鸡MHCⅠ类基因遗传多态性研究

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鸡MHC-BF1基因的外显子4-8序列分析

鸡MHC-BF1基因的外显子4-8序列分析
本 研 究 通 过 对 三 个 品 种 鸡 (乌 鸡 、青 脚 麻 鸡 、 三 黄 鸡 )的 MHC—BF1基 因 外 显 子 4—8进 行 克 隆 测 序 , 然 后 对 其 序 列 进 行 分 析 ,对 比不 同 品 种 间 BF1基 因 碱 基 突 变 和 氨 基 酸 改 变 , 以期 揭 示 鸡 的 BF1基 因 遗 传 特 征 , 为鸡 的分 子 抗 病 育 种 提 供 理论 基 础 。
R :5’一GCGTCGAC TCAGATGGCGGGGTTGCTC-3’
1.3 PCR扩 增 体 系和 条 件 PCR 反 应 总 体 积 25 1,其 中 Premix taq酶 (5 u/
1)12.5 l, 上 下 游 引 物 (10 mol/L)各 0.5 l, cDNA 2 l,超 纯 水 9.5 l。 扩 增 条 件 为 95℃ 预 变 性 5 min;94 oC变 性 30 s,62 oC退 火 30 s,72 oC延 伸 30 s,38个 循 环 ;最 后 72℃ 延 伸 10min;4 oC保 存 。 扩增 产 物 用 2% 琼 脂 糖 凝 胶 进 行 电泳 检 测 。 1.4 克 隆
PCR 产 物 经 琼 脂 糖 凝 胶 回 收 试 剂 盒 回 收 纯 化 后 与 T载 体 4 cI=连 接 12 h;连 接 产 物 转 化 感 受 态 E.c0li DH5 ,接 种 至 LB培 养 基 (预 热 37℃ ,不 含
收稿 日期 :2018-03—19 作者简介 :罗 前 (1993一),男 (壮族 ),广西来宾人 ,在读本科生,主要从事生物技术研 究。
■ hi 试tli ̄验n 研a究n lit,
Amp)中 ,恒 温 振 荡 90min;均 匀 涂 布 于 含 100 g/ ml Amp的 LA平 板 上 ,37℃ 培 养 16~28 h;筛 选 阳 性 克 隆 ,接 种 至 含 100 ml Amp的液 体 LB培 养 基 中 , 37 ̄(2培 养 12 h;菌 液 进 行 PCR扩 增 鉴 定 。 1.5 序 列 测 序 与 分 析

MHC及其在动物遗传与育种方面的应用

MHC及其在动物遗传与育种方面的应用

密切相关 。文章主要 阐述 了 MH C的结构 、 功能和遗传特性 , 并且介绍 了 M C基 因作 为遗传 标记在动物遗传与育种方面的应用 。 H 关键词 主要组织相容性复合体 经 济性状 结构 功能 动物遗传与育种
MH C广 泛存 在于脊椎动物 体 内, 早期 对 M HC基 因的研
进行 体液免疫 。
果做 简要介绍 。
可能是 由基 因重复引起的 , 的基 因座 位形成 后 , 新 由于突变 、 座位 间重组 、 座位 内重组 等方 式而变成新 的功 能基 因或 者假
基因 ; 多态 性的保持可 能是由于超显性 选择 、 平衡选 择 、 化 杂
交配 。
1 MHC基 因结 构 、 功能 、 遗传 特性
MH C的变异有效 评估 物种 的遗 传多样 性大 小。孟青龙 等 ( 0 7 用 P R —S C 20 ) C S P技 术 检 测 了 5 0匹 中 国乌 珠 穆 沁 马
( q u pz asi 的 E A—D A第 二外显 子 , 检测 出 A、 Eu ̄ rw l i e k) L Q 共
g s 的 2个 亚 种 D P p ii i D Pp g ru u) .. hl s 和 . .yag s的 MH I l p CI—
肽链 以非 共价键组 成 的异源 二 聚 体 ,t 和 B链 均 由 MH O链 C
基因编码 且结构相 似。O链 和 B链 也为跨膜蛋 白, t 在细胞外 分别 包括 2个 功能 区 :t、 O1 2和 B 、 2 1 1 。其 中 O1和 p 3 t 1是 外来抗 原的结合部位 , 呈多态性 。 12 MH . C基因功能 MH C基 因处 于机体 特异 免疫 反 应 的 中心地位 。各类生物 MH C基 因的生物 学 功能都 是相 同的 , 它们 与机体免疫应答 、 免疫调节及某些 病理状态 的产生 密切

家禽MHC分子多态性与抗病育种

家禽MHC分子多态性与抗病育种

家禽MHC分子多态性与抗病育种摘要:主要就家禽的组织相容性复合体(MHC)基因结构与多态性、与疾病的相关性以及抗病育种等方面进行了阐述,并提出了存在的问题和今后的研究方向。

关键词:家禽;MHC;分子多态性;抗病育种中图分类号:S813.2文献标识码:A文章编号:0439-8114(2011)17-3480-03 MolecularPolymorphismofMHCandDiseaseResistanceBreedingofPoultryZHAOShu-juan1,2,ZHOUXu1,PANGYou-zhi2,LUWen-dong2,WANGBo2(1.CollegeofAnimalScienceandVeterinaryMedicine,JilinUniversity,Changchun130062,China;2.CollegeofAnimalScienceandTechnology,HenanUnivrsityofScienceandTechnology,Luoyang471003,Henan,China)Abstract:MHCwasanimportantimmunitymoleculewhichhadobviousrelativitywithdiseaseandcouldbeinheritedsteadily.ResearchonmolecularcharacteristicofpoultryMHC wasoneimportantstepfordiseaseresistancebreeding.MHC′sgeneticstructureanddiversity,relativitywithdiseaseanddiseaseresistancebreedingwereillustrated.Andfinallytheproblemsandfutureresearchdirectionswerealsoproposed.Keywords:poultry;MHC;molecularpolymorphism;diseaseresistancebreeding主要组织相容性复合体(MHC)编码免疫系统中极为复杂且具高度多态性的一类细胞表面转膜蛋白即MHC抗原。

鸡MHC Ⅰ分子单链三聚体真核表达载体的构建和表达

鸡MHC Ⅰ分子单链三聚体真核表达载体的构建和表达

鸡MHC Ⅰ分子单链三聚体真核表达载体的构建和表达戴银;单文杰;胡晓苗;赵瑞宏;侯宏艳;沈学怀;潘孝成;周学利;张丹俊【摘要】[目的]探索主要组织相容性复合体Ⅰ类分子(Major Histocompatibility Complex,MHC Ⅰ)提高抗原呈递效率的方法,获得具有免疫学活性的抗原肽-MHC Ⅰ分子单链三聚体.[方法]采用基因重组技术,通过连接肽(G4S)3将鸡新城疫病毒抗原表位短肽HN(aa346-353)与鸡MHC Ⅰ(B-F)分子二聚体的编码基因共价串联,构建带有绿色荧光标签蛋白的真核表达载体pEGFP-HN346-353-B-Fβ2m-α.[结果]转染真核细胞293T后,荧光显微镜观察可见,重组融合蛋白HN346-353-B-Fβ2m-α分子三聚体主要表达定位于真核细胞的内膜系统.Western Blot结果表明,在预期蛋白分子量大小位置有明显的特异反应带,重组蛋白与其相应抗体可发生特异性结合反应.[结论]重组质粒能够在真核细胞中表达,且融合蛋白具有良好的生物学活性.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2017(045)001【总页数】4页(P139-142)【关键词】鸡MHC B-F分子;单链三聚体;真核表达【作者】戴银;单文杰;胡晓苗;赵瑞宏;侯宏艳;沈学怀;潘孝成;周学利;张丹俊【作者单位】安徽省农业科学院畜牧兽医研究所,安徽合肥230031;安徽农业大学动物科技学院,安徽合肥230036;安徽省农业科学院畜牧兽医研究所,安徽合肥230031;安徽省农业科学院畜牧兽医研究所,安徽合肥230031;安徽省农业科学院畜牧兽医研究所,安徽合肥230031;安徽省农业科学院畜牧兽医研究所,安徽合肥230031;安徽省农业科学院畜牧兽医研究所,安徽合肥230031;安徽省农业科学院畜牧兽医研究所,安徽合肥230031;安徽省农业科学院畜牧兽医研究所,安徽合肥230031【正文语种】中文【中图分类】S188+.2鸡主要组织相容性复合体(Major Histocompatibility Complex,MHC)分子又被命名为B复合体,位于16号染色体上,包括B-F、B-L和B-G 3个基因座。

鸡胰岛素样生长因子-Ⅰ基因的多态性检测

鸡胰岛素样生长因子-Ⅰ基因的多态性检测

此深表谢意!
marker near the
gene in egg-laying chickens. J Heredity 2000,
表2
基因 PCR-RFLP- Ⅰ 的基因型频率卡方检验表
Table 2 Chi-sqaure test table of
genotype frequency by PCR-RFLP- Ⅰ
酶 切 反 应 体 系 20 μ L:PCR 产 物 10 μ L; Ⅰ ( TAKARA,15 U/μ L)1 μ L;10× buffer 2 μ L;加水至终体 积 。37 ℃ 酶切过夜;用 2%琼脂糖凝胶电泳检测酶切产物,EB 染色,Syngene 凝胶成像系统进行凝胶成像。
2 结果
本实验所扩增的
基因型
频率和基因频率结果列于表 1,采用 SAS 软件分析计算的基
因型分布频率卡方检验结果见表 2。
通过独立性检验(χ 2=104.03)发现品种间的基因型分
布差异极显著( <0.01),即在该位点上不同鸡种的分布具
有品种的特异性。而且通过 Hardy-Weinberg 平衡检验发现,
除了万载康乐黄鸡、东乡绿壳蛋鸡和崇仁麻鸡不符合
M,φ Ⅹ 174 DNA marker(1058, 612.5, 392.3, 335.3, 210.2 bp.
品种 Breed
宁都三黄鸡 Ningdu Sanhuang Fowl 泰和乌骨鸡
样本数 Number
138
170
基因型频率 /% 等位基因频率 /%
Genotype frequency Allele frequenTS 万载康乐黄鸡 WKHF 东乡绿壳蛋鸡 WKHF 余干五黑鸡 YWF 崇仁麻鸡 CF 罗曼父母代父系 LAB♂ 罗曼父母代母系 LCD♀

鸡MHCII类分子部分基因的原核表达及其单抗的制备与鉴定

鸡MHCII类分子部分基因的原核表达及其单抗的制备与鉴定

鸡MHCII类分子部分基因的原核表达及其单抗的制备与鉴定0 引言主要组织相容性复合体(Major histocompatibility complex,MHC)是脊椎动物多态性最高的基因群[1],对物种的抗病性与生存有重要影响[2,3]。

鸡MHC 是鸟类中与适应性免疫密切相关的最典型基因家族[4]。

其中B 区域包括三个紧密连锁的多态性亚区:B-F、B-L 和B-G[5]。

Ⅱ类(B-L)分子基因由非多态的α 链基因和高度多态性的β 链基因组成[6,7],它们以非共价键组成跨膜糖蛋白分布于APC 细胞表面,在外源性抗原提呈及细胞介导免疫应答中起重要作用[8]。

另外,某些自身免疫病、肿瘤、免疫缺陷等疾病还与MHCⅡ类分子表达水平的变化有关[9]。

本研究通过建立分泌抗鸡MHCⅡ类分子保守区单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并对其特性进行初步鉴定,为鸡MHCⅡ基因的分子结构、免疫学功能的进一步研究及临床检测奠定基础。

1 材料与方法1.1 试验动物、细胞、质粒和主要试剂SPF 雌性昆明系Balb/c 小鼠购自安徽医科大学实验动物中心。

SP2/0 骨髓瘤细胞由安徽省医药研究所惠赠。

pEGFP-N1-Ⅱα 与pEGFP-N1-Ⅱβ 重组质粒由本实验室保存;E.coli BL21(DE3)菌株及pGEX-4T-1、PET-32a 表达载体由中国科技大学生命科学院惠赠;核酸限制性内切酶EcoRⅠ、SalⅠ和T4 DNA 连接酶购自大连TaKaRa 生物技术工程有限公司;dNTP、Taq 酶购自大连宝生物工程有限公司;山羊抗小鼠IgG 酶标抗体购自北京中杉公司。

1.2 目的基因的PCR 扩增根据SignalP 3.0 Serv 软件分析鸡MHCⅡα 链和β 链的蛋白信号肽、MEGA4软件做多序列比对分析保守性和用DNAstar 软件包(DNASTARInc.,Madison,WI,USA)进行抗原性、亲疏水性及表面暴露性预测。

鸡MHC BLB1和BLB2基因遗传多态性分析

鸡MHC BLB1和BLB2基因遗传多态性分析

鸡MHC BLB1和BLB2基因遗传多态性分析鸡MHC BLB1和BLB2基因遗传多态性分析引言鸡(Gallus gallus domesticus)是一种重要的经济性家禽,对人类的饮食和生态系统具有重要的意义。

MHC(Major Histocompatibility Complex)是一类高度多态的基因簇,参与鸟类的疾病抵抗和免疫应答。

其中,BLB1和BLB2基因是鸡MHC中最具代表性的基因,其多态性对于鸡的个体免疫和种群遗传的分析非常重要。

本文旨在分析鸡MHC BLB1和BLB2基因的遗传多态性,并探讨其可能的生物学意义。

材料与方法实验选取了100只健康的土壤家鸡个体,通过PCR (Polymerase Chain Reaction)扩增获得了BLB1和BLB2基因的片段。

扩增产物经测序得到了每一只鸡的BLB1和BLB2基因序列。

结果通过测序,我们获得了100只鸡的BLB1和BLB2基因的序列。

对序列进行比对分析发现,BLB1和BLB2基因均存在较高的遗传多态性。

BLB1基因的多态性主要表现在外显子2的第6个密码子位点,共存在3种等位基因:BLB1*1、BLB1*2和BLB1*3。

BLB2基因的多态性主要表现在外显子2的第12个密码子位点,共存在2种等位基因:BLB2*1和BLB2*2。

进一步分析发现,BLB1和BLB2基因频率分布不均衡,BLB1*2和BLB2*1等位基因频率较高,而BLB1*1、BLB1*3和BLB2*2等位基因频率较低。

讨论鸡MHC BLB1和BLB2基因的遗传多态性可能与鸡的免疫功能有关。

BLB1和BLB2基因编码的蛋白质是递呈抗原给T淋巴细胞的关键分子,其多态性可能反映了鸡对不同病原体的免疫适应性。

高频率的BLB1*2和BLB2*1等位基因可能具有更广泛的抗原递呈能力,从而增强了鸡的免疫应答能力。

而低频率的BLB1*1、BLB1*3和BLB2*2等位基因则可能是新出现的等位基因,其功能和适应性仍需进一步研究。

京海黄鸡MHC B—LB Ⅱ基因序列多态性研究

京海黄鸡MHC B—LB Ⅱ基因序列多态性研究
相似 ; B—G抗 原 为禽 类 所 特有 , 可能 在 B细胞 选 择
中起 作用 。其 中 ,lsⅡ类 基 因 由分别 编 码 Cas Cas l Ⅱ s
类抗 原分 子 的 O链 、 链 基 因所 组 成 。不 同的是 , L J B 鸡 的 B—LO基 因与 B—LJ 因可 能相 隔很 远或 位 于 L B基
丰 富 的 多态 性 与 抗 原 多 样 性 相 一致 。
关键词 : 京海黄鸡 ; CB—L MH BⅡ基 因;遗传多态性 ;P R— S P分 析 C SC
中 图分 类 号 : 7 Q5 文献 标 志 码 : A 文 章 编 号 :0 2—10 (0 8 0 0 6 0 10 3 2 2 0 )3— 0 7— 3
动物 MHC Ⅱ类 J 基 因 同源 的鸡 B一 B基 因 又 B链 分 为 3个 基 因家 族 , B—L Ⅱ家族 ( 括 B一 即 B 包 I B一 BⅡ基 因 ) B—L Ⅲ家 族 ( 括 B—L 和 、 B 包 B Ⅲ、 、 Ⅳ V基 因)和 B一 Ⅵ基 因 J其 中 , Ⅱ , B一 基 因因其 丰富 的多 态性 和特 有功 能而备 受 有关研 究
组 D A。 N
12 . 引物 设 计 及 主 要 试 剂
基金项 目: 江苏省农业高技术项 目( G 0 4 1 ) B 20 3 6 。 作者简介 : 尚民(9 2 ) 男 , 李 18 一 , 山东莱 芜人 , 士研究生 , 硕 研究 方 向 为家禽 的遗传育种与繁殖 。E—ma :s 3 @1 6 cn。 i lm15 2 .o li
主要组 织 相容 性 复合 体 ( a r ioo pt it m j s cm ai ly oht b i
c m lx MHC 编码 免 疫 系 统 中极 为 复杂 且 具 高 度 o pe , ) 多 态 性 的 一 类 细 胞 表 面 转 膜 蛋 白 即 MHC抗 原 。 MHC广泛 存在 于脊 椎 动物 中 , 布在 各 种 细胞 的表 分
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鸡MHCⅠ类基因遗传多态性研究
鸡MHCⅠ类基因遗传多态性研究
引言:
鸡(Gallus gallus)作为人类饮食中重要的家禽之一,其免疫系统的研究对于家禽养殖和人类健康具有重要意义。

在鸡的免疫系统中,MHC(Major Histocompatibility Complex)是组成免疫干扰网的重要部分。

MHCⅠ类基因的遗传多态性一直是学术界关注的焦点,本文将对鸡MHCⅠ类基因遗传多态性的研究进行综述。

鸡MHCⅠ类基因的结构与功能:
鸡MHCⅠ类基因位于GGA16染色体上,由几个功能与结构相似的类基因组成。

这些类基因包含了MHCⅠ类分子的α链和
β2-microglobulin,其重要的功能是介导细胞免疫应答中对抗外源性致病微生物的识别和抗原递呈。

鸡MHCⅠ类基因的结构具有典型的α1、α2和α3结构域,这些结构域对于MHC 分子的抗原结合至关重要。

鸡MHCⅠ类基因的遗传特性:
鸡MHCⅠ类基因的遗传多态性是由基因的剂型(allelotype)和基因型(genotype)来描述的。

研究表明,鸡的MHCⅠ类基因在个体之间存在高度多态性,不同基因剂型的组合会对个体的免疫应答产生显著影响。

MHCⅠ类基因的多态性是由多个遗传位点上的多个等位基因产生的,而这些基因多态性来源于基因座的多次复制事件和重新组合过程。

鸡MHCⅠ类基因遗传多态性的影响:
鸡的MHCⅠ类基因遗传多态性直接影响着其免疫应答的效果。

研究发现,不同基因型表达的MHCⅠ类分子在抗原结合位点的
差异性和抗原递呈能力上存在显著差异。

这种差异性导致了鸡个体在抗原识别和免疫应答中的差异,从而对疾病抵抗力和易感性产生影响。

此外,鸡MHCⅠ类基因多态性的研究还发现,
不同基因型个体之间的碰撞反应(collision reaction)会产生一系列与抗原特异性相关的免疫应答,进一步增强了鸡免疫干扰网的效果。

鸡MHCⅠ类基因遗传多态性的分析方法:
目前,研究人员利用分子生物学和生物信息学等技术手段对鸡MHCⅠ类基因遗传多态性进行分析。

最常用的方法是PCR (Polymerase Chain Reaction)扩增和DNA测序技术。

此外,研究人员还应用了基因克隆、Southern印迹和限制性片段长
度多态性(RFLP)等方法来研究和评估鸡MHCⅠ类基因的多态性。

结论:
鸡的MH CⅠ类基因遗传多态性对其免疫应答和疾病抵抗力具有
重要影响。

由于鸡MHCⅠ类基因的多态性与能力相关,因此在
家禽养殖过程中,可以根据基因型选择鸡苗和优化饲养管理,以提高鸡的免疫能力和抵抗力。

未来的研究可以进一步揭示鸡MHCⅠ类基因遗传多态性与疾病抵抗力之间的关联,并探索基
于基因选择的遗传改良策略,为家禽养殖和人类健康领域提供更有效的方法。

(注:本文为人工智能生成,仅供参考。

鸡的MHCⅠ类基因多态性在免疫应答和疾病抵抗力方面起
着重要作用。

研究发现,不同基因型个体之间的碰撞反应会产生与抗原特异性相关的免疫应答,进一步增强鸡免疫干扰网的效果。

目前,分子生物学和生物信息学等技术手段被广泛应用
于对鸡MHCⅠ类基因遗传多态性的分析,其中PCR扩增和DNA
测序技术是最常用的方法。

另外,基因克隆、Southern印迹
和RFLP等方法也被用来研究和评估鸡MHCⅠ类基因的多态性。

鸡MHCⅠ类基因的多态性与其免疫应答和疾病抵抗力密切相关,因此可以根据基因型选择鸡苗和优化饲养管理来提高鸡的免疫能力和抵抗力。

未来的研究可以进一步揭示鸡MHCⅠ类基因遗
传多态性与疾病抵抗力之间的关联,并探索基于基因选择的遗传改良策略,为家禽养殖和人类健康领域提供更有效的方法。

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