8-酶_4368
V8蛋白酶
Cat.No.：66676-43-5EC：3.4.21.19全名:序列分析纯V8蛋白酶；金黄色葡萄球菌V8蛋白酶别名:V8蛋白酶；谷氨酰胺内切酶；天冬酰胺内切酶储存条件：冻干粉，2-8℃来源：基因工程生产，大肠杆菌表达。
1.产品简介V8蛋白酶属于丝氨酸蛋白酶家族，能特异水解谷氨酸或天冬氨酸残基羧基侧肽键。
在pH7.8的NH4HCO3和pH4.0的CH3COONH4缓冲液中识别并切割Glu羧基端肽键，在pH7.8的磷酸盐缓冲液中识别并切割Glu或Asp羧基端肽键，且对Glu的水解速率高于Asp。
V8蛋白酶在pH4.0-10.0之间均有活性，最适pH 为8.0-8.5。
在进行蛋白质酶切测序、肽图谱分析和肽质量指纹图谱分析中使用时，可以单独使用或与其他蛋白酶混合使用。
V8蛋白酶的抑制剂有二异丙基氟磷酸（DFP）、α2-巨球蛋白和Nα-P-甲苯磺酰基-L-赖氨酸氯甲基酮（TLCK）。
2.产品特性来源重组大肠杆菌产品外观白色、类白色、类黄色粉末比活≥ 5.0AU/mg pro.蛋白电泳单一主条带分子量24.0±2.4kDa单位定义：在25℃，pH7.8的条件下，每分钟催化底物（Z-Phe-Leu-Glu-4-nitranilide）生成1μmol对硝基苯胺（4-nitroaniline）所需要的酶量为一个酶活性单位。
比活性：25°C时，以Z-Phe-Leu-Glu-4-nitranilide为底物测得的活性约为20U/mg pro.（对应于37°C时，以酪蛋白为底物的活性约为500U/mg pro）。
3.储存和运输稳定性储存稳定性：重组V8蛋白酶冻干粉存于2-8℃，24个月稳定；溶解后稳定性：用水或50mM Tris-HCl pH8.0溶解以后存于-20℃以下（1mg/ml），6个月稳定；用水或50mM Tris-HCl pH8.0溶解以后存于4℃（1mg/ml，无菌），2个月稳定；用50mM Tris-HCl pH8.0溶解以后存于25℃或37℃（0.5mg/ml）12h，活性可维持85%以上；溶解后溶液可反复冻融10次无活性损失。
酶的分类编号
酶的分类编号是一种具有高度特异性的有机分子，它可以激活、抑制和调节一系列生物反应。
由于其复杂的生物学功能，研究者们致力于系统地收集、分类和编号已知的酶类。
为此，他们建立了一个称为“酶分类编号系统”的有序结构，以提供有关已知酶的有用信息。
酶分类编号系统的基本思想是，根据酶的功能、结构和调节特性，将酶聚类成一系列类别，并为每个类别赋予一个体系编号，以表示其特性和复杂性。
这个编号系统用一组数字、字母和符号组成，通常最多不超过8位，按照以下格式排列：数字X.X.X.X.X.X.X.X，其中每一位数字代表一个不同的类别或功能，每一位数字的含义如下：第一位（第一级）：表示酶的总类别，例如，1代表酶催化剂；2表示信号转导酶；6表示糖酶；7表示蛋白质酶；8表示核酸酶；9表示其他酶。
第二位（第二级）：表示酶的家族，例如，1代表酶I类；2表示酶II型；3表示酶III型；4表示酶IV型；5表示酶V型；6表示酶VI型；7表示酶VII型。
第三位（第三级）：表示酶的子家族，例如，1代表酶I类的第一子家族，2表示酶I类的第二子家族，以此类推。
第四位（第四级）：表示酶的子家族，例如，1代表酶I类第一子家族中第一类酶，2表示酶I类第一子家族中第二类酶，以此类推。
第五位（第五级）：表示酶的目的，例如，1表示激活酶；2表示抑制酶；3表示识别酶；4表示转移酶；5表示合成酶；6表示破坏酶；7表示维持酶。
第六位（第六级）：表示酶的物种来源，例如，1代表细菌；2表示古菌；3表示植物；4表示病毒；5表示真菌；6表示哺乳动物；7表示其他动物；8表示其他。
第七位（第七级）：表示酶的种类，例如，1表示糖基化酶；2表示水解酶；3表示还原酶；4表示氧化酶；5表示转基因酶；6表示酪氨酸酶；7表示其他酶。
第八位（第八级）：表示酶的特性，例如，1表示对氧化应激反应有效；2表示对pH变化有效；3表示对热处理有效；4表示对药物有效；5表示其他特性。
以上就是酶分类编号系统的基本架构，也是比较成熟的系统。
V8蛋白酶
V8蛋白酶
全名: 金黄色葡萄球菌V8
别名: V8蛋白酶、天冬酰胺内切酶、谷氨酰胺内切酶CAS号: 66676-43-5
EC号: 3.4.21.19
说明：V8蛋白酶为丝氨酸蛋白酶，特异水解天门冬氨酸和谷氨酸残基羧基侧肽键。
最适pH为pH8.0～8.5。
酶抑制剂有二异丙基氟磷酸（DFP）、
α2- 巨球蛋白和Nα=-P-甲苯磺酰基-L-赖氨酸氯甲基酮（TLCK）。
单位定义：在25℃，pH7.8的条件下，每分钟催化底物
（Z-Phe-Leu-Glu-4-nitranilide）生成1μmol对硝基苯胺
（4-nitroaniline）所需要的酶量为一个酶活性单位。
用途：用于蛋白质结构和序列分析。
比活性：25°C时，以Z-Phe-Leu-Glu-4-nitranilide为底物测得的活性大约为5U/mg（37°C时，以酪蛋白为底物测得的活性大约为500
U/mg）。
规格：50 µg/支、2mg/支。
储存：-20°C及以下。
生物化学王镜岩(第三版)课后习题解答
第三章氨基酸提要α-氨基酸是蛋白质的构件分子，当用酸、碱或蛋白酶水解蛋白质时可获得它们。
蛋白质中的氨基酸都是L型的。
但碱水解得到的氨基酸是D型和L型的消旋混合物。
参与蛋白质组成的基本氨基酸只有20种。
此外还有若干种氨基酸在某些蛋白质中存在，但它们都是在蛋白质生物合成后由相应是基本氨基酸（残基）经化学修饰而成。
除参与蛋白质组成的氨基酸外，还有很多种其他氨基酸存在与各种组织和细胞中，有的是β-、γ-或δ-氨基酸，有些是D型氨基酸。
氨基酸是两性电解质。
当pH接近1时，氨基酸的可解离基团全部质子化，当pH在13左右时，则全部去质子化。
在这中间的某一pH（因不同氨基酸而异），氨基酸以等电的兼性离子（H3N+CHRCOO-）状态存在。
某一氨基酸处于净电荷为零的兼性离子状态时的介质pH称为该氨基酸的等电点，用pI表示。
所有的α-氨基酸都能与茚三酮发生颜色反应。
α-NH2与2,4-二硝基氟苯（DNFB）作用产生相应的DNP-氨基酸（Sanger反应）；α-NH2与苯乙硫氰酸酯（PITC）作用形成相应氨基酸的苯胺基硫甲酰衍生物（ Edman反应）。
胱氨酸中的二硫键可用氧化剂（如过甲酸）或还原剂（如巯基乙醇）断裂。
半胱氨酸的SH基在空气中氧化则成二硫键。
这几个反应在氨基酸荷蛋白质化学中占有重要地位。
除甘氨酸外α-氨基酸的α-碳是一个手性碳原子，因此α-氨基酸具有光学活性。
比旋是α-氨基酸的物理常数之一，它是鉴别各种氨基酸的一种根据。
参与蛋白质组成的氨基酸中色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸在紫外区有光吸收，这是紫外吸收法定量蛋白质的依据。
核磁共振（NMR）波谱技术在氨基酸和蛋白质的化学表征方面起重要作用。
氨基酸分析分离方法主要是基于氨基酸的酸碱性质和极性大小。
常用方法有离子交换柱层析、高效液相层析（HPLC）等。
习题1.写出下列氨基酸的单字母和三字母的缩写符号：精氨酸、天冬氨酸、谷氨酰氨、谷氨酸、苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸。
[见表3-1]表3-1 氨基酸的简写符号名称三字母符单字名称三字单字号母符号母符号母符号丙氨酸(alanine) Ala A亮氨酸(leucine)LeuL精氨酸(arginine) Arg R赖氨酸(lysine)LysK天冬酰氨(asparagine s) Asn N甲硫氨酸(蛋氨酸)(methionine)MetM天冬氨酸(aspartic acid) Asp D苯丙氨酸(phenylalanine)PheF半胱氨酸(cysteine) Cys C脯氨酸(praline)ProP谷氨酰氨(glutamine) Gln Q丝氨酸(serine)SerS谷氨酸(glutamic acid) Glu E苏氨酸(threonine)ThrT甘氨酸(glycine) Gly G色氨酸(tryptophan)TrpW组氨酸His H 酪氨酸Ty Y(histidine) (tyrosine) r 异亮氨酸(isoleucine ) Ile I缬氨酸(valine)ValVAsn和/或Asp Asx B Gln和/或GluGlsZ2、计算赖氨酸的εα-NH3+20%被解离时的溶液PH。
鼠岩藻糖转移酶8 基因敲除
鼠岩藻糖转移酶8（FucT-8）基因敲除是指在实验过程中，研究人员通过基因编辑技术将鼠体内的岩藻糖转移酶8基因删除，从而研究该基因在生物体内的功能和作用。
岩藻糖转移酶8（FucT-8）是一种糖基转移酶，主要参与鼠体内糖脂的合成。
糖脂是细胞表面的一种重要成分，参与细胞识别、信号传导等生理过程。
通过敲除FucT-8基因，研究人员可以探讨该基因在糖脂合成及生物学功能中的作用。
基因敲除实验通常采用CRISPR/Cas9等基因编辑技术进行。
实验过程中，研究人员首先设计并合成一段特定的sgRNA，引导Cas9蛋白定位到FucT-8基因的位置，然后进行剪切。
此外，还可以通过引入同源重组酶将敲除后的基因替换为荧光标签等标记基因，以便于后续的实验检测。
鼠岩藻糖转移酶8基因敲除实验的意义在于，通过研究敲除FucT-8基因后的鼠体表型，可以揭示该基因在糖脂合成及生物学功能中的重要作用，为进一步研究相关疾病的发生机制和寻找治疗策略提供线索。
岩藻糖基转移酶8fut8敲除
岩藻糖基转移酶8fut8敲除
岩藻糖基转移酶8FUT8是一种重要的酶，它在植物中起着关键的作用。
敲除（knockout）是一种常见的遗传学实验方法，通过该方法可以使目标基因在细胞或生物体中失去功能，从而研究该基因的功能。
敲除8FUT8基因可以对植物的生物学特性产生重要影响。
首先，敲除8FUT8基因可能会影响植物的糖基化模式。
岩藻糖作为一种重要的糖基化产物，参与了植物细胞壁的合成和结构。
因此，敲除8FUT8基因可能导致植物细胞壁的结构和性质发生变化，进而影响植物的生长发育和抗逆能力。
其次，敲除8FUT8基因可能会影响植物的生物学特性。
糖基化修饰在植物的生长发育、信号传导、抗病性等方面发挥重要作用，因此敲除8FUT8基因可能会影响植物的生长发育过程，甚至影响植物的生殖能力和适应环境的能力。
此外，敲除8FUT8基因还可能对植物的互作关系产生影响。
植物通过糖基化修饰调节细胞间信号传导和与其他生物的互作关系，因此敲除8FUT8基因可能会影响植物与其他生物的互作关系，如与共生菌根真菌的共生关系等。
总之，敲除岩藻糖基转移酶8FUT8基因可能对植物的生物学特性产生多方面的影响，包括糖基化模式、生长发育特性、抗逆能力以及与其他生物的互作关系等。
这些影响的具体表现需要通过实验研究进一步验证和探究。
酶的分类和命名
酶的分类和命名第二节酶的分类和命名一、酶的分类国际酶学委员会(I.E.C)规定，按酶促反应的性质，可把酶分成六大类：1.氧化还原酶类(oxidoreductases)指催化底物进行氧化还原反应的酶类。
例如，乳酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶、细胞色素氧化酶、过氧化氢酶等。
2.转移酶类(transferases)指催化底物之间进行某些基团的转移或交换的酶类。
如转甲基酶、转氨酸、己糖激酶、磷酸化酶等。
3.水解酶类(hydrolases)指催化底物发生水解反应的酶类。
例如、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、磷酸酶等。
4.裂解酶类(lyases)指催化一个底物分解为两个化合物或两个化合物合成为一个化合物的酶类。
例如柠檬酸合成酶、醛缩酶等。
5.异构酶类(isomerases)指催化各种同分异构体之间相互转化的酶类。
例如，磷酸丙糖异构酶、消旋酶等。
6.合成酶类(连接酶类，ligases)指催化两分子底物合成为一分子化合物，同时还必须偶联有ATP的磷酸键断裂的酶类。
例如，谷氨酰胺合成酶、氨基酸：tRNA连接酶等。
二、酶的命名(一)习惯命名法1.一般采用底物加反应类型而命名，如蛋白水解酶、乳酸脱氢酶、磷酸己糖异构酶等。
2.对水解酶类，只要底物名称即可，如蔗糖酶、胆硷酯酶、蛋白酶等。
3.有时在底物名称前冠以酶的来源，如血清谷氨酸－丙酮酸转氨酶、唾液淀粉酶等。
习惯命名法简单，应用历史长，但缺乏系统性，有时出现一酶数名或一名数酶的现象。
(二)系统命名法鉴于新酶的不断发展和过去文献中对酶命名的混乱，国际酶学委员会规定了一套系统的命名法，使一种酶只有一种名称。
它包括酶的系统命名和4个数字分类的酶编号。
例如对催化下列反应酶的命名。
ATP+D―葡萄糖→ADP+D―葡萄糖-6-磷酸该酶的正式系统命名是：ATP：葡萄糖磷酸转移酶，表示该酶催化从ATP中转移一个磷酸到葡萄糖分子上的反应。
它的分类数字是：E.C. 2.7.1.1,E.C代表按国际酶学委员会规定的命名，第1个数字(2)代表酶的分类名称(转移酶类)，第2个数字(7)代表亚类(磷酸转移酶类)，第3个数字(1)代表亚亚类(以羟基作为受体的磷酸转移酶类)，第4个数字(1)代表该酶在亚-亚类中的排号(D葡萄糖作为磷酸基的受体)。
人8-羟基鸟嘌呤dna糖基化酶
人8-羟基鸟嘌呤dna糖基化酶人8-羟基鸟嘌呤DNA糖基化酶（hOGG1）是一种重要的DNA修复酶，能够修复DNA中的8-羟基鸟嘌呤（8-OHdG）损伤，维护细胞的基因稳定性和避免遗传病发生。
本文将从分子结构、酶学特性、功能作用、调控机制等方面介绍hOGG1的相关知识。
一、分子结构hOGG1基因位于人类染色体3p25.3，编码一个肽链长达320个氨基酸的蛋白质。
hOGG1蛋白质由N端保守的碱基结合区、核苷酸结合区、镶嵌在核苷酸结合区和碳端的催化区组成。
其中，催化区包含一个由氨基酸241至252构成的互补配对结构和一个由氨基酸284至295构成的催化环。
这两个区域共同构成了hOGG1的催化中心，能够高效识别和剪切DNA 链上的8-OHdG位点，完成糖基化修复的过程。
二、酶学特性1. 底物特异性：hOGG1主要修复DNA中的8-OHdG损伤，对于其他类型的DNA损伤表现出较低的活性。
2. 极端酸碱度敏感性：hOGG1的活性在pH 7.2至8.0之间最高，但将pH调整到7.5附近可以保证最大的酶活性。
3. 快速扫描和斩断DNA链：hOGG1能够通过快速扫描DNA链，高效地识别8-OHdG位点并进行糖基化修复。
此外，hOGG1能够利用其催化中心中的催化环结构，进行DNA链的剪切。
三、功能作用hOGG1在维护DNA的完整性和稳定性方面发挥了重要作用，具体有以下三个方面的功能：1. 修复DNA中的8-OHdG损伤：在生物活动过程中，细胞内部和外部环境的氧化应激作用会导致DNA链上的8-OHdG结构损伤。
hOGG1能够高效识别和修复这种损伤，防止8-OHdG结构在DNA复制过程中产生突变和错误配对。
2. 维护基因稳定性和避免遗传病：hOGG1的缺陷会导致8-OHdG结构的累积，加重基因突变的风险，从而引发遗传病或癌症的发生。
因此，hOGG1的正常功能能够确保DNA的完整性和稳定性，避免潜在的疾病风险。
3. 参与药物代谢作用：除了修复DNA损伤外，hOGG1还能够参与人体内药物代谢作用，对于药物代谢而言具有重要意义。
硫酸沙丁胺醇溶液联合布地奈德混悬液雾化吸入治疗小儿支气管哮喘合并肺炎的临床疗效
小儿支气管哮喘（简称哮喘）是一种呼吸道炎性疾病，多由病原菌感染、变态反应因素、遗传因素等所致。
肺炎支原体（MP）可通过呼吸道飞沫、气溶胶传播，MP 感染是诱发哮喘的高危因素之一[1]。
小儿由于免疫系统、呼吸系统等发育尚未成熟，容易感染MP 引起肺炎，诱发哮喘。
小儿哮喘合并肺炎发生后，患儿可出现咳嗽、喘息、气促、发热等症状，严重影响其日常生活。
目前，临床上对小儿哮喘合并肺炎主要采用药物治疗，雾化吸入可让药物直达病灶，增加局部药物浓度，提高治疗效果，而且局部用药利于减少不良反应。
硫酸沙丁胺醇、布地奈德是常用的雾化吸入治疗药物，其中硫酸沙丁胺醇属于平喘药，能够缓解哮喘，布地奈德属于糖皮质激素药物，有抗炎、抗过敏等作用。
小儿哮喘合并肺炎发生过程中，多种炎性介质、细胞因子及免疫细胞参与其中，包括肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-8、免疫球蛋白、CD4+细胞等，治疗期间监测以上指标有助于评估治疗效果。
本研究对小儿哮喘合并肺炎采用硫酸沙丁胺醇联合布地奈德雾化吸入治疗，观察其疗效及对患儿免疫功能、炎性反应指标的影响，报告如下。
1 对象与方法1.1 研究对象选取2020年1月- 2021年1月东方市人民医院收治的小儿哮喘合并肺炎94例，根据组间基本资料均衡可比原则分为两组，各47例。
纳入标准：经临床症状、实验室检查、病史、免疫性检查等确诊，且符合《支气管哮喘防治指南（支气管哮喘的定义、诊断、治疗及教育和管理方案）》[2]诊断标准；年龄6～14岁；能配合完成肺功能检查。
排除标准：自身免疫性疾病；气胸、鼻炎等其他呼吸系统疾病；先天性心脏病；精神疾病；真菌感染。
对照组男27例，女20例；年龄6～14岁，平均8.97±0.65岁；病程1～5天，平均2.54±0.23天。
观察组男26例，女21例；年龄6～13岁，平均9.03±0.70岁；病程1～4天，平均2.49±0.23天。
8-羟化脱氧鸟苷 正常值范围
8-羟化脱氧鸟苷正常值范围8-羟化脱氧鸟苷（8-OHdG）是一种DNA损伤标志物，通常与氧化应激和细胞内DNA氧化损伤相关。
正常值范围是指在健康人群体内8-OHdG的浓度或尿液中的含量处于正常的范围内。
下面将详细介绍8-OHdG的正常值范围。
1.浓度范围：8-OHdG通常以纳摩尔/毫摩尔（nM/mol）的浓度进行表示。
在健康成人中，8-OHdG的血浆浓度通常在1.6至13 nM/mol之间。
这个范围的浓度反映了人体内正常的氧化水平和DNA损伤程度。
2.生理普遍性：8-OHdG是DNA损伤的指标，它在全球各地的健康人群中都有普遍存在。
然而，根据不同的个体特征和环境条件，其正常值范围可能会有一定的变化。
3.年龄差异：与年龄相关的氧化应激通常会导致DNA氧化损伤的增加。
因此，8-OHdG的正常值在不同年龄段之间可能会有所差异。
一般来说，儿童和青少年的8-OHdG浓度通常较低，而老年人的浓度可能会稍高。
4.性别差异：女性通常比男性具有更高的氧化应激水平，因此女性的8-OHdG浓度可能会稍高于男性。
然而，这种差异并不明显，所以在评估8-OHdG的正常值范围时，性别因素的影响可以忽略不计。
5.疾病状态：某些疾病或病理条件可导致体内氧化应激的增加，从而引起DNA氧化损伤的增加。
一些研究发现，在某些慢性病如糖尿病、肿瘤及心血管疾病等患者中，8-OHdG浓度明显增加。
因此，疾病状态是评估8-OHdG正常值范围的重要因素。
总体而言，8-OHdG的正常值范围是一个相对的概念，因为体内DNA氧化损伤的程度在个人之间会有差异。
对于临床或科研目的，通常会在一定数量的健康人群中进行调查研究，来确定8-OHdG的正常范围。
此外，还需要对个体的特殊情况进行综合分析，包括年龄、性别、疾病状态等因素。
只有这样才能更好地理解和应用8-OHdG的正常值范围。
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Aw 的影响 一般而言，酶活力随Aw的升高而增大。
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活化剂的影响 能增强酶的催化能力的物质， 即使酶成为活化催化剂的物质称为活化剂。 酶的活化剂（激活剂）多为无机离子或简单有 机物。 抑制剂的影响 有的化合物及M n+ 能使酶的 催化作用受到抑制，这些物质称为酶的抑制剂。
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粘度： η↑、活力E↓ （∵移动性降低）。 压力： （高）压力↑ 、E活力↓ （压力使E蛋
1.存在 高等植物、牛奶、动物组织 2.结构 含有一个血色素作为辅基 3.催化反应 l ROOH + AH2 l ROH + H2O + A l AH2是电子供体 如：Vc、酚、胺类等
4.特性
(1) 具有很高的耐热性 (2) 酶活力测定作用 还原剂被氧化后产生 颜色，可用比色法测定过氧化物酶活性。简易、 灵敏 可作为考察热烫处理是否充分的指示酶。 (3) 过氧化物酶活力的变化与一些果蔬的成熟和 衰老有关 (4) 催化Vc氧化、破坏Vc的生理功能 (5) 催化不饱和脂肪酸过氧化物裂解产生不良气 味的羟基化合物 (6) 催化类胡萝卜素漂白、花青素脱色
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1.存在 高等植物、微生物 2.类型 果胶酯酶、聚半乳糖醛酸酶、果胶裂 解酶 3.果胶酯酶（果胶甲酯酶） 果胶 果胶基水 解酶 EC 3.1.1.11 存在：高等植物、细菌、 真菌 4.聚半乳糖醛酸酶 聚－α－1，4－半乳糖醛酸 苷基－水解酶，EC 3.2.1.15 分内切酶和外切 酶 存在：植物、真菌、细菌
将酶固定化后， 由于受到载体等 的影响，酶的特 性可能会发生变 化
优点 (1)可提高稳定性。 (2)能回收，易与产物分离，可反复使用。
缺点 (1)存在扩散限制。 (2)酶活性下降。
依据带电的酶或细胞和载体之间的静电作用，使酶吸附于惰 性固体的表面或离子交换剂上。 常用的固体吸附剂有： 活性炭、氧化铝、硅藻土、多孔陶瓷、多孔玻璃、硅胶、羟 基磷灰石等。
各类酶的固定技术的优缺点比较
固定化方法
吸附法
物理吸附法 离子吸附法 易 中等 高 可能 低 不变
包埋 法
共价 结合 法 难 强 低 不能 高 可变
交联法
制备难易 结合程度 活力回收 再生 费用
易 弱
高，酶易流失
较难 强 高 不能 低 不变
较难 强 中等 不能 中等 可变
可能 低
底物专一性 不变
应用1：氨基酰化酶（Aminoacylase）
交联发生位置
酶的状态 酶
酶变为不溶态
四、包埋法（entrapment）
将酶用物理的方法包埋在各种载体（高聚物）内。 类型： 网格型：将酶包埋在高分子凝胶细微网格中。又称凝胶包 埋法。 微囊型：将酶包埋在高分子半透膜中。又称半透膜包埋法。
网格型：
使用的多孔载体及其特点 凝胶 琼脂、 海藻酸钙 角叉菜胶 明胶 聚丙烯酰胺 光交联树脂 包埋条件 温和 酶活性 不变 强度 差
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酶传感器之 酶电极（葡萄糖 氧化酶）
葡萄糖氧化酶
葡萄糖＋醌＋H2O
葡萄糖酸＋氢醌
Pt
氢醌
铂电极
醌＋2H＋＋2e－
酶传感器之 肉鲜度传感器
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肉类在腐败过程中会产生各种胺类，故胺类测定能反映 肉类的新鲜程度。 用腐胺氧化酶与过氧化氢电极构成多胺生物传感器，或 用单胺氧化酶膜和氧电极组成的酶传感器测定肉在贮藏 过程中的鲜度。
作用力
常用载体
活性炭，氧化铝、 硅藻土、多孔陶瓷、 多孔玻璃、硅胶、 羟基磷灰石等。 DEAE-纤维素、 DEAE-葡聚糖凝胶、 CM-纤维素
物理吸附法 （physical adsortion）
氢键 疏水键
离子结合法 （ion binding）
离子键
DEAE-纤维素：二乙氨乙基纤维素，是阴离子交换剂
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最常用的酶传感器是酶电极，即将固定化酶膜与转换电极做在一起， 当酶膜与被测物发生催化反应而生成电极活性物质后，电极测定活 性物质并将其转换为电信号输出。
酶传感器之 酶电极
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酶电极是由固定化酶与各种电极密切结合的传感装置。 1962年Clark和Lyons提出模型，1967年Updike和Hicks首先制造出酶 电极并把它用于葡萄糖的定量分析。 酶电极一般可根据电极检测物理量的不同分为电流型和电压型，前者 一般有氧电极、H2O2电极等，后者有NH3、CO2、H2电极等。 较典型的一种酶电极为葡萄糖酶电极。
酶制剂 酶制剂—酶的工业化制剂。酶制剂应 用方便，易获得。
pH的影响 大多数酶的活力最大时最适pH在 4.5～8 间 l pH影响酶活力的原因: (1) pH引起酶变性而失活 (2) pH改变酶蛋白分子的电离状态 (3)pH改变底物的电离状态
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温度的影响 一般最适温度 动物细胞酶 37～50 ºC 植物细胞酶 50～60 ºC（以上）
存在：动物组织细胞的溶菌体中。 l 适宜PH为 2.5～4.5 l 作用条件：动物死亡，组织破坏，pH下 降，酶激活 l 特性： l 将肌肉蛋白质水解成游离氨基酸，产生 优良的肉香风味。肌原纤维、胶原等结 缔组织分解。
乙酰 -DL — Ala
氨基酰化酶
L — Ala +乙酸 乙酰 -D — Ala
应用1：氨基酰化酶（Aminoacylase）
A-L-Ala A-D-Ala
固定化 酶柱子 泵 储 罐 反应产物
L-Ala A-D-Ala
离心 机
消 旋 反 应 器
晶体 L-Ala
世界上生产规模最大的一种固定化酶。 将培养好的含葡萄糖异构酶的放线菌细胞用60～65℃热处 理15min，该酶就固定在菌体上，制成固定化酶，催化葡 萄糖异构化生成果糖，用于连续生产果葡糖浆。
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(3) 底物： 水果、蔬菜中底物为： l 一元酚类 l 邻二酚类 l （对位二酚也可） l （间位二酚不作底物） 如：水果中的儿茶酚 土豆中的酪氨酸
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酶促褐变的三个条件，缺一不可。 即：多酚 类物质、酚酶、氧气 l 用于食品方面主要方法： （1）加热处理 （2）调节pH （3）二氧化硫 （4）隔氧 （5）加酚酶底物的类似物 （6）底物改性：甲基转移酶
世界上第一种工业化生产的固定化酶。 1969年，日本田边制药公司将从米曲霉中提取分离得到的氨基酰化酶，用 DEAE-葡聚糖凝胶为载体通过离子键结合法制成固定化酶，将L-乙酰氨基 酸水解生成L-氨基酸，用来拆分DL-乙酰氨基酸，连续生产L-氨基酸。剩 余的D-乙酰氨基酸经过消旋化，生成DL-乙酰氨基酸，再进行拆分。生产 成本仅为用游离酶生产成本的60％左右。
5.果胶裂解酶 [聚（1，4-丰乳糖醛酸苷）裂解 酶，EC 4.2.2.2] 存在： 黑曲霉 、米根霉 6. 对果蔬质构的影响 果胶物质是植物细胞的胞 间层的主要成分，其聚合度及酯化度的改变会影 响其质构，使组织软化。 ∴在贮藏及运输中应 避免伤、烂。 7. 应用 (1)澄清果汁：提高内源酶活力、加外源酶 澄 清果酒：以提高出汁率、澄清效果 (2)控制果汁浑浊型果汁的浑浊度，维持悬浮颗粒 的稳定性。 (3)柑桔瓤瓣的分离 (4)提取植物蛋白质，用果胶 酶处理，Pro得率↑
酶是由生物活细胞所产生的，具有高效的催 化活性和高度特异性（专一性）的蛋白质。 l 本质： 具有催化作用的蛋白质 酶具有活性中心。 l 特性 （1）高效性 为一般催化剂的1000万倍～10万 亿倍。 （2）专一性 酶对底物具有高度专一性。（绝 对、相对、立体）
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酶的辅助因子
许多酶在作用时，需要一个非蛋白质组分， 酶的这个非蛋白质组分称为酶的辅助因子。
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亚油酸：氧-氧化还原酶 l 作用底物是：含顺戊二烯的脂肪 如亚油酸、亚 麻酸、花生四烯酸 l 产物及适宜pH ：使不饱和脂肪酸生成氢过氧化 物。 l 适宜pH值：7～8
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对食品质量的影响： (1)有益功能 a.小麦粉、大豆粉的漂白 活性大豆粉中含脂肪氧合酶、 催化胡萝卜素降解而使面粉漂白 b.在制作面团过程中形成二硫键 面筋网络形成更好，改善 面包等产品质量 l [o] －SH ---------－S－S－ (2)有害作用 a. 破坏叶绿素和胡萝卜素 b. 产生氧化性不良风味，具有青草味 c. 使维生素、蛋白质被氧化破坏 d. 必需脂肪酸被氧化破坏 是导致青刀豆和甜玉米产生不 良风味的主要酶种
天然凝胶
合成凝胶
聚合反应
部分失活
高
微囊型：
半透膜：直径几十微米到几百微米，厚约25nm。 半透膜孔径 < 酶分子孔径，小于半透膜孔径的小分子底物 和产物可以自由进出，被称为“人工细胞”。
优点 1）固定化酶颗粒小，有利于底物和产物扩散 2）半透膜能阻止蛋白质分子渗漏和进入，注入体内既可避免引起免疫 过敏反应，也可使酶免遭蛋白水解酶的降解，具有较大的医学价值 缺点：反应条件要求高,制备成本也较高。
喷雾干燥 淀粉 淀粉酶 液化液 糖化酶 糖化液 结晶 异构酶 氢化还原
粉状葡萄糖 山梨醇
结晶葡萄糖 果葡糖浆 混合
果糖42% 葡萄糖55% 低聚糖 高果糖浆 果糖55% 葡萄糖39% 低聚糖
分离
果糖浆 果糖80-90%
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酶传感器是由固定化酶与传感元件两部分组成的，其中酶是与适当 的载体结合形成的不溶于水的固定化酶膜。
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水溶性酶
水不溶性载体
固定化技术 水不溶性酶 （固定化酶）
稳定性： 一般比游离酶好 最适作用温度： 一般与游离酶差不多，活化能也 变化不大 其作用的最适pH值往往会发生变化。 因素主要有：1）载体的带电性质； 2）酶催化反应产物的性质。 由于载体的空间位阻作用,固定化酶 的底物特异性发生改变，其变化与 底物分子量有一定关系。
缺点 反应条件较激烈，易影响酶的空间构象而影 响酶的催化活性。
三、交联法（crosslinking）