2-AR）通过共价键固定在大孔硅胶表面，制成β2 -AR亲和色谱柱，使用亲和色谱方法与四极飞行时间质谱（Q-TOF-MS）联用，从中药制剂活血胶囊提取物中筛选出有效成分阿魏酸，羟基红花黄色素A（HSYA）和柚皮苷。
提取物中具有舒血管作用的β2-AR拮抗剂能与固定相中上的β2-AR发生特异性结合而产生色谱保留，与Q-TOF-MS联用，实现活性化合物的在线分离和鉴定。
然而，受体的制备及固定化工艺较为复杂，受体的蛋白质特性导致了亲和色谱使用寿命较短。
在受体固定化过程中，受体蛋白覆盖不完全会导致配体与固定相上残留基团发生非特异性结合而导致其保留特性发生变化。
郑晓晖等<sup>[5]</sup>用甘氨酸乙酯对硅胶表面残留的未反应的咪唑基进行封尾而消除非特异性吸附，并在流动相中加入Tris，EDTA和NaCl等试剂，用于消除配体与固定相上残留氨基和硅羟基之间的静电作用。
这样不仅能最大程度地保持受体的活性和选择性，又减小了固定相表面非特异性功能团的影响。
所制备的色谱柱可使用1周的时间。
合适的固定化受体的发现决定着亲和色谱药物筛选模型的应用。
E Calleri等<sup>[6]</sup>研究了固定化γ型过氧化物酶体增殖物激活受体（PPARγ）的色谱特性。
实验将PPARγ以共价键固定在氨丙基二氧化硅粒子表面，作为色谱固定相，同时，将PPARγ结合在毛细管柱表面建立PPARγ毛细管亲和色谱以研究不同固定化条件下的亲和色谱特性，以已知配体验证固定化后的PPARγ亲和色谱的结合特性。