生物工程习题样本
生物工程下游技术 习题集
《生物工程下游技术》习题集绪论1.下游技术2.技术较适合于胞内活性物质和细胞碎片的分离。
3.技术在获取天然生物物质方面有独特的优势。
4.技术解决了生物大分子对PH、热、有机溶剂、金属离子等敏感的难题。
5.常用于生物大分子物质初步纯化的下游单元操作有：6.常用于小分子物质分离提取的下游单元操作有：7.常用于生物大分子物质高度纯化的下游单元操作有：8.常用于小分子物质高度纯化的下游单元操作有：9.某一目的蛋白在酵母中为分泌表达，该蛋白等电点为4.5,要求从发酵液中纯化得到固态的目的蛋白。
根据所学知识，设计一套较为合理的纯化工艺（画出工艺流程图）。
10.尽量减少分离提取的操作步骤，对于提高总收率是很重要的。
（）下游技术的理论基础1.以物理学过程为基础的分离操作，大致可分为平衡分离操作、拟平衡分离操作、非平衡分离操作。
其中，蒸发与干燥、萃取、结晶、离子交换都是，离心是，膜过滤是。
2.下游分离过程中，选择分离方法的依据是：3.从工程学的角度来说，物性差异越大，作为分离基础的实际利用价值越大。
（）4.分离操作中，属于平衡分离的操作，其最大分离度由平衡关系决定。
（）5.疏水性相互作用6.特异性相互作用预处理和固液分离1.改变发酵液过滤特性的主要方法有哪些？其主要机理如何？2.凝聚和絮凝、混凝3.下游技术对絮凝剂的化学结构的三个要求：、、。
4.发酵液中的高价金属离子，如Ca2+，Fe2+，Mg2+，分别采用、、去除。
5.发酵液中杂蛋白质的常采用、、方法去除。
6.发酵液中固液分离常采用、单元操作，优先考虑。
7.按照过滤机理不同，过滤操作可以分为和。
8.在澄清过滤中，起着主要的过滤作用，在滤饼过滤中，起着主要的过滤作用。
9.常用的离心设备：10.常用的过滤设备：微生物细胞破碎1.常用细胞破碎方法主要有：、、、、。
2. 常用细胞破碎方法(珠磨法、高压匀浆法、超声破碎法、酶溶法、化学渗透法)的原理、特点及适用性。
3. 举例说明采用多种破碎方法相结合提高破碎率的机理。
生物工程概论期末考试题
发酵工程复习题一、选择题：1.厂用谷氨酸棒状杆菌发酵生产谷氨酸，结果代谢产物没有谷氨酸而产生乙酰谷氨酰胺，其原因是（）A．温度控制不适 B．通气量过多 C. pH呈酸性 D.溶氧不足2.青霉素生产的叙述,正确的是（ B）B．用紫外线、激光、化学诱变剂处理青霉菌再经筛选的方法可以选育高产菌种3.有关谷氨酸棒状杆菌的生长和谷氨酸发酵的叙述．错误的是（ B）B．菌体能合成各种生长因子，不需要从外界补充4.属于生长因子的是（ D ）D 维生素5.菌培养液中常含有一定浓度的葡萄糖，但当葡萄糖浓度过高时，反而会抑制微生物的生长，原因是（A ）A．碳源供应太充足6.作为生产菌种和科研材料的细菌群体，应该是代谢旺盛、个体形态和生理特性比较稳定的。
所以应选择在它的（B ）B 对数期7.与调整期缩短有关的因素中，最全面的一组是(C )①用与菌种相同的培养基②营养丰富的培养基③稳定期获得的菌种④对数期获得的菌种⑤接种时间提前⑥接种量加大⑦接种量减少⑧接种种类增多C．①④⑥8.谷氨酸发酵过程中，如果环境条件控制不当，则可能使代谢产物成为乳酸，那么乳酸是下列哪种条件下的产物（ D ）D．溶氧不足9. 能影响发酵过程中温度变化的因素是（ D）A．微生物分解有机物释放的能量B．机械搅拌C．发酵罐散热及水分蒸发D．A、B、C都对10.应用发酵工程生产的产品不包括（ D）D．目的基因二、名词解释：1.发酵工程(fermentation engineering):研究发酵工业生产过程中，各个单元操作的工艺和设备的一门科学。
发酵工程具体包括菌种选育、菌体生产、代谢产物的发酵以及微生物机能的利用等2.培养基 : 原料其化学成分明确、稳定适合于研究菌种基本代谢和过程的物质变化规律培养基营养单一，价格较高，不适合用于大规模工业生产3.培养基: 80%～90%是水，其中配有可溶性的或不溶性的营养成分，是发酵工业大规模使用的培养基。
4.生理性酸性物质；生理性碱性物质经微生物生理作用（代谢）后能形成酸性物质的营养物叫生理酸性物质，若菌体代谢后能产生碱性物质的营养物称为生理碱性物质5.连续培养指在向反应器中添加培养基的同时，从容器中放出等体积的培养液，就可以形成一个生产细胞的连续过程，即在培养器中所形成的新细胞数量与从容器中流失的细胞数目相等，反应体系达到稳态；菌的积累速率=生长速率-流出速率,6.抗生素：是生物在其生产活动过程中所产生，并能在低微浓度下有选择性地抑制或杀灭其他微生物或肿瘤细胞的有机物。
生物工程分析检验试题及答案
生物工程分析检验试题及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. 生物工程中常用的基因克隆方法是什么？A. 限制性内切酶法B. 聚合酶链反应（PCR）C. 同源重组法D. 转座子法答案：B2. 以下哪种细胞是生物工程中常用的宿主细胞？A. 植物细胞B. 动物细胞C. 细菌细胞D. 所有以上选项答案：D3. 基因工程中，目的基因的插入通常使用哪种方式？A. 电穿孔B. 化学转化C. 热激法D. 农杆菌介导法答案：D4. 以下哪种技术不是蛋白质工程的范畴？A. 基因突变B. 蛋白质纯化C. 蛋白质结晶D. 蛋白质序列分析答案：C5. 重组DNA技术中，用于连接目的基因和载体DNA的酶是什么？A. 限制性内切酶B. DNA聚合酶C. DNA连接酶D. 反转录酶答案：C6. 以下哪种不是生物反应器的类型？A. 固定床反应器B. 悬浮床反应器C. 流化床反应器D. 离心分离器答案：D7. 基因编辑技术CRISPR-Cas9中，Cas9蛋白的作用是什么？A. 识别靶序列B. 切割DNAC. 连接DNA片段D. 转录mRNA答案：B8. 以下哪种不是生物制药的常见方法？A. 化学合成B. 基因工程C. 细胞培养D. 酶工程答案：A9. 以下哪种不是生物传感器的类型？A. 光学生物传感器B. 电化学生物传感器C. 热敏生物传感器D. 机械生物传感器答案：D10. 以下哪种是生物工程中常用的细胞融合技术？A. 电融合B. 化学融合C. 离心融合D. 热融合答案：A二、简答题（每题10分，共30分）1. 简述基因工程的基本步骤。
答案：基因工程的基本步骤包括：目的基因的获取、基因的克隆、基因的表达载体构建、目的基因的转化、目的基因的筛选和表达。
2. 什么是生物反应器？它在生物工程中有什么作用？答案：生物反应器是一种用于生物过程的设备，它可以提供适宜的环境，使生物体或细胞能够生长和代谢。
在生物工程中，生物反应器用于大规模生产生物产品，如药物、疫苗、酶等。
生物工程设备复习习题(答案版)
生物工程设备习题一、简答及看图题1、压缩空气的预处理流程及压缩空气预处理设备的作用p58要点：①掌握几种流程②流程的应用场合③流程中各设备起的作用（1）压缩空气的预处理流程：两级冷却、分离、加热空气预处理流程（潮湿地区）；冷热空气直接混合式空气预处理流程（中等含湿地区）；利用热空气加热冷空气流程；高效前置过滤空气预处理流程。
①两级冷却、分离、加热空气预处理流程：对各种气候环境条件都能适应；油、水分离效率较高，并能使空气在达到较低的相对湿度时进行过滤，提高了过滤效率。
适用于潮湿地区，其他地区可根据当地的情况，对流程中的设备做适当的增减。
特点：两次冷却、两次分离（好处：能够提高热导率，从而节约冷却水，使油水分离的较为完全）及适当加热。
（加热至50℃左右，需使其相对湿度减低至50-60%的程度）旋风分离器：经过第一冷却器冷却（30-35℃）之后，大部分的油、水物质都接近或达到露点温度，已经结成较大的颗粒，并且雾粒浓度较大。
丝网分离器：第二冷却器（20-25℃）使空气进一步冷却后析出一部分较小雾粒。
（能够发挥丝网分离较小直径的雾粒和分离效率高的能力。
②冷热空气直接混合式空气预处理流程特点：可省去第二次冷却后的分离设备和空气加热设备，流程较为简单可行，利用压缩空气来加热处理后的空气，冷却水用量较少。
适用于中等含湿地区，但不适用合于空气含湿量高的地区。
（没有经过冷却处理后的那部分压缩空气的油水怎么办？）③利用热空气加热冷空气流程利用压缩后热空气合冷却后的冷空气进行热量交换，从而使冷空气升温的过程，以达到减低相对湿度的目标。
④高效前置过滤空气预处理流程特点：在压缩机前设置一台高效过滤器，采用泡沫塑料（即静电除菌）、超细纤维纸为过滤介质，并串联使用，使空气过滤后再进入空气压缩机。
（2）压缩空气预处理设备的作用：采风设备、粗过滤器、空气压缩机、空气储罐、气液分离器等。
1）采风设备：①采风塔（吸风塔）：越高越好，至少10m，设计气流速度8m/s左右。
生物工程概论试题及答案
生物工程概论试题及答案一、单项选择题（每题2分，共10分）1. 生物工程中常用的基因克隆载体是：A. 质粒B. 噬菌体C. 病毒D. 染色体答案：A2. 以下哪项不是生物反应器的类型？A. 搅拌式生物反应器B. 填充床生物反应器C. 流化床生物反应器D. 电化学生物反应器答案：D3. 基因工程中，用于将目的基因导入植物细胞的方法是：A. 电穿孔法B. 脂质体介导法C. 农杆菌介导法D. 病毒载体法答案：C4. 以下哪种技术不属于蛋白质工程？A. 定点突变B. 基因编辑C. 蛋白质纯化D. 蛋白质结构预测答案：C5. 生物降解塑料的主要原料是：A. 聚乳酸B. 聚氯乙烯C. 聚苯乙烯D. 聚丙烯答案：A二、多项选择题（每题3分，共15分）6. 以下哪些属于生物工程的应用领域？A. 医药B. 农业C. 食品工业D. 能源答案：ABCD7. 基因治疗中可能使用到的载体包括：A. 质粒B. 病毒载体C. 脂质体D. 纳米粒子答案：ABCD8. 生物传感器的组成部分通常包括：A. 生物识别元件B. 信号转换器C. 放大器D. 数据处理器答案：AB9. 以下哪些是生物工程中常用的细胞培养技术？A. 悬浮培养B. 贴壁培养C. 微载体培养D. 共培养答案：ABCD10. 以下哪些属于生物工程产品的安全性评估内容？A. 毒性B. 过敏性C. 遗传稳定性D. 环境影响答案：ABCD三、填空题（每题2分，共10分）11. 生物工程中，________是指利用生物体（如微生物、动植物细胞）或其组成部分（如酶）作为生物催化剂进行化学反应的过程。
答案：发酵工程12. 基因克隆的最终目的是在宿主细胞中________。
答案：表达目的基因13. 在蛋白质工程中，通过________可以改变蛋白质的结构和功能。
答案：定点突变14. 生物降解塑料的优点包括可降解性、________和生物相容性。
答案：生物可再生性15. 细胞培养中，________是指细胞贴附在培养容器壁上生长的过程。
生物工程类试题及答案
生物工程类试题及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. 生物工程中常用的基因编辑技术是：A. 基因克隆B. CRISPR-Cas9C. 基因测序D. 基因表达2. 下列哪项不是生物反应器的特点？A. 高效性B. 可重复性C. 单一性D. 可控性3. 基因工程中，用于连接目的基因与载体DNA的酶是：A. 限制性内切酶B. DNA聚合酶C. DNA连接酶D. 反转录酶4. 下列哪个不是生物工程在医药领域的应用？A. 基因治疗B. 生物制药C. 组织工程D. 基因测序服务5. 以下哪个不是生物工程中常用的生物材料？A. 胶原蛋白B. 聚乳酸C. 聚氯乙烯D. 聚己内酯二、填空题（每空2分，共20分）6. 生物工程中，______ 是指通过生物技术手段改造生物体，使其具有特定的生物学特性或功能。
7. 基因枪法是一种将外源基因直接导入植物细胞的方法，其原理是利用______ 将DNA射入细胞。
8. 酶工程中，固定化酶技术可以提高酶的______ 和 __________。
9. 生物传感器是一种将生物识别元件与______ 结合的装置，用于检测特定物质。
10. 组织工程中，常用的支架材料包括天然材料和______ 材料。
三、简答题（每题10分，共30分）11. 简述基因工程的基本操作步骤。
12. 解释什么是生物反应器，并举例说明其应用。
13. 描述生物工程在环境保护中的应用。
四、论述题（每题15分，共30分）14. 论述生物工程在食品工业中的应用及其潜在的挑战。
15. 讨论生物工程在能源生产中的潜力和当前的限制因素。
答案一、选择题1. B2. C3. C4. D5. C二、填空题6. 转基因技术7. 高速微粒子8. 稳定性，重复使用性9. 信号转换元件10. 合成三、简答题11. 基因工程的基本操作步骤包括：目的基因的获取、载体的选择与构建、目的基因与载体的连接、转化宿主细胞、筛选含有重组DNA的细胞、目的基因的表达与检测。
生物工程设备习题及答案
一、填空题
1.固体物料的输送方法有四种分别为：、、、。
2.体外培养的动物细胞有两种类型，它们分别是和。
3.啤酒厂糖化设备多利用四器组合完成，四器主要是指：、、、和。
4.生物工程产品研究开发必须经历的3个阶段是、和。
5.离子交换树脂单元由两部分组成分别为：和。
6. CIP清洗系统之意即：，其关键设备是，一种，另一种。
53.管式离心机分为GQ型和GF型，其中GF型主要处理________________。
54.碟式离心机的排渣方式主要有________、________、________。
55、反渗透的推动力是_________。
56、酒精蒸馏三塔式流程，其中三塔分别指的是________、________、________。
40．依据发酵液的流变，主要有拟塑型流体、涨塑型流体、牛顿型流体和宾汉型流体。其中_______的黏度不随着搅拌剪切速率和剪应力的改变而改变。
41.下面哪一种产品不能用蒸馏方法提取_______（白酒、柠檬酸、酒精、丙酮）。
42.锤式粉碎机的主要作用力为_______。
43.机械搅拌自吸式发酵罐的主要构件是_______和_______。也被称为转子和定子。
13、植物细胞的培养液大多是牛顿性流体，黏度不随着剪应力的改变而改变（）
14、饱充CO2、沉淀蛋白质和消除异味均是啤酒后发酵的目的。（）
15、拟塑型流体剪切力和剪切速率的关系满足ζ=K*γn（n〉1）。（）
16、换热夹套装置因结构简单、加工方便，往往应用于大型发酵罐中。（）
17、发酵罐的公称容积就是全体积，包括筒身体积和上、下封头体积。（）
（2）淀粉质原料蒸煮的目的是什么？
（3）在罐式连续蒸煮中，蒸煮罐的工作原理是什么？蒸煮罐和后熟器的直径为什么不能太大？
生化工程习题
生化工程习题一、判断正误1、间歇培养微生物的减速生长期，微生物的比生长速率小于零。
（×）2、反混指不同物料间有混合的现象。
（×）3、PFR反应器中，沿轴向的反应速度是常数。
（×）4、单级连续培养中，如果调整成D（稀释速率）>μ（比生长速率），最终将发生“冲出”现象。
（√）5、一定温度下，微生物营养细胞的均相热死灭动力学符合化学反应的一级反应动力学。
（√）6、限制性底物指微生物的碳源。
（×）7、单级恒化器连续培养某种酵母达一稳态后，流出液中菌体浓度是培养时间的函数。
（×）8、CSTR反应器中物料的返混程度最小。
（×）9、微生物的比生长速率是指单位时间内菌体的增量。
（×）10、间歇培养好氧微生物时，菌体的对数生长期到来时，菌体的摄氧率大幅度增加。
（√）11亚硫酸盐氧化法可以用于测量真实发酵液的Kla。
（×）12、活塞流反应器中，沿径向的反应速度是常数。
（√）13、返混是指不同停留时间物料之间的混合。
（√）14、任何微生物培养过程的YATP均等于10g/mol左右。
（×）15、连续培养反应器中物料的平均停留时间和稀释速率互为倒数。
（√）16、间歇培养好氧微生物时，菌体耗氧速率是常数。
（×）17、对培养基进行热灭菌必须以霉菌的孢子为杀灭对象。
（×）18、在一定温度下，各种不同微生物的比热死亡速率常数值相等。
（×）19、在有细胞回流的单级恒化器中，总的出口处菌体浓度与恒化器中的菌体浓度完全相等。
（×）20、动态法测量Kla不能用于有菌体繁殖的发酵液。
（×）21、连续反应器中物料的平均停留时间用F/V来计算。
（×）22、在活塞流反应器中进行恒温热灭菌，沿物料流动方向菌体热死灭速率逐渐下降。
（√）23、单级恒化器的稀释速率可以任意调整大小。
（×）24、微生物营养细胞易于受热死灭，其比热死亡速率常数K值很高。
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生物分离工程习题一、名词解释滤饼过滤:若悬浮液中固体颗粒的体积百分数大于1%, 则过滤过程中在过滤介质表面会形成固体颗粒的滤饼层, 这种过滤操作称为饼层过滤。
深床过滤:当悬浮液中固体颗粒的百分数在0.1%以下且固体颗粒的粒度很小时, 若以小而坚硬的固体颗粒堆积生成的固定床作为过滤介质, 将悬浮于液体中的固体颗粒截留在床层内部且过滤介质表面不生成滤饼的过滤称为深层过滤。
萃取利用溶质在互不混溶的两相之间分配系数的不同而使溶质得到纯化或浓缩的技术。
液-固萃取用某种溶剂把有用物质从固体原料中提取到溶液中的过程称为固-液萃取, 也称浸取( Leaching) 或浸出。
液-液萃取用溶剂从溶液中抽提物质叫液-液萃取, 也称溶剂萃取。
经典的液-液萃取指的是有机溶剂萃取。
溶剂萃取法利用液体混合物各组分在某有机溶剂中的溶解度的差异而实现分离的。
双水相萃取分配系数K是指在一定温度、压力下, 溶质分子分布在两个互不相溶的溶剂里, 达到平衡后, 它在两相的浓度之比为一常数K分离因数在某一萃取系统中,溶质A的分配系数与溶质B的分配系数之比表示为β＝KA ／KB,β越大, A、 B的分离效果越好, 即产物与杂质越容易分离。
微波提取利用样品中目标物分子在微波电磁场的作用下, 从原来的热运动状态转为跟随微波交变电磁场而快速排列取向, 将微波能量转化为样品内的能量, 从而加速目标物从固相进入溶剂相的过程。
超声提取利用超声技术,使植物细胞壁及生物体破裂, 导致胞内物质释放、扩散、溶解, 从而加速目标物从固相进入溶剂相的过程。
吸附分离技术利用固体吸附剂对液体或气体中某一组分具有选择性吸附的能力, 使其富集在吸附剂表面,以除去有害成分或分离回收有用目标产物的过程。
离子交换技术经过溶液中带电的溶质分子与离子交换剂中可交换的离子进行交换, 利用其静电作用力的差异而达到分离纯化的方法。
吸附平衡一定条件下, 流体( 液体) 与吸附剂接触, 流体中的吸附质被吸附剂吸附, 经足够长时间后, 吸附质在两相中的含量不再改变, 即吸附质在流体和吸附剂上的分配达到一种动态平衡, 称为吸附平衡。
吸附等温线实验测定一定温度下的吸附平衡数据, 绘制成吸附剂上吸附质的吸附量与流体中吸附质浓度的关系曲线。
色谱分离技术是一类分离方法的总称, 又称色谱法、层析法、层离法等。
它是利用不同组分在固定相和流动相中的物理化学性质的差别, 使各组分在两相中以不同的速率移动而进一步分离的技术。
阻滞因数( 比移值)在薄层层析中,某溶质斑点到原点的距离与溶剂前沿到原点距离之比.又称为R,f,越大, 溶质随流动相移动快, 被洗脱速率也就越快。
Rf,凝胶色谱基于分子大小不同而进行分离的一种分离技术, 又称凝胶过滤、凝胶渗透过滤、分子筛过滤、阻滞扩散层析或排阻层析。
亲和色谱利用固定相配基与生物大分子之间的特殊生物亲和力的不同实现分离的。
广泛用于酶、抗体、核酸、激素等生物大分子以及细胞、细胞器、病毒等物质的分离与纯化。
特异性洗脱利用含有与亲和配体或目标产物具有亲和结合作用的小分子化合物溶液作为洗脱剂, 经过与亲和配基或目标产物的竞争性结合, 洗脱目标产物。
非特异性洗脱经过调节洗脱液的pH、离子强度、离子种类或温度等理化性质降低目标产物的亲和吸附作用, 是较多采用的洗脱方法。
膜分离技术:利用具有一定选择性透过的过滤介质进行物质分离的技术。
膜分离过程的实质是物质透过或被截留于膜的过程, 近似于筛分过程。
结晶物质以晶体的型态从溶液、熔融混合物或蒸气中析出的过程称为结晶(crystallization), 结晶是生物化工生产中, 获得纯固态物质的一种重要的分离方法, 是传质分离过程的一种单元操作。
蒸发结晶一般是经过加热蒸发溶剂, 使溶液由不饱和变为饱和, 再继续蒸发溶剂, 溶质就呈晶体析出。
蒸发结晶, 常见于分离提纯溶解度随温度变化相对较小的溶质。
降温结晶经过加热溶液(同时蒸发溶剂), 使溶液由不饱和变为饱和, 再降低饱和溶液的温度, 溶质则呈晶体析出。
降温结晶, 常见于分离提纯溶解度随温度变化较大的溶质。
重结晶法选用对结晶物难溶而对杂质易溶的溶剂和条件, 对粗结晶物进行再次结晶。
溶解度曲线在一定压强下, 以物质的溶解度对温度作图, 得到的曲线称为溶解度曲线。
在结晶操作中, 溶解度及溶解度曲线是我们分离多组分溶液的理论依据。
二、简答题1.简述晶体形成过程⑴介质达到过饱和状态晶体从溶液中形成, 不论是经过减少溶剂量还是经过降低温度, 首先须使其介质达到过饱和状态。
⑵晶核的形成当介质达到过饱和状态后, 溶液中便产生细小晶粒( 称为晶核) 。
晶核的形成是晶体生长过程必不可少的核心。
⑶晶体的生长溶质在过饱和度推动力的作用下, 向晶核运动, 并在其表面有序堆积, 使晶核或晶种不断长大形成晶体。
2.结晶溶剂选择原则⑴不能与溶质有化学反应, 不影响生物分子活性⑵有较高的温度系数⑶易于用溶解度差异或温度影响除去杂质⑷其它考虑因素: 操作要方便、安全、回收及成本3、晶体形成的条件(1)物质特性: 形成晶体的先决条件。
分子越小越易结晶,分子越大越难结晶。
许多盐类、尿素、各种有机酸、单糖、核苷酸、氨基酸、维生素、辅酶、双糖等小分子物质易形成结晶。
(2)溶质的纯度: 越纯越易。
多数蛋白质和酶必须达到50％才能结晶;(3)溶液饱和度: 过饱和溶液容易形成晶体;4.影响晶体形成的因素有哪些1) 温度温度影响溶质或杂质溶解度, 温度还影响晶体形态;2) pH值: 影响溶质溶解度,进而影响晶体形成;3) 结晶时间: 结晶时间长, 晶体大, 纯度高4) 搅拌速度: 过快易造成溶解、晶体损坏。
工业上选用5～15 r/m5.膜污染常见的清洗技术(1)物理清洗:反冲洗,气液混合振荡清洗,机械刮除等;(2)化学清洗: 碱性清洗剂,酸性清洗剂,表面活性剂等;(3)生物清洗: 利用具有生物活性清洗剂清洗, 生物剂固定在膜上, 使膜具有抗污染能力。
6. 色谱分离技术的特点和缺点(1) 分离效果高;(2) 应用范围广;(3) 选择性强;(4) 设备简单色谱法的缺点是处理量小、操作周期长、不能连续操作。
7.凝胶色谱法及其原理凝胶色谱是基于分子大小不同而进行分离的一种分离技术, 又称凝胶过滤七原理是利用小分子物质可在凝胶颗粒间隙中扩散外, 还能够进入凝胶颗粒的微孔中, 如此不断地进入和扩散, 小分子物质的下移速度落后于大分子物质, 从而使样品中分子大的先流出众谱柱, 中等分子的后流出, 分子最小的最后流出, 这种现象叫分子筛效应。
8.亲和色谱及其原理亲和色谱利用固定相配基与生物大分子之间的特殊生物亲和力的不同实现分离的。
亲和色谱是应用生物高分子物质能与相应专一配基分子可逆结合的原理,将配基经过共价键牢固地结合于固相载体上制得亲和吸附系统。
生物分子与配体特异结合, 具有高度的特异性和亲和力。
9.大孔吸附树脂吸附规律( 1) 非极性吸附剂从极性溶剂中吸附非极性物质( 2) 高极性吸附剂从非极性溶剂中吸附极性物质( 3) 中等极性吸附剂对两种情况均有吸附能力( 4) 水溶液中, 同族化合物分子量大, 极性弱易吸附( 5) 无机盐促进吸附10.大孔吸附树脂解吸规律( 1) 低级醇, 酮或其水溶液( a 溶胀聚合物, b 溶解吸附物, 减弱溶质与吸附剂间作用力)( 2) 弱酸性物质用碱解吸( 成盐)( 3) 弱碱性物用酸解吸( 成盐)( 4) 高盐吸附时用水解吸( 降低离子强度, 降低吸附量)( 5) 易挥发溶质用热水或蒸汽解吸11.萃取剂选择的要求(1)有很大的萃取容量;(2)良好的选择性;(3)与被萃取的液相( 一般是水相) 互溶度要小, 且粘度低、界面张力小或适中, 有利于相的分散和两相分离;(4)溶剂的回收和再生容易;(5)化学稳定性好, 不易分解, 对设备腐蚀性小;(6)价廉易得; 安全性好, 对人体无毒性或毒性低。
12.影响萃取操作的主要因素(1)温度:温度↑互溶性增大; 温度↓产物稳定性提高, 粘度增加, 扩散性能减小。
(2)pH值:pH低, 有利于酸性物质分配在有机相, pH低高,有利于碱性物质分配在水相。
(3)溶媒比:溶媒比↑萃取效果↑溶媒回收费用↑;(4)盐分:无机盐类如硫酸铵、氯化钠等一般可降低产物在水中的溶解度而使其更易于转入有机溶剂相中, 另一方面还能减小有机溶剂在水相中的溶解度。
13.乳化的形成原因及去除方法乳化即水或有机溶剂以微小液滴分散在有机相或水相中的现象。
乳化带来有机相和水相分相困难;破乳方法: 离心,化学法, 物理法如加热, 吸附或稀释, 加入其它表面活性剂14.双水相萃取的优点及常见聚合物优点(1)使固液分离和纯化两个步骤同时进行, 一步完成;(2)适合热敏物质的提取, 主要是胞内酶;(3)亲水性聚合物加入水中, 形成两相, 在这两相中, 水分都占大比例( 85～95％) ,这样生物活性蛋白质在两相中不会失活, 且以一定比例分配于两相中。
常见聚合物: 聚乙二醇－葡聚糖和聚乙二醇－无机盐系统;15.双水相萃取主要步骤(1)细胞破碎匀浆,双水相萃取目标蛋白分配在上相-PEG相,细胞碎片及其它杂质分配在下相-盐相;(2)除去上相核酸及多糖上相加入适量盐,除去核酸及多糖,而蛋白质保留在上相.(3)目标蛋白转移到下相而与上相PEG分离。