PCR实验室日常检测记录
实用pcr流程表
临床PCR检验流程记录表检验日期：检验项目： HBV-DNA 扩增仪中保存文件名使用说明：①严格按单一流向进行实验，即试剂准备区→标本制备区→扩增区，严禁逆向移动。
本记录表的流向亦遵循此流程；②各项工作执行后在相应项目前的方框内打“√”；③本记录表最后归档保存在PCR实验室扩增区的专用文件夹中，以备查找。
1. 操作步骤：1.2.1取n个1.5ml的灭菌离心管，作好标记。
（n=样本数+1管HCV阴性对照+1管HCV强阳性对照+1管HCV临界阳性对照）1.2.2向上述离心管中分别加入25ul蛋白酶溶液。
1.2.3分别加入待测样本、HCV阴性对照、HCV临界阳性对照和HCV强阳性对照各200ul.1.2.4加入200ul新鲜配制的裂解液工作液，盖上盖子，振荡15秒，充分混匀。
（注意：不要把蛋白酶溶液直接加入裂解液工作液中）。
1.2.556摄氏度温浴15分钟。
瞬时离心，以去除管盖上的滴液。
1.2.6加入250ul无水乙醇，盖上盖子，彻底混匀（振荡15秒）。
在室温下静置5分钟（15-25摄氏度）。
注意：如果环境温度超过25摄氏度，无水乙醇需预冷。
瞬时离心，以去除管盖上的滴液。
1.2.7将n个核酸提取柱放入收集管中，小心地将步骤1.2.6中的液体移入核酸提取柱中。
盖上盖子，6000*g离心1分钟。
倒掉收集管中的废液，将提取柱重新放入收集管中。
（如果离心后核酸提取柱中仍有部分液体，以更高的速度再次离心，确保提取柱中无残余的液体）1.2.8小心的打开核酸提取柱的盖子，加入500ul洗液1，盖上盖子，6000*g离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将提取柱重新放入收集管中。
1.2.9小心的打开核酸提取柱的盖子，加入500ul洗液2，盖上盖子，6000*g离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将提取柱重新放入收集管中。
1.2.10小心的打开核酸提取柱的盖子，加入500ul无水乙醇，盖上盖子，6000*g离心1分钟，丢弃收集管，将提取柱放入新的收集管中。
附表9：PCR实验室工作日志
文件编号：XXXX-PCR-FB009 版本序号： A 修订序号： 1编写：XXXXXX 审核：XXXXX 批准：XXXX制定日期：2020-6-21 修订日期：2020-8-20 执行日期：2020-8-20新型冠状病毒核酸检验流程记录表检验日期 _________________ 检验项目 ___2019-nCoV核酸检测______实验前准备√试剂在有效期内√扩增仪、加样器和温度计在校准的有效期内√生物安全柜的滤膜在使用有效期内√消毒溶液在有效期内√冲眼器正常运行√离心管、带滤芯吸头已经过质检合格试剂准备区（1区）操作者___________ 实验前：√打开通风设备√实验台面清洁（水或70％酒精擦拭）√冰箱温度：冰箱冷藏室（2～8℃）℃；冷冻室℃√实验室温度：℃（允许范围：10～30℃）；相对湿度：（允许范围：30％～70％）PCR试剂来源：品牌批号：___________。
检验项目：2019-nCoV核酸本次实验用量___________人份。
仪器设备使用：离心机：√正常□不正常；振荡器：√正常□不正常；超净工作台：√正常□不正常；√超净工作台使用按相应SOP。
实验后：√清洁实验室台面、地面、加样器和离心机（75％酒精擦拭），并进行移动紫外线照射60分钟以上。
紫外线累计照射__ _小时，□每周一擦拭紫外灯。
√处理实验废弃物。
√执行微量加样器、旋涡振荡器和紫外线消毒车保养√检查水、电(电脑、空调和仪器)和工作台面整洁。
样品制备区（2区）操作者___________实验前：√按sop穿防护用品：1.戴帽子2.戴口罩3.穿一次性塑料鞋套4.穿防护服5.穿一次性靴套6.戴双层乳胶手套7.戴防护眼睛√按照sop进行标本喷洒消毒√打开通风设备√实验台面清洁（75％酒精擦拭）√冰箱（柜）温度：冰箱冷藏室（2～8℃）℃；冷冻室℃；金属浴温度℃√实验室温度：℃（允许范围：10～30℃）；相对湿度：（允许范围：30％～70％）所处理的样品（对应样品接收的唯一编号）及拟扩增位置见反面核酸提取及加样过程：按 SOP进行；仪器设备使用：生物安全柜：√正常□不正常；核酸提取仪：√正常□不正常；低速离心机：√正常□不正常；振荡器：√正常□不正常；√生物安全柜使用按相应SOP；√核酸提取仪使用按相应SOP；实验后：√清洁实验室台面、地面及仪器设备（75％酒精擦拭）。
PCR实验室基因扩增检测实验及结果分析
PCR实验室基因扩增检测实验及结果分析1、目的：保证扩增及结果分析的标准化、规范化。
2．适用范围：适用于本室使用的普通离心机。
3．负责人：操作人：4、标准程序：4.1基因扩增检测标准程序：扩增反应前须先在样本输入模板上按照事先排好的标本位置进行设置。
每次实验除待检标本，还需包括：阴性对照、阳性对照、室内质控品各一份，一组阳性标准品（4个梯度108、106、105、104）。
4.1.1打开电脑电源开关，进入Windows XP界面。
4.1.2 接着打开PCR仪电源开关，预热5分钟。
4.1.3双击电脑桌面的SLAN-96P图标进入程序设置界面。
4.1.4单击“文件”菜单中的“新建”命令，（或单击工具栏中的“新建”按扭）。
在测定、容器和模板中做相应的选择，点击OK。
4.1.5应用检测管理程序，并将其添加到样品板文档中。
4.1.6检测反应管，4.1.7 根据当次实验所需条件编辑时间和温度。
运行样品板文档。
4.2 结果分析标准程序：应按以下步骤进行：全部曲线——阴性对照——阳性对照——阳性室内质控品——阳性标准品——逐个分析（标出阳性标本和可疑标本）——调整参数，获得较好的标准曲线，显示定量结果——登记，发报告。
4.2.1 整体曲线的观察：将所有曲线选中进行整体观察1）观察是否存在污染情况（包括标本污染和试剂污染），特别应注意大量曲线在同一Ct值出现上涨的情况。
2）观察是否有光路传导阻滞或电压波动等机器原因形成的异常曲线。
4.2.2 阴性对照的分析阴性对照：试剂中加入与待检标本进行同样处理的已知阴性标本。
作用：用以监测实验室和前处理过程中是否存在污染。
4.2.3 阳性对照的分析阳性对照：试剂中加入与待检标本进行同样处理的已知阳性标本。
作用：用以监测实验能否正常检出阳性标本，避免假阴性的出现。
4.2.4 室内质控品的分析室内质控品：试剂中加入与待检标本进行同样处理的已知浓度室内质控品。
作用：用以监控日常实验的精密度。
核酸实验室的各种记录表
核酸实验室的各种记录表1. 实验记录表实验记录是实验室工作的核心部分之一，记录实验的详细过程和结果对于后续的数据分析和科研发展至关重要。
实验记录表应包含以下内容：样品编号实验日期实验步骤实验结果备注012020/1/1DNA提取提取得到100μg DNA022020/1/2PCR扩增成功扩增目标片段使用了新批次试剂032020/1/3凝胶电泳测定DNA片段大小约为200bp，符合预期042020/1/4序列测定获得目标序列2. 样品管理表样品管理是实验室工作中的重要环节，需要记录每个样品的详细信息，以便后续实验的追溯和数据的分析。
样品管理表应包含以下内容：样品编号样品名称样品来源样品类型保存位置保存日期备注01DNA样品细菌培养物DNA-20°C冰箱1号架2020/1/102RNA样品植物组织提取RNA-80°C冰箱2号架2020/1/203细胞样品动物细胞培养细胞液液氮罐2020/1/3冻存液中添加甘油04组织样品人体组织组织切片石蜡块2020/1/4装在组织瓶中3. 购买记录表实验室需要不断购买试剂和耗材，购买记录是管理实验室资源和预算的重要依据。
购买记录表应包含以下内容：购买日期产品名称供应商数量单价（元）总价（元）备注2020/1/1DNA提取试剂公司A15005002020/1/2PCR扩增试剂公司B52001000从新批次试剂中购买2020/1/3琼脂糖公司C2501002020/1/4序列测定服务公司D110001000提供测序报告4. 仪器设备维护记录表实验室中常用的仪器设备需要定期维护和保养，以确保正常工作和准确的实验结果。
仪器设备维护记录表应包含以下内容：设备名称维护日期维护内容维护人员备注PCR仪2020/1/1清洁PCR仪外壳和热盖，检查温控系统张三离心机2020/1/2清洁转子和离心管，校准转速和计时功能李四紫外可见分光光度计2020/1/3校正波长和光程，清洁样品舱和光源王五更换紫外灯泡电泳仪2020/1/4检查电泳槽和电源是否正常，更换电极缓冲液赵六5. 废弃物处理记录表核酸实验室产生的废弃物需要按照规定进行安全处理，以保护环境和实验室的安全。
PCR荧光定量检测记录
PCR荧光定量检测记录PCR荧光定量检测记录编号：RE-ZL-TY-082 NO: 1、样本信息乙型肝炎病毒(HBV)检测使用仪器PCR仪器：；高速离心机：；恒温金属浴：；5-50μL移液枪：；20-200μL移液枪：；100-1000μL移液枪：；试剂盒来源：中山大学达安基因股份有限公司；批号：；将待测样本与阴性质控品、HBV强阳性质控品、HBV临界阳性质控品、阳性定量参考品进行同步处理。
在1.5ml 的无菌离心管内加入200μl 样品；再加入450μl DNA提取液，盖紧管盖，漩涡振荡 15 秒以充分混匀，瞬时离心数秒，100℃ 10±1 分钟恒温处理。
取出后12000转离心5分钟；离心管内即为病毒核酸溶液，吸取样本及阴性质控品、HBV强阳性质控品、HBV临界阳性质控品、阳性定量参考品核酸溶液各20μl加入到PCR反应管中，盖紧管盖，8,000rpm 离心数秒后转移至扩增区检测，以循环扩增条件：93℃ 2分钟；93℃ 45秒→55℃ 60秒，10个循环；93℃ 30秒→55℃ 45秒（收集荧光），30个循环进行扩增。
检验日期：复核日期：丙型肝炎病毒(HCV)检测使用仪器PCR仪器：；高速离心机：；恒温金属浴：；5-50μL移液枪：；20-200μL移液枪：；100-1000μL移液枪：；试剂盒来源：中山大学达安基因股份有限公司；批号：；将待测样本与阴性质控品、HCV强阳性质控品、HCV临界阳性质控品进行同步处理。
在1.5ml 的无菌离心管内加入50μl 的蛋白酶 K；取样本200 μl 加入离心管中；再加入200 μl 的裂解工作液（即已含 Carrier RNA 的病毒裂解液），盖紧管盖，漩涡振荡 15 秒以充分混匀，高速离心 10 秒（防止温育时产生气泡），72℃ 10 分钟。
同时可将洗脱液置于72℃预热；再加入250μl 无水乙醇，盖紧管盖，振荡 15 秒；将混合液全部吸至离心柱，室温下 12,000rpm 离心 1 分钟，将离心柱装至新的收集管；将500μl 的抑制物去除液加入离心柱，室温下 12,000rpm 离心 1 分钟，将离心柱装至新的收集管；将500μl 的去离子液加入离心柱，室温下 12,000rpm 离心 1 分钟，将离心柱装至新的收集管；再次将500μl 的去离子液加入离心柱，室温下 12,000rpm 离心 1 分钟，将离心柱装至新的收集管；将离心柱-收集管于室温下 14,000rpm 离心 3 分钟以除去残余的乙醇；将离心柱取出，放置于新的 1.5ml 离心管。
26!检验科PCR实验室质量控制记录表
26!检验科PCR实验室质量控制记录表
1.实验室信息
实验室名称：
实验室地址：
实验室负责人：
实验室联系方式：
2.质量控制记录
日期：[日期]
样本编号 | 实验批次 | 阳性对照 | 阴性对照 | 内部质控样本1 | 内部质控样本2 | 结果 |
3.质控结果评价
阳性对照
目标结果：[目标阳性对照结果]
实际结果：[实际阳性对照结果]
评价：[评价结果]
阴性对照
目标结果：[目标阴性对照结果]
实际结果：[实际阴性对照结果]
评价：[评价结果]
内部质控样本1
目标结果：[目标内部质控样本1结果] 实际结果：[实际内部质控样本1结果] 评价：[评价结果]
内部质控样本2
目标结果：[目标内部质控样本2结果] 实际结果：[实际内部质控样本2结果] 评价：[评价结果]
4.质量控制记录总结
根据以上质控结果，该实验室的PCR实验质量控制情况评价如下：
阳性对照：[阳性对照结果评价]
阴性对照：[阴性对照结果评价]
内部质控样本1：[内部质控样本1结果评价]
内部质控样本2：[内部质控样本2结果评价]
5.质控结果异常处理
如发现异常质控结果，请提供异常情况的详细描述，并提供相应的数据分析和根本原因分析。
以上是26!检验科PCR实验室质量控制记录表，请根据实验情况及时记录质控结果并评价实验室的质量控制情况。
如有问题或需要进一步帮助，请及时联系实验室负责人。
谢谢！。
PCR检验实验室检查要点指南
PCR检验实验室检查要点指南PCR（聚合酶链反应）是一种检测基因序列的实验技术。
PCR技术的应用范围广泛，包括疾病诊断、病原体检测、基因突变分析等。
本文将介绍PCR检验实验室的检查要点指南。
一、实验室环境要求1.实验室应保持干净整洁，避免灰尘和杂质的干扰。
2.实验室设备应经常进行检修和清洁，保证设备正常运行。
3.实验室应有稳定的温度和相对湿度，以适应PCR反应需要。
4.实验室应有充足的通风系统，以防止PCR反应中产生的挥发性化合物对实验结果的影响。
二、核酸提取1.核酸提取前，实验人员应佩戴手套、口罩等防护用品，避免外源性核酸的干扰。
2.核酸提取试剂及工具应进行无菌处理，以确保提取的核酸质量。
3.核酸提取前应核对样本标识与登记信息是否一致，避免样本混淆。
三、PCR反应体系准备1.PCR试剂的储存和使用应符合说明书要求，防止试剂变性或受到污染。
2.PCR反应体系的配制应准确无误，包括引物、模板DNA和酶等成分的比例。
3.PCR反应管等试剂器皿应进行无菌处理，避免外源性DNA干扰实验结果。
四、实验仪器使用1.PCR仪的温度控制和均匀性应进行验证。
2.电泳仪的供电、反应液浓度和电泳条件应进行调试，确保能够得到清晰的条带。
五、质控措施1.引物应经过合成和验证，确保特异性和灵敏度。
2.采用阳性对照和阴性对照，以验证PCR反应体系的准确性和可靠性。
3.反应阴性对照应添加，以检测试剂和实验过程中的污染情况。
4.实验过程中的操作人员应定期参加技能培训和质量控制培训，提高实验操作技术和质量意识。
六、实验记录1.对每个样本和控制试剂的操作过程进行详细记录，包括样本条码、操作时间、反应体系等信息。
2.实验人员应填写实验记录表格，并对异常情况进行说明。
3.实验数据和结果进行保留，并按照实验室规定的期限进行归档。
七、结果解释与报告1.PCR结果的分析应由专业人员进行，确保结果准确可靠。
2.PCR结果应进行解读，并结合临床资料进行分析和判断。
临床PCR检验流程记录表
口按实验室废弃物处理程序（SOP编号）处理实验废弃物。
操作者：____________
扩增区（3区）
实验前：口打开通风设备口实验台面清洁（水或75%酒精擦拭）
口实验室温度：____℃（允许范围：10~30℃）；相对湿度____（允许范围：30%~80%）
扩增仪操作：口开机自检及运行正常；
口按扩增仪操作（sop编号）sop进行编程、参数、设定；
室内质控结果：________________ 口填写室内质控记录、描质控图
是否失控：口是 口否
实验结果失控原因与处理：（失控标准参照室内质量控制SOP程序）
实验结果：见所附扩增仪打印结果。
实验后：口填写相关记录表；
口按实验室清洁程序（SOP编号）清洁实验室台面、地面，并进行紫外线照射30分钟以上；
口按实验室废弃物处理程序（SOP编号）处理实验废弃物。
操作者：____________
检测日期：____________
口 正常 口不正常
口实验室温度：____℃（允许范围：10~30℃）；相对湿度____（允许范围：30%~80%）
PCR试剂来源：（深圳匹基公司） 批号：____________
检验项目：_________ 本次实际用量：_______人份
具体配置内容______________________________________________________
仪器设备的使用：
离心机：口正常 口不正常 振荡器：口正常 口不正常
实验后：口移动器调至最大量程刻度并复位；
口填写相关记录表；
口按实验室清洁程序（SOP编号）清洁实验室台面、地面、加样器和离心机，并进行紫外线照射30分钟以上；