平板划线分离法的概念

• 平板划线分离法的概念？
用接种环以无菌操作沾取少许待分离的材料，在无菌平板 表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线 ， 如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在 平板表面得到单菌落。
• 个体计数法的四种方法分别是 、 、 • 涂片染色法 计数器(血球计数板）测定法 法 比浊计数法 • 个体计数法的两个缺点是 • 只能用来测定较大的细胞 和 。 比例计数
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• 解释什么是等渗溶液，高渗溶液？ 细胞内溶质浓度与胞外溶液的溶质浓度相等时，为等渗溶液，溶液的溶 质浓度高于胞内溶质浓度为高渗溶液。
在等渗、高渗、低渗溶液条件下，微生物各会发生什么变化？ 在等渗溶液中，微生物的活动保持正常，细胞外形不变。 在高渗溶液中，细胞易失水，脱水后发生质壁分离，生长受抑制或死亡。 在低渗溶液中，细胞吸水膨胀，甚至导致细胞破裂死亡。 微生物对紫外线的抵抗力与哪些因素有关？ 照射时间：照射时间长，死亡率高。 照射强度：照射强度大，死亡率高。 微生物种类及生长阶段：革兰氏阳性菌比阴性菌抗性强；多倍体比单倍 体抗性强；孢子和芽孢比营养细胞抗性同的类群中变化很大，根据微生物与氧 的关系,可把它们分为五种类型： 、 、 、 和 。 • 好氧菌 微好氧菌 兼性厌氧菌 耐氧厌氧菌 厌氧菌
• 培养好氧、厌氧、兼性厌氧或耐氧微生物时，各需要什么措施保证不 同微生物的生长？ • 培养好氧微生物：需震荡或通气，保证充足的氧气。 • 培养专性厌氧微生物：需排除环境中的氧气，同时在培养基中添加还 原剂，降低培养基中的氧化还原电位势。 • 培养兼性厌氧或耐氧微生物：可深层静止培养。 环境pH值对微生物生长的影响有哪些？ • 影响膜表面电荷的性质及膜的通透性，进而影响对物质的吸收能力。 • 改变酶活、酶促反应的速率及代谢途径。 • 环境pH值还影响培养基中营养物质的离子化程度，从而影响营养物质 吸收，或有毒物质的毒性。 根据微生物生长的最适pH值，将微生物分为 、 微生物。 嗜碱 耐碱 中性 嗜酸 耐酸 、 、 和
微生物细胞内的pH值却相当稳定，一般都接近 中性
。
水分活度的概念？ 在相同的温度、压力下，体系中溶液的水的蒸汽压与纯水的蒸汽压之比, 即Aω =p/p0. 干燥抑制微生物生长或造成其死亡的原因及影响因素？ 干燥能引起微生物细胞内蛋白质的变性和盐类等物质浓度提高，从而 抑制生长或造成微生物死亡。 微生物对干燥的抵抗力与以下因素有关： 温度： 在相同的干燥环境下，温度高，微生物易死亡，而在低温下 不易死亡。 干燥速度：干燥速度快，微生物不易死亡，反之，易死亡。 基质：在不同基质中对干燥的抵抗力不同，含有糖、淀粉、蛋白质等 物质时，不易死亡。 微生物种类及生长时期：产荚膜菌比不产荚膜菌抗性强；小型、厚壁 细胞的微生物比长型、薄壁细胞的微生物抗性强；细菌的芽孢、真菌 的孢子比营养细胞抗干燥性很强；老龄菌比幼龄菌抗性强。
恒浊法和恒化法的特点分别是什么？在实际生产中有什么作用？ 恒浊法：培养基流速可变，菌体以最高生长速度生长。 可获得大量菌体或与菌体生长相平衡的某些代谢产物 恒化法：培养基流速不变，直到菌体生长速度与培养基流速相适应。 用于与生长速率相关的研究 灭菌的概念？ 采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁 殖能力的措施，称为灭菌。
• 细菌在生长过程中，会出现稳定期的原因？ • 由于营养物质消耗，代谢产物积累和pH等环境变化，逐步 不适宜于细菌生长，导致生长速率降低直至零(即细菌分 裂增加的数量等于细菌死亡数量)，结束对数生长期，进 入稳定生长期。 同步培养的概念？ 是一种培养方法，它能使群体中不同步的细胞转变成能 同时进行生长或分裂的群体细胞。 连续培养的概念和基本原则? 是在微生物的整个培养期间，通过一定的方式使微生物能 以恒定的比生长速率生长并能持续生长下去的一种培养方 法。连续培养的基本原则：微生物培养过程中不断的补充 营养物质和以同样的速率移出培养物。 连续培养包括 类型。 恒浊 恒化 连续培养和 连续培养两种
• 微生物的繁殖结构比营养结构抗热性 • 强 强
，老龄菌抗热性比幼龄菌
。
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微生物对热的耐受力受哪些环境条件的影响，详细说明？ 与培养基的营养成分有关。 与pH 有关—— pH适宜时不易死亡，pH不适宜时，容易死亡。 与水分有关—— 含水量大时容易死亡，含水量小时不容易死亡。 与含菌量有关 ——含菌量高，抗热性增强，含菌量低，抗热性差。 与热处理时间有关—— 热处理时间长，微生物易死亡。
消毒的概念？ 采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部的一部分对人体有害的 病原菌，而对被处理物体基本无害的措施，称为消毒。
防腐的概念？ 利用理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖，从而达到防止物品发生 霉腐的措施，称为防腐。
商业灭菌的概念？ 就是指食品经过杀菌处理后，按照所规定的微生物检验方法，在所 检食品中无活的微生物检出，或者仅能检出极少数的非病原微生 物，并且它们在食品保藏过程中，是不可能进行生长繁殖的。 • 温度对微生物的影响具体表现在哪几个方面？ • 影响酶活性，温度变化影响酶促反应速率，最终影响细胞合成。 • 影响细胞膜的流动性，温度高，流动性大，有利于物质的运输，温度 低，流动性降低，不利于物质运输，因此，温度变化影响营养物质的 吸收与代谢产物的分泌。 • 影响物质的溶解度，对生长有影响。 每种微生物都有自己生长温度三基点，即 最低 最适 最高 、 和 生长温度。

• 薄膜计数法中对样品的要求是 点是 。 • 样品洁净 堵孔、菌太多难以分散
，此方法的缺
• 细菌干重约为湿重的 • 10％~20％
。
• 什么是细菌的生长曲线？ 在不补充营养物质或移去培养物，保持整个培养液体积不 变条件下，以时间为横坐标，以菌数为纵坐标，根据不同 培养时间时细菌数量的变化，可以作出一条反映细菌在整 个培养期间菌数变化规律的曲线。
• 嗜冷微生物在低温下生长的机理？ • ①它们体内的酶能在低温下有效地催化，在高温下酶活丧失②细胞膜 中的不饱和脂肪酸含量高，低温下也能保持半流动状态，可以进行物 质的传递。 • 微生物在高温下能生长的原因？ • ①酶蛋白以及核糖体有较强的抗热性 • ②核酸具有较高的热稳定性（核酸中G+C含量高（tRNA），可提供形 成氢键，增加热稳定性 ）。 • ③细胞膜中饱和脂肪酸含量高，较高温度下能维持正常的状态。 • 微生物的最适生长温度 产物多。 • 不等于 （等于、不等于）发酵速度快、积累代谢
• 细菌的生长曲线可分为 、 、 • 延滞期 对数期 稳定期 衰亡期
和
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• 延滞期的概念、特点？以及一些防止延滞期过长的方法有 哪些？ • 将少量菌种接入新鲜培养基后，在开始一段时间内菌数不 立即增加，或增加很少，生长速度接近于零。也称延迟期、 适应期。 • 迟缓期的特点：分裂迟缓、代谢活跃、对环境敏感 • 方法有： • ①通过遗传学方法改变种的遗传特性使迟缓期缩短； • ②利用对数生长期的细胞作为“种子”； • ③尽量使接种前后所使用的培养基组成不要相差太大； • ④适当扩大接种量等方式缩短迟缓期，克服不良的影响。 （3%-8%）
和 。 不能区分死活细胞
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稀释平板计数法的主要步骤及注意事项？ 第一步：菌样巧妙稀释 第二步：接种平板 第三步：培养 第四步：计数 注意：作空白及取平行样（2～3组）均值减小误差；一般 计数平板的细菌生长菌落数以30~300个为宜 MPN表中的三位数是如何来的？ 取发生变化的管数最多、稀释度又最低的生长管数，为第 一位数字，后面两个稀释度的生长管数为后两位数